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一種用于提取DNA的花生葉片組織研磨系統(tǒng)的制作方法

文檔序號(hào):12029990閱讀:256來源:國知局
一種用于提取DNA的花生葉片組織研磨系統(tǒng)的制作方法與工藝

本發(fā)明涉及生物科技技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種用于提取dna的花生葉片組織研磨系統(tǒng)。



背景技術(shù):

花生又名落花生,屬于一年生草本植物,由于其含油量高,被人們譽(yù)為“植物肉”?;ㄉ擞糜谑秤猛猓€可用于印染、造紙工業(yè)等,是我國重要的油料和經(jīng)濟(jì)作物。我國的花生種植面積和生產(chǎn)總量均居世界前列在國際上具有很強(qiáng)的競(jìng)爭力。但是,我國目前花生的種質(zhì)資源相對(duì)有限,一些抗病抗逆的種質(zhì)資源相對(duì)缺乏,尤其是抗黃曲霉品種更加缺乏。

常規(guī)的雜交育種、誘變育種雖然可以對(duì)花生的遺傳基因進(jìn)行一定的改良,但是都很難實(shí)現(xiàn)有目的性地進(jìn)行花生遺傳基因改良。而轉(zhuǎn)基因育種可以任意選擇生產(chǎn)上的當(dāng)家品種進(jìn)行外源基因的導(dǎo)入,達(dá)到目的性狀基因的轉(zhuǎn)移和種質(zhì)改良的目的。

現(xiàn)有花生轉(zhuǎn)基因育種的常用方法有農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和基因槍法。無論是采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和基因槍法都需要對(duì)花生葉片組織進(jìn)行研磨,以便提取花生葉片組織中的花生dna。已有技術(shù)中,為提取花生葉片組織中的花生dna,通常采用研缽和缽杵相互配合在液氮中實(shí)現(xiàn)對(duì)花生葉片組織的研磨,研磨完成的花生葉片組織從研缽中轉(zhuǎn)移至相應(yīng)的試管中進(jìn)行花生葉片dna的提取。

由于已有技術(shù)中采用的是研缽和缽杵相互配合實(shí)現(xiàn)對(duì)花生葉片組織的研磨,大量的花生葉片組織研磨液粘連在研缽和缽杵,造成花生葉片組織液的浪費(fèi),當(dāng)花生葉片組織較少時(shí),更無法采用已有技術(shù)中的方法進(jìn)行花生葉片dna的提取。如何減輕研磨過程對(duì)花生葉片組織的浪費(fèi),降低花生葉片dna的提取成本,已經(jīng)成為該領(lǐng)域亟待解決的技術(shù)難題。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本發(fā)明實(shí)施例提供一種用于提取dna的花生葉片組織研磨系統(tǒng),旨在降低花生葉片組織研磨過程中對(duì)花生葉片組織的浪費(fèi),降低花生葉片dna的提取成本。

本發(fā)明提供的具體技術(shù)方案如下:

一方面,本發(fā)明實(shí)施例提供一種用于提取dna的花生葉片組織研磨系統(tǒng),所述花生葉片組織研磨系統(tǒng)包括酒精燈、離心管、移液槍槍頭和液氮,其中,所述離心管為容積為1ml~2ml的帶密封蓋或壓蓋的管狀試樣容器;所述移液槍槍頭為規(guī)格為100ul~300ul的移液槍的槍頭,所述酒精燈用于加熱所述移液槍槍頭;所述移液槍槍頭為空心的錐形結(jié)構(gòu),所述移液槍槍頭包括大端和小端,所述移液槍槍頭的小端有一個(gè)經(jīng)所述酒精燈加熱融化后形成的圓球,所述圓球的半徑為0.1mm~2mm;所述離心管包括圓柱段和圓錐段,所述圓柱段的內(nèi)腔和所述圓錐段的內(nèi)腔相連通,所述圓錐段的最小直徑大于所述圓球的直徑,所述離心管的長度小于所述移液槍槍頭的長度;所述移液槍槍頭與所述離心管相配合用于將所述離心管內(nèi)的花生葉片搗碎,所述液氮用于對(duì)所述離心管和移液槍槍頭進(jìn)行冷卻。

