本發(fā)明涉及微生物活體保存的研究領(lǐng)域，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種車輪蟲活體保存方法。
背景技術(shù)：
：車輪蟲可寄生于各種淡水魚，引發(fā)多種車輪蟲病癥。車輪蟲病在全國(guó)各個(gè)地區(qū)和一年四季均有發(fā)生。車輪蟲引發(fā)的危害多發(fā)4月至7月間，期間水溫維持在20至28℃左右，車輪蟲大量繁殖導(dǎo)致各類淡水魚的魚苗及魚種被感染，嚴(yán)重時(shí)可引發(fā)魚苗和魚種的大量死亡。車輪蟲通過(guò)接觸傳播，離開魚體的車輪蟲可以通過(guò)水、水中生物等各種介質(zhì)轉(zhuǎn)移寄主而傳播。引起車輪蟲病爆發(fā)的因素主要有，水質(zhì)不良、食料不足、放養(yǎng)過(guò)密等。關(guān)于車輪蟲的研究既具有理論意義，又具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值，故而其一直是水生生物研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。科研用車輪蟲一般都需要現(xiàn)采集，車輪蟲的活體采集和保存是對(duì)其進(jìn)行研究的第一步，也是關(guān)鍵的一步。由于車輪蟲發(fā)病期集中在4-7月間，所以關(guān)于車輪蟲的采集和研究主要集中在4-7月間，患病魚類的供應(yīng)出現(xiàn)中斷，就會(huì)導(dǎo)致其研究中斷，給對(duì)于車輪蟲的研究造成了很大的困擾。故而，建立一種過(guò)程簡(jiǎn)單，存活率高的車輪蟲活體保存方法是很有必要的。水螅作為車輪蟲的寄主之一，具有生存活力強(qiáng)，繁殖速度快等優(yōu)點(diǎn)，是車輪蟲活體保存的良好的寄主。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題，并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一種操作簡(jiǎn)單，可重復(fù)性強(qiáng)，車輪蟲保存時(shí)間長(zhǎng)且車輪蟲的保存量大的車輪蟲活體保存方法。為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，提供了一種車輪蟲活體保存方法，將車輪蟲及水螅按數(shù)量比5～20:1共同培養(yǎng)。優(yōu)選地，所述共同培養(yǎng)具體包括以下步驟：s1：將車輪蟲與水螅按數(shù)量比5～20:1投入盛水的透光保存容器，并用透氣材料將所述保存容器封口，并保證每一只水螅對(duì)應(yīng)3-5cm2的水面；s2：每隔2天，投水蚤至保存容器，水蚤的量設(shè)置為：每只水螅對(duì)應(yīng)4只水蚤；s3：對(duì)車輪蟲及水螅進(jìn)行每24h計(jì)數(shù)一次并維持?jǐn)?shù)量比5～20:1。優(yōu)選地，所述車輪蟲與水螅的數(shù)量比為10:1。優(yōu)選地，所述的車輪蟲活體保存方法還包括：每隔24小時(shí)操作一次的沖洗步驟，具體包括：s4：用10-5-10-7mol/l的中性紅將車輪蟲從水螅體沖刷下來(lái)，將混有車輪蟲的中性紅收集，在轉(zhuǎn)速800-1000r/min條件下，離心3-5min回收車輪蟲；s5：將車輪蟲用水重懸，將車輪蟲重懸液在轉(zhuǎn)速800-1000r/min條件下，離心3-5min回收車輪蟲，重復(fù)該步驟兩次；s6：用水將水螅的體表沖刷三次；s7：將s5得到的車輪蟲和s6得到的水螅重新共同培養(yǎng)。優(yōu)選地，所述保存容器為燒杯，所述透氣材料為紗布。優(yōu)選地，所述s1中，當(dāng)用透氣材料將所述保存容器封口后，將保存容器放置于設(shè)定條件培養(yǎng)，所述設(shè)定條件為：恒溫21-22℃，循環(huán)光照射，所述循環(huán)光的一個(gè)循環(huán)設(shè)置為：先光照18h,再黑暗6h。本發(fā)明至少包括以下有益效果：一、本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)中車輪蟲病的季節(jié)性問(wèn)題導(dǎo)致其研究中斷的問(wèn)題，創(chuàng)造性的將被動(dòng)采集轉(zhuǎn)變?yōu)榱酥鲃?dòng)的培養(yǎng)并保存的技術(shù)，是一種可廣泛應(yīng)用于車輪蟲的研究中的車輪蟲活體保存技術(shù)。