本發(fā)明涉及飼用飼料添加劑領(lǐng)域，具體涉及一種酵母培養(yǎng)物的制備方法。
背景技術(shù)：
：酵母是一些單細(xì)胞真菌，并非系統(tǒng)演化分類(lèi)的單元。是子囊菌、擔(dān)子菌等幾科單細(xì)胞真菌的通稱(chēng)，一般泛指能發(fā)酵糖類(lèi)的各種單細(xì)胞真菌，可用于釀造生產(chǎn)，有的為致病菌，是遺傳工程和細(xì)胞周期研究的模式生物。酵母菌是人類(lèi)文明史中被應(yīng)用得最早的微生物?？稍谌毖醐h(huán)境中生存。目前已知有1000多種酵母，根據(jù)酵母菌產(chǎn)生孢子（子囊孢子和擔(dān)孢子）的能力，可將酵母分成三類(lèi)：形成孢子的株系屬于子囊菌和擔(dān)子菌。不形成孢子但主要通過(guò)出芽生殖來(lái)繁殖的稱(chēng)為不完全真菌，或者叫“假酵母”（類(lèi)酵母）。目前已知極少部分酵母被分類(lèi)到子囊菌門(mén)。酵母菌在自然界分布廣泛，主要生長(zhǎng)在偏酸性的潮濕的含糖環(huán)境中，而在釀酒中，它也十分重要。酵母培養(yǎng)物作為一種微生態(tài)制劑，是由酵母菌，主要是釀酒酵母，在現(xiàn)代發(fā)酵工藝控制下采用液、固態(tài)相結(jié)合或直接在固體培養(yǎng)基上發(fā)酵后連同固體基質(zhì)一起加工制得的產(chǎn)品。該產(chǎn)品不含大量的活性酵母，酵母菌只是酵母培養(yǎng)物產(chǎn)品生產(chǎn)中的一種工具，在終產(chǎn)品中的存活與否不會(huì)影響產(chǎn)品的使用效果。其主要作用成分是酵母發(fā)酵固體基質(zhì)產(chǎn)生的細(xì)胞外代謝產(chǎn)物、發(fā)酵后變性的固體基質(zhì)、酵母細(xì)胞內(nèi)容物以及酵母細(xì)胞壁。產(chǎn)品成分復(fù)雜，含有礦物質(zhì)、b族維生素、增味物質(zhì)、消化酶、甘露寡糖、β-葡聚糖和氨基酸以及“未知促生長(zhǎng)因子”等，這些物質(zhì)對(duì)于動(dòng)物胃腸道中的微生物而言是絕好的營(yíng)養(yǎng)底物，可以促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)，進(jìn)而提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。是集保健和營(yíng)養(yǎng)等多重功效為一體的微生態(tài)飼料添加劑。酵母培養(yǎng)物的研究始于二十世紀(jì)二十年代中期。最早的報(bào)道是williams和eckles將其作為蛋白質(zhì)補(bǔ)充飼料添加到奶牛日糧中，結(jié)果顯著提高了奶牛的生產(chǎn)性能。從此酵母培養(yǎng)物的研究開(kāi)始走進(jìn)人們的視線(xiàn)。二十世紀(jì)40-50年代，“不明促生長(zhǎng)因子”的研究開(kāi)始興起。許多抗生素廠家依賴(lài)于養(yǎng)殖業(yè)來(lái)處理廢棄的發(fā)酵培養(yǎng)液，將這些培養(yǎng)液與飼料混同使用比僅以飼料喂養(yǎng)的效果好，瘤胃試驗(yàn)證明其中所含“不明促生長(zhǎng)因子”可提高瘤胃的消化功能。后來(lái)，人們又發(fā)現(xiàn)了含“不明促生長(zhǎng)因子”的其它類(lèi)型物質(zhì)—酵母類(lèi)產(chǎn)品。研究者在奶牛飼料中添加較低水平的yc，結(jié)果顯著的提高了奶牛的產(chǎn)奶量和閹牛的增重量。將活酵母添加到煮沸的泔水里喂豬，可改善豬的生產(chǎn)性能。于是人們將日糧及抗生素發(fā)酵的廢棄培養(yǎng)液與酵母培養(yǎng)物混合使用，酵母培養(yǎng)物的應(yīng)用開(kāi)始普及。六十至七十年代，為緩解飼料蛋白資源短缺的問(wèn)題，世界各國(guó)均把單細(xì)胞蛋白的開(kāi)發(fā)作為一項(xiàng)重要措施。酵母作為一種穩(wěn)定性高、經(jīng)濟(jì)優(yōu)質(zhì)的單細(xì)胞蛋白飼料開(kāi)始被大量使用。70年代和80年代，發(fā)酵技術(shù)日趨成熟，酵母培養(yǎng)物的研究也得到飛速發(fā)展。人們利用深層發(fā)酵技術(shù)得到了高效濃縮的產(chǎn)品。huber報(bào)道，向奶牛日糧中添加yc，標(biāo)準(zhǔn)乳（fcm）產(chǎn)量和產(chǎn)奶量分別提高0.8升/日和1.2升/日。gunther將少量的活酵母添加到奶牛日糧中可使其fcm產(chǎn)量提高4.9kg/日。向精糧中添加yc對(duì)標(biāo)準(zhǔn)乳產(chǎn)量影響也相當(dāng)顯著。dawson發(fā)現(xiàn)接種于瘤胃的酵母仍可存活，他認(rèn)為，只有活酵母才能提高瘤胃的消化功能。90年代以來(lái)，由于人們對(duì)化學(xué)類(lèi)生長(zhǎng)促進(jìn)劑的安全性的擔(dān)憂(yōu)。酵母培養(yǎng)物用作微生態(tài)飼料添加劑開(kāi)始成為研究熱點(diǎn)。國(guó)外diamondvmill，alltech等大公司都相繼開(kāi)發(fā)了一系列yc產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)一些酵母培養(yǎng)物廠家也陸續(xù)出現(xiàn)，在美國(guó)酵母培養(yǎng)物已得到了普遍使用。人們對(duì)酵母培養(yǎng)物的概念也有了新的進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。目前從國(guó)內(nèi)外研究較多的酵母培養(yǎng)物產(chǎn)品來(lái)看，主要分為兩大類(lèi)：一類(lèi)產(chǎn)品的主要功效組分是酵母細(xì)胞外代謝產(chǎn)物，如達(dá)農(nóng)威公司的益康系列酵母培養(yǎng)物，該產(chǎn)品是一個(gè)包含了少數(shù)酵母菌、變性的培養(yǎng)基和酵母胞外代謝物的混合物，酵母菌僅作為產(chǎn)品生產(chǎn)的工具，在終產(chǎn)品中是否存活不會(huì)影響產(chǎn)品效果；另一類(lèi)產(chǎn)品的主要功效組分是活酵母細(xì)胞，如alltech公司生產(chǎn)的酵母培養(yǎng)物產(chǎn)品，該產(chǎn)品能夠耐受反芻動(dòng)物瘤胃酸性環(huán)境和飼料制粒時(shí)的升溫。酵母培養(yǎng)物一般的生產(chǎn)工藝主要有液態(tài)發(fā)酵法和固態(tài)發(fā)酵法。液態(tài)發(fā)酵法工藝具有產(chǎn)量大、工藝控制簡(jiǎn)單方便的優(yōu)點(diǎn)，但存在投資規(guī)模大，能源消耗大，發(fā)酵廢液污染，代謝產(chǎn)物浪費(fèi)嚴(yán)重的缺點(diǎn)。