可選的,所述離心管為尖底離心管,所述離心管的圓錐段的錐度大于所述移液槍槍頭的錐度。

可選的,所述離心管為規(guī)格為1.5ml的尖底離心管,所述移液槍槍頭為規(guī)格為200ul的移液槍的槍頭。

可選的,所述花生葉片組織研磨系統(tǒng)還包括手柄,所述手柄能夠插入尖端為圓球的所述移液槍槍頭的內(nèi)腔中,所述手柄與所述移液槍槍頭的內(nèi)腔相互配合實(shí)現(xiàn)將所述手柄卡在所述移液槍槍頭的內(nèi)腔中,所述手柄為塑料手柄、木質(zhì)手柄或金屬手柄中的一種。

可選的,所述花生葉片組織研磨系統(tǒng)還包括鑷子,所述鑷子的尖端能夠插入尖端為圓球的所述移液槍槍頭的內(nèi)腔中,以實(shí)現(xiàn)將所述鑷子卡在所述移液槍槍頭的內(nèi)腔中充當(dāng)所述移液槍槍頭的手柄。

可選的,所述圓球的直徑為1.5mm,所述移液槍槍頭能夠插入所述離心管的底部。

可選的,所述花生葉片組織研磨系統(tǒng)還包括離心管板,所述離心管板上設(shè)置離心管安裝槽,所述離心管安裝槽的直徑大于所述離心管的圓錐段的最小直徑,所述離心管安裝槽的直徑小于所述離心管的圓柱段的直徑。

本發(fā)明的有益效果如下:

本發(fā)明實(shí)施例提供用于提取dna的花生組織研磨系統(tǒng)包括酒精燈、離心管、移液槍槍頭和液氮,其中,移液槍槍頭的小端有一個(gè)經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球,并且離心管包括圓柱段和圓錐段,圓錐段的最小直徑大于圓球的直徑,離心管的長度小于移液槍槍頭的長度,將移液槍槍頭的小端經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球與現(xiàn)有的離心管相互配合,將經(jīng)液氮冷卻之后的花生葉片組織搗碎,以實(shí)現(xiàn)直接在該離心管中提取搗碎之后的花生葉片組織中的dna,相對(duì)于已有技術(shù)中采用研缽和缽杵相互配合的方式實(shí)現(xiàn)的花生葉片組織的搗碎,減輕了研磨過程對(duì)花生葉片組織的浪費(fèi),更加適合用于花生葉片組織較少時(shí)提取花生葉片組織dna;同時(shí),相對(duì)于已有技術(shù)中使用自動(dòng)化樣品研磨儀器,降低了花生葉片dna的提取成本和節(jié)約了花生葉片組織的使用量;由于本發(fā)明實(shí)施例的方法,在離心管中將花生葉片組織搗碎之后,不需要轉(zhuǎn)移搗碎之后的花生葉片組織即可實(shí)現(xiàn)對(duì)花生葉片組織dna的提取,避免了已有技術(shù)中研缽的使用和清洗工作,提高了花生葉片組織的利用率,同時(shí)節(jié)省了液氮的使用量,保證了花生葉片組織dna的提取效果,而且離心管和移液槍槍頭均是成本較低的試驗(yàn)器常見器材,實(shí)現(xiàn)了花生葉片組織的快速、低成本搗碎,節(jié)省了試驗(yàn)成本。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案,下面將對(duì)實(shí)施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹,顯而易見地,下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例,對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講,在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下,還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發(fā)明實(shí)施例的一種用于提取dna的花生葉片組織研磨系統(tǒng)的組成示意圖;

圖2為本發(fā)明實(shí)施例的使用的尖端融化成為圓球的移液槍槍頭的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖3為本發(fā)明實(shí)施例的離心管的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖4為本發(fā)明實(shí)施例的尖端融化成為圓球的移液槍槍頭與離心管相配合用于研磨花生葉片組織的示意圖;

圖5為本發(fā)明實(shí)施例的帶手柄的移液槍槍頭的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖6為本發(fā)明實(shí)施例的花生葉片組織研磨系統(tǒng)用于花生葉片研磨的過程流程圖。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚,下面將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步地詳細(xì)描述,顯然,所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例?;诒景l(fā)明中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其它實(shí)施例,都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

