一種泥鰍抗菌肽的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及抗菌肽的制備方法，尤其是一種泥鰍抗菌肽的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]抗菌肽(antimicrobialpeptides)是生物體中經(jīng)誘導(dǎo)而合成的一種內(nèi)源性多肽，在機(jī)體抵抗病原的入侵方面起著重要的作用，更被認(rèn)為是缺乏特異性免疫功能生物的重要防御成分?？咕牡淖饔脵C(jī)理與常用的抗生素明顯不同，它主要通過在細(xì)胞膜表面形成離子通道來殺死細(xì)菌，在目前細(xì)菌的抗藥性明顯增強(qiáng)，而尋找新的抗生素又極為困難的情況下，尋找新的抗菌肽具有重要意義。
[0003]泥鰍系鰍科動物，據(jù)《中藥大辭典》等文獻(xiàn)記載，泥鰍的肉或全體入藥，歸脾經(jīng)，具有補(bǔ)脾益氣，清熱解毒、護(hù)肝退黃等功效，在中國民間，用新鮮泥鰍搗亂外敷治療骨髓炎，乳癰等疾病已有數(shù)千年的歷史。但是國內(nèi)外對泥鰍中的功效成分的報道一直較少。
[0004]可控酶解法制備的泥鰍抗菌肽是低聚肽混合物，具有廣譜抑菌作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種泥鰍抗菌肽的制備方法。
[0006]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:一種黃鯽蛋白抗菌肽的風(fēng)味性提高方法，其特征在于包括以下步驟:
1.一種泥鰍抗菌肽的制備方法，其特征在于包括以下步驟:
1)將泥鰍肉洗凈切小塊，用組織勻漿搗碎機(jī)均勻攪碎，制成泥鰍肉糜，按照泥鰍肉糜質(zhì)量的3?5倍比例加入去咼子水；
2)調(diào)節(jié)泥鰍肉糜與水混合液的pH值至5.5?7.5，并保持恒定；
3)根據(jù)泥鰍肉糜的質(zhì)量，木瓜蛋白酶以3000?4000U/g的比例加入到混合液中，在保持酶解溫度45?55°C的條件下，酶解4?8小時；
4)加熱，升溫至95?100°C進(jìn)行鈍化滅酶，滅酶時間5?15分鐘；
5)冷卻至3?5°C以下，進(jìn)行高速離心處理，收集清液；
6)干燥，取清液冷凍干燥。
[0007]優(yōu)選，所述步驟2)中的pH值是用6?8mol/L氫氧化鈉來進(jìn)行調(diào)節(jié)的。
[0008]再優(yōu)選，所述步驟5)中的高速離心處理時間位?15分鐘，離心速度為6000?8000r/mino
[0009]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于:是以純天然的泥鰍為原料來制備抗菌肽，該菌肽可望用作無毒，無副作用的外用消炎藥和食品防腐劑和抗氧化劑，具有廣泛的應(yīng)用前景。
【具體實施方式】
[0010]—種泥鰍抗菌肽的制備方法，具體步驟如下: 1)將泥鰍魚肉1000克洗凈切小塊，用組織勻漿搗碎機(jī)均勻攪碎，制成魚肉糜，加入4000毫升去離子水?dāng)噭颍?br>2)采用8mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)泥鰍肉糜與水混合液的pH值至7.5，并保持恒定；
3)加入10萬u/g木瓜蛋白酶40g到混合液中，在保持酶解溫度45?55°C的條件下，酶解6小時；
4)加熱，升溫至95°C進(jìn)行鈍化滅酶，滅酶時間15分鐘；
5)冷卻至5°C以下，進(jìn)行離心處理10分鐘，離心速度8000r/min收集清液；
6)干燥，取清液冷凍干燥得泥鰍抗菌肽24克。
【主權(quán)項】
1.一種泥鰍抗菌肽的制備方法，其特征在于包括以下步驟: 1)將泥鰍肉洗凈切小塊，用組織勻漿搗碎機(jī)均勻攪碎，制成泥鰍肉糜，按照泥鰍肉糜質(zhì)量的3?5倍比例加入去咼子水； 2)調(diào)節(jié)泥鰍肉糜與水混合液的pH值至5.5?7.5，并保持恒定； 3)根據(jù)泥鰍肉糜的質(zhì)量，木瓜蛋白酶以3000?4000U/g的比例加入到混合液中，在保持酶解溫度45?55°C的條件下，酶解4?8小時； 4)加熱，升溫至95?100°C進(jìn)行鈍化滅酶，滅酶時間5?15分鐘； 5)冷卻至3?5°C以下，進(jìn)行高速離心處理，收集清液； 6)干燥，取清液冷凍干燥。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟2)中的pH值是用6?8mol/L氫氧化鈉來進(jìn)行調(diào)節(jié)的。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟5)中的高速離心處理的時間5?15分鐘，離心速度為6000?8000r/min。
【專利摘要】一種泥鰍抗菌肽的制備方法，其特征在于包括以下步驟：泥鰍肉洗凈、攪碎、酶解、離心、凍干。該菌肽可望用作無毒，無副作用的外用消炎藥和食品防腐劑和抗氧化劑，具有廣泛的應(yīng)用前景。
【IPC分類】C12P21/06
【公開號】CN105002248
【申請?zhí)枴緾N201510492218
【發(fā)明人】寧發(fā)子, 寧成勇, 李華群
【申請人】重慶都好生物科技有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年8月12日