本發(fā)明屬于細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備,尤其涉及nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備及方法。
背景技術(shù):
1、在免疫細(xì)胞治療領(lǐng)域,nk(自然殺傷)細(xì)胞因其強(qiáng)大的腫瘤殺傷能力和免疫調(diào)節(jié)功能而備受關(guān)注。nk細(xì)胞能夠直接識(shí)別和殺死多種腫瘤細(xì)胞,同時(shí)不依賴于抗體或主要組織相容性復(fù)合體(mhc)的限制,這使其在癌癥免疫治療中具有獨(dú)特優(yōu)勢。然而,高效、穩(wěn)定地制備和擴(kuò)增nk細(xì)胞以滿足臨床需求,一直是該領(lǐng)域面臨的重要挑戰(zhàn)。
2、傳統(tǒng)nk細(xì)胞培養(yǎng)方法往往存在操作復(fù)雜、成本高、擴(kuò)增效率低以及易污染等問題。例如,傳統(tǒng)的靜態(tài)培養(yǎng)方式容易導(dǎo)致培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)分布不均,影響細(xì)胞的生長和增殖;同時(shí),廢代謝產(chǎn)物的積累也可能對細(xì)胞造成毒害,進(jìn)一步降低培養(yǎng)效率。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備及方法,用于解決現(xiàn)有技術(shù)中靜態(tài)培養(yǎng)方式容易導(dǎo)致培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)分布不均,影響細(xì)胞的生長和增殖;同時(shí),廢代謝產(chǎn)物的積累也可能對細(xì)胞造成毒害,進(jìn)一步降低培養(yǎng)效率的技術(shù)問題。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案:
3、nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,包括:儲(chǔ)液筒,用于盛裝營養(yǎng)液;廢液筒,安裝在所述儲(chǔ)液筒底面;安裝架,安裝在所述儲(chǔ)液筒頂面;培養(yǎng)盒,安裝在所述安裝架上,用于培養(yǎng)nk細(xì)胞;第一輸送機(jī)構(gòu),安裝在所述安裝架上,用于將所述儲(chǔ)液筒內(nèi)的營養(yǎng)液輸送到培養(yǎng)盒內(nèi);第二輸送機(jī)構(gòu),安裝在所述安裝架上,用于將所述培養(yǎng)盒內(nèi)的營養(yǎng)液輸送到廢液筒內(nèi);驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu),安裝在所述安裝架上,用于驅(qū)動(dòng)所述第一輸送機(jī)構(gòu)和第二輸送機(jī)構(gòu)運(yùn)行;防滑固定機(jī)構(gòu)。
4、優(yōu)選的,所述第一輸送機(jī)構(gòu)包括:第一活塞筒,安裝在所述安裝架上,其內(nèi)部滑動(dòng)連接有第一活塞片,所述第一活塞片上安裝有第一活塞桿,所述第一活塞桿與第一活塞筒滑動(dòng)連接;第一推板,與所述第一活塞桿固定連接;第一彈簧,其一端與所述第一活塞筒連接,其另一端與所述第一推板固定連接;第一抽液管,其一端與所述第一活塞筒固定連接,其另一端延伸到所述儲(chǔ)液筒內(nèi);第一輸液管,其一端與所述第一活塞筒插接,其另一端與所述培養(yǎng)盒插接。
5、優(yōu)選的,所述第二輸送機(jī)構(gòu)包括:第二活塞筒,安裝在所述安裝架上,其內(nèi)部滑動(dòng)連接有第二活塞片,所述第二活塞片上安裝有第二活塞桿,所述第二活塞桿與第二活塞筒滑動(dòng)連接;第二推板,與所述第二活塞桿固定連接;第二彈簧,其一端與所述第二活塞筒連接,其另一端與所述第二推板固定連接;第二抽液管,其一端與所述第二活塞筒插接,其另一端與所述培養(yǎng)盒插接;第二輸液管,其一端與所述第二活塞筒固定連接,其另一端延伸到所述廢液筒。
6、優(yōu)選的,所述驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)包括:電機(jī),安裝在所述培養(yǎng)盒的底面上;凸輪,安裝在所述電機(jī)的動(dòng)力輸出軸上,與所述第一推板和第二推板接觸。
