本發(fā)明涉及生物醫(yī)學領域中與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性位點及其應用。

背景技術：

目前原發(fā)性肝癌診斷存在如下問題：

(1)臨床早期診斷率低

85％患者診斷時已到晚期：目前主要的臨床診斷手段包括影像檢查、血清甲胎蛋白(afp)檢測、血液酶學檢查和腫瘤組織活檢。影像檢查技術和手段中，超聲檢查可顯示直徑為2cm以上的腫瘤，但需重復、動態(tài)檢查并結合其他指標進行診斷。計算機斷層掃描(ct)在原發(fā)性肝癌的診斷中最為普遍，可顯示2cm的腫瘤，陽性率在90％以上。但是對占位性病變性質難以確定，對于直徑小于1厘米的腫瘤難以發(fā)現(xiàn)，正電子發(fā)射體層顯像(pet)可顯示肝癌組織的代謝情況，但是診斷的敏感性僅有50％左右。磁共振成像(mri)具有很高的組織分辨率和多參數(shù)、多方位成像等特點，而且無輻射影響，但是其空間分辨率不及ct，且費用昂貴，不能普遍應用于普查。由此可見，影像學方法只能檢測前臨床診斷期和臨床癥狀期的癌腫，即當癌腫小于0.5cm時因癌腫相關血管尚未形成無法在影像學上發(fā)現(xiàn)。血液酶學方面，afp是目前臨床上診斷hcc最常用的血清腫瘤標記物，其診斷hcc的敏感性和特異性分別為41％～65％和80％～94％。但在部分良性肝病、生殖系統(tǒng)和胃腸道的一些惡性腫瘤中afp也有升高，且在一部分hcc中afp水平長期保持低水平(<20ng/ml)，其較高的假陽性及假陰性嚴重影響了afp診斷hcc的準確性。因此，血清afp檢測因自身的局限性無法在原發(fā)性肝癌早期做出正確的診斷，仍需在影像學的配合下，在前臨床診斷期和臨床癥狀期協(xié)助診斷。綜上所述，目前臨床上原發(fā)性肝癌的主要診斷手段均為針對臨床癥狀期，尚無真正意義的早期診斷方法。

(2)慢性乙型肝炎患者在疾病進展中,缺乏肝癌早期預警指標

由于肝癌早期診斷率較低，臨床尚無針對腫瘤早期的診斷方法。在兒童時期感染乙型肝炎病毒的成人中，約25％會因慢性感染死于肝硬化或肝癌，因此在慢性乙型肝炎治療和隨訪中，引入肝癌預警體系對高危人群進行重點監(jiān)測，擬補影像學和酶學診斷指標不靈敏的不足，對于肝癌早期診斷非常的必要。

(3)肝癌治療后復發(fā)的預警

目前肝癌的治療方法包括手術和非手術治療。早期肝癌多采用手術切除，肝移植，無水酒精消融(percutaneousethanolinjection，pei)和射頻消融(radiofrequencyablation,rfa)等治療方法；中期肝癌多采用經導管動脈內化療栓塞術(transarterialchemoembolization，tace)，tace+fra，經導管放射性栓塞(transarterialradioembolization，tare)；晚期肝癌采用常規(guī)全身系統(tǒng)性化療或分子靶向治療藥物索拉非尼治療。大量臨床資料顯示，直徑≤5cm的小hcc治療效果明顯優(yōu)于直徑>5cm的大hcc，而直徑≤2cm的微小hcc療效更佳。但是，因為通常情況下，70％～80％的原發(fā)性肝癌病人發(fā)現(xiàn)時已到晚期，失去了根治性手術機會，而且即使手術切除肝癌，5年后腫瘤復發(fā)率仍超過70％?？梢?，肝癌治療后易于復發(fā)，因此，原發(fā)性肝癌需要早期診斷，但也需要針對治療后復發(fā)的預警指標。

