一種阿莫西林緩釋晶體的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種獸用阿莫西林緩釋晶體的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 阿莫西林（Amoxicillin)，又名羥氨芐青霉素，是半合成青霉素類(lèi)抗生素，對(duì)革蘭 陽(yáng)性菌和某些革蘭陰性菌都具有良好的抗菌作用。阿莫西林是一種帶有氨基側(cè)鏈的青霉 素，其化學(xué)結(jié)構(gòu)在單磷酸腺苷的側(cè)鏈苯環(huán)上多一個(gè)羥基，兩者性質(zhì)類(lèi)似。阿莫西林在體內(nèi)抗 菌作用明顯優(yōu)于氨芐青霉索，其抗菌活性起主要作用的基本結(jié)構(gòu)是6-氨基青霉烷酸中的 β-內(nèi)酰胺環(huán)，可專(zhuān)一性地與細(xì)菌內(nèi)膜上靶位點(diǎn)結(jié)合，抑制細(xì)菌細(xì)胞壁黏肽合成酶的活性， 從而阻礙細(xì)胞壁黏肽的合成，使細(xì)菌的細(xì)胞壁缺損，菌體膨脹裂解。尤其對(duì)青霉素耐藥菌 株、腸道桿菌、沙門(mén)氏菌、腸道彎曲菌等感染療效較為顯著。臨床上主要用于泌尿系統(tǒng)、呼吸 系統(tǒng)、膽道等的感染。
[0003] 阿莫西林屬時(shí)間依賴(lài)性抗菌藥物，其藥性的發(fā)揮與達(dá)到MIC的時(shí)間密切相關(guān)，其 殺菌作用主要取決于血藥濃度高于MIC的時(shí)間，即細(xì)菌的暴露時(shí)間，而Cmax并不很重要。這 類(lèi)抗菌藥物的血藥濃度在4~5倍MIC時(shí)，殺菌效果最佳即處于飽和狀態(tài)，再增大劑量殺 菌效果并不再增加；而血清和組織濃度低于MIC時(shí)，細(xì)菌則很快開(kāi)始繼續(xù)生長(zhǎng)，因此臨床應(yīng) 用阿莫西林時(shí)常常少量多次給藥，以使血藥濃度超過(guò)MIC的時(shí)間維持到最長(zhǎng)從而保證其療 效。但在獸醫(yī)臨床上頻繁給藥不僅給動(dòng)物造成應(yīng)激或者傷害，而且動(dòng)物臨床多次給藥特別 是注射給藥非常不便，少量多次給藥也會(huì)浪費(fèi)藥物，增加治療成本。同時(shí)阿莫西林屬內(nèi) 酰胺類(lèi)抗生素，其β-內(nèi)酰胺環(huán)長(zhǎng)期存放過(guò)程中極易受到環(huán)境因素的變化而出現(xiàn)降解從而 影響藥效。因此獲得具有緩釋效應(yīng)并且穩(wěn)定的阿莫西林制劑是獸醫(yī)臨床需要解決的問(wèn)題。
[0004] 物質(zhì)在結(jié)晶時(shí)由于受各種因素影響，使分子內(nèi)或分子間鍵合方式發(fā)生改變，致使 分子或原子在晶格空間排列不同，形成不同的晶體結(jié)構(gòu)。許多結(jié)晶藥物都存在多晶現(xiàn)象。在 其生產(chǎn)過(guò)程中，由于生產(chǎn)工藝的不同，可形成不同的結(jié)晶型及無(wú)定型晶體。同一藥物不同的 晶型，因晶格結(jié)構(gòu)不同，其物理性質(zhì)，如溶解度、溶出速率、熔點(diǎn)等及穩(wěn)定性（化學(xué)穩(wěn)定性） 可能存在顯著差異。因而晶體藥物研究日益受到藥學(xué)領(lǐng)域的重視。現(xiàn)有研究表明，藥物的 溶出速度正比于溶解度與粒子的表面積，藥物的結(jié)晶狀態(tài)與粒徑大小等因素影響藥物溶出 進(jìn)而影響藥物吸收的快慢。穩(wěn)定型晶體結(jié)構(gòu)由于分子間排列規(guī)則或者氫鍵結(jié)合規(guī)則有序， 其溶出速度相對(duì)亞穩(wěn)定性晶體結(jié)構(gòu)較緩，在體內(nèi)釋放分子速度變慢，可以延長(zhǎng)藥物分子在 動(dòng)物體內(nèi)藥效。所以選擇合適的晶體結(jié)構(gòu)，不僅可以提高阿莫西林類(lèi)藥物的穩(wěn)定性，而且可 以減慢藥物的溶出，從而延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間，這對(duì)于獸醫(yī)臨床用藥具有十分重要的價(jià)值。
[0005] 為了獲得阿莫西林的晶體結(jié)構(gòu)，國(guó)內(nèi)也有部分科研人員對(duì)阿莫西林的結(jié)晶工藝進(jìn) 行了研究。如天津大學(xué)劉慧勤采用等電點(diǎn)結(jié)晶法對(duì)阿莫西林結(jié)晶工藝進(jìn)行了優(yōu)化，陳格測(cè) 定了 3個(gè)企業(yè)阿莫西林原料藥的晶型與體外的溶出度的關(guān)系，石藥集團(tuán)王艷艷報(bào)道了對(duì)阿 莫西林結(jié)晶過(guò)程中晶核形成及晶型成長(zhǎng)過(guò)程的研究，中國(guó)專(zhuān)利號(hào)為201410274773. 9的專(zhuān) 利報(bào)道了一種阿莫西林晶體及其制備方法，但這些研究均只對(duì)阿莫西林的結(jié)晶工藝進(jìn)行了 研究，但如何獲得具有緩釋效應(yīng)的更加穩(wěn)定的阿莫西林晶體卻鮮見(jiàn)研究報(bào)道。