固態(tài)發(fā)酵工藝直接將發(fā)酵液接種于固體培養(yǎng)基，避免了液體發(fā)酵需脫水、收集、干燥等工序，能夠全部利用液體發(fā)酵物的菌體、代謝產(chǎn)物和液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分，既保留了活性成分又避免了廢液排放，環(huán)境污染，此外，固體培養(yǎng)原料來(lái)源豐富，成本低廉。也有采用將固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵工藝相結(jié)合的工藝，但是存在酵母含量低、有益的酵母胞外代謝物含量低、雜菌含量高，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺陷。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于，提供一種在酵母含量高、有益的酵母胞外代謝物含量高、雜菌含量低，產(chǎn)品質(zhì)量容易控制的固態(tài)液態(tài)相結(jié)合的酵母培養(yǎng)物的制備方法。本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，所述酵母培養(yǎng)物為釀酒酵母培養(yǎng)物，其特征在于，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把酵母菌加入無(wú)菌水中進(jìn)行稀釋?zhuān)诠腆w平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株。步驟二：斜面菌種制作將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管滅菌，取出擺斜面，冷卻后備用；向試管的斜面培養(yǎng)基中接入步驟一中制備的菌種，制成斜面菌種。步驟三：三角瓶液體菌種制作在無(wú)菌條件下，向三角瓶中的液體培養(yǎng)基中接入步驟二制得的斜面菌種，制得三角瓶液體菌種。步驟四：種子罐液體菌種制作向種子罐的液體培養(yǎng)基中接入步驟三制取的液體菌種，制得種子罐液體菌種。步驟五：固體發(fā)酵在無(wú)菌條件下，向固體培養(yǎng)基中接入步驟四制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床上在28～30℃下進(jìn)行固體發(fā)酵。步驟六：袋內(nèi)細(xì)胞厭氧自溶將步驟五得到的料裝入帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋中，在編制袋中進(jìn)行細(xì)胞厭氧自溶處理。步驟七：低溫干燥、粉碎對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。作為優(yōu)選技術(shù)方案，編制袋的容積為0.25-1.0立方米。作為優(yōu)選技術(shù)方案，裝滿(mǎn)料的編織袋放置在置物架上，置物架保持通風(fēng)；編織袋外的空氣溫度控制在28～30℃，自溶時(shí)間控制在20～30小時(shí)。作為優(yōu)選技術(shù)方案，步驟1中，懸浮液的稀釋濃度為10-8。作為優(yōu)選技術(shù)方案，步驟二的具體步驟為：按配方要求配置斜面培養(yǎng)基，斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖28～35g，蛋白胨5～7g，酵母膏2～4g，瓊脂粉20～25g，加水定容至1000ml；將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于115-130℃滅菌28-32min，取出擺斜面，冷卻后備用；將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置24～48h接入步驟一中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的0.8～1.3%，在28～32℃條件下培養(yǎng)36～52h，制成斜面菌種。作為優(yōu)選技術(shù)方案，步驟三的具體步驟為：按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖100～110g，酵母浸粉18～23g，硫酸鎂1～1.2g，磷酸二氫鉀0.8～1.1g，加水定容至1000ml；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在115～130℃溫度下滅菌28～35min，冷卻后備用；在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟二制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的8～13%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在28～32℃，轉(zhuǎn)速為180～200r/min；搖床培養(yǎng)18～30h后制得三角瓶液體菌種。作為優(yōu)選技術(shù)方案，步驟四的具體步驟為：按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖28～35kg，酵母浸粉5～7kg，硫酸鎂0.3～0.5kg，磷酸二氫鉀0.25～0.35kg，加水定容至300l；密封后在115～130℃溫度下滅菌28～35min，降溫至28～35℃接入步驟三制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的12～17%，溫度控制在28～30℃，通氣量5～7m3/h，培養(yǎng)18～24h后制得種子罐液體菌種。作為優(yōu)選技術(shù)方案，步驟五中，固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮10～15％，豆粕20～26％，玉米胚芽粕18～23％，玉米淀粉5～7％，棕櫚粕2.5～3.5％，其余為水，混勻放入球鍋100℃下4-6小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。作為優(yōu)選技術(shù)方案，步驟五中，發(fā)酵床上的物料內(nèi)部溫度超過(guò)45℃，對(duì)物料進(jìn)行翻到降溫處理；發(fā)酵過(guò)程中，于發(fā)酵后24-33h開(kāi)始取樣，送到化驗(yàn)室進(jìn)行感官、水分、ph值和酵母菌菌數(shù)的檢測(cè)當(dāng)感官有濃郁酸香味、ph值在4～5之間，水分≤30％以及酵母菌菌數(shù)達(dá)到14～17億個(gè)/克時(shí)，判斷發(fā)酵完成。作為優(yōu)選技術(shù)方案，在步驟五中糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.01～0.03％；在步驟六裝袋時(shí)，向步驟五獲得的物料中加入其重量的0.5-1％的無(wú)水乙醇、0.1-0.3％乙酸乙酯、0.1-0.35％的木瓜蛋白酶。