二、本發(fā)明應(yīng)用到的儀器及設(shè)備均是實(shí)驗(yàn)室中比較常見(jiàn)的，操作也不復(fù)雜，可重復(fù)性也強(qiáng)，沒(méi)有復(fù)雜的高端設(shè)備，是一種操作簡(jiǎn)單的、可重復(fù)性強(qiáng)的車輪蟲活體保存技術(shù)。三、本發(fā)明使用水螅作為車輪蟲的寄主，水螅的生命力強(qiáng)，繁殖速度快，因而車輪蟲的生存條件得到了好的保證，在維持二者數(shù)量比和良好的生存條件的情況下，車輪蟲在水螅體表可以一直繼代培養(yǎng)并大量繁殖，是一種車輪蟲保存時(shí)間長(zhǎng)且保存量大的車輪蟲活體保存技術(shù)。本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過(guò)下面的說(shuō)明體現(xiàn)，部分還將通過(guò)對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。附圖說(shuō)明圖1為實(shí)驗(yàn)二中實(shí)驗(yàn)組車輪蟲的數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間變化的圖；圖2為試驗(yàn)二中實(shí)驗(yàn)組車輪蟲的增長(zhǎng)率隨培養(yǎng)時(shí)間變化的圖；圖3為試驗(yàn)二中實(shí)驗(yàn)組水螅的存活率與隨培養(yǎng)時(shí)間變化的圖；圖4為實(shí)驗(yàn)二中對(duì)照組車輪蟲的數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間變化的圖；圖5為試驗(yàn)二中對(duì)照組車輪蟲的增長(zhǎng)率隨培養(yǎng)時(shí)間變化的圖；圖6為試驗(yàn)二中對(duì)照組水螅的存活率與隨培養(yǎng)時(shí)間變化的圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書文字能夠據(jù)以實(shí)施。需要說(shuō)明的是，下述實(shí)施方案中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法，所述試劑和材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑獲得；在本發(fā)明的描述中，術(shù)語(yǔ)“橫向”、“縱向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“頂”、“底”、“內(nèi)”、“外”等指示的方位或位置關(guān)系為基于附圖所示的方位或位置關(guān)系，僅是為了便于描述本發(fā)明和簡(jiǎn)化描述，并不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構(gòu)造和操作，因此不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。如圖1-6所示，本發(fā)明提供了一種車輪蟲活體保存方法，將車輪蟲及水螅按數(shù)量比5～20:1共同培養(yǎng)。本發(fā)明通過(guò)試驗(yàn)一論證了，當(dāng)車輪蟲及水螅按數(shù)量比5～20:1時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間24h，水螅的存活率在70％以上且車輪蟲的存活率在90％以上。在24h內(nèi)，在數(shù)量比5～20:1內(nèi)，車輪蟲和水螅能維持一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的生存狀態(tài)。本發(fā)明選用水螅作為車輪蟲的活體保存載體，一是因?yàn)樗５呐囵B(yǎng)方法簡(jiǎn)單，是實(shí)驗(yàn)室常用的試驗(yàn)生物之一；二是因?yàn)樗５拇婊钅芰?qiáng)；三是因?yàn)樗５姆敝乘俣瓤?。而在魚的體表對(duì)車輪蟲進(jìn)行活體保存，一方面造成了水產(chǎn)資源的浪費(fèi)，另一方面魚類對(duì)生存環(huán)境的要求比水螅要高，對(duì)于車輪蟲和魚類的混合培養(yǎng)的研究更加復(fù)雜?；谝陨显?，選擇了水螅為車輪蟲活體保存的寄主。水螅肉眼可見(jiàn)，故試驗(yàn)人員可以直接通過(guò)觀察計(jì)數(shù)。