本發(fā)明屬于微生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域,特別是指一種空氣中細(xì)菌或病毒在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)方法。
背景技術(shù):
空氣傳播是一些致病菌或病毒傳播的主要途徑,也是目前環(huán)境中最難以檢測(cè)和控制的途徑。
從2003年給全球帶來(lái)巨大沖擊的sars疫情,到2009年影響國(guó)內(nèi)的h1n1和2013年爆發(fā)的禽流感疫情,都是可通過(guò)空氣傳播的病毒性疾病。以sars病毒為例:病毒主要存在于傳染源(人或動(dòng)物)的鼻涕、痰和唾液中,通過(guò)空氣飛沫和接觸傳播?;颊咄ㄟ^(guò)咳嗽、打噴嚏、甚至大聲說(shuō)話時(shí)都會(huì)將病毒隨唾液飛沫、塵埃粒子等擴(kuò)散到周?chē)目諝庵校S空氣流動(dòng)傳播。
sars初期之所以造成大量人員感染特別是醫(yī)護(hù)人員帶來(lái)巨大犧牲,除防護(hù)措施的原因外,很大程度上是由于空氣中的病毒難以監(jiān)測(cè)和防范造成的。
sars疫情雖然過(guò)去十幾年了,但它給社會(huì)生活帶來(lái)的巨大影響和社會(huì)的恐慌情緒讓我們記憶猶新。時(shí)至今日,對(duì)于空氣中有害微生物的預(yù)警與監(jiān)測(cè)仍然缺乏有效的工具和方法?,F(xiàn)有檢測(cè)儀器及檢測(cè)方法程序復(fù)雜,耗時(shí)較長(zhǎng),難以及時(shí)提供疫情現(xiàn)場(chǎng)準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)信息以便迅速采取防范措施。
隨著社會(huì)的發(fā)展,不同國(guó)家、地區(qū)人們的交往越來(lái)越頻繁,因此公共交通工具、交通站點(diǎn)、學(xué)校、醫(yī)院、商場(chǎng)、寫(xiě)字樓等人流密集的封閉區(qū)域已經(jīng)成為空氣中傳播疾病的主要場(chǎng)所。特別是在醫(yī)院中,院內(nèi)交叉感染一直是令醫(yī)院頭疼的問(wèn)題。
當(dāng)禽流感病毒流行時(shí),因?yàn)闆](méi)有快速檢測(cè)裝置,政府往往在沒(méi)有直接證據(jù)情況下對(duì)家禽養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行盲目地?fù)錃ⅲo政府和養(yǎng)殖場(chǎng)都造成巨大損失。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是提供一種空氣中細(xì)菌或病毒在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)方法,以解決不能對(duì)空氣中細(xì)菌或病毒進(jìn)行預(yù)警或監(jiān)測(cè)的問(wèn)題,以實(shí)現(xiàn)對(duì)空氣中的細(xì)菌或病毒進(jìn)行迅速準(zhǔn)確的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
一種空氣中細(xì)菌或病毒在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)方法,
使用在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)裝置,包括加樣控制裝置、pcr擴(kuò)增裝置、檢測(cè)裝置及自動(dòng)控制裝置,還包括加壓裝置及負(fù)壓裝置;包括以下步驟:
1)開(kāi)啟在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)裝置,根據(jù)待檢測(cè)的對(duì)象及對(duì)應(yīng)的pcr試劑盒要求,預(yù)設(shè)置pcr擴(kuò)增程序,然后插入一體化采樣盒;
2)設(shè)置取樣體積,然后開(kāi)啟所述負(fù)壓裝置,自動(dòng)采集樣品至設(shè)置取樣體積;