本發(fā)明的有益效果如下。本發(fā)明采用特有的液體培養(yǎng)基及液體發(fā)酵工藝培養(yǎng)液體種子；為保證固體發(fā)酵的深度發(fā)酵，在固體發(fā)酵階段加入了糖化酶，發(fā)酵工藝培養(yǎng)高密度的酵母細(xì)胞；通過(guò)特殊的編織袋細(xì)胞厭氧自溶工藝使菌體自溶，再經(jīng)過(guò)低溫干燥、粉碎后而制成的高活性生物制品。本發(fā)明生產(chǎn)工藝具有節(jié)水、節(jié)能、酵母菌菌數(shù)高、環(huán)保、產(chǎn)品工藝及質(zhì)量容易控制的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，具有生產(chǎn)成本低的特點(diǎn)。本發(fā)明采用帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋瓶這種價(jià)格低廉的自溶容器，設(shè)備投資低。由于各個(gè)編織袋的空間相互獨(dú)立，便于進(jìn)行底物特性檢測(cè)，便于檢驗(yàn)自溶效果，便于試驗(yàn)和控制自溶參數(shù)，便于運(yùn)用單因素和多因素正交試驗(yàn)對(duì)酵母菌的自溶條件進(jìn)行優(yōu)化，從而得到最佳溫度、濕度和ph，便于分析接種量對(duì)自溶周期的影響；可以靈活的制定避免染菌的對(duì)策，便于對(duì)溫度、通風(fēng)與傳質(zhì)、傳熱及ph等進(jìn)行控制；各個(gè)編織袋容器內(nèi)的雜菌不容易相互影響。環(huán)境比較控制，產(chǎn)品均勻，溫度均勻。本發(fā)明工藝縮短了發(fā)酵周期，特別是在編織袋內(nèi)自溶，自溶條件容易控制，降低了雜菌污染程度，自溶效果好，且富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，主要有活性酵母細(xì)胞、葡聚糖、甘露聚糖、酵母代謝產(chǎn)物和變異培養(yǎng)基等，是一種具有生物活性的復(fù)合飼料添加劑。最終制備的酵母培養(yǎng)物與發(fā)酵前相比，粗蛋白含量和脂肪含量及顯著提高；尤其是葡聚糖和甘露聚糖含量高含量達(dá)到x%。本發(fā)明的酵母培養(yǎng)物品質(zhì)優(yōu)良，穩(wěn)定性好，經(jīng)試驗(yàn)證明其功效性強(qiáng)，作為營(yíng)養(yǎng)均衡的飼料添加劑，調(diào)控動(dòng)物體內(nèi)益生菌的代謝，促進(jìn)其生長(zhǎng)，在反芻及畜禽生產(chǎn)上均可廣泛的應(yīng)用。瘤胃微生物蛋白質(zhì)的濃度極顯著增加；斷奶仔豬存活率提高；豬的腹瀉率降低；斷奶仔豬采食量極顯著提高，飼料轉(zhuǎn)化率顯著提高。具體實(shí)施方式下面，結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把購(gòu)得的酵母菌種制成懸浮液，加入無(wú)菌水稀釋到濃度為10-8時(shí)，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株。步驟二：斜面菌種制作按配方要求配置斜面培養(yǎng)基，斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖30g，蛋白胨6g，酵母膏3g，瓊脂粉20g，加水定容至1000ml。將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于121℃滅菌30min，取出擺斜面，冷卻后備用。將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置36h接入步驟一中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的1%，在30℃條件下培養(yǎng)40h，制成斜面菌種。步驟三：三角瓶液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖100g，酵母浸粉20g，硫酸鎂1g，磷酸二氫鉀1g，加水定容至1000ml；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在121℃溫度下滅菌30min，冷卻后備用。在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟二制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的10%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在30℃，轉(zhuǎn)速為190r/min；搖床培養(yǎng)26h后制得三角瓶液體菌種。步驟四：種子罐液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖32kg，酵母浸粉6kg，硫酸鎂0.4kg，磷酸二氫鉀0.3kg，加水定容至300l；密封后在121℃溫度下滅菌30min，降溫至30℃接入步驟三制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的15%，溫度控制在28℃，通氣量6m3/h，培養(yǎng)20h后制得種子罐液體菌種。步驟五：固體發(fā)酵在無(wú)菌條件下，向固體培養(yǎng)基中接入步驟四制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床上在28℃下進(jìn)行固體發(fā)酵。糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.01％。固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮12％，豆粕25％，玉米胚芽粕20％，玉米淀粉6％，棕櫚粕3％，其余為水，混勻放入球鍋100℃下5小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。發(fā)酵床上的物料內(nèi)部溫度超過(guò)45℃，對(duì)物料進(jìn)行翻到降溫處理；發(fā)酵過(guò)程中，于發(fā)酵后30h開(kāi)始取樣，送到化驗(yàn)室進(jìn)行感官、水分、ph值和酵母菌菌數(shù)的檢測(cè)當(dāng)感官有濃郁酸香味、ph值在4～5之間，水分≤30％以及酵母菌菌數(shù)達(dá)到15億個(gè)/克時(shí)，判斷發(fā)酵完成。步驟六：袋內(nèi)細(xì)胞厭氧自溶將步驟五得到的料裝入帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋中。在編制袋中進(jìn)行細(xì)胞厭氧自溶處理。編制袋的容積為0.5立方米。裝滿(mǎn)料的編織袋放置在置物架上，置物架保持通風(fēng)；編織袋外的空氣溫度控制在28℃，自溶時(shí)間控制在25小時(shí)。