一種鮑魚內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明公開了一種鮑魚內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑的制備方法，屬于產(chǎn)品精深加工及其副產(chǎn)物綜合利用的技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來，由于化學(xué)抗氧化添加劑的不安全性和食品安全的考慮，化學(xué)抗氧化添加劑如BHA、BHT和TBHQ等的應(yīng)用受到了較大的限制。因此，高效、低毒的天然食品抗氧化劑的開發(fā)成為研究熱點(diǎn)領(lǐng)域。
[0003]目前，已從各種植物、動物組織中提取得到了抗氧化活性顯著的物質(zhì)，如茶葉中的茶多酚、大豆中的異黃酮、枸杞中的多糖等物質(zhì)，而已有的研究發(fā)現(xiàn)，生物體內(nèi)天然多肽也具有顯著的抗氧化活性，比如鮑魚。鮑魚，最常用的是指一種原始的海洋貝類，屬于單殼軟體動物，其只有半面外殼，殼堅厚、扁而寬，鮑魚是中國傳統(tǒng)的名貴食材，位居四大海味之首，它的內(nèi)臟也是極其富有營養(yǎng)的，含有生物蛋白抗氧化肽，抗氧化肽穩(wěn)定性比較差、在高溫、潮濕等條件下極易發(fā)生變性反應(yīng)，這使得性肽的應(yīng)用受到了很大的影響。因此為了延長功能肽的作用時間和效果，并增加肽的穩(wěn)定性，對肽進(jìn)行微囊化可以起到緩釋和提高其穩(wěn)定性的作用。
[0004]海藻酸鈉載體適合于有生物活性的蛋白質(zhì)類食品，且其來源豐富，成本低廉，是很有前途的緩釋載體，是一種極其適合的微膠囊壁材，而氯化鈣的來源也非常廣泛，價格低廉，且能與海藻酸鈉能夠很好的結(jié)合，從而增強(qiáng)其微囊的穩(wěn)定性，加強(qiáng)其緩釋放性能。因此，我們采用海藻酸鈉和氯化鈣結(jié)合法制備大豆抗氧化肽微膠囊。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題:針對目前化學(xué)抗氧化劑的應(yīng)用受到了較大的限制，因而轉(zhuǎn)為從各種植物和動物組織中提取抗氧化活性顯著的物質(zhì)，但是提取出來的抗氧化肽穩(wěn)穩(wěn)定性比較差、在高溫和潮濕的條件下極易發(fā)生變性反應(yīng)，影響應(yīng)用的弊端，提供了一種鮑魚內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑的制備方法，該方法以鮑魚內(nèi)臟為原料，通過脫脂、除蛋白處理后，用熱水浸提高速離心和透析后得到鮑魚內(nèi)臟抗氧化鈦粉末，之后將其與海藻酸鈉充分混合溶解后逐滴加入到氯化鈣中，形成凝膠小球?qū)⒌鞍纂陌?，最后真空干燥得到一種鮑魚內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑。該方法制得的抗氧化劑不僅安全無毒副作用，穩(wěn)定性比較好，而且抗氧化活性強(qiáng)，在高溫和潮濕的情況下也不會變性。
[0006]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
(1)取海鮮加工廠遺留的鮑魚內(nèi)臟，用去離子水浸泡沖洗3?5次，之后放入水浴鍋中，升溫至70?80°C，水熱脫除內(nèi)臟表皮脂肪，水浴時間為I?2h，再將初步脫脂的鮑魚內(nèi)臟移入組織粉碎機(jī)中進(jìn)彳丁粉碎;
(2)取50?10g粉碎后的鮑魚內(nèi)臟放入IL的燒杯中，加入300?400mL質(zhì)量濃度為6?7%的碳酸鈉溶液，用玻璃棒攪拌10?15min后過濾得鮑魚內(nèi)臟漿液，繼續(xù)用體積比為I: I的異丙醇水溶液漂洗4?5h，以進(jìn)一步脫除鮑魚內(nèi)臟組織間的脂肪；