3)靜置設(shè)置時(shí)間,所負(fù)壓裝置啟動(dòng),將采樣區(qū)的液體吸入廢液瓶,吸附了dna或rna的顆粒被截留在所述采樣區(qū)的過(guò)濾介質(zhì)上;
4)開(kāi)啟所述加壓裝置,在所述采樣區(qū)加入dna或rna洗脫液,將所述顆粒上的所述dna或所述rna洗脫下;
5)通過(guò)所述加樣控制裝置,將洗脫下所述dna或所述rna的洗脫液加入到所述pcr擴(kuò)增裝置通過(guò)所述預(yù)設(shè)置pcr擴(kuò)增程序進(jìn)行pcr擴(kuò)增;
6)將擴(kuò)增后的樣品通過(guò)檢測(cè)裝置進(jìn)行檢測(cè)后,輸出檢測(cè)結(jié)果。
所述采樣一體化采樣盒與所述加樣控制裝置通過(guò)管路連接;所述加樣控制裝置與所述pcr擴(kuò)增裝置配合;
所述自動(dòng)控制裝置分別與所述加樣控制裝置、所述pcr擴(kuò)增裝置、所述檢測(cè)裝置、所述加壓裝置及所述負(fù)壓裝置電連接;
所述加壓裝置與所述負(fù)壓裝置均與所述采樣一體化采樣盒通過(guò)管路連接。
所述采樣一體化采樣盒包括采樣容器、洗脫液存儲(chǔ)容器及廢液缸;洗脫液存儲(chǔ)容器與所述采樣容器通過(guò)管路連接;所述廢液缸與所述采樣容器的底部通過(guò)管路連接;
在所述采樣容器與所述洗脫液存儲(chǔ)容器之間的管路上設(shè)置有所述加壓裝置;
所述采樣容器與所述廢液缸分別通過(guò)管路與所述負(fù)壓裝置連接;
在所述采樣容器內(nèi)設(shè)置有多孔空氣分布器及過(guò)濾器;所述多孔空氣分布器的入口與連接所述采樣容器與所述負(fù)壓裝置的管路連接,所述過(guò)濾器設(shè)置于所述采樣容器的底部出口處,在所述采樣容器內(nèi)設(shè)置有吸附液,所述多孔空氣分布器的出氣口低于所述吸附液的液面;所述吸附液由微生物裂解液及吸附粒子組成;
在所述洗脫液存儲(chǔ)容器內(nèi)設(shè)置有洗脫液。
在所述吸附液中,所述微生物裂解液與所述吸附粒子的體積比為10-20:1。
所述加壓裝置為第一蠕動(dòng)泵,所述負(fù)壓裝置為真空泵。
還包括插撥式接口裝置,用于采樣一體化采樣盒的快速插撥。
所述加樣控制裝置包括第二蠕動(dòng)泵及單向閥;所述第二蠕動(dòng)泵的出口與所述pcr擴(kuò)增裝置相對(duì)應(yīng),所述第二蠕動(dòng)泵的入口與所述單向閥的出口通過(guò)管路連接;所述單向閥的入口通過(guò)管路與所述采樣容器的底部出口連接。
所述pcr擴(kuò)增裝置包括加樣板、pcr試劑盒及pcr溫度控制裝置,所述加樣板與所述pcr試劑盒連通,所述pcr試劑盒與所述pcr溫度控制裝置連接。
所述檢測(cè)裝置包括激發(fā)光發(fā)射器、熒光接收器及人機(jī)對(duì)話系統(tǒng);所述激發(fā)光發(fā)射器與所述熒光接收器相對(duì)設(shè)置于所述pcr擴(kuò)增裝置的檢測(cè)區(qū),所述激發(fā)光發(fā)射器與所述熒光接收器均與所述人機(jī)對(duì)話系統(tǒng)電連接,所述人機(jī)對(duì)話系統(tǒng)與所述自動(dòng)控制裝置電連接。
所述自動(dòng)檢測(cè)裝置包括中央控制器,所述中央控制器為程序控制器、單片機(jī)或工控機(jī)中的一種;
所述自動(dòng)檢測(cè)裝置還包括藍(lán)牙接口、無(wú)線wifi接口、以太網(wǎng)接口、usb接口、rs232串口或rs485串口中的一種或多種組合。
本發(fā)明的有益效果是:
本技術(shù)方案的細(xì)菌或病毒在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)方法,包括負(fù)壓抽氣、微生物在線采集、空氣微生物吸附、dna或rna在線提取、dna在線擴(kuò)增及檢測(cè)等部件,通過(guò)采集空氣中的微生物粒子,在液體中進(jìn)行實(shí)時(shí)裂解、提取dna(或rna),通過(guò)pcr擴(kuò)增后,進(jìn)行在線實(shí)時(shí)檢測(cè)。
本技術(shù)方案通過(guò)采樣、提取及檢測(cè)集合于一體,能將采集的樣品分別分析,并適合測(cè)定單位體積空氣中不同種類(lèi)微生物數(shù)量。
