藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。該步驟中具體的 培養(yǎng)方法和步驟41中對藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法相同,此處不再贅述。
[0046] 作為上述將藻類細(xì)胞層中的所有第二藻絲全部采收的進(jìn)一步優(yōu)化方案,在步驟 43a后,步驟45a前,步驟40 (即對藻類細(xì)胞層中第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的步驟) 還可包括:
[0047] 步驟44a、對全部第二藻絲中長度大于預(yù)設(shè)長度的第二藻絲進(jìn)行減短處理。通過 該步驟,將采收得到的全部第二藻絲中長度較長的第二藻絲處理為新的長度較短的第二藻 絲,從而在后續(xù)的步驟45中,使得接種在支撐層上的藻類細(xì)胞層中的第二藻絲的長度均較 短,進(jìn)一步防止藻類細(xì)胞層中因第二藻絲生長地過長而產(chǎn)生較多的鼓泡,最終避免鼓泡對 藻類細(xì)胞的養(yǎng)殖產(chǎn)量產(chǎn)生影響。
[0048] 請參閱圖5,可以理解的是,在大多數(shù)情況下,本發(fā)明實(shí)施例能夠避免藻類細(xì)胞層 中鼓泡的產(chǎn)生,但在極個別情況(例如某些藻類細(xì)胞的生長速度過快的情況、或藻類細(xì)胞 的培養(yǎng)時(shí)間過長的情況)下,存在藻類細(xì)胞層中產(chǎn)生鼓泡的可能。為了對這些可能產(chǎn)生的 鼓泡進(jìn)行處理,在本發(fā)明實(shí)施例中,步驟40(即對藻類細(xì)胞層中第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn) 行培養(yǎng)的步驟)還包括:
[0049] 步驟42b、當(dāng)藻類細(xì)胞層中產(chǎn)生鼓泡時(shí),對位述鼓泡處的第二藻絲進(jìn)行剪裁、切割 或采收,以使鼓泡消失。具體地,例如,通過肉眼或顯微器械等觀察藻類細(xì)胞層,當(dāng)藻類細(xì)胞 層中出現(xiàn)多個鼓泡時(shí),切斷或剪裁該鼓泡處第二藻絲,使其斷裂為長度較短的新的第二藻 絲,或者將該鼓泡處的第二藻絲采收。需要說明的是,步驟42b可根據(jù)藻類細(xì)胞層中出現(xiàn)鼓 泡的情況反復(fù)實(shí)施。通過上述設(shè)置,在藻類細(xì)胞層中產(chǎn)生鼓泡時(shí)及時(shí)對該鼓泡進(jìn)行處理,避 免鼓泡現(xiàn)象造成藻類細(xì)胞的養(yǎng)殖產(chǎn)量降低。
[0050] 請參閱圖6,除對藻類細(xì)胞層產(chǎn)生鼓泡處的第二藻絲進(jìn)行處理之外,還可將藻類細(xì) 胞層中的所有第二藻絲全部采收,具體地,步驟40(即對藻類細(xì)胞層中第二藻絲中的藻類 細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的步驟)還包括:
[0051] 步驟43b、當(dāng)藻類細(xì)胞層中產(chǎn)生鼓泡時(shí),對藻類細(xì)胞層中的全部第二藻絲進(jìn)行采 收;具體的采收方法在上述內(nèi)容中已有詳述,此處不再贅述。
[0052] 步驟45b、使全部第二藻絲均勻混合,然后將全部第二藻絲接種在支撐層上??梢?理解的是,在步驟41的藻類細(xì)胞培養(yǎng)中,藻類細(xì)胞層中的表層細(xì)胞能夠獲得充足的光照及 二氧化碳?xì)怏w,從而生長較為旺盛,則表層細(xì)胞中的第二藻絲的長度較長,而底層細(xì)胞無法 獲得足夠的光照,因此底層細(xì)胞中的第二藻絲的長度較短。因此,在步驟45b中,通過將采 收后的所有第二藻絲混勻后重新接種在支撐層上,形成新的藻類細(xì)胞層,使得新的藻類細(xì) 胞層中的表層細(xì)胞中較長的第二藻絲的比例減小,從而降低了較長的第二藻絲造成新的藻 類細(xì)胞層中產(chǎn)生鼓泡的可能性,進(jìn)而降低了鼓泡對藻類細(xì)胞的養(yǎng)殖產(chǎn)量造成影響的風(fēng)險(xiǎn)。
[0053] 步驟46b、對接種在支撐層上的第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。該步驟中具體的 培養(yǎng)方法和步驟41中對藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的方法相同,此處不再贅述。