而車輪蟲的個(gè)體比較小，較難通過(guò)觀察計(jì)數(shù)，但其主要寄居在寄主體表，故我們選擇在顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)。車輪蟲的計(jì)數(shù)方法為:直接取出水螅，放入顯微鏡下觀察水螅體表的車輪蟲并計(jì)數(shù)。本發(fā)明選擇水螅中的褐水螅作為寄主，但不僅僅限于此，凡是應(yīng)用本發(fā)明的方法對(duì)車輪蟲進(jìn)行保存所選擇的任一種水螅均在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。在本發(fā)明中，水螅的食物為水蚤，這只是一個(gè)優(yōu)選方案，但不僅僅限于此，凡是能夠維持水螅生長(zhǎng)的食物均在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。本發(fā)明選擇中華杜氏車輪蟲作為代表進(jìn)行研究，但不僅僅限于此，凡是適用本發(fā)明進(jìn)行活體保存的車輪蟲均在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。所述共同培養(yǎng)具體包括以下步驟：s1：將車輪蟲與水螅按數(shù)量比5～20:1投入盛水的透光保存容器，并用透氣材料將所述保存容器封口，并保證每一只水螅對(duì)應(yīng)3-5cm2的水面；s2：每隔2天，投水蚤至保存容器，水蚤的量設(shè)置為：每只水螅對(duì)應(yīng)4只水蚤；s3：對(duì)車輪蟲及水螅進(jìn)行每24h計(jì)數(shù)一次并維持?jǐn)?shù)量比5～20:1。現(xiàn)有技術(shù)中，在對(duì)水螅進(jìn)行養(yǎng)殖時(shí)，每3日投放的水蚤的量設(shè)置為：每只水螅對(duì)應(yīng)3只水蚤；在車輪蟲及水?；旌吓囵B(yǎng)的過(guò)程中，為了保持水螅的生存活力，將投放水蚤的時(shí)間改為每隔2天投放一次且投放量為：每只水螅對(duì)應(yīng)4只水蚤。本發(fā)明在s1中給水螅的進(jìn)食間隔時(shí)間設(shè)置為2天且投放量為：每只水螅對(duì)應(yīng)4只水蚤，但不僅僅限于此，凡是能夠維持水螅生長(zhǎng)的進(jìn)食間隔時(shí)間均在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。因?yàn)楸景l(fā)明中車輪蟲會(huì)寄生在水螅上，必然會(huì)影響到水螅的營(yíng)養(yǎng)狀況及健康狀況，加大投食頻率和投食量，可以幫助水?；謴?fù)其生存狀態(tài)。需要說(shuō)明的是，在投放水蚤后一段時(shí)間內(nèi)，需要對(duì)水螅進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)其已經(jīng)將糞便排泄出時(shí)候，此時(shí)立即將其糞便及死亡的水蚤清除，以免造成培養(yǎng)環(huán)境的惡化，影響車輪蟲和水螅的生存。維持車輪蟲與水螅的數(shù)量比，避免因?yàn)檐囕喯x數(shù)目過(guò)多，導(dǎo)致二者之間的平衡狀態(tài)被破壞。所述s3中的計(jì)數(shù)時(shí)間為24小時(shí)/次，是因?yàn)檐囕喯x的繁殖周期為24h，也可以根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)縮短或者拉長(zhǎng)所述s3中的計(jì)數(shù)時(shí)間。因?yàn)樗Ｊ俏皆谒械母街锷?，位于水面生存，故而本試?yàn)設(shè)置鵝卵石于保存容器中，讓水稍稍沒(méi)過(guò)鵝卵石即可。保證每一只水螅對(duì)應(yīng)3-5cm2的水面，既可以保證水螅有一定的活動(dòng)空間，也不會(huì)因?yàn)樗５母街孢^(guò)大造成試驗(yàn)材料的浪費(fèi)。所述車輪蟲與水螅的數(shù)量比為10:1。車輪蟲與水螅的數(shù)量比為10:1是一個(gè)優(yōu)選地方案，主要以水螅的存活率為主要因素及車輪蟲的存活率為次要因素，挑選出了10:1作為優(yōu)選方案。