本技術(shù)方案開(kāi)發(fā)出的新型的空氣微生物采樣檢測(cè)儀器,結(jié)合生物芯片或熒光定量pcr技術(shù),可快速、靈敏地檢測(cè)出空氣中可能存在的致病微生物。該裝置主要由負(fù)壓吸氣裝置(手持式或真空泵)、空氣流量計(jì)、吸附液及吸附粒子組成。利用抽氣裝置,通過(guò)負(fù)壓吸附空氣,以每分鐘恒定氣流量,經(jīng)過(guò)液體采集區(qū),在溶液和溶液內(nèi)的吸附粒子的作用下,使空氣中的病毒粒子收集在小體積的液體中,同時(shí)裂解收集的微生物,釋放微生物dna(rna),吸附在吸附粒子上。然后通過(guò)在線過(guò)濾,收集液體中的粒子,用市售的dna(rna)洗脫液洗脫dna(rna),然后采用pcr技術(shù)檢測(cè)微生物量,測(cè)定的拷貝數(shù)除以吸附的空氣體積,即檢測(cè)所得的單位空氣中的微生物數(shù)量。
附圖說(shuō)明
圖1為本發(fā)明裝置的結(jié)構(gòu)示意圖;
圖2為本發(fā)明采樣一體化采樣盒工作示意圖。
附圖標(biāo)記說(shuō)明
1真空泵,2第一電磁閥,3采樣容器,4第一蠕動(dòng)泵,5洗脫液存儲(chǔ)容器,6洗脫液,7吸附液,8第二蠕動(dòng)泵,9單向閥,10第二電磁閥,11廢液缸,12激發(fā)光發(fā)射器,13熒光接收器,14人機(jī)對(duì)話系統(tǒng),15加樣板,16pcr溫度控制裝置,17過(guò)濾器。
具體實(shí)施方式
以下通過(guò)實(shí)施例來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案,以下的實(shí)施例僅是示例性的,僅能用來(lái)解釋和說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案,而不能解釋為是對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的限制。
本發(fā)明開(kāi)發(fā)出新型的空氣微生物采樣檢測(cè)儀器,結(jié)合生物芯片或熒光定量pcr技術(shù),可快速、靈敏地檢測(cè)出空氣中可能存在的致病微生物。該裝置主要由負(fù)壓吸氣裝置(手持式或真空泵)、空氣流量計(jì)、吸附液及吸附粒子組成。利用抽氣裝置,通過(guò)負(fù)壓吸附空氣,以每分鐘恒定氣流量,經(jīng)過(guò)液體采集區(qū),在溶液和溶液內(nèi)的吸附粒子的作用下,使空氣中的病毒粒子收集在小體積的液體中,同時(shí)裂解收集的微生物,釋放微生物dna(rna),吸附在吸附粒子上。然后通過(guò)在線過(guò)濾,收集液體中的粒子,用市售的dna(rna)洗脫液洗脫dna(rna),然后采用pcr技術(shù)檢測(cè)微生物量,測(cè)定的拷貝數(shù)除以吸附的空氣體積,即檢測(cè)所得的單位空氣中的微生物數(shù)量。
目前的市場(chǎng)上該類(lèi)采樣器只適用于高濃度的空氣微生物采樣,對(duì)于較低密度的病毒,由于空氣在較小體積的液體中的停留時(shí)間等因素的限制,無(wú)法捕集微小病毒粒子,因此靈敏度不高,同時(shí)也不能在線測(cè)定。本發(fā)明通過(guò)采樣、提取及檢測(cè)集合于一體,能將采集的樣品分別分析,并適合測(cè)定單位體積空氣中不同種類(lèi)微生物數(shù)量。
本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N空氣中細(xì)菌或病毒在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)裝置,如圖1和圖2所示,包括采樣一體化采樣盒、加樣控制裝置、pcr擴(kuò)增裝置、檢測(cè)裝置及自動(dòng)控制裝置,還包括與采樣一體化采樣盒相配合的加壓裝置及負(fù)壓裝置。
采樣一體化采樣盒與加樣控制裝置通過(guò)管路連接;加樣控制裝置與pcr擴(kuò)增裝置配合;本申請(qǐng)的采樣一體化采樣盒通過(guò)插撥式接口裝置,用于采樣一體化采樣盒的快速插撥。
自動(dòng)控制裝置分別與加樣控制裝置、pcr擴(kuò)增裝置、檢測(cè)裝置、加壓裝置及負(fù)壓裝置電連接;自動(dòng)檢測(cè)裝置包括中央控制器,中央控制器為程序控制器、單片機(jī)或工控機(jī)中的一種,通過(guò)編程實(shí)現(xiàn)從空氣采樣到檢測(cè)出微生物種類(lèi)及濃度全自動(dòng)進(jìn)行。
