一種枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基及其使用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種菌種富集培養(yǎng)基及其使用,特別涉及一種枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基及 其使用。
【背景技術(shù)】
[0002] 木薯渣是木薯在經(jīng)過淀粉廠榨取淀粉或是酒精廠制取酒精之后所留下的廢棄物, 但是依然含有豐富的纖維素、半纖維素、淀粉和無機鹽等物質(zhì),是一種非常有用的生物質(zhì)資 源。我國木薯主要種植區(qū)在廣西、廣東、海南、云南、福建等地,全國年產(chǎn)木薯1000多萬噸。 木薯渣的產(chǎn)生量與淀粉之比為1:2 (以干物質(zhì)計),木薯渣產(chǎn)量非常龐大。我國木薯酒精加 工業(yè)發(fā)展始于20世紀90年代前后,主要以鮮木薯和木薯干片為原料生產(chǎn)食用酒精及工業(yè) 酒精。目前我國酒精產(chǎn)量的1/3是以木薯為原料。隨著中國對淀粉需求的增加及木薯制取 燃料乙醇、木薯深加工產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,對于木薯的需求也隨之增加,目前國內(nèi)木薯產(chǎn)量已無法 滿足需求,每年需從國外進口大量的木薯。在木薯使用量增加的同時,產(chǎn)生的廢渣一一木薯 渣也不斷增加。
[0003] 就目前而言,木薯渣的處理有以下幾種:(1)厭氧發(fā)酵生產(chǎn)沼氣;(2)發(fā)酵生產(chǎn)酒 精;(3)生產(chǎn)飼料;(4)生產(chǎn)有機肥。目前雖然有幾種木薯渣的處理方法,但由于種種原因未 普及應(yīng)用,大量的木薯渣還處于廢棄狀態(tài)??莶菅挎邨U菌的常用碳源為葡萄糖、蔗糖等,成 本較高。
[0004] 公開于該【背景技術(shù)】部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解,而不應(yīng) 當(dāng)被視為承認或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種利用木薯渣制作枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基及其使用,旨 在提高枯草芽孢桿菌產(chǎn)量的同時降低生產(chǎn)枯草芽孢桿菌的成本。
[0006] 為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明技術(shù)方案如下:
[0007] -種枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基,按質(zhì)量比包含以下組分原料:木薯渣18?22g,酵 母膏0. 8?I. 2g,磷酸二氫鉀0. 8?I. 2g,7水硫酸鎂0. 15?0. 22g,蒸餾水或去離子水 IOOOml0
[0008] 其中,按質(zhì)量比計,所述的木薯渣為含水量為70%的木薯渣。
[0009] 其中,所述含水量為70 %的木薯渣為將木薯加工后的新鮮木薯渣在自然光照下干 燥至含水量為70%。
[0010] 一種枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基的使用,包含以下操作步驟:
[0011] (1)稱取所需的各組分原料,將木薯渣粉碎到木薯渣長度為0.5?2mm,然后在 121°C 滅菌 20min ;
[0012] (2)向步驟(1)中滅菌后所得木薯渣加入酵母膏,磷酸二氫鉀,7水硫酸鎂,蒸餾水 或去離子水形成培養(yǎng)基,接種菌種,保持溫度為30?35°C培養(yǎng)16?24h,即可。
[0013] 其中,步驟(2)中培養(yǎng)菌種期間每隔5?7h攪動一次。
[0014] 其中,步驟(2)中接種菌種的量隨菌種來源不同而有所差異。
[0015] 與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有如下有益效果:
[0016] 本發(fā)明利用木薯渣做成的培養(yǎng)基能大量提供枯草芽孢桿菌所需的碳源,用本發(fā)明 培養(yǎng)基培養(yǎng)枯草芽孢桿菌的產(chǎn)量明顯比如蛋白胨、葡萄糖、蔗糖等常規(guī)碳源要高;進一步 的,本發(fā)明增加木薯渣多元化回收利用的方式,增加了木暑加工的附加值,減少了該工業(yè)對 環(huán)境的污染;更進一步的,木薯渣比葡萄糖、蔗糖廉價,大大的降低了生產(chǎn)成本,因此本發(fā)明 為實現(xiàn)枯草芽孢桿菌的高產(chǎn)化、規(guī)?;a(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。
