本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,特別是涉及一種b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡、b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒及其使用方法。
背景技術(shù):
b族鏈球菌(groupbstreptococcus,gbs),又叫無乳鏈球菌(s.agalactiae),在1938年首次被發(fā)現(xiàn),1938年fry首次報告3例感染b族鏈球菌引起產(chǎn)后心內(nèi)膜炎的死亡,證實b族鏈球菌為人類的致病菌。經(jīng)過科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,發(fā)現(xiàn)b族鏈球菌可引起新生兒敗血癥、肺炎、腦膜炎,甚至死亡等。在感染后存活的新生兒,還有可能有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥,包括腦積水、智力障礙、小頭畸形、耳聾等。同時,b族鏈球菌還可引起孕婦感染、引起早產(chǎn)、胎兒發(fā)育不良、胎膜早破及晚期流產(chǎn)等。對圍產(chǎn)期孕婦進(jìn)行g(shù)bs篩查,成為預(yù)防新生兒感染、降低新生兒死亡率的必須手段。
美國疾病控制中心(cdc)2010年發(fā)布的gbs預(yù)防指南中建議,對于懷孕35周~37周的孕婦進(jìn)行陰道和直腸的gbs篩檢,我國也已經(jīng)把孕婦gbs篩查列為產(chǎn)前必須檢測項目之一。
對于孕婦感染gbs的治療方案,國內(nèi)外都主要采用抗生素治療,但是近年來隨著抗生素的濫用,gbs的耐藥性逐年上升。1998年至2001年間,美國及加拿大地區(qū),gbs對紅霉素的耐藥性由7%上升至25%,2003年達(dá)到37%;在我國,廣州地區(qū)1999年分離的gbs菌株對紅霉素和林可霉素耐藥率即分別達(dá)到45%和26%。為了精準(zhǔn)用藥用,同時減少抗生素的使用量和避免孕婦病情的延誤,我們更有必要對感染gbs的孕婦進(jìn)行藥敏試驗。
目前現(xiàn)有的b族鏈球菌的鑒定方法包括:(1)微生物平板培養(yǎng)法,該種方法操作復(fù)雜,需要專業(yè)人員,費時費力;(2)抗原金標(biāo)檢測法,該方法的靈敏度和特異性差,實驗結(jié)果與臨床相符度低,難以滿足醫(yī)院需求;(3)分子探針檢測法,該方法對試驗條件要求很高,同時試驗操作復(fù)雜,需要昂貴設(shè)備和專業(yè)人員才能完成。gbs藥敏試驗方法主要是紙片擴散法,該方法較簡易,但消耗時間過長,不能進(jìn)行定量檢測。綜上所述,目前gbs的鑒定和藥敏試驗方法很難滿足醫(yī)院要求的快捷簡便、準(zhǔn)確可靠的要求。此外,現(xiàn)有的以顯色法/濁度法法來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定和藥敏檢測,需要首先做b族鏈球菌鑒定實驗,在b族鏈球菌鑒定為陽性之后,再進(jìn)行b族鏈球菌的藥敏實驗檢測,整個檢測過程費時費力,便捷性較差。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
基于此,有必要提供一種能夠同時進(jìn)行b族鏈球菌鑒定和藥敏的檢測實驗、操作便捷性較好的b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡、b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒及其使用方法。
一種b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,其特征在于,包括一檢測卡本體,所述檢測卡本體上設(shè)置有鑒別微孔區(qū)和藥敏試驗區(qū),所述鑒別微孔區(qū)開設(shè)有若干個鑒別微孔,所述藥敏試驗區(qū)開設(shè)有若干個藥敏微孔。
在其中一個實施例中,所述檢測卡本體上還開設(shè)有加樣口及廢液口,各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔均分別與所述加樣口及所述廢液口連通。
在其中一個實施例中,所述鑒別微孔區(qū)開設(shè)有至少5個鑒別微孔,所述藥敏試驗區(qū)開設(shè)有至少23個藥敏微孔。
在其中一個實施例中,所述鑒別微孔區(qū)開設(shè)有6個鑒別微孔,所述藥敏試驗區(qū)開設(shè)有26個藥敏微孔。
在其中一個實施例中,其中5個所述鑒別微孔內(nèi)分別一一對應(yīng)吸附有葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蜜二糖以及棉子糖的檢測底物。
在其中一個實施例中,23個藥敏微孔中的其中22個藥敏微孔兩兩分成11個藥敏微孔組,11個藥敏微孔組中一一對應(yīng)添加有青霉素、氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬古霉素、頭孢曲松、頭孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素以及利奈唑胺,其中,每一組的藥敏微孔組的兩個藥敏微孔中分別盛裝最低抑菌濃度值的最高濃度和最低濃度的同一種鑒別藥物,23個藥敏微孔中除去22個藥敏微孔的剩余的1個藥敏微孔中添加有誘導(dǎo)性克林霉素耐藥試劑。
一種b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒,包括如上任一實施例中所述的b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡。