干擾素誘導的跨膜蛋白3(ifitm3，也被稱為1-8u)的基因最初確定于1984年，系從inf治療神經母細胞瘤篩選cdna過程中發(fā)現(xiàn)，其克隆來源于人淋巴細胞的cdna文庫。ifitm3可在大多數(shù)組織中翻譯表達，并高度誘導干擾素表達。以往的研究表明ifitm3屬于鼠基因家族，其較短，含有2個跨膜結構域的蛋白(5-18kda)，具有較高的核心序列相似性，但n和c-末端存在進化差異。人類的同源基因(ifitm1，ifitm2，和ifitm3)均聚集在11號染色體上一個18-kb的基因組序列內，并介導細胞的發(fā)育過程，包括細胞粘附，免疫細胞調節(jié)，生殖細胞歸巢和成熟。

干擾素誘導跨膜蛋白3(ifitm3)是一種具有廣譜抗囊膜病毒活性的蛋白，ifitm3是由i型或ii型干擾素(ifn)誘導產生的，它可以通過抑制流感病毒和其他包膜病毒進入細胞而限制病毒復制，缺失ifitm3基因后，ifn的抗病毒作用會明顯變弱。rs12252位于干擾素誘導跨膜蛋白3基因中。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術問題是如何篩查不同腫瘤生長速度肝癌患者。

為解決上述技術問題，本發(fā)明首先提供了下述1-6中任一用途：

1、檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質在制備篩查或輔助篩查不同腫瘤生長速度肝癌患者或不同肝癌發(fā)展途徑患者產品中的應用；

2、檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質在制備檢測或輔助檢測不同腫瘤生長速度肝癌易感性或不同肝癌發(fā)展途徑易感性產品中的應用；

3、檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質在制備檢測或輔助檢測與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性或與不同肝癌發(fā)展途徑相關的單核苷酸多態(tài)性的產品中的應用；

4、檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質在制備鑒定或輔助鑒定與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性或與不同肝癌發(fā)展途徑相關的單核苷酸多態(tài)性的產品中的應用；

5、人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型在制備篩查或輔助篩查不同腫瘤生長速度肝癌患者或不同肝癌發(fā)展途徑患者產品中的應用；

6、人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型在制備檢測或輔助檢測不同腫瘤生長速度肝癌易感性或不同肝癌發(fā)展途徑易感性產品中的應用。

rs12252是人染色體11p5.5上的一個二等位多態(tài)性的snp位點，該變異是轉換(t/c，在其互補鏈上則為a/g)。rs12252基因型是cc、ct或tt。其中，cc是rs12252位點為c的純合型，tt是rs12252位點為t的純合型，ct是rs12252位點為t和c的雜合型。所述檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型具體可通過檢測rs12252的核苷酸種類確定。

上述用途中，所述人可為肝癌患者。

為解決上述技術問題，本發(fā)明還提供了含有檢測或輔助檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質的產品。

本發(fā)明所提供的含有檢測或輔助檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質的產品，為a)-h)中的任一種產品：

a)檢測或輔助檢測與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性或基因型的產品；

b)鑒定或輔助鑒定與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性或基因型的產品；

c)篩查或輔助篩查不同腫瘤生長速度肝癌患者產品；

d)檢測或輔助檢測不同腫瘤生長速度肝癌易感性產品；

e)檢測或輔助檢測與不同肝癌發(fā)展途徑相關的單核苷酸多態(tài)性或基因型的產品；

f)鑒定或輔助鑒定與不同肝癌發(fā)展途徑相關的單核苷酸多態(tài)性或基因型的產品；

g)篩查或輔助篩查不同肝癌發(fā)展途徑患者產品；

h)檢測或輔助檢測不同肝癌發(fā)展途徑易感性產品。

上述產品中，所述人可為肝癌患者。

本發(fā)明中，所述檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質可包括擴增包括rs12252在內的基因組dna片段的pcr引物對，還可包括限制性內切酶msci。所述檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質也可僅為擴增包括rs12252在內的基因組dna片段的pcr引物對，也可為所述引物對與限制性內切酶msci。

