本發(fā)明涉及微生物，具體的涉及一種產(chǎn)保濕抗炎多糖的芽孢桿菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、多糖是一種由多個(gè)單糖通過糖苷鍵連接而成的天然聚合物，廣泛存在于植物、動(dòng)物和微生物中（zong?a,?cao?h,?wang?f.?anticancer?polysaccharides?from?naturalresources:?a?review?of?recent?research[j].?carbohydrate?polymers,?2012,?90(4):?1395-1410）。在微生物多糖中，大多數(shù)源自細(xì)菌的多糖被釋放到細(xì)胞外培養(yǎng)基中，因此被分類為eps類型（sutherland?i?w.?novel?and?established?applications?ofmicrobial?polysaccharides[j].?trends?in?biotechnology,?1998,?16(1):?41-46）。在體內(nèi)和體外研究中,細(xì)菌胞外多糖均表現(xiàn)出廣泛的生物活性，例如抗菌、抗病毒、抗氧化、抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、降血糖等。與植物多糖和動(dòng)物多糖相比,細(xì)菌eps具有生產(chǎn)成本低，不受地理環(huán)境、氣候和自然災(zāi)害等因素的影響,品質(zhì)與產(chǎn)量穩(wěn)定，易提取，可通過深層發(fā)酵實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢(shì)（郭敏.?微生物發(fā)酵生產(chǎn)多糖的研究進(jìn)展[j].?微生物學(xué)通報(bào),2008,?35(7):?1084-1090），在生物材料，制藥，食品等領(lǐng)域具有優(yōu)良的應(yīng)用前景。

2、目前芽孢桿菌胞外多糖的應(yīng)用多集中在在生物醫(yī)藥領(lǐng)域及生態(tài)農(nóng)業(yè)方面，在日化領(lǐng)域應(yīng)用較少，汪等的研究證明多粘芽孢桿菌胞外多糖可以修護(hù)被紫外線損傷的細(xì)胞，為開發(fā)新型紫外損傷修復(fù)劑提供新思路，未見報(bào)道芽孢桿菌胞外多糖應(yīng)用于皮膚保濕和抗炎方面研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種產(chǎn)保濕抗炎多糖的芽孢桿菌 bacillus? sp.及其應(yīng)用。

2、本發(fā)明具體如下：

3、本發(fā)明第一方面提供了一種產(chǎn)保濕抗炎多糖的芽孢桿菌，所述芽孢桿菌為芽孢桿菌 bacillus?sp.zr001，從山東省濟(jì)南市半畝花田格拉斯玫瑰基地(36°12'00.00"n,?117°42'00.00"e)土壤中分離獲得，其經(jīng)過16s?rdna菌種鑒定確定為芽孢桿菌 bacillus?sp.，其16s?rdna的核苷酸序列如seq?id?no.1所示，該菌保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為cgmcc?no：32048，保藏日期為2024年9月23日。

4、本發(fā)明第二方面提供了一種胞外多糖，所述胞外多糖由所述芽孢桿菌 bacillus? sp.產(chǎn)生。

5、本發(fā)明第三方面提供了一種組合物，所述組合物包括所述芽孢桿菌 bacillus?sp.或所述胞外多糖。

6、本發(fā)明第四方面提供了所述的芽孢桿菌 bacillus?sp.或所述胞外多糖或所述組合物在保濕和/或抗炎方面的應(yīng)用。

7、本發(fā)明第五方面提供了所述的芽孢桿菌 bacillus?sp.或所述胞外多糖或所述組合物在制備藥品、化妝品、護(hù)膚品方面的應(yīng)用。優(yōu)選地，所述藥品為抗炎類藥品。

8、本發(fā)明第六方面提供了一種培養(yǎng)所述芽孢桿菌 bacillus?sp.的方法，其培養(yǎng)條件為：

9、搖瓶種子培養(yǎng)：?jiǎn)尉洌ɑ蚋视凸埽┙臃N到裝液量為50?ml種子培養(yǎng)基的250?ml三角搖瓶中，150-250轉(zhuǎn)/分，25-35℃培養(yǎng)18-24h；