步驟七：低溫干燥、粉碎對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。實(shí)施例2。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把購(gòu)得的酵母菌種制成懸浮液，加入無(wú)菌水稀釋到濃度為10-8時(shí)，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株。步驟二：斜面菌種制作按配方要求配置斜面培養(yǎng)基，斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖28g，蛋白胨5g，酵母膏2g，瓊脂粉20g，加水定容至1000ml。將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于121℃滅菌28min，取出擺斜面，冷卻后備用。將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置24h接入步驟一中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的0.8%，在28℃條件下培養(yǎng)36h，制成斜面菌種。步驟三：三角瓶液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖100g，酵母浸粉18g，硫酸鎂1g，磷酸二氫鉀0.8g，加水定容至1000ml；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在121℃溫度下滅菌28min，冷卻后備用。在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟二制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的8%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在28℃，轉(zhuǎn)速為180r/min；搖床培養(yǎng)18h后制得三角瓶液體菌種。步驟四：種子罐液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖28kg，酵母浸粉5kg，硫酸鎂0.3kg，磷酸二氫鉀0.25kg，加水定容至300l；密封后在115℃溫度下滅菌28min，降溫至28℃接入步驟三制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的12%，溫度控制在28℃，通氣量5m3/h，培養(yǎng)18h后制得種子罐液體菌種。步驟五：固體發(fā)酵在無(wú)菌條件下，向固體培養(yǎng)基中接入步驟四制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床上在28℃下進(jìn)行固體發(fā)酵。糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.05％。糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.01％，可以消耗氧氣，促進(jìn)厭氧條件。固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮10％，豆粕20％，玉米胚芽粕18％，玉米淀粉5％，棕櫚粕2.5％，其余為水，混勻放入球鍋100℃下4小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。發(fā)酵床上的物料內(nèi)部溫度超過(guò)45℃，對(duì)物料進(jìn)行翻到降溫處理；發(fā)酵過(guò)程中，于發(fā)酵后24h開(kāi)始取樣，送到化驗(yàn)室進(jìn)行感官、水分、ph值和酵母菌菌數(shù)的檢測(cè)當(dāng)感官有濃郁酸香味、ph值在4～5之間，水分≤30％以及酵母菌菌數(shù)達(dá)到14億個(gè)/克時(shí)，判斷發(fā)酵完成。步驟六：袋內(nèi)細(xì)胞厭氧自溶將步驟五得到的料裝入帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋中。在編制袋中進(jìn)行細(xì)胞厭氧自溶處理。編制袋的容積為0.25立方米。裝滿(mǎn)料的編織袋放置在置物架上，置物架保持通風(fēng)；編織袋外的空氣溫度控制在28℃，自溶時(shí)間控制在20小時(shí)。步驟七：低溫干燥、粉碎對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。實(shí)施例3。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把購(gòu)得的酵母菌種制成懸浮液，加入無(wú)菌水稀釋到濃度為10-8時(shí)，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株。步驟二：斜面菌種制作按配方要求配置斜面培養(yǎng)基，斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖35g，蛋白胨7g，酵母膏4g，瓊脂粉25g，加水定容至1000ml。將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于130℃滅菌32min，取出擺斜面，冷卻后備用。將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置48h接入步驟一中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的1.3%，在32℃條件下培養(yǎng)52h，制成斜面菌種。步驟三：三角瓶液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖110g，酵母浸粉23g，硫酸鎂1.2g，磷酸二氫鉀1.1g，加水定容至1000ml；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在130℃溫度下滅菌35min，冷卻后備用。在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟二制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的13%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在32℃，轉(zhuǎn)速為200r/min；搖床培養(yǎng)30h后制得三角瓶液體菌種。步驟四：種子罐液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖35kg，酵母浸粉7kg，硫酸鎂0.5kg，磷酸二氫鉀0.35kg，加水定容至300l；密封后在121℃溫度下滅菌35min，降溫至35℃接入步驟三制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的17%，溫度控制在30℃，通氣量7m3/h，培養(yǎng)24h后制得種子罐液體菌種。