本發(fā)明的說明書和權(quán)利要求書及上述附圖中的術(shù)語“第一”、“第二”、“第三”、“第四”、“第五”、“第六”、“第七”和“第八”等(如果存在)是用于區(qū)別類似的對(duì)象,而不必用于描述特定的順序或先后次序。應(yīng)該理解這樣使用的數(shù)據(jù)在適當(dāng)情況下可以互換,以便這里描述的本發(fā)明的實(shí)施例例如能夠以除了在這里圖示或描述的那些以外的順序?qū)嵤?/p>

此外,術(shù)語“包括”和“具有”以及他們的任何變形,意圖在于覆蓋不排他的包含,例如,包含了一系列步驟或單元的過程、方法、系統(tǒng)、產(chǎn)品或設(shè)備不必限于清楚地列出的那些步驟或單元,而是可包括沒有清楚地列出的或?qū)τ谶@些過程、方法、產(chǎn)品或設(shè)備固有的其它步驟或單元。

為降低已有技術(shù)中花生葉片組織研磨過程中對(duì)花生葉片組織的浪費(fèi),降低花生葉片dna的提取成本,本發(fā)明實(shí)施例提供一種用于提取dna的花生葉片組織研磨系統(tǒng),包括酒精燈、離心管、移液槍槍頭和液氮,其中,移液槍槍頭的小端有一個(gè)經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球,并且離心管包括圓柱段和圓錐段,圓錐段的最小直徑大于圓球的直徑,離心管的長度小于移液槍槍頭的長度,將移液槍槍頭的小端經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球與現(xiàn)有的離心管相互配合,將經(jīng)液氮冷卻之后的花生葉片組織搗碎,以實(shí)現(xiàn)直接在該離心管中提取搗碎之后的花生葉片組織中的dna,相對(duì)于已有技術(shù)中采用研缽和缽杵相互配合的方式實(shí)現(xiàn)的花生葉片組織的搗碎,減輕了研磨過程對(duì)花生葉片組織的浪費(fèi),更加適合用于花生葉片組織較少時(shí)提取花生葉片組織dna;同時(shí),相對(duì)于已有技術(shù)中使用自動(dòng)化樣品研磨儀器,降低了花生葉片dna的提取成本和節(jié)約了花生葉片組織的使用量;由于本發(fā)明實(shí)施例的方法,在離心管中將花生葉片組織搗碎之后,不需要轉(zhuǎn)移搗碎之后的花生葉片組織即可實(shí)現(xiàn)對(duì)花生葉片組織dna的提取,避免了已有技術(shù)中研缽的使用和清洗工作,提高了花生葉片組織的利用率,同時(shí)節(jié)省了液氮的使用量,保證了花生葉片組織dna的提取效果,而且離心管和移液槍槍頭均是成本較低的試驗(yàn)器常見器材,實(shí)現(xiàn)了花生葉片組織的快速、低成本搗碎,節(jié)省了試驗(yàn)成本。

下面將結(jié)合附圖1~附圖6對(duì)本發(fā)明實(shí)施例的用于提取dna的花生葉片組織研磨系統(tǒng)進(jìn)行詳細(xì)的說明。

參考附圖1所示,本發(fā)明實(shí)施例的用于提取dna的花生葉片組織研磨系統(tǒng)包括酒精燈100、離心管200、移液槍槍頭300和液氮,其中,液氮為液態(tài)的氮?dú)猓娣旁谝旱拗?,液氮的溫度為?96℃。液氮用于對(duì)離心管和移液槍槍頭進(jìn)行冷卻,并且在花生葉片的研磨過程中,將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進(jìn)行冷卻,其中,液氮的溫度為零下196℃,由于液氮的溫度低,可以實(shí)現(xiàn)花生葉片和離心管的溫度的急速下降,避免花生葉片在冷卻的過程中花生葉片組織中的dna被破壞。

采用液氮對(duì)花生葉片進(jìn)行冷卻,不僅可以避免花生葉片在冷卻的過程中花生葉片組織中的dna被破壞,而且還可以采用液氮對(duì)花生葉片進(jìn)行快速冷卻之后,可以降低花生葉片的研磨難度,保證研磨過程不會(huì)破壞花生葉片組織中的dna的完整性。