用這個(gè)數(shù)量比10:1去進(jìn)一步驗(yàn)證我們根據(jù)實(shí)驗(yàn)一得到的結(jié)論，車輪蟲和水螅能在一定培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)維持一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的生存狀態(tài)，故設(shè)置了試驗(yàn)二。在48小時(shí)的共同培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，車輪蟲和水螅都在適應(yīng)環(huán)境的過(guò)程中，暫時(shí)不考慮車輪蟲的增殖；在48小時(shí)對(duì)車輪蟲和水螅進(jìn)行計(jì)數(shù)后，要考慮48小時(shí)后二者均適應(yīng)了環(huán)境且車輪蟲開始增殖，故48小時(shí)計(jì)數(shù)后，考慮車輪蟲在每個(gè)24小時(shí)內(nèi)，會(huì)有60％-70％的車輪蟲出現(xiàn)分裂生殖；例如假設(shè)48小時(shí)的時(shí)候計(jì)數(shù)得到車輪蟲數(shù)目為n，水螅數(shù)目為m，假設(shè)60％的車輪蟲在未來(lái)的24小時(shí)發(fā)生增殖，那么需要加入水螅的數(shù)目＝(1+60％)n-m，計(jì)算得到需要加入水螅的數(shù)目為小數(shù)時(shí)，直接將小數(shù)去掉且整數(shù)+1。以后每24小時(shí)計(jì)數(shù)后，均按上述方法類推需要加入水螅的數(shù)目。所述車輪蟲活體保存方法，還包括：每隔24小時(shí)操作一次的沖洗步驟，具體包括：s4：用10-5-10-7mol/l的中性紅將車輪蟲從水螅體沖刷下來(lái)，將混有車輪蟲的中性紅收集，在轉(zhuǎn)速800-1000r/min條件下，離心3-5min回收車輪蟲；s5：將車輪蟲用水重懸，將車輪蟲重懸液在轉(zhuǎn)速800-1000r/min條件下，離心3-5min回收車輪蟲，重復(fù)該步驟兩次；s6：用水將水螅的體表沖刷三次；s7：將s5得到的車輪蟲和s6得到的水螅重新共同培養(yǎng)。用10-5-10-7mol/l中性紅沖洗水螅，不會(huì)對(duì)水螅造成影響，并且短時(shí)間內(nèi)中性紅可以讓附著在水螅表面的車輪蟲脫落，防止車輪蟲長(zhǎng)時(shí)間的附著在水螅體表固定的位置而導(dǎo)致傷害不斷加深，這個(gè)沖洗方法也不會(huì)對(duì)車輪蟲的活性產(chǎn)生影響?；厥哲囕喯x，并將二者再次共同培養(yǎng)，可以讓車輪蟲在水螅體表重新尋找附著點(diǎn)，讓水螅體表的先前的傷口可以慢慢恢復(fù)。選擇水沖洗三次，是為了將水螅及車輪蟲體表的中性紅被清洗干凈，防止殘留的中性紅對(duì)二者的損傷。中性紅的濃度設(shè)置為10-5-10-7mol/l，僅僅是本發(fā)明的優(yōu)選方案，凡是用中性紅達(dá)到本發(fā)明目的的中性紅的濃度范圍均在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。中性紅沖刷一次并用水沖洗三次，沖洗次數(shù)的選擇僅僅是本發(fā)明的優(yōu)選方案，選擇其他的沖洗次數(shù)達(dá)到本發(fā)明的目的也在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。本發(fā)明選擇用水作為去除車輪蟲和水螅體表殘留中性紅的沖洗液，是因?yàn)樗浅Ｒ?jiàn)的并且不會(huì)對(duì)二者生存有害的沖洗液，僅僅是本發(fā)明的優(yōu)選方案，用其他的沖洗液，例如生理鹽水沖洗達(dá)到本發(fā)明目的也在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。選擇24h處理一次，一是因?yàn)?4h需要對(duì)水螅及車輪蟲進(jìn)行計(jì)數(shù)，將兩個(gè)步驟合并在一起，方便操作；二是因?yàn)?4h兩者都已經(jīng)適應(yīng)培養(yǎng)條件了，也可以根據(jù)實(shí)際的情況縮短或延續(xù)處理時(shí)間間隔。離心條件是800-1000r/min條件下，離心3-5min，這是一個(gè)常規(guī)操作，也可以根據(jù)實(shí)際情況自行選擇。所述保存容器為燒杯，所述透氣材料為紗布。燒杯和紗布是實(shí)驗(yàn)室比較常見(jiàn)的試驗(yàn)材料，而且價(jià)格便宜，但不僅僅限于此，凡應(yīng)用本發(fā)明的過(guò)程中選擇的任意種類的保存容器和透氣材料，均在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。