步驟五：固體發(fā)酵在無(wú)菌條件下，向固體培養(yǎng)基中接入步驟四制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床上在30℃下進(jìn)行固體發(fā)酵。糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.018％，可以消耗氧氣，促進(jìn)厭氧條件。固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮15％，豆粕26％，玉米胚芽粕23％，玉米淀粉7％，棕櫚粕3.5％，其余為水，混勻放入球鍋100℃下6小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。發(fā)酵床上的物料內(nèi)部溫度超過(guò)45℃，對(duì)物料進(jìn)行翻到降溫處理；發(fā)酵過(guò)程中，于發(fā)酵后33h開(kāi)始取樣，送到化驗(yàn)室進(jìn)行感官、水分、ph值和酵母菌菌數(shù)的檢測(cè)當(dāng)感官有濃郁酸香味、ph值在5之間，水分≤30％以及酵母菌菌數(shù)達(dá)到17億個(gè)/克時(shí)，判斷發(fā)酵完成。步驟六：袋內(nèi)細(xì)胞厭氧自溶將步驟五得到的料裝入帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋中，裝袋時(shí)，向步驟五獲得的物料中加入其重量的0.5％的無(wú)水乙醇、0.1％乙酸乙酯、0.1％的木瓜蛋白酶，可以提高破壁效果。在編制袋中進(jìn)行細(xì)胞厭氧自溶處理。編制袋的容積為1.0立方米。裝滿(mǎn)料的編織袋放置在置物架上，置物架保持通風(fēng)；編織袋外的空氣溫度控制在30℃，自溶時(shí)間控制在30小時(shí)。步驟七：低溫干燥、粉碎對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。實(shí)施例4。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把購(gòu)得的酵母菌種制成懸浮液，加入無(wú)菌水稀釋到濃度為10-8時(shí)，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株。步驟二：斜面菌種制作按配方要求配置斜面培養(yǎng)基，斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖30g，蛋白胨6g，酵母膏3g，瓊脂粉25g，加水定容至1000ml。將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于121℃滅菌32min，取出擺斜面，冷卻后備用。將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置36h接入步驟一中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的0.9%，在28℃條件下培養(yǎng)36～52h，制成斜面菌種。步驟三：三角瓶液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖110g，酵母浸粉18g，硫酸鎂1g，磷酸二氫鉀0.8g，加水定容至1000ml；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在121℃溫度下滅菌35min，冷卻后備用。在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟二制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的13%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在28℃，轉(zhuǎn)速為180r/min；搖床培養(yǎng)18h后制得三角瓶液體菌種。步驟四：種子罐液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖32kg，酵母浸粉7kg，硫酸鎂0.3kg，磷酸二氫鉀0.35kg，加水定容至300l；密封后在121℃溫度下滅菌28min，降溫至35℃接入步驟三制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的12%，溫度控制在28℃，通氣量5m3/h，培養(yǎng)18h后制得種子罐液體菌種。步驟五：固體發(fā)酵在無(wú)菌條件下，向固體培養(yǎng)基中接入步驟四制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床上在30℃下進(jìn)行固體發(fā)酵。糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.023％，可以消耗氧氣，促進(jìn)厭氧條件。固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮12％，豆粕23％，玉米胚芽粕20％，玉米淀粉7％，棕櫚粕2.5％，其余為水，混勻放入球鍋100℃下4小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。發(fā)酵床上的物料內(nèi)部溫度超過(guò)45℃，對(duì)物料進(jìn)行翻到降溫處理；發(fā)酵過(guò)程中，于發(fā)酵后33h開(kāi)始取樣，送到化驗(yàn)室進(jìn)行感官、水分、ph值和酵母菌菌數(shù)的檢測(cè)當(dāng)感官有濃郁酸香味、ph值在4～5之間，水分≤30％以及酵母菌菌數(shù)達(dá)到14億個(gè)/克時(shí)，判斷發(fā)酵完成。步驟六：袋內(nèi)細(xì)胞厭氧自溶將步驟五得到的料裝入帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋中，裝袋時(shí)，向步驟五獲得的物料中加入其重量的0.6％的無(wú)水乙醇、0.2％乙酸乙酯、0.2％的木瓜蛋白酶，可以提高破壁效果。在編制袋中進(jìn)行細(xì)胞厭氧自溶處理。編制袋的容積為0.35立方米。裝滿(mǎn)料的編織袋放置在置物架上，置物架保持通風(fēng)；編織袋外的空氣溫度控制在30℃，自溶時(shí)間控制在30小時(shí)。步驟七：低溫干燥、粉碎對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。實(shí)施例5。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把購(gòu)得的酵母菌種制成懸浮液，加入無(wú)菌水稀釋到濃度為10-8時(shí)，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株。