本發(fā)明中，所述pcr引物對可為序列表中seqidno.1所示的單鏈dna和序列表中seqidno.2所示的單鏈dna。

不同肝癌發(fā)展途徑可為是否經過肝硬化發(fā)展為肝癌，具體可為慢性乙型肝炎是否經過肝硬化發(fā)展為肝癌。

實驗證明，rs12252的c等位在腫瘤生長速度快的肝癌患者群體中的比例高于該等位在腫瘤生長速度慢的肝癌患者群體中的比例，具有統(tǒng)計學差異，說明rs12252的c等位為腫瘤生長速度快的肝癌的風險等位。rs12252的三個基因型中，cc基因型的個體在高生長速度肝癌組中的比例高于對應基因型在低生長速度肝癌組中的比例，tt和ct基因型的個體在高生長速度肝癌組中的比例分別低于對應基因型在低生長速度肝癌組中的比例。與攜帶tt和ct基因型的個體相比，攜帶cc基因型的肝癌患者的腫瘤是高生長速度腫瘤的風險增加，or值為4.067[95％置信區(qū)間(95％ci)＝1.833-9.025；p<0.001]。說明rs12252多態(tài)性位點與肝癌腫瘤的生長速度顯著關聯(lián)。

腫瘤生長速度具體可體現(xiàn)在慢性乙型肝炎是否經過肝硬化發(fā)展為肝癌(即不同肝癌發(fā)展途徑)上和/或肝癌是否伴有癌栓上和/或在確診為肝癌時腫瘤的大小上。是否經過肝硬化發(fā)展為肝癌具體可為慢性乙型肝炎是否經過肝硬化發(fā)展為肝癌。

在實際應用中，可將檢測rs12252的多態(tài)性或基因型的物質與其它物質(如檢測其它的與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性或基因型的物質)聯(lián)合在一起制備篩查或輔助篩查不同腫瘤生長速度肝癌患者的產品。

其中，檢測人基因組中rs12252的多態(tài)性或基因型的物質可為通過下述至少一種方法確定rs12252的多態(tài)性或基因型所需的試劑和/或儀器：dna測序、限制性酶切片段長度多態(tài)性、單鏈構象多態(tài)性、變性高效液相色譜、snp芯片、taqman探針技術和sequenommassarray技術。其中，利用sequenommassarray技術確定rs12252的多態(tài)性或基因型所需的試劑和/或儀器包括pcr引物對、基于單堿基延伸反應的延伸引物、磷酸酶(如蝦堿性磷酸酶(shrimpalkalinephosphatase，sap))、樹脂、芯片、maldi-tof(matrix-assistedlaserdesorption/ionization–timeoffligh，基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜)以及sequenommassarray技術所需要的其他試劑和儀器；利用限制性酶切片段長度多態(tài)性確定rs12252的多態(tài)性或基因型所需的試劑和/或儀器包括pcr引物對和限制性內切酶；snp芯片包括基于核酸雜交反應的芯片、基于單堿基延伸反應的芯片、基于等位基因特異性引物延伸反應的芯片、基于“一步法”反應的芯片、基于引物連接反應的芯片、基于限制性內切酶反應的芯片、基于蛋白dna結合反應的芯片，及基于熒光分子dna結合反應的芯片。

本發(fā)明的一個實施例中，采用限制性酶切片段長度多態(tài)性確定rs12252的多態(tài)性和基因型。所述pcr引物對在序列上沒有特殊要求，只要能擴增出包括rs12252在內的基因組dna片段即可，具體可為序列表中seqidno.1和seqidno.2所示的單鏈dna。所述限制性內切酶具體可為msci。

本發(fā)明在不同腫瘤生長速度肝癌患者群體中發(fā)現(xiàn)rs12252是與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性?？蓪z測rs12252的多態(tài)性或基因型的物質與其它物質(如檢測其它的與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性或基因型的物質)聯(lián)合在一起制備篩查不同腫瘤生長速度肝癌患者的產品。

附圖說明

圖1為使用msci限制性內切酶對pcr擴增產物進行酶切的電泳圖譜；其中，m:為dna分子量標準(50bpladder)；樣品1-1、1-2和1-3為ct基因型酶切產物；樣品2-1、2-2和2-3為cc基因型酶切產物；樣品3-1、3-2和3-3為tt基因型酶切產物。