根據(jù)水螅的數(shù)量及時(shí)更換燒杯，以免單位水面積內(nèi)水螅數(shù)目過(guò)多，造成的生活環(huán)境惡化，影響二者的生存。所述s1中，當(dāng)用透氣材料將所述保存容器封口后，將保存容器放置于設(shè)定條件培養(yǎng)，所述設(shè)定條件為：恒溫21-22℃，循環(huán)光照射，所述循環(huán)光的一個(gè)循環(huán)設(shè)置為：先光照18h,再黑暗6h。對(duì)水螅和車輪蟲的生活條件進(jìn)行設(shè)定，可以更好的模擬二者在自然環(huán)境下的生活條件，有利于二者更好的適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室條件，保存二者的活性。因?yàn)檐囕喯x的繁殖溫度在20℃-28℃之間，而水螅的繁殖溫度在15-20℃，并且水螅的生存溫度不能高于23℃，在二者混合培養(yǎng)時(shí)，盡量避免水螅的增殖而引起的營(yíng)養(yǎng)不足，讓其保持好的生存狀態(tài)，所以選擇溫度為21℃-22℃作為車輪蟲和水螅的混合培養(yǎng)溫度。車輪蟲在一年中適應(yīng)生活的時(shí)間在4月-7月，在這段時(shí)間內(nèi)，自然光照在14小時(shí)左右，而所述循環(huán)光照射設(shè)置一個(gè)循環(huán)為先光照18h,再黑暗6h，是因?yàn)檫@樣設(shè)置循環(huán)光照，有利于車輪蟲的生存。具體實(shí)驗(yàn)方案及結(jié)果如下：試驗(yàn)一的具體方案：設(shè)置了車輪蟲與水螅水量比為5:1，10:1，15:1，20:1，25:1，30:1，40:1，50:1共8個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中的水螅數(shù)目為10只，車輪蟲的數(shù)目根據(jù)二者數(shù)量比確定，根據(jù)數(shù)量比投放24個(gè)實(shí)驗(yàn)組的車輪蟲和水螅至24個(gè)盛水的燒杯中并保證每一只水螅對(duì)應(yīng)3-5cm2的水面，并用紗布對(duì)燒杯封口，將燒杯放置于21℃-22℃恒溫水浴鍋中，水浴鍋放置在恒溫21℃-22℃的暗室，在暗室中設(shè)置燈管，先打開燈管的開關(guān)18h后關(guān)閉開關(guān)6h，然后循環(huán)。24小時(shí)后，對(duì)車輪蟲及水螅進(jìn)行計(jì)數(shù)，得到如下表格：試驗(yàn)一的結(jié)論：將水螅及車輪蟲按數(shù)量比5～20:1設(shè)置時(shí)候，培養(yǎng)時(shí)間24h，水螅的存活率在70％以上且車輪蟲的存活率在90％以上，特別地，在車輪蟲：水螅＝10:1時(shí)候，水螅和車輪蟲的存活率均在95％左右，因此，選擇車輪蟲：水螅＝10:1為最優(yōu)的比例，考察二者在連續(xù)培養(yǎng)時(shí)候的存活狀態(tài)，用以確定二者在車輪蟲：水螅＝10:1時(shí)，是否為一個(gè)穩(wěn)定狀態(tài)。表格一：車輪蟲及水螅不同數(shù)量比共同培養(yǎng)24h后二者數(shù)量及存活率表試驗(yàn)二的具體實(shí)驗(yàn)方案：以車輪蟲：水螅＝10:1的組別作為研究對(duì)象，比較二者共同培養(yǎng)的條件分別為本發(fā)明的設(shè)定的條件和自然條件時(shí)二者的存活狀態(tài)，具體為在兩種培養(yǎng)條件下對(duì)二者混合培養(yǎng)，并于共同培養(yǎng)24、48、72、96、120小時(shí)后，分別對(duì)二者進(jìn)行計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)組：設(shè)置培養(yǎng)條件為本發(fā)明的條件，然后根據(jù)計(jì)數(shù)情況，補(bǔ)加水螅，維持車輪蟲和水螅的數(shù)量比為10:1。拿第一個(gè)重復(fù)來(lái)說(shuō)，24小時(shí)后計(jì)數(shù)98只車輪蟲，10只水螅，設(shè)定值10：1，對(duì)應(yīng)98只車輪蟲的數(shù)目為10只，不需要補(bǔ)加水螅；48小時(shí)后，計(jì)數(shù)車輪蟲的數(shù)量為155只，而水螅只有10只了，考慮到80％水螅都能增殖，增殖后水螅的數(shù)目為279，24小時(shí)候可增殖到，設(shè)定值為10:1，那么對(duì),279只車輪蟲對(duì)應(yīng)的水螅數(shù)為28只，就補(bǔ)加18只水螅，保持設(shè)定比值。