在其中一個實施例中,b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒還包括b族鏈球菌培養(yǎng)液。
如上任一實施例中所述的b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒的使用方法,包括如下步驟:
將離體的標(biāo)本加入b族鏈球菌培養(yǎng)液中,得到標(biāo)本液。
將標(biāo)本液加入各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔中;
將b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡在35℃~37℃條件下恒溫培養(yǎng)5小時~24小時;
分別對b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡中的各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔進(jìn)行顏色觀察,得到檢測結(jié)果。
在其中一個實施例中,所述離體的標(biāo)本通過拭子采集得到。
在其中一個實施例中,所述拭子為孕婦陰道拭子或肛拭子。
上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,鑒別微孔區(qū)的鑒別微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌鑒定實驗,藥敏微孔區(qū)的藥敏微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌的藥敏檢測實驗,從而能夠同時進(jìn)行b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測實驗,便捷性較好。此外,上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,基于顯示法/濁度法來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定和藥敏實驗,相對于核酸檢測,檢測成本較低。
其它實施例中還能夠達(dá)到的技術(shù)效果是,通過在b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡上開設(shè)加樣口和廢液口,且各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔均分別與所述加樣口及所述廢液口連通,使用過程中,將標(biāo)本液加入至加樣口后,通過傾斜b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,使加樣口中的標(biāo)本液加滿各所述鑒別微孔和各所述藥敏微孔,使得加樣過程非常方便,以往需要手動逐一加樣的過程現(xiàn)在一次操作即可完成,進(jìn)一步提高了加樣便捷性。
附圖說明
圖1為本發(fā)明一實施方式的b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施方式
為了便于理解本發(fā)明,下面將參照相關(guān)附圖對本發(fā)明進(jìn)行更全面的描述。附圖中給出了本發(fā)明的較佳實施方式。但是,本發(fā)明可以以許多不同的形式來實現(xiàn),并不限于本文所描述的實施方式。相反地,提供這些實施方式的目的是使對本發(fā)明的公開內(nèi)容理解的更加透徹全面。當(dāng)然,它們僅僅為示例,并且目的不在于限制本發(fā)明。此外,本發(fā)明可以在不同例子中重復(fù)參考數(shù)字和/或字母。這種重復(fù)是為了簡化和清楚的目的,其本身不指示所討論各種實施例和/或設(shè)置之間的關(guān)系。
需要說明的是,當(dāng)元件被稱為“固定于”另一個元件,它可以直接在另一個元件上或者也可以存在居中的元件。當(dāng)一個元件被認(rèn)為是“連接”另一個元件,它可以是直接連接到另一個元件或者可能同時存在居中元件。本文所使用的術(shù)語“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及類似的表述只是為了說明的目的,并不表示是唯一的實施方式。
在本發(fā)明的描述中,需要說明的是,除非另有規(guī)定和限定,術(shù)語“安裝”、“相連”、“連接”應(yīng)做廣義理解,例如,可以是機械連接或電連接,也可以是兩個元件內(nèi)部的連通,可以是直接相連,也可以通過中間媒介間接相連,對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言,可以根據(jù)具體情況理解上述術(shù)語的具體含義。
此外,術(shù)語“第一”、“第二”僅用于描述目的,而不能理解為指示或暗示相對重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隱含地包括至少一個該特征。在發(fā)明的描述中,“多個”的含義是至少兩個,例如兩個,三個等,除非另有明確具體的限定。在本發(fā)明的描述中,“若干”的含義是至少一個,例如一個,兩個等,除非另有明確具體的限定。
除非另有定義,本文所使用的所有的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語與屬于本發(fā)明的技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員通常理解的含義相同。本文中所使用的術(shù)語只是為了描述具體的實施方式的目的,不是旨在于限制本發(fā)明。本文所使用的術(shù)語“及/或”包括一個或多個相關(guān)的所列項目的任意的和所有的組合。
