一種新的檸檬苦素類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，具體涉及從白鮮的干燥根皮中分離得到的一種新的檸檬苦 素類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 白鮮（DictamnusdasycarpusTurcz.)隸屬于蕓香科（Rutaceae)白鮮屬 (DictamnusL.)，為多年生的草本植物，植物體具有濃烈的特殊香味，主要分布于歐洲和亞 洲部分地區(qū)。該屬全世界約5種，中國植物志記載1種。據(jù)歷代本草及《中國藥典》2010版 一部收載記錄，中藥白鮮皮為蕓香科白鮮屬植物白鮮的干燥根皮，是中國常用中藥，又名北 鮮皮、野花椒根皮、臭根皮等?，F(xiàn)代藥理學研究表明，中藥白鮮皮具有清熱燥濕、祛風止癢以 及解毒等功效，用以治療黃水淋漓、濕疹、風濕熱痹、疥癬瘡癩、黃疸尿赤等癥，從而引起廣 泛關(guān)注。
[0003] 目前，從白鮮根皮以及地上部分已分離鑒定出多種化學成分，包括揮發(fā)油類、生 物堿類、檸檬苦素類、多糖化合物以及香豆素、黃酮類、留體類等成分。白鮮皮中所含的生 物堿為呋喃喹啉類生物堿，主要有白鮮堿、茵芋堿、萌蘆巴堿、膽堿、Y-崖椒堿、異斑佛林 ^ 8-dimethoxymyrtopsineN〇-ethylnor-y-fagarineNplatydesmineN〇-ethylnor dictamine、0_ethylnorskimmianin、7, 8-dimethoxyplatydesmine等，其中白鮮喊為白鮮 皮的指標成分之一。此外，檸檬苦素類化合物是白鮮屬植物中分布最為廣泛的一類化合物， 為白鮮皮中一大類重要活性成分。
[0004] 白鮮植物體揮發(fā)油類物質(zhì)如倍半萜類化合物等具有抗腫瘤增生及細胞毒性活 性，其對6種腫瘤細胞株的生長具有明顯的抑制作用，如人類乳房腫瘤細胞株（MCF-7， ZR-75-30和MDA-MB-435S)、人類肝臟癌細胞株（Bel-7402和IfepG2)以及人類腎上腺細胞 細胞株（ACHN)。另外，白鮮皮中揮發(fā)油類還具有強烈的抑制耐甲氧西林金葡菌及金黃色葡 萄球菌ATCC25923的活性。生物堿具有強心、抗炎、收縮血管平滑肌、抗病原微生物等作 用。其中，白鮮堿為其重要活性成分，具有抗菌、抗病毒和皮膚濕疹、皮膚瘙癢和體外抗癌活 性等多種生物活性。白鮮皮中的檸檬苦素類化合物涔酮具有體外抗癌活性，并可作為一種 新型的肝病治療藥物，具有良好的保肝降酶和抑制肝纖維化等作用。藥理實驗表明，白鮮皮 粗多糖能明顯增加正常小鼠胸腺和脾臟的重量，提高網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能，具有抗疲勞、 耐缺氧、提高機體抗應(yīng)激能力，能顯著促進小鼠膽汁分泌，加速肝內(nèi)毒物排泄，從而保護肝 臟。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種從白鮮的干燥根皮中分離得到的一種新的檸檬苦素 類化合物；
[0006] 本發(fā)明的另一目的在于提供該新化合物的制備方法；
[0007] 本發(fā)明的再一目的在于提供該化合物用于制備治療胰腺癌藥物的醫(yī)藥用途。
[0008] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0009] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0010] _
:〇
[0011] 所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：(a)白鮮的干燥根皮粉碎， 用85 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的 正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟（a)中乙 酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，依次用10%乙醇和75%乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液， 減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟（b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依 次用體積比為90:1、40:1、20:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d) 步驟（c)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1、20:1和10:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；(e)步驟（d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠 分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10-12個柱體積洗脫液，洗脫液 減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0012] 進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0013] 藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學上可接受的載體。
[0014] 所述的化合物（I)在制備治療胰腺癌的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 所述的藥物組合物在制備治療胰腺癌的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0017] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0018] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0019] 說明書附圖
[0020] 圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式；