步驟二：斜面菌種制作按配方要求配置斜面培養(yǎng)基，斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖30g，蛋白胨5g，酵母膏3g，瓊脂粉22g，加水定容至1000ml。將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于121℃滅菌28-32min，取出擺斜面，冷卻后備用。將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置36h接入步驟一中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的1.2%，在32℃條件下培養(yǎng)48h，制成斜面菌種。步驟三：三角瓶液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖105g，酵母浸粉19g，硫酸鎂1.1g，磷酸二氫鉀0.9g，加水定容至1000ml；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在121℃溫度下滅菌30min，冷卻后備用。在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟二制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的12%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在30℃，轉(zhuǎn)速為180～200r/min；搖床培養(yǎng)24h后制得三角瓶液體菌種。步驟四：種子罐液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖29kg，酵母浸粉5kg，硫酸鎂0.3kg，磷酸二氫鉀0.25kg，加水定容至300l；密封后在121℃溫度下滅菌30min，降溫至31℃接入步驟三制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的15%，溫度控制在29℃，通氣量5.5m3/h，培養(yǎng)20h后制得種子罐液體菌種。步驟五：固體發(fā)酵在無(wú)菌條件下，向固體培養(yǎng)基中接入步驟四制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床上在28℃下進(jìn)行固體發(fā)酵。糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.03％，可以消耗氧氣，促進(jìn)厭氧條件。固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮11％，豆粕25％，玉米胚芽粕19％，玉米淀粉5.5％，棕櫚粕2.8％，其余為水，混勻放入球鍋100℃下5小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。發(fā)酵床上的物料內(nèi)部溫度超過(guò)45℃，對(duì)物料進(jìn)行翻到降溫處理；發(fā)酵過(guò)程中，于發(fā)酵后26h開(kāi)始取樣，送到化驗(yàn)室進(jìn)行感官、水分、ph值和酵母菌菌數(shù)的檢測(cè)當(dāng)感官有濃郁酸香味、ph值在4～5之間，水分≤30％以及酵母菌菌數(shù)達(dá)到15億個(gè)/克時(shí)，判斷發(fā)酵完成。步驟六：袋內(nèi)細(xì)胞厭氧自溶將步驟五得到的料裝入帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋中，裝袋時(shí)，向步驟五獲得的物料中加入其重量的1％的無(wú)水乙醇、0.3％乙酸乙酯、0.35％的木瓜蛋白酶，可以提高破壁效果。在編制袋中進(jìn)行細(xì)胞厭氧自溶處理。編制袋的容積為0.55立方米。裝滿(mǎn)料的編織袋放置在置物架上，置物架保持通風(fēng)；編織袋外的空氣溫度控制在29℃，自溶時(shí)間控制在26小時(shí)。步驟七：低溫干燥、粉碎對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。實(shí)施例6。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把購(gòu)得的酵母菌種制成懸浮液，加入無(wú)菌水稀釋到濃度為10-8時(shí)，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株。步驟二：斜面菌種制作按配方要求配置斜面培養(yǎng)基，斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖32g，蛋白胨6g，酵母膏3g，瓊脂粉24g，加水定容至1000ml。將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于121℃滅菌30min，取出擺斜面，冷卻后備用。將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置40h接入步驟一中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的1.0%，在30℃條件下培養(yǎng)50h，制成斜面菌種。步驟三：三角瓶液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖108g，酵母浸粉22g，硫酸鎂1.0g，磷酸二氫鉀1.0g，加水定容至1000ml；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在121℃溫度下滅菌30min，冷卻后備用。在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟二制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的12%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在30℃，轉(zhuǎn)速為190r/min；搖床培養(yǎng)28h后制得三角瓶液體菌種。步驟四：種子罐液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖32kg，酵母浸粉6.5kg，硫酸鎂0.45kg，磷酸二氫鉀0.32kg，加水定容至300l；密封后在121℃溫度下滅菌35min，降溫至32℃接入步驟三制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的16%，溫度控制在28℃，通氣量6m3/h，培養(yǎng)24h后制得種子罐液體菌種。