例如,一種b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,包括一檢測卡本體,所述檢測卡本體上設(shè)置有鑒別微孔區(qū)和藥敏試驗區(qū),所述鑒別微孔區(qū)開設(shè)有若干個鑒別微孔,所述藥敏試驗區(qū)開設(shè)有若干個藥敏微孔。又如,所述鑒別微孔為b族鏈球菌鑒別微孔,又如,所述藥敏微孔為b族鏈球菌藥敏微孔。
為了進(jìn)一步說明上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,又一個例子是,請參閱圖1,b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡包括一檢測卡本體100,所述檢測卡本體100上設(shè)置有鑒別微孔區(qū)110和藥敏試驗區(qū)120,所述鑒別微孔區(qū)110開設(shè)有若干個鑒別微孔111,鑒別微孔區(qū)的鑒別微孔用于對b族鏈球菌進(jìn)行鑒別實驗,例如,鑒別微孔中分別吸附有葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蜜二糖或/及棉子糖的檢測底物,來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒別實驗。所述藥敏試驗區(qū)120開設(shè)有若干個藥敏微孔121,藥敏試驗區(qū)的藥敏微孔用于對b族鏈球菌進(jìn)行藥敏檢測實驗,例如,藥敏微孔中分別吸附有青霉素、氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬古霉素、頭孢曲松、頭孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素、利奈唑胺及/或誘導(dǎo)性克林霉素耐藥試劑等抗生素,以此來對b族鏈球菌進(jìn)行藥敏檢測實驗。使用過程中,將待測樣本/標(biāo)本同時加入鑒別微孔111和藥敏微孔121中,通過加入對應(yīng)的鑒別生化試劑或者藥敏生化試劑,同時加入b族鏈球菌進(jìn)行培養(yǎng),然后將檢測板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間之后,通過觀察檢測板中鑒別微孔111和藥敏微孔121的顏色變化或濁度變化,即可實現(xiàn)對b族鏈球菌的鑒定和藥敏檢測,當(dāng)然,在此過程中,也可以將鑒別生化試劑或者藥敏生化試劑預(yù)先對應(yīng)吸附至鑒別微孔或者藥敏微孔中,如此,可以省去加試劑的步驟,從而進(jìn)一步提高了操作便捷性。需要說明的是,使用鑒別生化試劑如葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蜜二糖或/及棉子糖等對b族鏈球菌的鑒別原理及實驗過程,以及使用藥敏生化試劑如青霉素、氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬古霉素、頭孢曲松、頭孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素、利奈唑胺及/或誘導(dǎo)性克林霉素耐藥試劑等抗生素對b族鏈球菌的藥敏的實驗過程,可參照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行實現(xiàn),本發(fā)明在此不再贅述。
上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,鑒別微孔區(qū)的鑒別微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌鑒定實驗,藥敏微孔區(qū)的藥敏微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌的藥敏檢測實驗,從而能夠同時進(jìn)行b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測實驗,便捷性較好。此外,上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,基于顯示法/濁度法來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定和藥敏實驗,相對于核酸檢測,檢測成本較低。
一實施例中,請再次參閱圖1,所述檢測卡本體100上還開設(shè)有加樣口131及廢液口141,各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔均分別與所述加樣口及所述廢液口連通。加樣口用于加樣經(jīng)過b族鏈球菌培養(yǎng)液稀釋后的離體的標(biāo)本。又如,將標(biāo)本使用b族鏈球菌培養(yǎng)液配置成標(biāo)本液后加入加樣口中,又如,標(biāo)本液為將標(biāo)本使用b族鏈球菌培養(yǎng)液稀釋或配置而成。b族鏈球菌培養(yǎng)液用于供b族鏈球菌生長需要。