其中,本發(fā)明實(shí)施例的花生葉片組織研磨系統(tǒng)包括的離心管200是容積為1ml~2ml的離心管,其中,離心管200為帶密封蓋或壓蓋的管狀試樣容器,屬于實(shí)驗(yàn)室常見試驗(yàn)器材;示例的,本發(fā)明實(shí)施例采用1ml尖底離心管或者1.5ml尖底離心管。

參考圖3所示,本發(fā)明實(shí)施例的離心管200包括圓柱段201和圓錐段202,其中,圓柱段201的內(nèi)腔和圓錐段202的內(nèi)腔相連通。離心管200的內(nèi)腔用于存放花生葉片和研磨后的花生葉片組織研磨液。

參考圖2所示,本發(fā)明實(shí)施例的花生葉片組織研磨系統(tǒng)包括的移液槍槍頭300為規(guī)格為100ul~300ul的移液槍的槍頭,其中,移液槍是移液器的一種,常用于實(shí)驗(yàn)室少量或微量液體的移取,規(guī)格不同,不同規(guī)格的移液槍配套使用不同大小的槍頭,不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的形狀也略有不同,但工作原理及操作方法基本一致。

移液槍的量程范圍一般是0.1ul~5000ul,其中,不同量程范圍的移液槍使用不同的移液槍槍頭,示例的,本發(fā)明實(shí)施例可以選用量程為100ul~150ul的移液槍的槍頭,也可以選用量程為100ul~200ul的移液槍的槍頭,也可以選用量程為100ul~300ul的移液槍的槍頭。其中,優(yōu)選的,本發(fā)明實(shí)施例選用顏色為黃色的200ul的移液槍槍頭300,選用200ul的移液槍槍頭300與1.5ml的尖底離心管相配合,其中1.5ml的尖底離心管的大小和容積合適,并且200ul的移液槍槍頭的強(qiáng)度和長度也合適,并且兩者均是實(shí)驗(yàn)室常用的儀器,成本均比較低,可以避免對(duì)試驗(yàn)材料干花生葉片的浪費(fèi),提高花生葉片的利用率和降低試驗(yàn)成本。

參考圖1所示,本發(fā)明實(shí)施例的酒精燈100用于加熱移液槍槍頭,其中,本發(fā)明實(shí)施例使用的可以是一個(gè)容積為60ml或者150ml又或者200ml的酒精燈。將酒精燈100點(diǎn)燃之后,待酒精燈100燃燒一段時(shí)間之后,將100ul~300ul移液槍槍頭300的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分進(jìn)行加熱,加熱一段時(shí)間之后,移液槍槍頭300的尖端融化,融化產(chǎn)生的液體在移液槍槍頭的尖端聚集。待移液槍槍頭300的尖端聚集的液體可以形成本發(fā)明所要求的圓球之后,將100ul~300ul移液槍槍頭撤離酒精燈火焰的外焰部分,在空氣中冷卻之后,在移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成一個(gè)圓球,示例的,如圖3所示,在移液槍槍頭300的尖端經(jīng)冷卻形成的圓球的半徑為0.1mm~2mm。

參考圖3所示,本發(fā)明實(shí)施例的移液槍槍頭300為空心的錐形結(jié)構(gòu),移液槍槍頭包括大端301和小端302,移液槍槍頭300的小端302有一個(gè)經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球303,圓球303的半徑為0.1mm~2mm。參考圖3和圖4所示,離心管200的圓錐段202的最小直徑大于圓球303的直徑,離心管200的長度小于移液槍槍頭300的長度,其中,由于圓球303的直徑小于離心管200的圓錐段202的最小內(nèi)徑,可以保證移液槍槍頭的小端經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球可以深入離心管200的底部,保證離心管200的花生葉片可以被移液槍槍頭尖端的圓球充分研磨。而且,離心管的長度小于移液槍槍頭的長度,可以進(jìn)一步的保證移液槍槍頭尖端的圓球充分接觸離心管200的底部,實(shí)現(xiàn)離心管200的花生葉片的充分研磨。