[0054] 進(jìn)一步地,在步驟43b后,步驟45b前,步驟40 (即對藻類細(xì)胞層中第二藻絲中的 藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的步驟)還包括:
[0055] 步驟44b、對全部第二藻絲中長度大于預(yù)設(shè)長度的第二藻絲進(jìn)行減短處理。通過 該步驟,將采收得到的全部第二藻絲中長度較長的第二藻絲處理為新的長度較短的第二藻 絲,從而在后續(xù)的步驟45中,使得接種在支撐層上的藻類細(xì)胞層中的第二藻絲的長度均較 短,進(jìn)一步防止藻類細(xì)胞層中因第二藻絲生長地過長而產(chǎn)生較多的鼓泡,最終避免鼓泡對 藻類細(xì)胞的養(yǎng)殖產(chǎn)量產(chǎn)生影響。其中,預(yù)設(shè)長度取決于藻類細(xì)胞的生長速度和藻類細(xì)胞層 的密集程度,一般而言可設(shè)置成第一藻絲的平均長度。
[0056] 在步驟30(即將第二藻絲接種在支撐層上,獲得附著在支撐層上的藻類細(xì)胞層的 步驟)前,藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法還包括搭建固定化養(yǎng)殖平臺,該搭建固定化養(yǎng)殖平臺的具 體過程為:
[0057] 步驟11、搭建支撐層。支撐層可選用柔性材料(如絲綢等)、親水材料(如木材等) 或柔性親水材料(如棉布等),柔性材料能夠適應(yīng)各樣的培養(yǎng)環(huán)境,而親水材料具有良好的 保持培養(yǎng)基的性能,柔性親水材料則兼具兩者的優(yōu)點(diǎn),根據(jù)實(shí)際的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)需求,本 領(lǐng)域技術(shù)人員可適當(dāng)選擇合適的支撐層。
[0058] 步驟12、設(shè)置培養(yǎng)基儲存容器,培養(yǎng)基儲存容器內(nèi)儲存有培養(yǎng)基,培養(yǎng)基儲存容器 可選用無菌水箱等大型的密封儲液容器,以確保培養(yǎng)基的無菌保存。
[0059] 步驟13、在支撐層和培養(yǎng)基儲存容器之間設(shè)置培養(yǎng)基輸送裝置,以使培養(yǎng)基儲存 容器向支撐層提供培養(yǎng)基,且使支撐層向培養(yǎng)基儲存容器返回未被消耗的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基 輸送裝置可由多條管線、循環(huán)泵組成,其具體設(shè)置可根據(jù)固定化養(yǎng)殖平臺的工作環(huán)境及培 養(yǎng)基循環(huán)運(yùn)行的實(shí)際參數(shù)決定,本發(fā)明并不對此進(jìn)行特別限定。
[0060] 可以理解的是,步驟11至步驟13可在步驟20之前進(jìn)行,也可在步驟20后,步驟 30前進(jìn)行,此外還可和步驟20同時(shí)進(jìn)行。這是由于搭建固定化養(yǎng)殖平臺和第一藻絲的減短 處理互不干擾,即在第二藻絲接種前,可在任意時(shí)刻進(jìn)行步驟11至步驟13。本發(fā)明實(shí)施例 優(yōu)選步驟11至步驟13在步驟20之前進(jìn)行,以確保在通過減短處理將第一藻絲制成第二藻 絲后,及時(shí)將第二藻絲接種在支撐層上。
[0061] 對于上述技術(shù)方案及其改進(jìn)方案而言,在步驟40(即對藻類細(xì)胞層中第二藻絲中 的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的步驟)后,藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法還包括:
[0062] 步驟50、對藻類細(xì)胞層中的第二藻絲進(jìn)行采收。上述內(nèi)容已經(jīng)提及對第二藻絲進(jìn) 行采收的方法,應(yīng)用上述方法進(jìn)行第二藻絲的采收即可,對于多糖、蛋白質(zhì)及甘油三酯等細(xì) 胞分泌物的采收方法,與現(xiàn)有技術(shù)相同,此處不再贅述。對于采收所得到長度變長的第二藻 絲,可直接將其用作第一藻絲,從步驟20開始再次實(shí)施本發(fā)明實(shí)施例提供的藻類細(xì)胞的培 養(yǎng)方法,以實(shí)現(xiàn)藻類細(xì)胞的循環(huán)培養(yǎng),提高藻類細(xì)胞的培養(yǎng)效率。