[0006] 本發(fā)明旨在通過(guò)研究不同結(jié)晶條件對(duì)阿莫西林晶體的影響，從而改變阿莫西林藥 物晶型，得到阿莫西林相對(duì)穩(wěn)定的晶體，提高阿莫西林的穩(wěn)定性，減緩阿莫西林分子溶出速 度，延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)存留時(shí)間，提高藥物的抗菌效果。同時(shí)由于藥物的緩釋效應(yīng)也能減輕對(duì) 動(dòng)物的應(yīng)激，增加藥物的利用率，減少治療成本。所以，制作出阿莫西林的穩(wěn)定晶體具有明 顯的經(jīng)濟(jì)和實(shí)用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種阿莫西林緩釋晶體的制備方法，通過(guò)本發(fā) 明的方法制備得到的阿莫西林緩釋晶體，穩(wěn)定性高，溶解度低。
[0008] 本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0009] -種阿莫西林緩釋晶體的制備方法，步驟如下：取阿莫西林原粉，加入溫度為 60~80°C的溶劑中，恒溫?cái)嚢枞芙?，過(guò)濾（濾紙過(guò)濾）得到阿莫西林的飽和溶液，然后迅速 放入25°C~45°C水浴鍋中，靜置保存lh，隨后轉(zhuǎn)至15°C環(huán)境中，析出得到阿莫西林晶體，抽 濾（用循環(huán)水真空栗抽濾）析出的晶體，烘干（放入恒溫箱里烘干），即得。
[0010] 優(yōu)選的，所述溶劑為水，最優(yōu)選蒸餾水。
[0011] 優(yōu)選的，所述溶解溫度為60 °C或70 °C。
[0012] 優(yōu)選的，所述析晶方式為：在25°C環(huán)境中保存Ih后轉(zhuǎn)至15°C，或在45°C環(huán)境中保 持Ih后轉(zhuǎn)至15 °C。
[0013] 通過(guò)本發(fā)明的方法制備得到的阿莫西林晶體，晶型更穩(wěn)定，溶解度低（降低 28. 2% )，藥物釋放更為緩慢，這樣藥效在體內(nèi)的持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)，進(jìn)而可減少給藥次數(shù)，減輕 對(duì)動(dòng)物的應(yīng)激，增加藥物的利用率，減少治療成本，也便于養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)動(dòng)物的管理，臨床意義 較大，社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益更加顯著。
【附圖說(shuō)明】
[0014] 圖1 :阿莫西林標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
[0015] 圖2 :不同方法制備的阿莫西林溶解曲線(xiàn)。
[0016] 圖3 :不同溶解溫度中析出晶體的溶解速度比較。
[0017] 圖4 :不同析晶溫度中析出晶體的溶解速度比較。
[0018] 圖5 :不同析晶方式中析出晶體的溶解速度比較。
[0019] 圖6:阿莫西林的析晶過(guò)程和晶體形狀，其中，（a)析晶過(guò)程；(b)阿莫西林晶體； (c)顯微鏡下阿莫西林晶體。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。
[0021] 下述實(shí)施例中所涉及的儀器、試劑、材料等，若無(wú)特別說(shuō)明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有 的常規(guī)儀器、試劑、材料等，可通過(guò)正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所涉及的實(shí)驗(yàn)方法，檢 測(cè)方法等，若無(wú)特別說(shuō)明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法，檢測(cè)方法等。
[0022] 實(shí)驗(yàn)制備阿莫西林晶體
[0023] 1.材料
[0024] I. 1藥品與試劑
[0025] 阿莫西林原粉，氨水（成都市科龍化工試劑廠，批準(zhǔn)文號(hào)20130418,含量 多99. 5% )，氨水（成都市科龍化工試劑廠，批準(zhǔn)文號(hào)20091023,含量多99. 0% )，碳酸氫鈉 (天津市申泰化學(xué)試劑有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)021219,含量彡99. 5% )等。