7、優(yōu)選的,nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備還包括攪拌機(jī)構(gòu),所述攪拌機(jī)構(gòu)包括:軸桿,貫穿所述儲(chǔ)液筒頂面并與儲(chǔ)液筒轉(zhuǎn)動(dòng)連接;多個(gè)攪拌桿,均位于所述儲(chǔ)液筒內(nèi),均與所述軸桿固定連接;齒輪,安裝在所述軸桿的上端;齒條,與所述齒輪嚙合連接,與所述儲(chǔ)液筒的頂面滑動(dòng)連接,與所述第一推板固定連接。
8、優(yōu)選的,所述防滑固定機(jī)構(gòu)包括:固定筒,與所述儲(chǔ)液筒和廢液筒插接配合;托環(huán),安裝在所述固定筒的內(nèi)壁上,用于承托所述廢液筒;通槽,開設(shè)在所述固定筒上;固定環(huán),與所述固定筒的底面固定連接;多個(gè)吸盤,等距安裝在所述固定環(huán)的底面上。
9、優(yōu)選的,所述防滑固定機(jī)構(gòu)還包括:紫外線燈,安裝在所述固定筒的內(nèi)底面上。
10、優(yōu)選的,所述防滑固定機(jī)構(gòu)還包括:兩個(gè)第一插筒,均安裝在所述固定筒的底面上,與所述第一輸液管和第二抽液管插接配合;轉(zhuǎn)動(dòng)板,與所述固定筒的底面鉸接;第二插筒,貫穿安裝在所述轉(zhuǎn)動(dòng)板上,與所述第一輸液管和第二抽液管插接配合;限位組件。
11、優(yōu)選的,所述限位組件包括:多個(gè)轉(zhuǎn)軸,均轉(zhuǎn)動(dòng)安裝在固定筒上;多個(gè)擋板,分別安裝在多個(gè)所述轉(zhuǎn)軸上。
12、nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備的使用方法,包括以下步驟:步驟一、檢查nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備各部件是否齊全且完好無損;步驟二、將防滑固定機(jī)構(gòu)倒扣在儲(chǔ)液筒和廢液筒上,啟動(dòng)紫外線燈對培養(yǎng)盒、第一輸送機(jī)構(gòu)和第二輸送機(jī)構(gòu)進(jìn)行殺菌處理;步驟三、將固定筒放置在桌面上,使吸盤吸附在桌面上,再將儲(chǔ)液筒和廢液筒分別放置在防滑固定機(jī)構(gòu)內(nèi);步驟四、打開培養(yǎng)盒,將nk細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)盒內(nèi),啟動(dòng)電機(jī),帶動(dòng)凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),使第一輸送機(jī)構(gòu)將儲(chǔ)液筒內(nèi)的營養(yǎng)液輸送到培養(yǎng)盒內(nèi);使第二輸送機(jī)構(gòu)將培養(yǎng)盒內(nèi)的廢營養(yǎng)液輸送到廢液筒內(nèi),實(shí)現(xiàn)nk細(xì)胞的自動(dòng)灌流培養(yǎng);步驟五、在培養(yǎng)過程中,定期觀察培養(yǎng)盒內(nèi)nk細(xì)胞的生長情況,并根據(jù)需要調(diào)整培養(yǎng)液的成分或濃度;步驟六、當(dāng)nk細(xì)胞達(dá)到預(yù)期的培養(yǎng)效果時(shí),按下驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)的停止按鈕,結(jié)束自動(dòng)灌流培養(yǎng);步驟七、培養(yǎng)結(jié)束后,及時(shí)清洗儲(chǔ)液筒、廢液筒、培養(yǎng)盒等部件,并進(jìn)行消毒殺菌處理,以便下次使用。
13、綜上所述,由于采用了上述技術(shù)方案,本發(fā)明的有益效果是:
14、1、本發(fā)明中的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備通過設(shè)置第一輸送機(jī)構(gòu)、第二輸送機(jī)構(gòu)和驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu),能夠自動(dòng)將儲(chǔ)液筒內(nèi)的營養(yǎng)液輸送到培養(yǎng)盒內(nèi),以及將培養(yǎng)盒內(nèi)的廢營養(yǎng)液輸送到廢液筒內(nèi),實(shí)現(xiàn)了nk細(xì)胞的自動(dòng)灌流培養(yǎng),通過營養(yǎng)液的流動(dòng),可以使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢產(chǎn)物與細(xì)胞之間的質(zhì)量傳遞,從而降低有害代謝廢物濃度積累,利于培養(yǎng)nk細(xì)胞。