[0063] 為了進(jìn)一步說明本發(fā)明實(shí)施例提供的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法所具有的提高藻類細(xì) 胞的養(yǎng)殖產(chǎn)量的效果,本申請發(fā)明人還進(jìn)行了如下對比實(shí)驗(yàn):
[0064] 對比實(shí)驗(yàn)1:
[0065] 在該對比實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組以原料黃絲藻作為第一藻絲,對照組以原料黃絲藻作為 原料藻絲,以濾紙作為支撐層。
[0066] 步驟10、在長X寬為lmXlm、厚為5cm的有機(jī)玻璃板上平鋪與有機(jī)玻璃板大小相 同的無紡布,并在無紡布上平鋪與無紡布大小相同的濾紙,然后將該有機(jī)玻璃板連同其上 的無紡布和濾紙豎直放置(同時(shí)采取措施防止無紡布和濾紙脫落),在無紡布與有機(jī)玻璃 板之間,從兩者上部不斷滴加培養(yǎng)基,培養(yǎng)基自另一端留下,落入位于有機(jī)玻璃板下方的水 槽內(nèi),該水槽為培養(yǎng)基儲存容器,設(shè)置潛水泵以及循環(huán)管線,構(gòu)成培養(yǎng)基輸送裝置,使得培 養(yǎng)基能夠?qū)V紙進(jìn)行循環(huán)浸潤(實(shí)驗(yàn)組和對照組各設(shè)置一套上述裝置)。
[0067] 步驟20、對通過液體培養(yǎng)獲得的黃絲藻進(jìn)行抽濾,除去液體,獲得黃絲藻的藻泥或 藻片,即原料黃絲藻;然后:
[0068] (1)實(shí)驗(yàn)組:以該原料黃絲藻作為第一藻絲,用剪刀將第一藻絲先橫向剪切,再縱 向剪切,使第一藻絲盡量規(guī)則變短,以形成第二藻絲;
[0069] (2)對照組:以該原料黃絲藻作為原料藻絲。
[0070] 步驟30、將實(shí)驗(yàn)組的第二藻絲和對照組的原料藻絲分別溶解在培養(yǎng)基中,然后將 溶解有第二藻絲的培養(yǎng)基和溶解有原料藻絲的培養(yǎng)基分別噴灑在不同的支撐層的濾紙上, 完成第二藻絲和原料藻絲的接種。
[0071] 步驟40、向水槽中的培養(yǎng)基內(nèi)通入2%二氧化碳與空氣的混合氣體,并通過曝氣 石對該混合氣體進(jìn)行分散,促進(jìn)該混合氣體的溶解;利用培養(yǎng)基輸送裝置進(jìn)行培養(yǎng)基的循 環(huán),使得濾紙和其上的藻類細(xì)胞層持續(xù)被培養(yǎng)基所浸潤;同時(shí),采用熒光燈對附著在濾紙上 的藻類細(xì)胞層的表面持續(xù)進(jìn)行照射。
[0072] 步驟50、在通過步驟40對第二藻絲持續(xù)培養(yǎng)三天后,分別將實(shí)驗(yàn)組和對照組的濾 紙上的藻類細(xì)胞全部用水沖下,混勻,清洗藻類細(xì)胞中混雜的鹽分與雜質(zhì),然后通過抽濾方 法獲得藻泥,將藻泥放入l〇5°C烘箱進(jìn)行烘干,然后分別稱重并計(jì)算產(chǎn)量。
[0073]表1
[0075] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0076] 在對比實(shí)驗(yàn)1中,實(shí)驗(yàn)組的黃絲藻的第一藻絲經(jīng)過減短處理,得到長度較短的第 二藻絲,然后將第二藻絲接種在濾紙上;對照組的黃絲藻的原料藻絲并未經(jīng)過處理,直接接 種在濾紙上。從實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象來看,實(shí)驗(yàn)組的藻類細(xì)胞層中幾乎不產(chǎn)生鼓泡,而對照組的藻類細(xì) 胞層中產(chǎn)生的鼓泡較多;根據(jù)表1可得,實(shí)驗(yàn)組的平均產(chǎn)量明顯高于對照組的平均產(chǎn)量,從 而證明本發(fā)明實(shí)施例提供的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法確實(shí)能夠提高藻類細(xì)胞的養(yǎng)殖產(chǎn)量。
[0077] 對比實(shí)驗(yàn)2:
[0078] 在該對比實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組以原料螺旋藻作為第一藻絲,對照組以原料螺旋藻作為 原料藻絲,以玻璃纖維膜作