[0021] 圖2為化合物（I)理論E⑶值與實驗E⑶值比較。
【具體實施方式】
[0022] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0023]實施例1:化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0024]藥材和試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海 凌峰化學試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學試劑有限公司。白鮮的干燥根皮 購自安徽亳州中藥材市場，產(chǎn)地福建。
[0025]制備方法：（a)白鮮的干燥根皮（10kg)粉碎至綠豆大小，用85%乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3 次）和水飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物 (305g)和正丁醇萃取物；(b)步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用純凈水溶解至2L，醫(yī)用脫脂棉 過濾，濾液用AB-8型大孔樹脂分離，依次用10%乙醇（10L)和75% (12L)乙醇洗脫，收集 75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏（142g) ;(c)步驟（b)中75%乙醇洗 脫浸膏用200-300目正相硅膠分離，依次用體積比為90:1 (10個柱體積）、40:1 (10個柱體 積）、20:1 (8個柱體積）、10:1 (8個柱體積）和1:1 (5個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分3 (35g)用200-300目正相硅膠進一步分離，依次用體 積比為25:1 (10個柱體積）、20:1 (10個柱體積）和10:1 (5個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯 度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2(10g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠0DS-C18 分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10-12個柱體積洗脫液，洗脫液 減壓濃縮得到純的化合物（I ) (24mg)。
[0026]結(jié)構(gòu)確證：HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z 707. 3408,結(jié)合核磁特征可得分子式 為C3SH520n，不飽和度為13。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)SH(ppm，DMS0-d6,400MHz) :H-1(3.45， ddd，J = 8. 6, 3. 3, 2. 2)，H-2 (1. 93, m)，H-2 (2. 25, ddd，J = 16. 4, 3. 3, 2. 6)，H-3 (5. 05， dd，J = 2. 6, 2. 6)，H-5 (2. 28, d，J = 12. 6)，H-6 (4. 15, dd，J = 12. 6, 2. 9)，H-7 (5. 64, d， J = 2. 9)，H-9(2. 94, dd，J = 12. 9,7. 1)，57,2. 30, m)，H-12(5. 10, d，J = 8. 4)， H-15 (5. 97, s)，H-17 (3. 63, s)，H-18 (1. 00, s)，H-19 (0? 88, s)，H-21 (7. 30, m)，H-22 (6. 07， br，s)，H-23(7. 29, m)，H-28(3. 21，br，d，J = 7. 9)，H-28(3. 43, d，J = 7. 9)，H-29(l. 10， s)，H-30(1.31，s)，H-3'（6.70，br，q，J = 7.2)，H-4,（1.69，br，d，J = 7.2)，H-5，（1.72， br，s)，H-2"（2. 09, m)，H-3"（1. 24,1. 53, m)，H-4"（0? 70, t，J = 7. 4)，H-5"（0? 95, d， J = 7. 0)，12-0Ac(2. 11，s)，1-OH(3. 58, s)，6-OH(3. 58, s)，28-OH(3. 65, s);核磁共振碳 譜數(shù)據(jù)Sc(ppm，DMS0-d6，125Hz) :70. 4 (CH，1-C)，29.3 (CH2,2-C)，72.3 (CH，3-C)，41.6 (C， 4-C)，39. 8 (CH，5-C)，71. 2 (CH，6-C)，72. 0 (CH，7-C)，45. 0 (C，8-C)，33. 4 (CH，9-C)，39. 1 (C， 10-C)，23. 4 (CH2,11-C)，69. 6 (CH，12-C)，50. 2 (C，13-C)，187. 1 (C，14-C)，125. 2 (CH，15-C)， 203. 6(C，16-C)，51. 7(CH，17-C)，23. 9(CH3, 18-C)，14. 7(CH3, 19-C)，117. 1 (C，20-C)， 141. 2 (CH，2卜C)，110. 2 (CH，22-C)，142. 0 (CH，23-C)，77. 0 (CH2, 28-C)，18. 1 (CH3, 29-C)， 23. 8(CH3,30-C)，165. 5(C，1' -C)，127. 0(C，2' -C)，137. 7(CH，3' -C)，13. 7(CH3,4' -C)， 11. 3(CH3,5' -C)，174. 0(C，1"-C)，40. 9(CH，2"-C)，25. 8(CH2,3"-C)，11. 1(CH3,4"-C)， 16. 6 (CH3, 5" -C)，170. 0 (C，12-OAc)，21. 5 (CH3,12-OAc);碳原子標記參見圖 1。NMR數(shù)據(jù) 表明該化合物含有的一個a，不飽和羰基，一個3-取代的呋喃基，一個2-甲基-2, 3 烯-丁烯酰氧基，一個2-甲基丁酰氧基基團，五個含氧次甲基，1個含氧亞甲基以及一個乙 酰氧基。2-甲基丁酰氧基于C-3相連，H