步驟五：固體發(fā)酵在無(wú)菌條件下，向固體培養(yǎng)基中接入步驟四制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床上在30℃下進(jìn)行固體發(fā)酵。糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.01～0.03％，可以消耗氧氣，促進(jìn)厭氧條件。固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮14％，豆粕25％，玉米胚芽粕22％，玉米淀粉6％，棕櫚粕3％，其余為水，混勻放入球鍋100℃下5小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。發(fā)酵床上的物料內(nèi)部溫度超過(guò)45℃，對(duì)物料進(jìn)行翻到降溫處理；發(fā)酵過(guò)程中，于發(fā)酵后30h開(kāi)始取樣，送到化驗(yàn)室進(jìn)行感官、水分、ph值和酵母菌菌數(shù)的檢測(cè)當(dāng)感官有濃郁酸香味、ph值在4～5之間，水分≤30％以及酵母菌菌數(shù)達(dá)到26億個(gè)/克時(shí)，判斷發(fā)酵完成。步驟六：袋內(nèi)細(xì)胞厭氧自溶將步驟五得到的料裝入帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋中，裝袋時(shí)，向步驟五獲得的物料中加入其重量的0.5％的無(wú)水乙醇、0.1％乙酸乙酯、0.1％的木瓜蛋白酶，可以提高破壁效果。在編制袋中進(jìn)行細(xì)胞厭氧自溶處理。編制袋的容積為0.75立方米。裝滿(mǎn)料的編織袋放置在置物架上，置物架保持通風(fēng)；編織袋外的空氣溫度控制在30℃，自溶時(shí)間控制在28小時(shí)。步驟七：低溫干燥、粉碎對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。實(shí)施例7。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把購(gòu)得的酵母菌種制成懸浮液，加入無(wú)菌水稀釋到濃度為10-8時(shí)，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株；步驟二：斜面菌種制作按配方要求配置斜面培養(yǎng)基,斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖30g，蛋白胨5g，酵母膏3g，瓊脂粉20-25g，加水定容至1000ml；ph自然；將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于121℃滅菌30min,取出擺斜面，冷卻后備用；將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置24-48h接入步驟（1）中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的1%，在30℃條件下培養(yǎng)48h，制成斜面菌種；步驟三：三角瓶液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖100g，酵母浸粉20g，硫酸鎂1g，磷酸二氫鉀1g，加水定容至1000ml；ph自然；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在121℃溫度下滅菌30min，冷卻后備用；在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟（2）制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的10%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在30℃，轉(zhuǎn)速為180-200r/min；搖床培養(yǎng)24h后制得三角瓶液體菌種，備用；步驟四：種子罐液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖30kg，酵母浸粉6kg，硫酸鎂0.3kg，磷酸二氫鉀0.3kg，加水定容至300l，ph自然；密封后在121℃溫度下滅菌30min，降溫30度接入步驟（3）制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的15%，溫度控制在28-30℃，通氣量5-7m3/h，培養(yǎng)20h后制得種子罐液體菌種，備用步驟五：固體發(fā)酵按配方要求配置固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮20％，豆粕35％，玉米胚芽粕30％，玉米淀粉10％，棕櫚粕5％，加水45％，混勻放入球鍋100度5小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。在無(wú)菌條件下，接入步驟（4）制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床28-30度培養(yǎng)30小時(shí)，酵母菌菌數(shù)達(dá)到15億/克，出料。此過(guò)程會(huì)產(chǎn)生多種酶類(lèi)、酵母細(xì)胞代謝產(chǎn)物等。步驟六：細(xì)胞自溶將發(fā)酵好的料裝入噸袋厭氧細(xì)胞自溶處理，此過(guò)程會(huì)產(chǎn)生葡聚糖和甘露聚糖，還有部分活性酵母細(xì)胞。自溶作用是細(xì)胞的自我毀滅,即溶酶體將酶釋放出來(lái)將自身細(xì)胞降解。自溶時(shí)間24h。在正常情況下,溶酶體的膜是十分穩(wěn)定的,溶酶體的酶也安全地被包裹在溶酶體內(nèi),不會(huì)對(duì)細(xì)胞自身造成傷害。如果細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷,造成溶酶體破裂,那么細(xì)胞就會(huì)在溶酶體酶的作用下被降解,如某些紅細(xì)胞常會(huì)有這種情況發(fā)生。如果錯(cuò)誤的發(fā)生自溶（由于內(nèi)界或外界因素），則會(huì)導(dǎo)致疾病發(fā)生（如矽肺）。步驟七：低溫干燥、低溫精細(xì)粉碎。對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。本實(shí)施例酵母培養(yǎng)物是一種采用特有的液體培養(yǎng)基及液體發(fā)酵工藝培養(yǎng)液體種子，再用獨(dú)特的固體深度發(fā)酵工藝培養(yǎng)高密度的酵母細(xì)胞，通過(guò)特殊工藝使菌體自溶，再經(jīng)過(guò)低溫干燥、粉碎后而制成的高活性生物制品。實(shí)施例8。一種酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括下列步驟。