15、2、本發(fā)明中的攪拌機(jī)構(gòu)通過設(shè)置軸桿、攪拌桿、齒輪和齒條,攪拌機(jī)構(gòu)能夠?qū)?chǔ)液筒內(nèi)的營養(yǎng)液進(jìn)行攪拌,避免培養(yǎng)液在長時(shí)間靜置后,出現(xiàn)成分分布不均的情況,確保細(xì)胞在培養(yǎng)過程中獲得均衡的營養(yǎng),且攪拌機(jī)構(gòu)能夠改變攪拌方向,相對比不改變攪拌方向的方式,可以更有效的促進(jìn)培養(yǎng)液中各成分的均勻分布,減少成分分布不均的情況,進(jìn)一步提高混合效率。
16、3、本發(fā)明中的驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)通過設(shè)置電機(jī)和凸輪,驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)不僅負(fù)責(zé)為第一輸送機(jī)構(gòu)和第二輸送機(jī)構(gòu)提供動(dòng)力,使其能夠分別將營養(yǎng)液輸送到培養(yǎng)盒內(nèi)和將廢營養(yǎng)液輸送到廢液筒內(nèi),還承擔(dān)了帶動(dòng)攪拌機(jī)構(gòu)工作的任務(wù),只需啟動(dòng)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu),即可同時(shí)實(shí)現(xiàn)兩個(gè)功能,避免了使用多個(gè)獨(dú)立驅(qū)動(dòng)源的需要,從而節(jié)省了能源和設(shè)備的制造成本。
17、4、本發(fā)明中的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備通過設(shè)置防滑固定機(jī)構(gòu),防滑固定機(jī)構(gòu)能夠防止廢液筒、儲(chǔ)液筒在桌面上滑動(dòng),確保設(shè)備的穩(wěn)定性;防滑固定機(jī)構(gòu)能夠倒扣在儲(chǔ)液筒和廢液筒上,使得培養(yǎng)盒、第一輸送機(jī)構(gòu)和第二輸送機(jī)構(gòu)處于防滑固定機(jī)構(gòu)內(nèi),再通過啟動(dòng)紫外線燈對培養(yǎng)盒、第一輸送機(jī)構(gòu)和第二輸送機(jī)構(gòu)進(jìn)行殺菌,降低細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染風(fēng)險(xiǎn);當(dāng)需要移動(dòng)本裝置時(shí),通過將第一輸液管、第二輸液管與第一插筒和第二插筒插接,能夠組成臨時(shí)提手,從而便于移動(dòng)本裝置,也提高了設(shè)備的便攜性和靈活性。
1.nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,包括:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,所述第一輸送機(jī)構(gòu)(110)包括:
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,所述第二輸送機(jī)構(gòu)(120)包括:
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,所述驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)(130)包括:
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,還包括攪拌機(jī)構(gòu)(140),所述攪拌機(jī)構(gòu)(140)包括:
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,所述防滑固定機(jī)構(gòu)(200)包括:
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,所述防滑固定機(jī)構(gòu)(200)還包括:
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,所述防滑固定機(jī)構(gòu)(200)還包括:
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備,其特征在于,所述限位組件(210)包括:
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的nk細(xì)胞培養(yǎng)用自動(dòng)灌流培養(yǎng)設(shè)備的使用方法,其特征在于,包括以下步驟: