本發(fā)明涉及植物基因工程,尤其是涉及水稻氮高效利用基因osnlp6及其編碼蛋白和應用。
背景技術(shù):
1、水稻是世界上最重要的糧食作物之一,全球約半數(shù)以上人口以稻米為主食。氮素是水稻生長發(fā)育和產(chǎn)量形成的重要限制因子,在水稻生命活動、物質(zhì)生產(chǎn)、產(chǎn)量形成及稻米品質(zhì)中發(fā)揮巨大作用。水稻吸收的氮素主要為銨態(tài)氮,但由于根際硝化作用,約40%的氮素以硝態(tài)氮形式被吸收。雖然大量施氮可以在一定程度上提高水稻產(chǎn)量,但我國79%的水稻產(chǎn)量增勢已趨于停滯,氮素利用率隨著施氮水平的增加趨于平緩,過量使用氮肥不僅增加成本、降低稻米品質(zhì),還造成了一系列生態(tài)環(huán)境問題,限制了氮素營養(yǎng)潛力的充分發(fā)揮。因此,提高氮素利用效率(nue)有利于水稻高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn),對保障國家糧食安全、保護生態(tài)環(huán)境、提高農(nóng)民收益及實現(xiàn)農(nóng)業(yè)穩(wěn)定可持續(xù)發(fā)展等具有重要意義,而挖掘、利用水稻種質(zhì)資源中nue相關(guān)的優(yōu)異遺傳資源及基因型是解決上述難題最經(jīng)濟有效的途徑。
2、氮素的高效利用主要由氮素的吸收效率和利用效率決定。氮素的吸收效率指作物吸收土壤中n素的力能;氮素的利用效率是指作物將n素轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物的能力。如何提高氮素的利用效率,減少氮素投入成為當前急切需要解決的問題。不同作物中氮素利用效率是不一致的,氮素的利用效率不僅僅是某個作物的特性,而是整個作物系統(tǒng)的特性,土壤中的有效氮含量、作物的田間管理、不同的輪作方式以及環(huán)境條件等都會影響作物對氮素的吸收與利用。因此,通過選育氮髙效利用的作物品種是提高氮素利用率最經(jīng)濟有效的手段。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的是提供水稻氮高效利用基因osnlp6及其編碼蛋白和應用,osnlp6基因可以促進植物對氮的吸收和利用,尤其是能夠提升水稻對氮素的吸收利用效率,可以用于培育氮素利用效率高的水稻新品種,為水稻的育種奠定基礎(chǔ)。
2、為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供了水稻氮高效利用基因osnlp6及其編碼蛋白和應用,氮高效利用基因osnlp6,其核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
3、本發(fā)明還提供了多肽,其編碼基因如seq?id?no.1所示,其氨基酸序列如seq?idno.2所示。
4、本發(fā)明還提供了包含氮高效利用基因osnlp6的氮高效利用基因的重組表達載體。
5、本發(fā)明還提供了包含氮高效利用基因osnlp6或重組表達載體的宿主細胞,其中宿主細胞為微生物細胞。
6、進一步地,微生物細胞為大腸桿菌細胞或農(nóng)桿菌細胞。
7、本發(fā)明還提供了水稻氮高效利用基因osnlp6或重組載體在培育提高氮利用效率植物中的應用。
8、進一步地,應用環(huán)境為低氮和/或高氮生長條件。
9、本發(fā)明還提供了培育提高氮利用效率植物的方法,包括以下步驟:將基因osnlp6或其活性片段或重組載體導入植物細胞,得到轉(zhuǎn)基因植株;
10、或?qū)騩snlp6或其活性片段的植株與另一植株雜交獲得含有基因osnlp6或活性片段的雜交后代植株。
11、與未導入基因osnlp6或其活性片段或重組表達載體的對照植株或未雜交的植株相比,轉(zhuǎn)基因植株和雜交后代植株的氮利用效率提高。
12、進一步地,方法還包括,在導入植物細胞之前將基因osnlp6針對植物的密碼子應用進行密碼子優(yōu)化。
13、進一步地,植物選自水稻、玉米、小麥、棉花、油菜、大豆、或擬南芥,優(yōu)選水稻。
14、進一步地,基因osnlp6或其活性片段在轉(zhuǎn)基因植株中過表達。
15、進一步地,轉(zhuǎn)基因植株或雜交后代植株在低氮和/或高氮生長條件下具有生長優(yōu)勢。
16、進一步地,轉(zhuǎn)基因植株或雜交后代植株的產(chǎn)量提高。
17、本發(fā)明所述的水稻氮高效利用基因osnlp6及其編碼蛋白和應用的優(yōu)點和積極效果是:
18、osnlp6基因可以促進植物對氮的吸收和利用,尤其是能夠提升水稻對氮素的吸收利用效率,可以用于培育氮素利用效率高的水稻新品種,為水稻的育種奠定基礎(chǔ)。
19、下面通過附圖和實施例,對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步的詳細描述。
1.水稻氮高效利用基因osnlp6,其特征在于:其核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
2.多肽,其特征在于:其編碼基因如seq?id?no.1所示,其氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
3.包含權(quán)利要求1所述的水稻氮高效利用基因osnlp6的重組載體。
4.包含權(quán)利要求1所述的水稻氮高效利用基因osnlp6或權(quán)利要求3所述的重組載體的宿主細胞,其特征在于:宿主細胞為微生物細胞。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的宿主細胞,其特征在于:微生物細胞為大腸桿菌細胞或農(nóng)桿菌細胞。
6.如權(quán)利要求1所述的水稻氮高效利用基因osnlp6或權(quán)利要求3所述的重組載體在培育提高氮利用效率植物中的應用。
7.培育提高氮利用效率植物的方法,其特征在于,包括以下步驟:
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于:還包括,在導入植物細胞前將基因osnlp6針對植物的密碼子應用進行密碼子優(yōu)化。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于:植物或植株包括水稻、擬南芥、玉米、小麥、棉花、油菜或大豆。