(3)將上述脫脂后的鮑魚內(nèi)臟漿液用200?300mL質(zhì)量濃度為4?6%的氯化鈉溶液浸泡，搖床振蕩反應(yīng)12?24h，去除鮑魚內(nèi)臟中的雜蛋白；
(4)稱取20?30g上述處理后的鮑魚內(nèi)臟漿液放入500mL燒杯中，加入200?300mL雙蒸水，油浴升溫至100?110°C，熱水浸提10?12h后移入臥式離心機(jī)，以9000?1000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理15?20min，分離得到上清液；
(5)稱取15?35g硫酸銨加入到上清液中，緩慢攪拌析出鮑魚內(nèi)臟蛋白肽，之后放入離心機(jī)，以4000?5000r/min的轉(zhuǎn)速離心分離得到鮑魚內(nèi)臟蛋白肽，將蛋白肽沉淀重新溶解后裝入透析袋，在流動水中透析20?30h，直至透析液不能讓氯化鋇溶液變渾濁為止，之后將透析袋中的鮑魚內(nèi)臟蛋白肽噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為180?200°C，出風(fēng)溫度為80?90°C，干燥后放入研缽研磨成粉，即得到具有強(qiáng)抗氧化性的鮑魚內(nèi)臟蛋白肽粉末；
(6)稱取10?20g海藻酸鈉放入500mL燒杯中，加入200?300mL蒸餾水，移入水浴鍋，升溫至40?50°C，用磁力攪拌機(jī)攪拌10?15min，攪拌轉(zhuǎn)速為300?400r/min，使海藻酸鈉充分溶解，之后降低攪拌轉(zhuǎn)速至200?300r/min，在攪拌狀態(tài)下加入20?40g上述制得的鮑魚內(nèi)臟蛋白肽粉末，繼續(xù)攪拌10?20min，制得鮑魚內(nèi)臟蛋白肽海藻酸鈉混合液；
(7)將上述制得的混合液一滴一滴的加入到質(zhì)量濃度為90%的氯化鈣溶液中，邊滴加邊晃動燒杯，使混合液滴凝聚成均勻小球，之后過濾分離得到蛋白肽凝膠小球，用去離子水沖洗3?5次后用真空冷凍干燥機(jī)干燥，即得一種鮑魚內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑。
[0007]本發(fā)明的應(yīng)用方法是:將本發(fā)明所制得的一種鮑魚內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑均勻放置在肉類柜臺中，其中每隔80?120cm處放置10?15g抗氧化劑，I?2天即可發(fā)現(xiàn)放置抗氧化劑的肉類柜臺中的肉比沒有放置抗氧化劑的肉類柜臺中的肉，顏色更加鮮艷，色澤更加誘人，大大延長了肉類貨柜期。
[0008]本發(fā)明的有益效果是:
(1)本發(fā)明制得的抗氧化劑不僅安全無毒副作用，穩(wěn)定性比較好，而且抗氧化活性強(qiáng)，在高溫和潮濕的情況下也不會變性；
(2)將本發(fā)明制得的抗氧化劑用于肉類食品的保鮮方面，效果顯著，可以提高肉類80%以上的貨柜期。
【具體實(shí)施方式】
[0009]首先取海鮮加工廠遺留的鮑魚內(nèi)臟，用去離子水浸泡沖洗3?5次，之后放入水浴鍋中，升溫至70?80°C，水熱脫除內(nèi)臟表皮脂肪，水浴時間為I?2h，再將初步脫脂的鮑魚內(nèi)臟移入組織粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎；然后取50?10g粉碎后的鮑魚內(nèi)臟放入IL的燒杯中，加入300?400mL質(zhì)量濃度為6?7%的碳酸鈉溶液，用玻璃棒攪拌10?15min后過濾得鮑魚內(nèi)臟漿液，繼續(xù)用體積比為I: I的異丙醇水溶液漂洗4?5h，以進(jìn)一步脫除鮑魚內(nèi)臟組織間的脂肪；之后將上述脫脂后的鮑魚內(nèi)臟漿液用200?300mL質(zhì)量濃度為4?6%的氯化鈉溶液浸泡，搖床振蕩反應(yīng)12?24h，去除鮑魚內(nèi)臟中的雜蛋白；隨后稱取20?30g上述處理后的鮑魚內(nèi)臟漿液放入500mL燒杯中，加入200?300mL雙蒸水，油浴升溫至100?110°C，熱水浸提10?12h后移入臥式離心機(jī)，以9000?10000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理15?20min，分離得到上清液；接下來稱取15?35g硫酸銨加入到上清液中，緩慢攪拌析出鮑魚內(nèi)臟蛋白肽，之后放入離心機(jī)，以4000?5000r/min的轉(zhuǎn)速離心分離得到鮑魚內(nèi)臟蛋白肽，將蛋白肽沉淀重新溶解后裝入透析袋，在流動水中透析20?30h，直至透析液不能讓氯化鋇溶液變渾濁為止，之后將透析袋中的鮑魚內(nèi)臟蛋白肽噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為180?200°C，出風(fēng)溫度為80?90°C，干燥后放入研缽研磨成粉，即得到具有強(qiáng)抗氧化性的鮑魚內(nèi)臟蛋白肽粉末；稱取10?20g海藻酸鈉放入500mL燒杯中，加入200?300mL蒸餾水，移入水浴鍋，升溫至40?50°C，用磁力攪拌機(jī)攪拌10?15min，攪拌轉(zhuǎn)速為300?400r/min，使海藻酸鈉充分溶解，之后降低攪拌轉(zhuǎn)速至200?300r/min，在攪拌狀態(tài)下加入20?40g上述制得的鮑魚內(nèi)臟蛋白妝粉末，繼續(xù)攬摔10?20min，制得鮑魚內(nèi)臟蛋白妝海操酸納混合液；最后將上述制得的混合液一滴一滴的加入到質(zhì)量濃度為90 %的氯化鈣溶液中，邊滴加邊晃動燒杯，使混合液滴凝聚成均勻小球，之后過濾分離得到蛋白肽凝膠小球，用去離子水沖洗3?5次后用真空冷凍干燥機(jī)干燥，即得一種鮑魚內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑。
[0010]實(shí)例I
首先取海鮮加工廠遺留的鮑魚內(nèi)臟，用去離子水浸泡沖洗3次，之后放入水浴鍋中，升溫至70°C，水熱脫除內(nèi)臟表皮脂肪，水浴時間為lh，再將初步脫脂的鮑魚內(nèi)臟移入組織粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎；然后取50g粉碎后的鮑魚內(nèi)臟放入IL的燒杯中，加入300mL質(zhì)量濃度為6%的碳酸鈉溶液，用玻璃棒攪拌1min后過濾得鮑魚內(nèi)臟漿液，繼續(xù)用體積比為1:1的異丙醇水溶液漂洗4h，以進(jìn)一步脫除鮑魚內(nèi)臟組織間的脂肪；之后將上述脫脂后的鮑魚內(nèi)臟漿液用200mL質(zhì)量濃度為4%的氯化鈉溶液浸泡，搖床振蕩反應(yīng)12h，去除鮑魚內(nèi)臟中的雜蛋白；隨后稱取20g上述處理后的鮑魚內(nèi)臟漿液放入500mL燒杯中，加入200mL雙蒸水，油浴升溫至100°C，熱水浸提1h后移入臥式離心機(jī)，以9000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理15min，分離得到上清液；接下來稱取15g硫酸銨加入到上清液中，緩慢攪拌析出鮑魚內(nèi)臟蛋白肽，之后放入離心機(jī)，以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心分離得到鮑魚內(nèi)臟蛋白肽，將蛋白肽沉淀重新溶解后裝入透析袋，在流動水中透析20h，直至透析液不能讓氯化鋇溶液變渾濁為止，之后將透析袋中的鮑魚內(nèi)臟蛋白肽噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為80°C，干燥后放入研缽研磨成粉，即得到具有強(qiáng)抗氧化性的鮑魚