選擇24小時(shí)作為計(jì)數(shù)周期，是因?yàn)檐囕喯x分裂增殖的周期為24小時(shí)。根據(jù)表可知，48小時(shí)后，車輪蟲基本適應(yīng)了新環(huán)境，考慮增殖對(duì)于水螅數(shù)目的要求了，根據(jù)車輪蟲的增殖以后的數(shù)目確定水螅的量，假設(shè)80％的水螅都能增殖，確定了相應(yīng)的水螅的數(shù)目，實(shí)際上，車輪蟲并沒(méi)有80％都呈現(xiàn)出增殖而是呈現(xiàn)出40％左右的百分增殖率。72h調(diào)整水螅的數(shù)目，此時(shí)，假設(shè)60％的車輪蟲增殖，確定水螅數(shù)目。96h調(diào)整水螅的數(shù)目，此時(shí)，根據(jù)前兩次經(jīng)驗(yàn)，假設(shè)70％的車輪蟲增殖，確定水螅數(shù)目。分別于共同培養(yǎng)24h、48h、72h、96h、120h后對(duì)數(shù)量比為10:1的實(shí)驗(yàn)組，即實(shí)驗(yàn)組的車輪蟲及水螅進(jìn)行計(jì)數(shù)，得到如下表格：表格二：不同培養(yǎng)時(shí)間后實(shí)驗(yàn)組車輪蟲與水螅的生存情況總表表格三：不同培養(yǎng)時(shí)間后實(shí)驗(yàn)組的車輪蟲數(shù)量統(tǒng)計(jì)表培養(yǎng)時(shí)間(h)024487296120重復(fù)1(條)10098155220357647重復(fù)2(條)10090142199329592重復(fù)3(條)10094150208321546均值(條)10094149209336595表格四：不同培養(yǎng)時(shí)間后實(shí)驗(yàn)組的水螅存活率的統(tǒng)計(jì)表培養(yǎng)時(shí)間(h)024487296120重復(fù)1(％)10010010096.410098.3重復(fù)2(％)10010010092.310096.4重復(fù)3(％)1009010010097.1100均值(％)10096.710096.29998.2表格五：不同培養(yǎng)時(shí)間后實(shí)驗(yàn)組的車輪蟲增殖率的統(tǒng)計(jì)表培養(yǎng)時(shí)間(h)24487296120重復(fù)1(％)-258.141.962.370重復(fù)2(％)-1057.840.165.367.8重復(fù)3(％)-557.938.754.370.1均值(％)-5.757.940.260.669.3對(duì)照組：初始設(shè)置車輪蟲：水螅＝10:1，設(shè)置三個(gè)重復(fù)，即：每個(gè)重復(fù)設(shè)置10只水螅和100只車輪蟲，將二者共同培養(yǎng)，放置于盛水的透光保存容器中并保證每一只水螅對(duì)應(yīng)3-5cm2的水面，設(shè)置溫度為21-22℃，將所述容器用紗布封口并放置于窗臺(tái)邊，但是不對(duì)10:1的數(shù)量比進(jìn)行維持，且不用中性紅處理，且不用循環(huán)光照射，分別在培養(yǎng)24、48、72、96、120小時(shí)后，對(duì)水螅及車輪蟲進(jìn)行計(jì)數(shù)。表格六：不同培養(yǎng)時(shí)間后對(duì)照組的車輪蟲數(shù)量統(tǒng)計(jì)表培養(yǎng)時(shí)間(h)024487296120重復(fù)1(條)10098148250300290重復(fù)2(條)10093150280292299重復(fù)3(條)10094135311290313均值(條)10095144280294301表格七：不同培養(yǎng)時(shí)間后對(duì)照組的水螅存活率的統(tǒng)計(jì)表培養(yǎng)時(shí)間(h)024487296120重復(fù)1(條)100100100906040重復(fù)2(條)100100100805030重復(fù)3(條)100100100905030均值(條)10010010086.753.333.3表格八：不同培養(yǎng)時(shí)間后對(duì)照組的車輪蟲增殖率的統(tǒng)計(jì)表培養(yǎng)時(shí)間(h)24487296120重復(fù)1(％)-251.068.920-3.3重復(fù)2(％)-761.286.74.32.4重復(fù)3(％)-643.6130.4-6.77.9均值(％)-551.995.35.92.3試驗(yàn)二結(jié)論：用origin8.0對(duì)實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)作圖，得到圖1至圖3。