尖端帶有圓球的移液槍槍頭300的一端是敞開的,另一端是密閉的,其中,敞開的一端用來安裝鑷子或者手柄。經(jīng)酒精燈外焰加熱后形成圓球的移液槍槍頭是密封的,可以避免用移液槍槍頭的尖端的圓球搗碎離心管中的花生葉片時(shí),造成花生葉片組織液進(jìn)入移液槍槍頭,有助于避免研磨過程對(duì)花生葉片組織造成浪費(fèi)。

參考圖4所示,本發(fā)明實(shí)施例提供的花生葉片組織研磨系統(tǒng)將移液槍槍頭的小端經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球303與現(xiàn)有的離心管相互配合,將經(jīng)液氮冷卻之后的花生葉片組織搗碎,以實(shí)現(xiàn)直接在該離心管中提取搗碎之后的花生葉片組織中的dna。

可選的,離心管200為尖底離心管,離心管200的圓錐段201的錐度大于移液槍槍頭300的錐度,即離心管200的任一內(nèi)徑均大于移液槍槍頭300的外經(jīng),可以保證移液槍槍頭300可以順利的離心管200中往返出入,以實(shí)現(xiàn)對(duì)離心管200內(nèi)的花生葉片進(jìn)行研磨。

可選的,離心管200為規(guī)格為1.5ml的尖底離心管,移液槍槍頭300為規(guī)格為200ul的移液槍的槍頭。

可選的,參考圖5所示,本發(fā)明實(shí)施例的花生葉片組織研磨系統(tǒng)還包括手柄400,其中,手柄400能夠插入尖端為圓球的移液槍槍頭300的內(nèi)腔中,手柄400與移液槍槍頭300的內(nèi)腔相互配合實(shí)現(xiàn)將手柄400卡在移液槍槍頭300的內(nèi)腔中,手柄300為塑料手柄、木質(zhì)手柄或金屬手柄中的一種。

需要說明的是,之所以在移液槍槍頭的內(nèi)腔中安裝手柄,是為了避免將移液槍槍頭放置于液氮中進(jìn)行冷卻時(shí)人手接觸到液氮,可以有效防止人手誤接觸到液氮而對(duì)人手造成凍傷。

示例的,該手柄可以是特制的手柄,也可以是木棍,還可以是金屬桿等,其中,優(yōu)選的,該手柄為木質(zhì)手柄或者塑料手柄,木質(zhì)手柄和塑料手柄的導(dǎo)熱效果差,可以避免用戶將移液槍槍頭放置于液氮中進(jìn)行冷卻時(shí)對(duì)用戶的手造成凍傷。

可選的,手柄400為一個(gè)鑷子,將鑷子的尖端能夠插入尖端為圓球的移液槍槍頭300的內(nèi)腔中,以實(shí)現(xiàn)將鑷子卡在移液槍槍頭300的內(nèi)腔中充當(dāng)移液槍槍頭300的手柄。通過移動(dòng)鑷子,可以實(shí)現(xiàn)將尖端為圓球的移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~4s。需要說明的是,之所以將鑷子卡在移液槍槍頭的內(nèi)腔充當(dāng)該移液槍槍頭的手柄,是為了避免將移液槍槍頭放置于液氮中進(jìn)行冷卻時(shí)人手接觸到液氮,可以有效防止人手誤接觸到液氮而對(duì)人手造成凍傷。

可選的,圓球的直徑為1.5mm,移液槍槍頭能夠插入所述離心管的底部。

可選的,參考圖4所示,本發(fā)明實(shí)施例的花生葉片組織研磨系統(tǒng)還包括離心管板500,離心管板500上設(shè)置離心管安裝槽501,離心管安裝槽501的直徑大于離心管200的圓錐段202的最小直徑,離心管安裝槽501的直徑小于離心管200的圓柱段201的直徑,可以實(shí)現(xiàn)將離心管200卡在離心管板500的離心管安裝槽501中。

需要說明的是,離心管板500上設(shè)置有離心管安裝槽501,可以將離心管200固定在離心管安裝槽501內(nèi),保證采用移液槍槍頭尖端的圓球快速將離心管中的花生葉片搗碎的過程中,裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在離心管板上安裝牢靠。