例如,離體的標(biāo)本包括但不限于血液、組織、尿液、糞便、白帶等。又如,所述標(biāo)本離體的標(biāo)本通過拭子采集得到,又如,所述拭子為孕婦陰道拭子或肛拭子。廢液口用于放置一些多余的標(biāo)本液。又如,廢液孔中還設(shè)置有吸液棉,所述洗液棉能夠吸收廢液口中一些多余的標(biāo)本液。如此,通過傾斜檢測卡本體,以使加樣口131一側(cè)高于廢液口141,從而使加樣口131中的液體在重力作用下依次/分別填滿各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔,待各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔填滿后,多余的液體會流至廢液口141中,從而避免液體流出b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡外。上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,通過在b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡上開設(shè)加樣口和廢液口,且各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔均分別與所述加樣口及所述廢液口連通,使用過程中,將標(biāo)本液加入至加樣口后,通過傾斜b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,使加樣口中的標(biāo)本液加滿各所述鑒別微孔和各所述藥敏微孔,使得加樣過程非常方便,以往需要手動逐一加樣的過程現(xiàn)在一次操作即可完成,進(jìn)一步提高了加樣便捷性。又如,所述檢測卡上還開設(shè)有流道,各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔均分別通過所述流道與所述加樣口及所述廢液口連通。又如,所述流道為加樣通道,即流道也可理解為加樣通道。又如,所述加樣通道的深度均小于所述鑒別微孔、所述藥敏微孔、所述加樣口及所述廢液口的深度。又如,請再次參閱圖1,所述檢測卡本體100上還設(shè)置有加樣區(qū)130及廢液區(qū)140,所述加樣區(qū)130設(shè)置所述加樣口131,所述廢液區(qū)140設(shè)置所述廢液口141。又如,所述檢測卡本體100的一側(cè)面上依次包括鑒別微孔區(qū)110、藥敏微孔區(qū)120、加樣區(qū)130及廢液區(qū)140。需要進(jìn)一步說明的是,圖1中的虛線并未在檢測卡本體中真實存在,只是為了說明b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡的鑒別微孔區(qū)110、藥敏微孔區(qū)120、加樣區(qū)130及廢液區(qū)140的位置。
一實施例中,b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡上還設(shè)置有蓋板,所述蓋板蓋合于所述檢測卡本體上,又如,所述檢測卡本體設(shè)置各微孔、加樣孔及廢液口的一側(cè)面被所述蓋板蓋合。又如,所述蓋板于所述加樣口對應(yīng)的位置還設(shè)置有加樣孔,如此,可以通過從加樣孔進(jìn)行加樣操作,從而使其它各種微孔處于開口被封閉狀態(tài),提高了操作安全性,避免了染菌幾率。又如,所述加樣孔還設(shè)置有塞子,塞子塞入加樣孔中,如此,在加樣后可以通過所述塞子塞住所述加樣孔。需要說明的是,上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,鑒別微孔、藥敏微孔可以將對應(yīng)的試劑預(yù)先吸附在相應(yīng)的孔中,也可以在用戶使用時根據(jù)實際需要將對應(yīng)的試劑加入/吸附在相應(yīng)的孔中。又如,標(biāo)本液為將標(biāo)本使用b族鏈球菌培養(yǎng)液稀釋或者溶解后所得。又如,鑒別微孔為b族鏈球菌鑒別微孔,又如,加樣口為b族鏈球菌加樣口,
一實施例中,所述鑒別微孔區(qū)開設(shè)有至少5個鑒別微孔。又如,其中5個所述鑒別微孔內(nèi)分別一一對應(yīng)吸附有葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蜜二糖以及棉子糖的檢測底物。如此,同時通過葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蜜二糖以及棉子糖來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定實驗,能夠使鑒定結(jié)果更為準(zhǔn)確。又如,所述藥敏試驗區(qū)開設(shè)有至少23個藥敏微孔。又如,23個藥敏微孔中的其中22個藥敏微孔兩兩分成11個藥敏微孔組,11個藥敏微孔組中一一對應(yīng)添加有青霉素、氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬古霉素、頭孢曲松、頭孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素以及利奈唑胺,其中,每一組的藥敏微孔組的兩個藥敏微孔中分別盛裝最低抑菌濃度值的最高濃度和最低濃度的同一種鑒別藥物,23個藥敏微孔中除去22個藥敏微孔的剩余的1個藥敏微孔中添加有誘導(dǎo)性克林霉素耐藥試劑,如此,能夠?qū)族鏈球菌進(jìn)行12項藥敏實驗。又如,誘導(dǎo)性克林霉素耐藥試劑包括克林霉素紙片(2ug/片)和紅霉素紙片(15ug/片)。需要進(jìn)一步說明的是,如何使用克林霉素紙片及紅霉素紙片來對b族鏈球菌進(jìn)行誘導(dǎo)性克林霉素耐藥實驗,請參照現(xiàn)有技術(shù)。又如,所述鑒別微孔區(qū)開設(shè)有6個鑒別微孔,所述藥敏試驗區(qū)開設(shè)有26個藥敏微孔。請參閱圖1,6個鑒別微孔分別為a6~a8、b6~b8,26個藥敏微孔分別為a1~a5、b1~b5、c1~c8、d1~d8。
又如,最高濃度即為下列括號中的(h),又如,最高濃度即為下列括號中的(l)。又如,最高濃度采用國標(biāo)中藥敏規(guī)定中最低抑菌濃度(minimalinhibitoryconcentration,mic)值的最高濃度,即抑制90%受試菌株生長所需的mic,最低濃度采用國標(biāo)中藥敏規(guī)定中最低抑菌濃度值的最低濃度,即抑制50%受試菌株生長所需的mic。又如,加樣如下表格所述(請一并結(jié)合圖1):