圖1表示出培養(yǎng)時(shí)間與車輪蟲數(shù)量的關(guān)系，其中r2＞99％，故車輪蟲的數(shù)量與培養(yǎng)時(shí)間呈現(xiàn)出很好的線性關(guān)系。由圖1可以發(fā)現(xiàn)，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，車輪蟲的數(shù)目一直在增長(zhǎng)；由圖2可以發(fā)現(xiàn)，車輪蟲的增長(zhǎng)率基本穩(wěn)定保持在50％上下，可認(rèn)為車輪蟲在生存條件下保持一個(gè)穩(wěn)定增長(zhǎng)的狀態(tài)；由圖3可以看出，在一定的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，水螅的存活率一直保持在95％左右，可認(rèn)為水螅在該生存條件下維持一個(gè)穩(wěn)定的生存狀態(tài)。故而，我們認(rèn)定，在將車輪蟲和水螅的數(shù)量設(shè)定為10:1時(shí)，二者在本發(fā)明設(shè)定的培養(yǎng)條件下并維持二者數(shù)量比，可以維持一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。用origin8.0對(duì)對(duì)照組數(shù)據(jù)作圖，得到圖4至圖6。圖4表示出培養(yǎng)時(shí)間與車輪蟲數(shù)量的關(guān)系，其中r2＞99％，故車輪蟲的數(shù)量與培養(yǎng)時(shí)間呈現(xiàn)出很好的線性關(guān)系。由圖4可以發(fā)現(xiàn)，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，車輪蟲的數(shù)目一直在增長(zhǎng)，但是明顯發(fā)現(xiàn)在72h后車輪蟲的增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期，基本數(shù)量維持不變；由圖5可以發(fā)現(xiàn)，車輪蟲的增長(zhǎng)率剛開始出現(xiàn)增長(zhǎng)，后來(lái)激增至95.3％，之后出現(xiàn)急劇的下跌，可認(rèn)為車輪蟲在該生存條件下不能維持穩(wěn)定增長(zhǎng)的狀態(tài)；由圖6可以看出，在一定的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，水螅的存活率一直在下降，因?yàn)檐囕喯x數(shù)量的不可控的增長(zhǎng)，導(dǎo)致環(huán)境及水螅的負(fù)荷過(guò)重，水螅也在培養(yǎng)過(guò)程中，逐漸出現(xiàn)行動(dòng)遲緩、觸手萎縮最后逐漸降解，可認(rèn)為水螅在該生存條件下無(wú)法維持生存狀態(tài)。而且在保存容器中，也觀察到了大批的車輪蟲的死亡。最終，水螅在培養(yǎng)168小時(shí)后計(jì)數(shù)時(shí)，已經(jīng)全部死亡；而車輪蟲在培養(yǎng)216小時(shí)后計(jì)數(shù)時(shí)，已經(jīng)全部死亡。故而，通過(guò)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的試驗(yàn)結(jié)果分析，我們認(rèn)為在將車輪蟲和水螅的數(shù)量設(shè)定為10:1時(shí)，二者在本發(fā)明設(shè)定的條件下共同培養(yǎng)，可以維持一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。按本發(fā)明的試驗(yàn)方法及培養(yǎng)條件對(duì)車輪蟲與水螅進(jìn)行共同培養(yǎng)，且維持二者數(shù)量比為10:1，一年后，水螅仍然保持著90％以上的存活率，且車輪蟲的數(shù)量保持著50％以上的增長(zhǎng)百分率。盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的圖例。當(dāng)前第1頁(yè)12