圖2為不同惡性程度肝癌患者群體中cc、ct和tt基因型個體的比例。

具體實施方式

下面結合具體實施方式對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。

下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。

下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。

實施例1、ifitm3rs12252是與肝癌惡性程度、復發(fā)可能性以及肝癌腫瘤生長速度相關的單核苷酸多態(tài)性位點

rs12252是人染色體11p5.5上的一個二等位多態(tài)性的snp位點，該變異是轉換(t/c，在其互補鏈上則為a/g)，該位點位于ifitm3基因中。rs12252基因型是cc、ct或tt。其中，cc是rs12252位點為c的純合型，tt是rs12252位點為t的純合型，ct是rs12252位點為t和c的雜合型。

一、肝癌患者的入選標準

156例肝癌患者，其中男性患者為137例，女性患者為19例，所有患者的平均年齡為50.89±9.13，所有患者均來自中國大陸，且無血緣關系。所有患者均符合衛(wèi)生部組織專家指定的《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)》標準，經影像學b超、ct、mri、肝穿及手術病理檢查證實確診為肝癌患者。

二、rs12252位點的基因分型

(1)擴增含snp位點的核苷酸片段

根據(jù)rs12252的側翼序列設計引物，正向引物f：5’-gaaaaggaaactgttgagaaccgaa-3’(seqidno.1)，反向引物r：5’-gagcctcctcctaaacctgcac-3’(seqidno.2)，擴增出待測snp所在的核苷酸片段，pcr產物為序列表中seqidno.3。rs12252位點位于seqidno.3的140bp處，該處核苷酸為c或t，當該處核苷酸為t時，可被msci內切酶(識別序列為tgg^cca)識別。

其中，pcr反應體系以50μl計為：150-200ng/μl人基因組dna1μl，10μm引物f和r各2μl，premixtaqhs25μl，余量為ddh2o；其中，premixtaqhs為takara公司(貨號：dr028a)產品。使用premixtaqhotstartversion(takara公司)。

pcr反應條件為：95℃10分鐘；95℃60秒，55℃30秒，72℃30秒，35個循環(huán)；72℃5分鐘。

(2)針對第142位核苷酸的不同選擇適當?shù)膬惹忻高M行pcr-rflp

該pcr產物用msci內切酶酶切，反應體系以20μl計為：pcr擴增產物10μl，快速消化msci酶(fastdigestmsci，fermentas公司)1μl，10×fastdigestgreen緩沖液2μl，無核酸酶的ddh2o17μl。反應條件為：37℃水浴，酶切30min。

然后，將得到的酶切產物在2％瓊脂糖凝膠中進行電泳，溴化乙錠染色，凝膠成像系統(tǒng)中觀察。

制膠：用蒸餾水將與膠接觸的器皿洗干凈，室溫自然晾干，將含有goldenview的2％瓊脂糖凝膠倒入模板中，插入13個孔的梳子，待膠自然聚合后，拔出梳子，則制得含有13個孔的2％的瓊脂糖凝膠。

電泳：向15μl酶切產物中加入6×上樣緩沖液3μl，上樣檢測，100v恒壓，電泳2小時。

根據(jù)pcr-rflp的結果確定該位點在檢測群體中的基因型。當pcr產物的140bp處核苷酸均為c時，msci內切酶不可識別該位點，即pcr產物不能被切開，凝膠中只有一條帶，長度為562bp，該基因型記為cc型；當140bp處的核苷酸均為t時，即可將pcr擴增片段切成兩個片段，一個為420bp，另一個片段為142bp，該基因型記為tt型；當140bp處既含有c又含有t時，即凝膠電泳中含有三條帶，長度分別約為562bp、420bp和142bp，該基因型記為雜合型ct型。(圖1)

