抗體和蛋白質制劑的制作方法
【專利說明】抗體和蛋白質制劑
[0001] 本申請于2013年8月28日作為PCT國際專利申請?zhí)峤?，并且要求?012年8月 31日提交的美國專利申請?zhí)?3/601,598和于2013年3月15日提交的美國專利申請?zhí)?13/843, 780的優(yōu)先權，所述美國專利申請的公開內容在此通過引用全文并入本文。
[0002] 背景 本公開內容一般涉及等滲且具有低粘度的抗體及其他蛋白質制劑，包括用于注射和一 般施用的制劑。
[0003] 血友病患者患有出血障礙，這導致在損傷或手術后延遲的血液凝固。延長出血由 一種或多種血液凝固因子中的遺傳缺陷引起。兩類常見的血友病是已知的--血友病A和 血友病B。血友病A由因子VIII中的缺陷引起，而血友病B由因子IX中的缺陷引起。總血 友病患者中的約75-80%患有血友病A。
[0004] 組織因子途徑抑制劑（TFPI)是血液凝固的外源性途徑的人抑制劑并在抗凝中起 效。針對TFPI的抗體包括抗TFPI單克隆抗體（aTFPImAb)在阻斷TFPI功能的努力中得 到開發(fā)。一種此類aTFPImAb是人IgG2抗TFPImAb，其開發(fā)用于治療血友病A和B患者。 [0005] 抗體及其他蛋白質可以經(jīng)由靜脈內、肌內和/或皮下注射施用于患者。為了確保 患者依從性，希望皮下注射劑型是等滲的且包括小注射體積（〈2.0ml/注射部位)。為了 降低注射體積，蛋白質通常在1mg/ml- 150mg/ml的范圍內施用。
[0006] 雖然液體和凍干劑型兩者均用于目前銷售的基于抗體及其他蛋白質的藥物產品， 但凍干形式更頻繁用于具有高蛋白質濃度的蛋白質和抗體藥物產品。
[0007] 蛋白質和抗體劑型可以呈現(xiàn)制劑開發(fā)中的許多挑戰(zhàn)，尤其是對于液體制劑。對于 其中蛋白質濃度接近其表觀溶解度限制的制劑，相分離可以通過沉淀、膠凝和/或結晶而 發(fā)生。在高蛋白質濃度時，由于可溶性和不溶性蛋白質-蛋白質聚集體的形成，抗體或其他 蛋白質的穩(wěn)定性可以變得成問題。高度濃縮的蛋白質制劑通常是高度粘稠的，這呈現(xiàn)加工 例如超濾和無菌過濾以及劑量溶液注射的困難。并且在對于預期用于肌內或皮下施用的制 劑希望的蛋白質濃度時，需要高濃度的穩(wěn)定劑例如鹿糖和氯化鈉，以實現(xiàn)長期蛋白質穩(wěn)定 性。所得到的高滲溶液通常由于組織損害而引起注射疼痛。因此，對于高蛋白質濃度制劑 的穩(wěn)定性和滲透壓摩爾濃度平衡穩(wěn)定劑的量是關鍵的。
[0008] 出于這些原因，本領域存在對以液體形式的基于抗體及其他蛋白質的治療制劑的 需要，所述治療制劑顯示出高蛋白質濃度，而無顯著增加的蛋白質聚集、滲透壓摩爾濃度或 粘度和/或蛋白質穩(wěn)定性減少的問題。因此，希望基于抗體及其他蛋白質的制劑含有有限 量的賦形劑和小體積以便于治療施用或遞送。進一步希望基于抗體及其他蛋白質的治療制 劑可順應于凍干，以增強在延長貯存條件下的蛋白質穩(wěn)定性。
[0009] 概述 本公開內容提供了液體和凍干的基于抗體和蛋白質的制劑，其基本上是等滲和低粘度 的，并且基本上不含無機鹽。本文呈現(xiàn)的抗體及其他蛋白質制劑在約pH4.0 -約pH6.0 的pH下含有約0mM-約30mM組氨酸；約50ppm-約200ppm非離子型表面活性劑例 如聚山梨酯（Tween?)80或聚山梨酯（Tween?)20;約88mM-約292mM糖或糖醇例如甘露 糖醇、右旋糖、葡萄糖、海藻糖和/或蔗糖；約0mM-約50mM精氨酸；約0mM-約50mM賴氨酸；約〇mM_約133mM甘氨酸或丙氨酸；約0mM-約10mM甲硫氨酸；和約1mg/ ml-約150mg/ml的蛋白質。本文公開的制劑顯示出范圍為在22°C下約1mPa-S-約20 mPa-S，或在 22°C下約 1mPa-S-約 15mPa-S，或在 22°C下約 1mPa-S-約 10mPa-S，或 在22°C下約1mPa-S-約8mPa-S或在22°C下約1mPa-S-約6mPa-S的粘度和范圍為 約240 -約380mmol/kg的滲透壓摩爾濃度。
[0010] 在進一步方面內，本公開內容提供了用于治療患者中的病癥的方法，其包括給患 者施用治療有效量的本文描述的一種或多種制劑。例如，提供的是用于治療患者中的病癥 的方法，其包括給患者施用治療有效量的如本文更詳細地描述的抗體或其他蛋白質制劑。
[0011] 本文教導的這些及其他特點在本文中闡述。
[0012] 附圖簡述 技術人員應當理解下文描述的附圖僅用于舉例說明目的。附圖不預期以任何方式限制 本文教導的范圍。
[0013] 圖1是顯示氯化鈉（NaCl)濃度對20mg/ml以pH5. 5的抗TFPImAb制劑的濁度 的作用的圖示。
[0014] 圖2是顯示pH對抗TFPImAb藥品的濁度的作用的圖示。
[0015] 多種實施方案的描述 如上所述，本公開內容提供了抗體及其他蛋白質制劑，其在預期貯存條件下以液體形 式或凍干形式穩(wěn)定抗體或其他蛋白質。本文描述的制劑包括一種或多種藥學上可接受的賦 形劑或穩(wěn)定劑，并且包含在以合適pH的緩沖介質中，并且與生理溶液基本上等滲。對于全 身施用，注射是一種施用途徑，包括肌內、靜脈內、腹膜內和皮下注射。
[0016] 由于其低粘度，本文公開的蛋白質制劑可以方便地經(jīng)由例如超濾和無菌過濾進行 加工，并且可以經(jīng)由注射包括皮下注射施用于患者。此外，因為它們基本上是等滲的，所以 本文公開的抗體和蛋白質制劑降低組織損害或其他不利生理效應，并且從而實現(xiàn)有利的患 者耐受和增加的患者依從性。
[0017] 本文描述的制劑的特征在于基本上不存在添加的鹽，其提供增加其他穩(wěn)定劑例如 蔗糖的濃度的靈活性，同時維持制劑的滲透壓摩爾濃度用于改善的體內耐受性和因而增加 的患者依從性。此外，本文描述的制劑的低粘度允許方便加工，包括但不限于超濾和無菌過 濾，和通過針注射藥物產品溶液。
[0018] 如本文使用的，術語"粘度"指例如當在施用于患者期間通過注射針注射時，液體 制劑對流動的抗性。粘度測量可以通過錐板技術用在限定溫度例如如本文描述的22°C下設 定的泊爾帖元件（Peltierelement)完成。通常，將明確限定的剪切應力梯度應用于液體 制劑，并測量所得到的剪切速率。粘度是剪切應力與剪切速率的比。如本文使用的，粘度以 在22°C下的mPa-S單位表示，其中1mPa-S= 1cP。本文公開的低粘度、基本上等滲的制 劑通常特征在于具有范圍為在22°C下約1mPa-S-約20mPa-S，或在22°C下約1mPa-S-約 15mPa-S，或在 22°C下約 1mPa-S-約 10mPa-S，或在 22°C下約 1mPa-S-約 8mPa-S 或在22°C下約1mPa-S-約6mPa-S的粘度。
[0019] 如本文使用的，術語"滲透壓摩爾濃度"指定義為每kg溶液的溶質mmole數(shù)的溶 質濃度量度。所需滲透壓摩爾濃度水平可以通過添加一種或多種穩(wěn)定劑來實現(xiàn)，所述穩(wěn)定 劑例如糖或糖醇，包括但不限于甘露糖醇、右旋糖、葡萄糖、海藻糖和/或蔗糖。適合于提 供滲透壓摩爾濃度的另外穩(wěn)定劑在參考文獻例如PharmaceuticalExcipients(第四版， RoyalPharmaceuticalSocietyofGreatBritain，Science&PracticePublishers) 或Remingtons: TheScienceandPracticeofPharmacy(第十九版，MackPublishing Company)的手冊中描述。
[0020] 如本文使用的，術語"約"指提供的單位值的+/- 10%。如本文使用的，術語"基本 上"指顯示出總計或近似程度的目的特征或特性的定性狀況。生物學領域的普通技術人員 應當理解生物學和化學現(xiàn)象很少(如果有的話)實現(xiàn)或避免絕對結果。術語基本上因此在本 文中用于捕獲許多生物學和化學現(xiàn)象中固有的完全性的潛在缺乏。如本文使用的，術語"等 滲的"和"等張的"可與術語"基本上等滲的"和"基本上等張的"互換使用，并且指特征在于 具有的滲透壓與另一種溶液的滲透壓相同或至少基本上相等