自動(dòng)檢測(cè)裝置還包括藍(lán)牙接口、無(wú)線wifi接口、以太網(wǎng)接口、usb接口、rs232串口或rs485串口中的一種或多種組合,通過(guò)有線或無(wú)線方式與上位機(jī)或移動(dòng)終端通訊,實(shí)現(xiàn)對(duì)本裝置的遠(yuǎn)程監(jiān)控,檢測(cè)人員無(wú)需深入疫區(qū)便可得到檢測(cè)結(jié)果,避免了檢測(cè)人員被感染的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí),這些接口可以與其它設(shè)備如上位機(jī)、手機(jī)等進(jìn)行通訊,使檢測(cè)結(jié)果可被其它設(shè)備應(yīng)用,自動(dòng)檢測(cè)裝置還可以被其它設(shè)備所控制,也可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)的遠(yuǎn)程傳輸或云端管理以及對(duì)自動(dòng)檢測(cè)裝置的遠(yuǎn)程控制。
加壓裝置與負(fù)壓裝置均與采樣一體化采樣盒通過(guò)管路連接。
加壓裝置為第一蠕動(dòng)泵4;在本申請(qǐng)中負(fù)壓裝置為真空泵1。
采樣一體化采樣盒包括采樣容器3、洗脫液存儲(chǔ)容器5及廢液缸11;洗脫液存儲(chǔ)容器與采樣容器通過(guò)管路連接;廢液缸與采樣容器的底部通過(guò)管路連接。在采樣一體化采樣盒中,液體的流動(dòng)通過(guò)氣壓控制,管路上通過(guò)單向閥控制氣體流動(dòng)方向,從而控制采樣容器、洗脫液存儲(chǔ)容器或廢液缸中的壓力,實(shí)現(xiàn)液體(吸附液或洗脫液)的定向流動(dòng)。
在采樣容器與洗脫液存儲(chǔ)容器之間的管路上設(shè)置有加壓裝置;
采樣容器3與廢液缸分別通過(guò)管路與負(fù)壓裝置連接;在本申請(qǐng)中,負(fù)壓裝置為真空泵1,在真空泵與采樣容器之間設(shè)置有第一電磁閥2,在真空泵與廢液缸之間設(shè)置有第二電磁閥10;第一電磁閥與第二電磁閥均與自動(dòng)控制裝置電連接,通過(guò)自動(dòng)控制裝置控制第一電磁閥和第二電磁閥的開(kāi)啟或關(guān)閉。
在采樣容器內(nèi)設(shè)置有多孔空氣分布器及過(guò)濾器17;多孔空氣分布器的入口與連接采樣容器與負(fù)壓裝置的管路連接,過(guò)濾器設(shè)置于采樣容器的底部出口處,在采樣容器內(nèi)設(shè)置有吸附液7,多孔空氣分布器的出氣口低于吸附液的液面;多孔空氣分布器的出氣口通過(guò)多個(gè)細(xì)孔方式將抽入的帶菌空氣分布到吸附液中,為了防止氣流太大,直接短路沖出液體,多個(gè)細(xì)孔將帶菌空氣分布成小氣泡,增加帶菌空氣與吸附液的接觸面積,提高吸附空氣中微生物的效率。
吸附液由微生物裂解液及吸附粒子組成。
在洗脫液存儲(chǔ)容器5內(nèi)設(shè)置有洗脫液6,在本申請(qǐng)中,洗脫液為dna(rna)洗脫液,均為市售的dna(rna)洗脫液。
在吸附液中,微生物裂解液與吸附粒子的體積比為10-20:1。
吸附粒子為dna吸附粒子或rna吸附粒子。
吸附液在采樣容器中的高徑比為6:1-3:1。
在本申請(qǐng)中,微生物裂解液采用磷酸鹽緩沖液pbs,配置方法為,將nacl、kcl、na2hpo4和kh2po4,溶于蒸餾水中,用hcl調(diào)節(jié)溶液的ph值至7.4,最后加蒸餾水定容即可,并在121℃高壓下蒸氣滅菌20分鐘,保存存于室溫或4℃冰箱中。
例如,8gnacl、0.2gkcl、1.44gna2hpo4和0.24gkh2po4,溶于800ml蒸餾水中,用hcl調(diào)節(jié)溶液的ph值至7.4,最后加蒸餾水定容至1l即可。121℃高壓下蒸氣滅菌20分鐘,保存存于室溫或4℃冰箱中。
在本申請(qǐng)中,廣譜高效吸附液組成:1mlpbs溶液中添加粒徑分布為10-30毫克直徑為10-200nm的殼聚糖納米粒子。
在本申請(qǐng)中,如采用特異性吸附液組成,1mlpbs溶液中添加粒徑分布為10-30.毫克直徑為10-200nm的表面帶有流感病毒抗體修飾的納米粒子。