[0026] 1. 2主要試驗(yàn)儀器
[0027] 水浴恒溫振蕩器（哈爾濱市東明醫(yī)療儀器廠制造，HZS-H)、循環(huán)水真空栗（上海亞 榮生化儀器廠SHZ- III D)、恒溫磁力攪拌器、紫外分光光度計(jì)（上海龍尼柯儀器有限公司， WFZW-2000)、電子分析天平（沈陽(yáng)龍騰電子有限公司，ESJ200-4)、恒溫水浴鍋（國(guó)華電器有 限公司，HH-4)等。
[0028] 2.方法與結(jié)果
[0029] 2. 1阿莫西林含量測(cè)定方法的建立
[0030] 阿莫西林含量的測(cè)定采用紫外分光光度法。配制一定濃度的阿莫西林溶液，于 200~400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，選擇最大吸收波長(zhǎng)272nm作為含量測(cè)定波長(zhǎng)。
[0031] 精密稱(chēng)取一定量的阿莫西林對(duì)照品，配制成濃度分別為52. 02、104. 04、156. 06、 208. 08、260. 10、312. 22ug/ml的阿莫西林標(biāo)準(zhǔn)溶液，用紫外分光光度計(jì)在272nm波長(zhǎng)條件 下分別測(cè)量吸光度。以吸光度（X)為橫坐標(biāo)、阿莫西林濃度（y)為縱坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸 分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程為y = 398. 76x+0. 3032 (R2= 0.9998)，結(jié)果表明，阿莫西林在 52. 02~312. 22ug/ml濃度范圍內(nèi)與吸光度線(xiàn)性關(guān)系良好，可用于阿莫西林含量的測(cè)定。標(biāo) 準(zhǔn)曲線(xiàn)如圖1所示。
[0032] 2. 2阿莫西林溶解速度的檢測(cè)
[0033] 將恒溫水浴振蕩器溫度設(shè)置為25°C，轉(zhuǎn)速設(shè)為150r/min。稱(chēng)取0. 3g阿莫西林原粉 或者阿莫西林晶體，放入裝有100mL蒸餾水的燒杯中，將燒杯放入恒溫水浴振蕩器中不斷 振搖，分另 1J在 lmin、2min、4min、6min、8min、lOmin、15min、30min、lh、2h、4h、6h 時(shí)取樣 5ml， 用微孔濾膜過(guò)濾后轉(zhuǎn)入50ml容量瓶中蒸餾水定容，在272nm波長(zhǎng)條件下檢測(cè)吸光度，根據(jù) 阿莫西林標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出濃度，并繪制溶解曲線(xiàn)。
[0034] 2. 3阿莫西林緩釋晶體的制備方法
[0035] 2. 3. 1酸堿法制備阿莫西林晶體
[0036] 稱(chēng)取Ig阿莫西林原粉于100mL蒸餾水中，將其置于恒溫水浴攪拌器中（T = 25°C， r = 150r/min)并向其中緩慢滴加一定濃度的鹽酸溶液將pH調(diào)至2左右時(shí)阿莫西林基本 溶解，此時(shí)，向燒杯緩慢滴加一定濃度的氨水溶液至阿莫西林晶體充分析出。過(guò)濾析出的晶 體，放入恒溫箱里烘干，備用。
[0037] 2. 3. 2改變溫度法制備阿莫西林晶體
[0038] 量取100mL蒸餾水加入燒杯中，置于恒溫磁力攪拌器上，調(diào)節(jié)至適宜溫度，并保持 恒速攪拌。稱(chēng)取Ig阿莫西林原粉加入燒杯中，不斷攪拌下使阿莫西林溶解，用濾紙過(guò)濾得 到阿莫西林的飽和溶液，然后將過(guò)濾后的飽和溶液迅速放置低溫水浴鍋中使阿莫西林靜置 析出得到阿莫西林晶體，用循環(huán)水真空栗抽濾析出的晶體，后放入恒溫箱里烘干，備用。
[0039] 將2. 3. 1和2. 3. 2所得阿莫西林晶體分別按2. 2方法測(cè)定阿莫西林的溶解速度， 比較二者溶解速度的快慢，結(jié)果見(jiàn)圖2。
[0040] 從圖2中可以看出，阿莫西林在6h時(shí)其溶解基本已達(dá)到平衡，其溶解度約為 329. 28 μ g/ml，而通過(guò)酸堿法和改變溫度法制備的阿莫西林晶體在6h時(shí)的溶解度分別為 275. 05 μ g/ml和230. 03 μ g/ml?？梢?jiàn)阿莫西林經(jīng)過(guò)重結(jié)晶后其溶解速率明顯減慢，其中改 變溫度法得到的阿莫西林晶體溶出更為緩慢。酸堿法（即等電點(diǎn)結(jié)晶）制備阿莫西林晶體 是目前大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道的方法，它是在一定溫度、相應(yīng)攪拌下將一定濃度的氨水作為調(diào)節(jié) 體系pH的物質(zhì)以一定流速加入阿莫西林鹽酸鹽水溶