下面將結(jié)合附圖6,對(duì)辦發(fā)明實(shí)施例的花生葉片組織研磨系統(tǒng)用于研磨花生葉片的過程進(jìn)行詳細(xì)說明。具體的,參考附圖6所示,該過程包括如下步驟:

步驟110:取0.1克~0.4克的新鮮花生葉片或者取0.01克~0.04克的干花生葉片,放置于離心管中。

如果本發(fā)明實(shí)施例使用的是新鮮花生葉片,其中,新鮮花生葉片是從花生活體上摘取的花生葉片,新鮮花生葉片的含水率大于40%。在本發(fā)明實(shí)施例的用于提取dna的花生葉片組織研磨方法中,一次選取的新鮮花生葉片的重量可以在0.1克~0.4克之間;對(duì)于一次選取的新鮮花生葉片的具體重量,本發(fā)明實(shí)施例不做具體限定,只要在本發(fā)明實(shí)施例限定的范圍內(nèi)即可。

其中,優(yōu)選的,本發(fā)明實(shí)施例選取的新鮮花生葉片的重量為0.1克~0.2克,這樣可以在保證本發(fā)明實(shí)施例的方法有效提取花生葉片組織的dna的同時(shí),避免對(duì)試驗(yàn)材料花生葉片的浪費(fèi),提高花生葉片的利用率和降低試驗(yàn)成本。

如果本發(fā)明實(shí)施例使用的是干花生葉片,其中,干花生葉片是從曬干的花生本體上摘取的花生葉片,干花生葉片的含水率小于20%。在本發(fā)明實(shí)施例的用于提取dna的花生葉片組織研磨方法中,一次選取的干花生葉片的重量可以在0.01克~0.04克之間;對(duì)于一次選取的干花生葉片的具體重量,本發(fā)明實(shí)施例不做具體限定,只要在本發(fā)明實(shí)施例限定的范圍內(nèi)即可。

其中,優(yōu)選的,本發(fā)明實(shí)施例選取的干花生葉片的重量為0.01克~0.02克,這樣可以在保證本發(fā)明實(shí)施例的方法有效提取花生葉片組織的dna的同時(shí),避免對(duì)試驗(yàn)材料干花生葉片的浪費(fèi),提高花生葉片的利用率和降低試驗(yàn)成本。

示例的,取0.2克的新鮮花生葉片或者取0.02克的干花生葉片,放置于1.5ml的尖底離心管中,并且該尖底離心管的底部內(nèi)徑大于移液槍槍頭的尖端的圓球的直徑。

步驟120:將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管至于液氮中。

將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進(jìn)行冷卻,其中,液氮的溫度為零下196℃,由于液氮的溫度低,可以實(shí)現(xiàn)花生葉片和離心管的溫度的急速下降,避免花生葉片在冷卻的過程中花生葉片組織中的dna被破壞。

步驟130:將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s。

將尖端帶有圓球的移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s,示例的,可以通過移液槍槍頭的大端,在移液槍槍頭的內(nèi)腔中安裝一個(gè)把手,用于將尖端帶有圓球的移液槍槍頭放置于液氮中進(jìn)行冷卻。對(duì)于尖端為圓球的移液槍槍頭放置于液氮中的具體冷卻時(shí)間,本發(fā)明實(shí)施例不做具體限定,示例的,可以將尖端為圓球的移液槍槍頭放置于液氮中冷卻5s,保證尖端為圓球的移液槍槍頭溫度降低至零下20℃以下。

步驟140:待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時(shí),將離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃的離心管板上,并從液氮中取出移液槍槍頭,將移液槍槍頭插入離心管中,利用移液槍槍頭尖端的圓球快速將離心管中的花生葉片搗碎,以便采用離心管進(jìn)行提取花生葉片組織中dna的步驟。

將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進(jìn)行冷卻,待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時(shí),說明裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了接近液氮的溫度,即裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時(shí),說明裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了零下196℃。