在本申請(qǐng)中,dna吸附粒子或rna吸附粒子均可以為市售的吸附樹(shù)脂,如上海生工或北京全式金等公司生產(chǎn)的dna(rna)吸附樹(shù)脂。
加樣控制裝置包括第二蠕動(dòng)泵8及單向閥9;第二蠕動(dòng)泵的出口與pcr擴(kuò)增裝置相對(duì)應(yīng),第二蠕動(dòng)泵的入口與單向閥的出口通過(guò)管路連接;單向閥的入口通過(guò)管路與采樣容器的底部出口連接。在本申請(qǐng)的加樣板的加樣區(qū),采用第二蠕動(dòng)泵進(jìn)行加樣,采用計(jì)滴器進(jìn)行加樣量的計(jì)量。
pcr擴(kuò)增裝置包括加樣板15、pcr試劑盒及pcr溫度控制裝置16,加樣板與pcr試劑盒連通,pcr試劑盒與pcr溫度控制裝置連接。在pcr試劑盒中添加液體石蠟對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行密封。本申請(qǐng)的pcr試劑盒為市售的pcr試劑盒。
檢測(cè)裝置包括激發(fā)光發(fā)射器12、熒光接收器13及人機(jī)對(duì)話系統(tǒng)14;激發(fā)光發(fā)射器與熒光接收器相對(duì)設(shè)置于pcr擴(kuò)增裝置的檢測(cè)區(qū),熒光發(fā)射器與熒光接收器均與人機(jī)對(duì)話系統(tǒng)電連接,人機(jī)對(duì)話系統(tǒng)與自動(dòng)控制裝置電連接。同時(shí)人機(jī)對(duì)話系統(tǒng)還可以設(shè)定相關(guān)檢測(cè)參數(shù)及設(shè)備維護(hù)管理。
具體的工作原理是:
根據(jù)檢測(cè)對(duì)象及pcr試劑盒要求,設(shè)置pcr擴(kuò)增程序,插入采樣一體化采樣盒;設(shè)置好采樣體積,然后開(kāi)啟裝置,自動(dòng)控制裝置會(huì)控制真空泵啟動(dòng),實(shí)現(xiàn)自動(dòng)采樣至設(shè)定體積;通過(guò)靜置2分鐘后,自動(dòng)控制裝置控制真空泵再次啟動(dòng),使廢液缸中為負(fù)壓,將采樣容器中的液體吸入到廢液缸,吸附了dna(rna)的顆粒截止在采樣容器中的過(guò)濾介質(zhì)上;自動(dòng)控制裝置控制第一蠕動(dòng)泵啟動(dòng),為洗脫液存儲(chǔ)容器加壓,將dna(rna)洗脫液壓入到采樣容器中,將明附粒子上吸附的dna(rna)洗脫下,通過(guò)單向閥及第二蠕動(dòng)泵將洗脫下的dna(rna)的洗脫液加入到預(yù)先加有市售dna(rna)檢測(cè)樣品pcr試劑盒中,并根據(jù)pcr試劑盒的要求預(yù)設(shè)的程序進(jìn)行pcr擴(kuò)增;擴(kuò)增后的樣品通過(guò)檢測(cè)區(qū)的檢測(cè)裝置檢測(cè)后,輸出結(jié)果給自動(dòng)控制裝置,獲得微生物的種類(lèi)信濃度,并將檢測(cè)結(jié)果通過(guò)有線或無(wú)線通訊傳遞給上位機(jī)或移動(dòng)終端。
在本申請(qǐng)中,所有的開(kāi)啟動(dòng)作均由自動(dòng)控制裝置控制各裝置自動(dòng)完成,運(yùn)動(dòng)部分采用步進(jìn)電機(jī)由自動(dòng)控制裝置控制完成。
本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N空氣中細(xì)菌或病毒在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)方法,
使用在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)裝置,包括以下步驟:
1)開(kāi)啟在線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)裝置,進(jìn)行開(kāi)機(jī)預(yù)熱,根據(jù)待檢測(cè)的對(duì)象及對(duì)應(yīng)的pcr試劑盒要求,預(yù)設(shè)置pcr擴(kuò)增程序,然后插入一體化采樣盒,在本申請(qǐng)中,所有耗材均需要無(wú)菌處理。