這156例肝癌患者中，cc基因型的患者為44例，ct基因型的患者為84例，tt基因型的患者為28例。

三、rs12252位點的基因型與肝癌惡性程度的關系

對這156例肝癌患者按照肝癌的不同惡性程度進行分組，分為高分化肝細胞性肝癌組、中分化肝細胞性肝癌組和低分化肝細胞性肝癌組。肝癌患者歸為高分化肝細胞性肝癌組的標準為腫瘤直徑<2cm，與正常細胞相比核漿比例增大，但異型性不明顯。肝癌患者歸為中分化肝細胞性肝癌組的標準為腫瘤直徑大于3cm，癌細胞胞漿豐富、嗜酸性、核圓形，核仁清楚。肝癌患者歸為低分化肝細胞性肝癌組的標準為與正常肝組織相比血竇樣腔隙減少，癌細胞核漿比例明顯增大，異型性明顯。其中，異型性是指腫瘤組織在細胞形態(tài)和組織結構上，與其發(fā)源的正常組織的不同程度的差異。各組中各基因型的患者數(shù)及百分比如表1與圖2所示。

表1、各組中各基因型的患者數(shù)及百分比

結果顯示，高分化肝細胞性肝癌組中c等位的頻率為41.03％，t等位的頻率為58.97％；中分化肝細胞性肝癌組中c等位的頻率為56.62％，t等位的頻率為43.38％；低分化肝細胞性肝癌組中c等位的頻率為64.29％，t等位的頻率為35.71％。c等位在中分化肝細胞性肝癌組中的頻率比在高分化肝細胞性肝癌組中的頻率高，具有統(tǒng)計學差異(p＝0.028)，c等位在低分化肝細胞性肝癌組中的頻率比在高分化肝細胞性肝癌組中的頻率高，具有統(tǒng)計學差異(p＝0.002)，c等位在低分化肝細胞性肝癌組中的頻率比在中分化肝細胞性肝癌組中的頻率高(p＝0.238)，表明rs12252位點的c等位為惡性程度高的肝癌的風險等位。

rs12252位點的三個基因型中，不同的組別中cc基因型的肝癌患者具有以下規(guī)律：在中分化肝細胞性肝癌組中的百分比高于在高分化肝細胞性肝癌組中的百分比，在低分化肝細胞性肝癌組中的百分比高于在高分化肝細胞性肝癌組中的百分比，在低分化肝細胞性肝癌組中的百分比高于在中分化肝細胞性肝癌組中的百分比。

不同的組別中ct基因型的肝癌患者具有以下規(guī)律：在中分化肝細胞性肝癌組中的百分比低于在高分化肝細胞性肝癌組中的百分比，在低分化肝細胞性肝癌組中的百分比低于在高分化肝細胞性肝癌組中的百分比。

不同的組別中tt基因型的肝癌患者具有以下規(guī)律：在低分化肝細胞性肝癌組中的百分比低于在高分化肝細胞性肝癌組中的百分比，在低分化肝細胞性肝癌組中的百分比低于在中分化肝細胞性肝癌組中的百分比，在中分化肝細胞性肝癌組中的百分比低于在高分化肝細胞性肝癌組中的百分比。

與攜帶tt和ct基因型的肝癌患者相比，攜帶cc基因型的肝癌患者肝癌為中分化肝細胞性肝癌的風險增加，or值為3.910(95％ci＝1.231-12.413；p＝0.011)。與攜帶tt和ct基因型的肝癌患者相比，攜帶cc基因型的肝癌患者肝癌為低分化肝細胞性肝癌的風險增加，or值為5.542,[(95％ci＝1.697-18.095；p＝0.002]。

結果表明，rs12252多態(tài)性位點與肝癌的惡性程度顯著關聯(lián)，可以利用rs12252位點篩查惡性程度高的肝癌患者。

四、rs12252位點的基因型與肝癌腫瘤生長速度的關系

對這156例肝癌患者按照肝癌腫瘤生長速度進行分組，分為高生長速度肝癌組和低生長速度肝癌組，肝癌患者歸為高生長速度肝癌組的標準為慢性乙型肝炎不經過肝硬化直接發(fā)展為肝癌，在b超和ct確診為肝癌時腫瘤體積大于10cm³，伴有癌栓，肝癌患者歸為低生長速度肝癌組的標準為慢性乙型肝炎經過肝硬化發(fā)展為肝癌，在b超和ct確診為肝癌時腫瘤體積小于10cm³，不伴有癌栓。各組中各基因型的患者數(shù)及百分比如表2所示。

