本發(fā)明發(fā)現(xiàn)一類新型1-氨基-2-羥基-3-四氫咔唑-丙烷類化合物，該類化合物可抑制多種腫瘤細(xì)胞的體內(nèi)外增殖；本發(fā)明發(fā)現(xiàn)該類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病，而傳統(tǒng)化療藥物的療效不佳，尋找新的抗腫瘤藥物是醫(yī)學(xué)研究的當(dāng)務(wù)之急。天然產(chǎn)物在抗腫瘤藥物發(fā)現(xiàn)過程中有著重要的作用和意義。本發(fā)明通過對(duì)天然產(chǎn)物來源的化合物進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)了一類新型1-氨基-2-羥基-3-四氫咔唑-丙烷類化合物，該類化合物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具體顯著治療作用，尤其是胃腸道腫瘤，效果明顯。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對(duì)上述技術(shù)問題提供了一類可抑制腫瘤的1-氨基-2-羥基-3-四氫咔唑-丙烷類化合物。

本發(fā)明另一個(gè)目的是提供上述化合物在制藥中的應(yīng)用。

本發(fā)明在體外細(xì)胞水平上尋找先導(dǎo)化合物，發(fā)現(xiàn)了一類結(jié)構(gòu)新穎的化合物，以細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)和小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該類化合物可抑制腫瘤細(xì)胞的體內(nèi)外增殖。本發(fā)明可為抗腫瘤藥物的開發(fā)提供先導(dǎo)化合物。

本發(fā)明的目的是通過下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一類新型1-氨基-2-羥基-3-四氫咔唑-丙烷類化合物，其結(jié)構(gòu)如通式(i)所示：

其中：

r代表c4-c7的環(huán)烷基、取代環(huán)烷基、芳基或取代芳基，所述取代基為烷基、鏈烯基、烷氧基、亞甲二氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵素、硝基、羥基、羥烷基、巰基、氰基、羧基、甲?；被?、烷氨基或二烷基氨基。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：首先在細(xì)胞水平上進(jìn)行初篩、復(fù)篩，發(fā)現(xiàn)一類體外可抑制腫瘤細(xì)胞的化合物；隨后以小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)該類化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞體內(nèi)生長的作用。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明在細(xì)胞水平上評(píng)價(jià)天然產(chǎn)物的抗腫瘤作用，隨后，以小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞體內(nèi)生長的抑制。經(jīng)初篩，復(fù)篩，發(fā)現(xiàn)了一類1-氨基-2-羥基-3-四氫咔唑-丙烷類化合物，對(duì)多種腫瘤細(xì)胞，尤其是胃腸道腫瘤細(xì)胞，具有良好的抑制作用。本發(fā)明篩選出的1-氨基-2-羥基-3-四氫咔唑-丙烷類化合物可為制備抗腫瘤藥提供更多選擇。

附圖說明

圖1：4號(hào)化合物抑制多種腫瘤細(xì)胞活性的抑制曲線(n＝3)；

圖2：14號(hào)化合物抑制多種腫瘤細(xì)胞活性的抑制曲線(n＝3)；

圖3：14號(hào)化合物抑制小鼠s180肉瘤的體內(nèi)增殖(n＝3)。

具體實(shí)施方式：

以下結(jié)合附圖說明

一、檢測方法

1.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

(1)取處于指數(shù)生長期狀態(tài)良好的人腫瘤細(xì)胞一瓶，消化后計(jì)數(shù)，取180μl細(xì)胞懸液接種于96孔板上，2-4×10³個(gè)/孔，置恒溫co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。

(2)第二天換入新鮮的培養(yǎng)液(含10％血清)，加入不同濃度的受試樣品，繼續(xù)培養(yǎng)72小時(shí)。

(3)將mtt試劑加入96孔板中，20μl/孔，培養(yǎng)箱中反應(yīng)4小時(shí)。

(4)吸去上清液，加入dmso，150μl/孔，平板搖床上振搖5分鐘。用酶聯(lián)免疫檢測儀在波長為570nm處測定每孔的吸光值，并計(jì)算細(xì)胞抑制。

2.小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)

(1)選擇腫瘤生長旺盛且無潰破的荷瘤小鼠，頸椎脫臼處死，在無菌條件下(超凈臺(tái)或接種罩)，用碘酒、酒精或新潔爾滅消毒動(dòng)物皮膚，切開皮膚，剝離腫瘤。

(2)將瘤組織剪切成1.5mm3左右的小塊，用套管針接種于動(dòng)物一側(cè)或雙側(cè)腋窩皮下。

(3)7天后處死動(dòng)物，稱體重，解剖剝離瘤塊，稱瘤重。

(4)計(jì)算體內(nèi)抑瘤率，按下式計(jì)算

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1.篩選得到的該類化合物結(jié)構(gòu)通式如下：

2.10μg/ml的樣品對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的抑制率(72h，％)如下：

3.樣品對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的抑制曲線及ic50值(72h)

根據(jù)初篩結(jié)果，選擇效果較好的4、14號(hào)樣品進(jìn)行復(fù)篩，作出樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制曲線。4號(hào)樣品對(duì)四種腫瘤細(xì)胞的抑制曲線如圖1所示，14號(hào)樣品對(duì)四種腫瘤細(xì)胞的抑制曲線如圖2所示。樣品的ic50值(μm)如下(n＝3)：

4.研究在細(xì)胞水平上效果最好的14號(hào)樣品對(duì)于小鼠s180肉瘤的作用。設(shè)高(40mg/kg)、中(20mg/kg)、低(10mg/kg)三組劑量，每2天腹腔注射給藥一次，連續(xù)給藥10d。于末次給藥后24h稱體重，剖取瘤塊，稱瘤重，計(jì)算抑瘤率，給藥組結(jié)果與對(duì)照組相比較，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)分析。15mg/kg的紫杉醇作為陽性對(duì)照。統(tǒng)計(jì)結(jié)果見圖3?？梢?，14號(hào)樣品對(duì)小鼠s180肉瘤具有較強(qiáng)的抑制作用，其中40mg/kg劑量作用較為明顯，并呈現(xiàn)劑量依賴性。對(duì)于s180肉瘤，高劑量組的藥效約為陽性藥紫杉醇的83％。