12項藥敏檢測實驗微孔中試劑表
又如,從至少23個藥敏微孔中任意選用17個藥敏微孔做9項藥敏實驗,17個藥敏微孔中的其中16個藥敏微孔兩兩分成8個藥敏微孔組,11個藥敏微孔組中一一對應(yīng)添加有青霉素、氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬古霉素、頭孢曲松、頭孢唑林以及左氧氟沙星,其中,每一組的藥敏微孔組的兩個藥敏微孔中分別盛裝最低抑菌濃度值的最高濃度和最低濃度的同一種鑒別藥物,17個藥敏微孔中除去26個藥敏微孔的剩余的1個藥敏微孔中添加有誘導(dǎo)性克林霉素耐藥試劑,如此,還能夠?qū)族鏈球菌進(jìn)行9項藥敏實驗,從而適配性好,滿足不同客戶的需要。又如,所述鑒別微孔區(qū)開設(shè)有6個鑒別微孔,所述藥敏試驗區(qū)開設(shè)有26個藥敏微孔,多設(shè)置一個鑒別微孔,能夠在其中一個鑒別微孔損壞的情況下,使用剩下的一個鑒別微孔替代,從而不影響對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定實驗。又如,最高濃度即為下列括號中的(h),又如,最高濃度即為下列括號中的(l)。又如,最高濃度采用國標(biāo)中藥敏規(guī)定中最低抑菌濃度值的最高濃度,即抑制90%受試菌株生長所需的mic,最低濃度采用國標(biāo)中藥敏規(guī)定中最低抑菌濃度值的最低濃度,即抑制50%受試菌株生長所需的mic。又如,加樣如下表格所述(結(jié)合圖1):
9項藥敏檢測實驗微孔中試劑表
一實施例中,所述鑒別微孔區(qū)開設(shè)有至少5個鑒別微孔,所述藥敏試驗區(qū)開設(shè)有至少17個藥敏微孔。又如,17個藥敏微孔中的其中16個藥敏微孔兩兩分成8個藥敏微孔組,11個藥敏微孔組中一一對應(yīng)添加有青霉素、氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬古霉素、頭孢曲松、頭孢唑林以及左氧氟沙星,其中,每一組的藥敏微孔組的兩個藥敏微孔中分別盛裝最低抑菌濃度值的最高濃度和最低濃度的同一種鑒別藥物,17個藥敏微孔中除去26個藥敏微孔的剩余的1個藥敏微孔中添加有誘導(dǎo)性克林霉素耐藥試劑。如此,能夠?qū)族鏈球菌進(jìn)行9項藥敏實驗。
上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試卡,通過使用b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,鑒別微孔區(qū)用于進(jìn)行b族鏈球菌鑒定實驗,藥敏微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌的藥敏檢測實驗,從而能夠同時進(jìn)行b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測實驗,便捷性較好。且在上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡的使用過程中,標(biāo)本b族鏈球菌培養(yǎng)液加入至加樣口后,通過傾斜b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,使加樣口中的標(biāo)本液加滿各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔,使得加樣的過程非常方便,以往需要手動逐一加樣的過程現(xiàn)在一次操作即可完成,進(jìn)一步提高了加樣便捷性。此外,上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,基于顯示法來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定和藥敏實驗,相對于核酸檢測,檢測成本較低。
本發(fā)明還提供一種b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒,包括如上任一實施例中所述的b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡。上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測盒,包含了b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,鑒別微孔區(qū)的鑒別微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌鑒定實驗,藥敏微孔區(qū)的藥敏微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌的藥敏檢測實驗,從而能夠同時進(jìn)行b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測實驗,便捷性較好。此外,上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒,基于顯示法/濁度法來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定和藥敏實驗,相對于核酸檢測,檢測成本較低。又如,所述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒包括包裝盒及b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,所述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡位于所述包裝盒內(nèi)。