表2、各組中各基因型的患者數(shù)及百分比

結果顯示，高生長速度肝癌組中c等位的頻率為63.53％，t等位的頻率為36.47％；低生長速度肝癌組中c等位的頻率為45.07％，t等位的頻率為54.93％。c等位在高生長速度肝癌組中的頻率比在低生長速度肝癌組中的頻率高，具有統(tǒng)計學差異(p<0.001)，表明rs12252位點的c等位為高肝癌腫瘤生長速度的風險等位。

rs12252位點的三個基因型中，cc基因型的個體在高生長速度肝癌組中的比例高于對應基因型在低生長速度肝癌組中的比例，tt和ct基因型的個體在高生長速度肝癌組中的比例分別低于對應基因型在低生長速度肝癌組中的比例。與攜帶tt和ct基因型的個體相比，攜帶cc基因型的肝癌患者的腫瘤是高生長速度腫瘤的風險增加，or值為4.067[95％置信區(qū)間(95％ci)＝1.833-9.025；p<0.001]。

結果表明，rs12252多態(tài)性位點與肝癌腫瘤的生長速度顯著關聯(lián)，可以利用rs12252位點篩查腫瘤的生長速度快的肝癌患者。

五、rs12252位點的基因型與肝癌復發(fā)可能性的關系

在這156例肝癌患者中選出同處于病理低分化期(腫瘤直徑<2cm，核漿比例增大，但異型性不大)的肝癌患者，共54例，對選出的這54例肝癌患者均按照如下任一方法進行治療：介入術、肝癌切除術和肝移植術。按照rs12252位點的基因型這54例肝癌患者進行分組，分為高肝癌復發(fā)可能性組和低肝癌復發(fā)可能性組，肝癌患者歸為高肝癌復發(fā)可能性組的標準為治療12個月以內復發(fā)，肝癌患者歸為低肝癌復發(fā)可能性組的標準為治療12個月以內無復發(fā)。在以上肝癌患者進行治療后，跟蹤其復發(fā)情況，復發(fā)的判斷標準為：ct能觀察到新的病灶。各組中各基因型的患者數(shù)及百分比如表3所示。

表3、各組中各基因型的患者數(shù)及百分比

結果顯示，高肝癌復發(fā)可能性組中c等位的頻率為62.5％，t等位的頻率為37.5％；低肝癌復發(fā)可能性組中c等位的頻率為58.33％，t等位的頻率為41.67％。c等位在高肝癌復發(fā)可能性組中的頻率比在低肝癌復發(fā)可能性組中的頻率高，具有統(tǒng)計學差異(p<0.001)，表明rs12252位點的c等位為高肝癌復發(fā)可能性的風險等位。

rs12252的三個基因型中，cc基因型的個體在肝癌復發(fā)性高的肝癌患者群體中的比例高于對應的基因型在肝癌復發(fā)性低的肝癌患者群體中的比例；tt和ct基因型的個體在肝癌復發(fā)性高的肝癌患者群體中的比例分別低于對應的基因型在肝癌復發(fā)性低的肝癌患者群體中的比例。

與攜帶tt和ct基因型的個體相比，攜帶cc基因型的肝癌患者的腫瘤使高肝癌復發(fā)可能性的風險增加，or值為4.067[95％置信區(qū)間(95％ci)＝1.833-9.025；p<0.001]。

結果表明，rs12252多態(tài)性位點與肝癌復發(fā)可能性顯著關聯(lián)，可以利用rs12252位點篩查肝癌復發(fā)可能性高的肝癌患者。

<110>首都醫(yī)科大學附屬北京佑安醫(yī)院

<120>與不同腫瘤生長速度肝癌相關的單核苷酸多態(tài)性位點及其應用

<160>3

<170>patentinversion3.5

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<400>2

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<212>dna

<213>人（homosapiens）

<220>

<221>misc_feature

<222>(140)..(140)

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gaaaaggaaactgttgagaaccgaaactactggggaaagggagggctcactgagaaccat60

cccagtaacccgaccgccgctggtcttcgctggacaccatgaatcacactgtccaaacct120

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