【具體實施方式】
[0017] 下面對本發(fā)明的【具體實施方式】進行詳細描述,但應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的保護范圍并不 受【具體實施方式】的限制。
[0018] 實施例1
[0019] 將木薯加工后的新鮮木薯渣放在太陽光下干燥至木薯渣含水量為70%即可,然后 粉碎木薯渣至長度為0. 5?2mm,備用;稱取各組分原料:上述處理好的木薯渣18g,酵母膏 〇. 8g,磷酸二氫鉀0. 8g,7水硫酸鎂0. 15g,蒸餾水1000ml,然后向木薯渣中加入酵母膏,磷 酸二氫鉀,7水硫酸鎂,蒸餾水形成培養(yǎng)基,備用。
[0020] 按下列步驟對4°C條件下保存1個月的枯草芽孢桿菌進行規(guī)?;囵B(yǎng)測試,取Iml 該枯草芽孢桿菌懸浮液接種于250ml按上述配制好的培養(yǎng)基中,于30°C下恒溫培養(yǎng),隔7h 搖動一次,培養(yǎng)16h。吸取Iml液體生產(chǎn)培養(yǎng)基菌液,梯度稀釋為107、108、10 9,吸取適量上 述各梯度稀釋液于血球計數(shù)板上在生物顯微鏡下計數(shù),設(shè)3個平行組。具體結(jié)果見表1 :
[0021] 表 1
[0022]
【主權(quán)項】
1. 一種枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基,其特征在于,按質(zhì)量比包含以下組分原料:木薯渣 18?22g,酵母膏0. 8?I. 2g,磷酸二氫鉀0. 8?I. 2g,7水硫酸鎂0. 15?0. 22g,蒸餾水 或去離子水1000ml。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基,其特征在于:按質(zhì)量比計,所述的 木薯渣為含水量為70 %的木薯渣。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基,其特征在于:所述含水量為70% 的木薯渣為將木薯加工后的新鮮木薯渣在自然光照下干燥至含水量為70 %。
4. 一種如權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基的使用,其特征在于,包含以下 操作步驟: (1) 稱取所需的各組分原料,將木薯渣粉碎到木薯渣長度為〇. 5?2mm,然后在121 °C滅 菌 20min ; (2) 向步驟(1)中滅菌后所得木薯渣加入酵母膏,磷酸二氫鉀,7水硫酸鎂,蒸餾水或去 離子水,接種菌種,保持溫度為30?35°C培養(yǎng)16?24h,即可。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基的使用,其特征在于:步驟(2)中培 養(yǎng)菌種期間每隔5?7h攪動一次。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基的使用,其特征在于:步驟(2)中接 種菌種的量隨菌種來源不同而有所差異。
【專利摘要】一種枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基含有木薯渣,酵母膏,磷酸二氫鉀,7水硫酸鎂,蒸餾水或去離子水。一種枯草芽孢桿菌富集培養(yǎng)基的使用,包含以下操作步驟:(1)將木薯渣粉碎到木薯渣長度為0.5~2mm,然后在121℃滅菌20min;(2)加入酵母膏,磷酸二氫鉀,7水硫酸鎂,蒸餾水或去離子水,接種菌種,保持溫度為30~35℃培養(yǎng)16~24h。用本發(fā)明培養(yǎng)基培養(yǎng)枯草芽孢桿菌的產(chǎn)量明顯比如蛋白胨、葡萄糖、蔗糖等常規(guī)碳源要高;本發(fā)明增加了木暑加工的附加值,減少了該工業(yè)對環(huán)境的污染;更進一步的,木薯渣比葡萄糖、蔗糖廉價,大大降低了生產(chǎn)成本,因此本發(fā)明為實現(xiàn)枯草芽孢桿菌的高產(chǎn)化、規(guī)?;a(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。
【IPC分類】C12R1-125, C12N1-20
【公開號】CN104560783
【申請?zhí)枴緾N201410735138
【發(fā)明人】王英輝, 陳倩伶, 張瑞杰, 尚謙, 陳建華, 許道全, 余克服
【申請人】廣西大學(xué)
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2014年12月5日