一實施例中,所述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒還包括b族鏈球菌培養(yǎng)液。如此,通過直接將b族鏈球菌培養(yǎng)液一并設(shè)置于試劑盒中,能夠進(jìn)一步提高操作便捷性,減少需要額外配置或者購買b族鏈球菌培養(yǎng)液的問題。例如,b族鏈球菌培養(yǎng)液包括但不限于鏈球菌基礎(chǔ)營養(yǎng)肉湯和酵母提取液等。
一實施例中,b族鏈球菌培養(yǎng)液包括基礎(chǔ)營養(yǎng)液、促生長劑、生長試劑、生長指示劑、雜菌抑制劑及解毒劑。又如,所述基礎(chǔ)液為鏈球菌基礎(chǔ)營養(yǎng)肉湯和酵母提取液中的至少一種,基礎(chǔ)營養(yǎng)液提供生長基本營養(yǎng)。又如,所述促生長劑包括主要成分和添加成分,所述主要成分為脫纖維羊血、脫纖維馬血、馬血清以及小牛血清中任一種,所述添加成分為丙酮酸鈉、亞硫酸鈉、氯化鈉、異抗壞血酸以及氯化血紅素中的至少一種,促生長劑用于提高b族鏈球菌的生長速度。又如,所述解毒劑為可溶性淀粉、活性炭以及環(huán)糊精中的至少一種,解毒劑用于吸附不利b族鏈球菌的生長物質(zhì)。又如,所述生長指示劑為噻唑藍(lán)、磺基羅丹明b、酚酞、甲基紅和碘硝基四唑紫中的任一種。又如,所述雜菌抑制劑包括萘啶酸、粘菌素b、兩性霉素b以及甲氧芐氨嘧啶,雜菌抑制用于抑制其他雜菌生長。選用上述組分的b族鏈球菌培養(yǎng)液,能夠減少對b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測的影響,還能夠縮短b族鏈球菌的鑒定和藥敏檢測時間,使鑒定和檢測時間能夠縮減至6小時至20小時。相對于傳統(tǒng)中的b族鏈球菌的鑒定和藥敏檢測時間動輒24小時的檢測時間,縮短了檢測時間。
上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測盒,包含了b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,鑒別微孔區(qū)的鑒別微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌鑒定實驗,藥敏微孔區(qū)的藥敏微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌的藥敏檢測實驗,從而能夠同時進(jìn)行b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測實驗,便捷性較好。此外,上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒,基于顯示法/濁度法來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定和藥敏實驗,相對于核酸檢測,檢測成本較低。又如,所述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒包括包裝盒及b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,所述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡位于所述包裝盒內(nèi)。
本發(fā)明還提供一種b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒的使用方法,其中b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒為如上任一實施例中所述的b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒,所述使用方法包括如下步驟:
s110:將離體的標(biāo)本加入b族鏈球菌培養(yǎng)液中,得到標(biāo)本液。
例如,離體的標(biāo)本包括但不限于血液、組織、尿液、糞便、白帶等。又如,所述離體的標(biāo)本通過拭子采集得到。又如,所述拭子為孕婦陰道拭子或肛拭子。
例如,將采集的分泌物拭子直接投入到b族鏈球菌培養(yǎng)液瓶壁旋轉(zhuǎn)擠壓數(shù)次,使拭子中的樣本充分混入b族鏈球菌培養(yǎng)液中,浸泡幾分鐘,使其充分溶解至b族鏈球菌培養(yǎng)液后即得標(biāo)本液。需要說明的是,為避免其它微生物的污染有必要采取標(biāo)準(zhǔn)的實驗操作技術(shù)。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,常溫下在4小時內(nèi)完成檢測,2-8℃冷藏條件下不要超過48小時。
s120:將標(biāo)本液加入各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔中。
例如,各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔中預(yù)先吸附有對應(yīng)的試劑。又如,在使用過程中再加入與各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔中對應(yīng)的試劑。
s130:將b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡在35℃~37℃條件下恒溫培養(yǎng)5小時~24小時。