10、種子罐培養(yǎng)條件：溫度25-35℃，通氣量800-1200?l/h，轉(zhuǎn)速300?-350rpm，培養(yǎng)周期20-28小時(shí)；

11、發(fā)酵罐培養(yǎng)條件：溫度25-35℃，通氣量800-1200?l/h，轉(zhuǎn)速，起步100?rpm。當(dāng)溶氧回升時(shí)，開始流加蔗糖和胰蛋白胨，通過調(diào)節(jié)補(bǔ)料速率和轉(zhuǎn)速來控制溶氧在30%-60%，培養(yǎng)周期40-56小時(shí)。

12、進(jìn)一步地，種子培養(yǎng)基包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，其中固體培養(yǎng)基的成份包括：胰蛋白胨8-13g/l，酵母提取物4-7?g/l，氯化鈉8-13?g/l，瓊脂15-25?g/l；液體培養(yǎng)基的成份包括胰蛋白胨8-13g/l，酵母提取物4-7?g/l，氯化鈉8-13?g/l。

13、進(jìn)一步地，發(fā)酵培養(yǎng)基的成份包括：蔗糖40-60g/l，胰蛋白胨4-6g/l，酵母浸粉0.5-1.5?g/l，磷酸氫二鈉2-5g/l。

14、本發(fā)明第七方面提供了一種生產(chǎn)胞外多糖的方法，所述方法包括以下步驟：

15、1）芽孢桿菌發(fā)酵階段：將培養(yǎng)好的芽孢桿菌 bacillus?sp.zr001的種子液按照1-5%接種量接入發(fā)酵罐，溫度25-35℃。當(dāng)溶氧回升時(shí)，通過調(diào)節(jié)補(bǔ)料速率和轉(zhuǎn)速來控制溶氧在30%-60%，培養(yǎng)周期36-60小時(shí)。

16、2）純化階段：將步驟1）獲得的培養(yǎng)液下罐，將發(fā)酵液使用管式離心機(jī)13000-15000rpm/min離心除去菌體；離心后液體添加硅藻土，然后進(jìn)行板框過濾，再過0.45um濾膜，獲得多糖溶液。

17、在本發(fā)明的具體實(shí)施例中，所述產(chǎn)胞外多糖的方法包括以下步驟：

18、1）芽孢桿菌發(fā)酵階段：將培養(yǎng)好的芽孢桿菌 bacillus?sp.zr001種子液按照2%接種量接入發(fā)酵罐，溫度30℃。當(dāng)溶氧回升時(shí)，通過調(diào)節(jié)補(bǔ)料速率和轉(zhuǎn)速來控制溶氧在30%-60%，培養(yǎng)周期48小時(shí)；

19、2）純化階段：將步驟1）獲得的培養(yǎng)液下罐，發(fā)酵培養(yǎng)到48h下罐，將發(fā)酵液使用管式離心機(jī)14000rpm/min離心除去菌體；離心后液體添加硅藻土，然后進(jìn)行板框過濾，再過0.45um濾膜，獲得多糖溶液。

20、本發(fā)明的有益效果包括但不限于：

21、1.本發(fā)明所述的芽孢桿菌 bacillus?sp.zr001能大幅度的提高胞外多糖的產(chǎn)量，最高可達(dá)15.6g/l，為胞外多糖的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)提供了新的選擇，具有遠(yuǎn)大的應(yīng)用前景；

22、2.本發(fā)明所述的芽孢桿菌 bacillus?sp.zr001所生產(chǎn)的胞外多糖具有皮膚保濕和/或抗炎的作用，可廣泛的應(yīng)用于制備藥品、化妝品、護(hù)膚品方面；

23、3.本發(fā)明還優(yōu)化了本發(fā)明通過優(yōu)化芽孢桿菌 bacillus?sp.zr001發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件提高發(fā)酵液中胞外多糖含量，通過發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的優(yōu)化，芽孢桿菌 bacillus?sp.zr001發(fā)酵液中胞外多糖的產(chǎn)量進(jìn)一步提高，產(chǎn)量最高為25.8g/l。