2)設(shè)置取樣體積,然后開(kāi)啟負(fù)壓裝置,在本實(shí)施例中,負(fù)壓裝置為真空泵,自動(dòng)采集樣品至設(shè)置取樣體積。
3)靜置設(shè)置時(shí)間,在本實(shí)施例中選用靜置2分鐘,所負(fù)壓裝置啟動(dòng),將采樣區(qū)的液體吸入廢液瓶,吸附了dna或rna的顆粒被截留在采樣區(qū)的過(guò)濾介質(zhì)上。
4)開(kāi)啟加壓裝置,在本實(shí)施例中,加壓裝置為第一蠕動(dòng)泵,在采樣區(qū)加入dna或rna洗脫液,將顆粒上的dna或rna洗脫下。
5)通過(guò)加樣控制裝置,將洗脫下dna或rna的洗脫液加入到pcr擴(kuò)增裝置通過(guò)預(yù)設(shè)置pcr擴(kuò)增程序進(jìn)行pcr擴(kuò)增。
6)將擴(kuò)增后的樣品通過(guò)檢測(cè)裝置進(jìn)行檢測(cè)后,輸出檢測(cè)結(jié)果,獲得微生物的種類(lèi)及濃度。
實(shí)施例1
液體采集區(qū)的液體添加1ml市售dna(rna)吸附粒子,分別用0.01mol/l的naoh和hcl調(diào)節(jié)溶液的ph至6-8,進(jìn)行空氣中流感病毒的采集實(shí)驗(yàn)。將鼠肺適應(yīng)株甲型流感病毒經(jīng)雞胚復(fù)壯后,用0.1mol/l的磷酸鹽溶液配置成100000個(gè)病毒/ml溶液,然后向體積約50m3的密閉空間中,用空氣分布器在空氣中噴灑病毒,具體的病毒粒子數(shù)根據(jù)噴霧器中液體的減少量計(jì)算(空氣中的病毒粒子約為1000個(gè)/m3)。液體采集區(qū)的液體體積15ml,高徑比為3:1,采用不同方式采集0.1m3的流感病毒,分兩次進(jìn)行采樣檢測(cè)實(shí)驗(yàn),每次三個(gè)批次,實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表1)。pcr試劑盒采用市售的h1n1定量試劑盒檢測(cè)。
表1空氣中病毒粒子的采集結(jié)果
注:采樣方式,噴霧后,立刻用線采集及在線自動(dòng)檢測(cè)裝置分別在房間的四個(gè)角落和中間位置離地1.6m處同時(shí)取樣,然后計(jì)算平均值,在表1中1個(gè)病毒為1個(gè)copy。
實(shí)施例2
液體采集區(qū)的液體添加1ml市售dna(rna)吸附粒子,分別用0.01mol/l的naoh和hcl調(diào)節(jié)溶液的ph至6-8,進(jìn)行空氣中大腸桿菌的采集實(shí)驗(yàn)。將大腸桿菌dh5α采用常規(guī)方法培養(yǎng)至濃度為5×106后,用0.1mol/l的磷酸鹽溶液配置成100000個(gè)細(xì)胞/ml溶液,然后向體積約50m3的密閉空間中,用空氣分布器在空氣中噴灑病毒,具體的微生物粒子數(shù)根據(jù)噴霧器中液體的減少量計(jì)算(空氣中的微生物細(xì)胞濃度約為1000個(gè)/m3)。液體采集區(qū)的液體體積15ml,高徑比為3:1,采用不同方式采集0.1m3的大腸桿菌,分兩次進(jìn)行采樣檢測(cè)實(shí)驗(yàn),每次三個(gè)批次,實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表2)。采用市售的大腸桿菌pcr定量檢測(cè)試劑盒檢測(cè)。
表2空氣中大腸桿菌的采集結(jié)果
注:注:采樣方式,噴霧后,立刻用采樣器分別在房間的四個(gè)角落和中間位置離地1.6m處同時(shí)取樣,然后計(jì)算平均值。在表2中1個(gè)大腸菌群為1個(gè)pfu。
以上僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式的描述,應(yīng)當(dāng)指出,由于文字表達(dá)的有限性,而在客觀上存在無(wú)限的具體結(jié)構(gòu),對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō),在不脫離本發(fā)明原理的前提下,還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾,這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。