又如,將b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡在35℃~37℃條件下恒溫培養(yǎng)18小時~24小時。又如,將b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡在36.5℃條件下恒溫培養(yǎng)6小時~12小時。
例如,當(dāng)b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡中設(shè)置有蓋板時,用配套塑料塞把加液口蓋好后在35-37℃條件下恒溫培養(yǎng)18-24小時。
s130:分別對b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡中的各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔進(jìn)行顏色觀察,得到檢測結(jié)果。
例如,若鑒別孔中精氨酸、海藻糖、纖維二糖孔中有至少兩孔變黃色,甘露醇、馬尿酸鈉、山梨醇孔中至少有兩孔不變色,則表明為gbs,否則為其他細(xì)菌。例如,微孔變紅表明該濃度藥物不能抑制gbs生長,不變色則能抑制gbs生長。
又如,采用人工誤讀的方法進(jìn)行顏色觀察。又如,人工誤讀的方法如下(請結(jié)合圖1):
又如,采用藥敏檢測儀進(jìn)行顏色觀察/讀取,按儀器操作說明書進(jìn)行判讀。
上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒的使用方法,能夠同時進(jìn)行b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測實驗,便捷性較好。此外,基于顯示法/濁度法來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定和藥敏實驗,相對于核酸檢測,檢測成本較低。
一實施例中,當(dāng)b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡中設(shè)置有加樣口及廢液口且各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔均分別與所述加樣口及所述廢液口連通時,所述步驟s120具體為:
s121:將標(biāo)本液加入b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡的加樣口中。
例如,取充分溶解混勻后的標(biāo)本液,從加樣口倒入平放置的檢測板中。
s122:傾斜b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,使加樣口中的標(biāo)本液加滿各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔。
例如,輕輕用手抬高檢測板加樣口一側(cè)一定角度,使標(biāo)本液從加樣口側(cè)向另一側(cè)通過加液通道把各微孔全部加滿,多余的標(biāo)本液通過吸液棉吸附掉。
所述步驟s130具體為:分別對b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡中的各所述鑒別微孔、各所述藥敏微孔進(jìn)行顏色觀察,得到檢測結(jié)果。
上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒的使用方法,通過使用b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,鑒別微孔區(qū)用于進(jìn)行b族鏈球菌鑒定實驗,藥敏微孔用于進(jìn)行b族鏈球菌的藥敏檢測實驗,從而能夠同時進(jìn)行b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測實驗,便捷性較好。且在將上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒的使用過程中,標(biāo)本b族鏈球菌培養(yǎng)液加入至加樣口后,通過傾斜b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測卡,使加樣口中的標(biāo)本液加滿各所述鑒別微孔及各所述藥敏微孔,使得加樣的過程非常方便,以往需要手動逐一加樣的過程現(xiàn)在一次操作即可完成,進(jìn)一步提高了加樣便捷性。此外,上述b族鏈球菌鑒定和藥敏檢測試劑盒,基于顯示法來對b族鏈球菌進(jìn)行鑒定和藥敏實驗,相對于核酸檢測,檢測成本較低。
以上所述實施例的各技術(shù)特征可以進(jìn)行任意的組合,為使描述簡潔,未對上述實施例中的各個技術(shù)特征所有可能的組合都進(jìn)行描述,然而,只要這些技術(shù)特征的組合不存在矛盾,都應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是本說明書記載的范圍。
以上所述實施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實施方式,其描述較為具體和詳細(xì),但并不能因此而理解為對發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是,對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說,在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下,還可以做出若干變形和改進(jìn),這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此,本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。