需要說明的是,裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進(jìn)行冷卻,其冷卻的時(shí)間不能太長也不能太短,比如將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中冷卻的時(shí)間過長,將會(huì)由于冷凍時(shí)間過長導(dǎo)致花生葉片中的dna的完整性被破壞;如果將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中冷卻的時(shí)間過短,將會(huì)提高花生葉片的研磨難度,不利于使用本發(fā)明實(shí)施例的花生葉片組織的研磨方法將花生葉片徹底研磨碎,不利于花生葉片組織dna的提取。本申請(qǐng)的發(fā)明人,經(jīng)過大量的試驗(yàn)和研究之后,發(fā)現(xiàn)當(dāng)裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進(jìn)行冷卻,待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時(shí),表明新鮮花生葉片或者干花生葉片在液氮中冷卻的溫度合適,即可保證花生葉片中dna的完整性,又降低了花生葉片的研磨難度。

其次,需要說明的是,由于不同的花生葉片,其含水率和導(dǎo)熱性質(zhì)都不同,即不同的花生葉片在液氮中冷卻所需要的時(shí)間不同,因此,如何準(zhǔn)確地控住花生葉片在液氮中冷卻的準(zhǔn)確時(shí)間,是一直以來困擾本領(lǐng)域技術(shù)人員的亟待解決的技術(shù)難題。本發(fā)明的申請(qǐng)人經(jīng)過長期的實(shí)踐和大量的試驗(yàn)之后發(fā)現(xiàn),通過判斷花生葉片在液氮中冷卻時(shí)發(fā)出的聲音,可以準(zhǔn)確判斷不同的花生葉片在液氮中冷卻所需要的準(zhǔn)確時(shí)間,即裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時(shí),表明裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了合適的溫度,此時(shí)將其取出進(jìn)行研磨,可保證花生葉片中dna的完整性,又降低了花生葉片的研磨難度。

待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了零下196℃時(shí),將離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃之間的離心管板上,并從液氮中取出移液槍槍頭,迅速將移液槍槍頭插入該離心管中,利用移液槍槍頭尖端的圓球快速將離心管中的花生葉片搗碎,待離心管中的新鮮花生葉片或者干花生葉片被搗碎之后,將移液槍槍頭從離心管中取出,然后將裝有搗碎的新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管轉(zhuǎn)移到其他的試驗(yàn)裝置上,實(shí)現(xiàn)直接采用該離心管提取該離心管中的花生葉片組織中dna。

對(duì)于,采用該離心管內(nèi)的搗碎的新鮮花生葉片或者干花生葉片提取花生葉片組織中dna的具體過程,本發(fā)明實(shí)施例在此不再累述,本領(lǐng)域技術(shù)人員可參考現(xiàn)有技術(shù)。

需要說明的是,離心管板需要提前進(jìn)行降溫,保證離心管板的溫度降至零下20℃~零下30℃之間,這樣可以保證搗碎離心管內(nèi)的新鮮花生葉片或者干花生葉片的過程中,離心管內(nèi)的花生葉片組織不會(huì)溫度升高太多,可以保證花生葉片組織中的dna在花生葉片搗碎過程中,dna的完整性不會(huì)被破壞。

具體的,待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了零下196℃時(shí),將離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃之間的離心管板上,然后將移液槍槍頭插入離心管中,然后移液槍槍頭尖端的圓球與離心管的底部往復(fù)性接觸和脫離;通過移液槍槍頭尖端的圓球與離心管的底部之間的擠壓力,將離心管中的花生葉片組織搗碎,其中,當(dāng)離心管內(nèi)的新鮮花生葉片或者干花生葉片搗碎至離心管內(nèi)的花生葉片組織中無可視顆粒物,即可將移液槍槍頭從離心管中取出,然后將裝有搗碎的新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管轉(zhuǎn)移到其他的試驗(yàn)裝置上,實(shí)現(xiàn)直接采用該離心管提取該離心管中的花生葉片組織中dna。

本發(fā)明實(shí)施例提供一種用于提取dna的花生葉片組織研磨系統(tǒng),包括酒精燈、離心管、移液槍槍頭和液氮,其中,移液槍槍頭的小端有一個(gè)經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球,并且離心管包括圓柱段和圓錐段,圓錐段的最小直徑大于圓球的直徑,離心管的長度小于移液槍槍頭的長度,將移液槍槍頭的小端經(jīng)酒精燈加熱融化后形成的圓球與現(xiàn)有的離心管相互配合,將經(jīng)液氮冷卻之后的花生葉片組織搗碎,以實(shí)現(xiàn)直接在該離心管中提取搗碎之后的花生葉片組織中的dna,相對(duì)于已有技術(shù)中采用研缽和缽杵相互配合的方式實(shí)現(xiàn)的花生葉片組織的搗碎,減輕了研磨過程對(duì)花生葉片組織的浪費(fèi),更加適合用于花生葉片組織較少時(shí)提取花生葉片組織dna;同時(shí),相對(duì)于已有技術(shù)中使用自動(dòng)化樣品研磨儀器,降低了花生葉片dna的提取成本和節(jié)約了花生葉片組織的使用量;由于本發(fā)明實(shí)施例的方法,在離心管中將花生葉片組織搗碎之后,不需要轉(zhuǎn)移搗碎之后的花生葉片組織即可實(shí)現(xiàn)對(duì)花生葉片組織dna的提取,避免了已有技術(shù)中研缽的使用和清洗工作,提高了花生葉片組織的利用率,同時(shí)節(jié)省了液氮的使用量,保證了花生葉片組織dna的提取效果,而且離心管和移液槍槍頭均是成本較低的試驗(yàn)器常見器材,實(shí)現(xiàn)了花生葉片組織的快速、低成本搗碎,節(jié)省了試驗(yàn)成本。

本發(fā)明是參照根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法、設(shè)備(系統(tǒng))、和計(jì)算機(jī)程序產(chǎn)品的流程圖和/或方框圖來描述的。應(yīng)理解可由計(jì)算機(jī)程序指令實(shí)現(xiàn)流程圖和/或方框圖中的每一流程和/或方框、以及流程圖和/或方框圖中的流程和/或方框的結(jié)合??商峁┻@些計(jì)算機(jī)程序指令到通用計(jì)算機(jī)、專用計(jì)算機(jī)、嵌入式處理機(jī)或其他可編程數(shù)據(jù)處理設(shè)備的處理器,使得通過該計(jì)算機(jī)或其他可編程數(shù)據(jù)處理設(shè)備的處理器執(zhí)行的指令可實(shí)現(xiàn)流程圖中的一個(gè)流程或多個(gè)流程和/或方框圖一個(gè)方框或多個(gè)方框中指定的功能。

這些計(jì)算機(jī)程序指令也可存儲(chǔ)在能引導(dǎo)計(jì)算機(jī)或其他可編程數(shù)據(jù)處理設(shè)備以特定方式工作的計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)器中,使得存儲(chǔ)在該計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)器中的指令產(chǎn)生包括指令裝置的制造品,該指令裝置實(shí)現(xiàn)在流程圖一個(gè)流程或多個(gè)流程和/或方框圖一個(gè)方框或多個(gè)方框中指定的功能。

這些計(jì)算機(jī)程序指令也可裝載到計(jì)算機(jī)或其他可編程數(shù)據(jù)處理設(shè)備上,使得在計(jì)算機(jī)或其他可編程設(shè)備上執(zhí)行一系列操作步驟以產(chǎn)生計(jì)算機(jī)實(shí)現(xiàn)的處理,從而在計(jì)算機(jī)或其他可編程設(shè)備上執(zhí)行的指令提供用于實(shí)現(xiàn)在流程圖的一個(gè)流程或多個(gè)流程和/或方框圖的一個(gè)方框或多個(gè)方框中指定的功能的步驟。

盡管已描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例,但本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員一旦得知了基本創(chuàng)造性概念,則可對(duì)這些實(shí)施例做出另外的變更和修改。所以,所附權(quán)利要求意欲解釋為包括優(yōu)選實(shí)施例以及落入本發(fā)明范圍的所有變更和修改。

顯然,本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明實(shí)施例進(jìn)行各種改動(dòng)和變型而不脫離本發(fā)明實(shí)施例的精神和范圍。這樣,倘若本發(fā)明實(shí)施例的這些修改和變型屬于本發(fā)明權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi),則本發(fā)明也意圖包含這些改動(dòng)和變型在內(nèi)。

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