步驟一：菌種制備與活化把購(gòu)得的酵母菌種制成懸浮液，加入無(wú)菌水稀釋到濃度為10-8時(shí)，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)其進(jìn)行涂布分離或劃線(xiàn)分離，挑取部分單菌落進(jìn)行生產(chǎn)能力的測(cè)定；經(jīng)反復(fù)篩選，確定出經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的酵母菌活性強(qiáng)、活菌數(shù)高的菌株代替原來(lái)的菌株。步驟二：斜面菌種制作按配方要求配置斜面培養(yǎng)基，斜面培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖30g，蛋白胨5.5g，酵母膏3.5g，瓊脂粉22g，加水定容至1000ml。將斜面培養(yǎng)基加熱使各組分充分溶解，然后分裝于若干支試管中，密封試管；將試管于121℃滅菌30min，取出擺斜面，冷卻后備用。將上述斜面培養(yǎng)基置于干燥箱或培養(yǎng)箱中放置26h接入步驟一中制備的菌種，其中酵母菌接種量為試管中混合物總重量的0.9%，在30℃條件下培養(yǎng)40h，制成斜面菌種。步驟三：三角瓶液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖105g，酵母浸粉20g，硫酸鎂1.0g，磷酸二氫鉀0.9g，加水定容至1000ml；分裝于若干個(gè)500ml的三角瓶中，每支三角瓶裝量為100ml；密封后在121℃溫度下滅菌30min，冷卻后備用。在無(wú)菌條件下，每個(gè)三角瓶中的液體培養(yǎng)基接入步驟二制得的斜面菌種，其中酵母菌接種量為三角瓶中混合物總重量的10%，對(duì)三角瓶進(jìn)行搖床培養(yǎng)，溫度控制在30℃，轉(zhuǎn)速為190r/min；搖床培養(yǎng)20h后制得三角瓶液體菌種。步驟四：種子罐液體菌種制作按配方要求配置液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基的各組份重量份為：葡萄糖30kg，酵母浸粉5.5kg，硫酸鎂0.4kg，磷酸二氫鉀0.3kg，加水定容至300l；密封后在121℃溫度下滅菌30min，降溫至30℃接入步驟三制取的液體菌種，其中酵母菌接種量為混合物總重量的13%，溫度控制在28℃，通氣量5m3/h，培養(yǎng)20h后制得種子罐液體菌種。步驟五：固體發(fā)酵在無(wú)菌條件下，向固體培養(yǎng)基中接入步驟四制得的液體菌種及糖化酶，然后上發(fā)酵床上在28℃下進(jìn)行固體發(fā)酵。糖化酶的加入量為發(fā)酵床上的物料重量的0.08％。固體培養(yǎng)基的各組份重量份為：麩皮12％，豆粕22％，玉米胚芽粕20％，玉米淀粉5％，棕櫚粕3％，其余為水，混勻放入球鍋100℃下6小時(shí)滅菌，滅菌完畢放入無(wú)菌間降溫備用。發(fā)酵床上的物料內(nèi)部溫度超過(guò)45℃，對(duì)物料進(jìn)行翻到降溫處理；發(fā)酵過(guò)程中，于發(fā)酵后26h開(kāi)始取樣，送到化驗(yàn)室進(jìn)行感官、水分、ph值和酵母菌菌數(shù)的檢測(cè)當(dāng)感官有濃郁酸香味、ph值在4～5之間，水分≤30％以及酵母菌菌數(shù)達(dá)到15億個(gè)/克時(shí)，判斷發(fā)酵完成。步驟六：袋內(nèi)細(xì)胞厭氧自溶將步驟五得到的料裝入帶有塑料膜內(nèi)層的不透氣的編織袋中，在編制袋中進(jìn)行細(xì)胞厭氧自溶處理。編制袋的容積為0.35立方米。裝滿(mǎn)料的編織袋放置在置物架上，置物架保持通風(fēng)；編織袋外的空氣溫度控制在28℃，自溶時(shí)間控制在24小時(shí)。步驟七：低溫干燥、粉碎對(duì)步驟六得到的物料低溫干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的溫度不超過(guò)45℃。試驗(yàn)例1。將按照上述實(shí)施例方法生產(chǎn)所得的酵母培養(yǎng)物進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)的主要指標(biāo)有粗蛋白，粗灰分，酵母細(xì)胞數(shù)，甘露聚糖，雜菌。所述雜菌主要為黃曲霉素。經(jīng)檢測(cè)，酵母培養(yǎng)物有效成分含量如下表所示。表1酵母培養(yǎng)物有效成分含量粗蛋白質(zhì)（%）粗灰分（%）酵母細(xì)胞數(shù)（個(gè)/g）甘露聚糖mg/kg雜菌（個(gè)/g）實(shí)施例115.95.95×1081.01×106實(shí)施例218.25.22×1091.25×105實(shí)施例317.34.85×1080.81×106實(shí)施例435.15.06×1082.43×106實(shí)施例525.25.66×1082.12×106實(shí)施例626.34.65×1081.31×106實(shí)施例717.95.18×1080.74×106實(shí)施例816.84.65×1080.91×106檢測(cè)方法為：粗蛋白，按gb/t6432-1994檢測(cè)；粗灰分，按gb/t6438-2007檢測(cè)；酵母細(xì)胞數(shù)，按gb/t13093-2006檢測(cè)。水分含量＜15%，未檢出沙門(mén)氏菌。產(chǎn)品為淡黃色粉狀物，無(wú)變質(zhì)、結(jié)塊及異味，具有正常的發(fā)酵香氣。選取遺傳背景相同、胎次及妊娠期一致、體況良好且生產(chǎn)性能相近的48頭母豬，隨機(jī)分為a、b兩個(gè)處理組，a組為對(duì)照組，b組為試驗(yàn)組，每組24頭豬，每頭母豬作為1個(gè)重復(fù)。在試驗(yàn)組母豬妊娠后期和哺乳期日糧中添加本發(fā)明的飼料添加劑酵母培養(yǎng)物，添加量為每噸日糧中添加1.5kg酵母培養(yǎng)物，對(duì)照組不添加酵母培養(yǎng)物。試驗(yàn)周期從母豬臨產(chǎn)前21天開(kāi)始，至仔豬21天斷奶時(shí)結(jié)束。試驗(yàn)過(guò)程中記錄初生仔豬數(shù)、平均窩產(chǎn)活仔數(shù)、平均初生窩重量、母豬平均日采食量、仔豬平均斷奶個(gè)體重等，同時(shí)，觀察和記錄試驗(yàn)豬的健康狀態(tài)及母豬的泌乳情況等。表2酵母培養(yǎng)物對(duì)母豬繁殖性能的影響表3酵母培養(yǎng)物對(duì)母豬繁殖性能的影響注：同行肩標(biāo)星號(hào)表示差異極顯著(p<0.01)。從表2可見(jiàn)，與對(duì)照組相比，母豬日糧中添加酵母培養(yǎng)物后其采食量明顯上升，平均日采食量提高了11.36%(p＜0.05)。另外，在日糧中加入酵母培養(yǎng)物的母豬體況也比對(duì)照組好，食欲也比對(duì)照組旺盛，表明酵母培養(yǎng)物能改善母豬體況，進(jìn)而增加母豬的采食量。添加0.10%酵母培養(yǎng)物后平均窩產(chǎn)活仔數(shù)、仔豬平均初生重及平均初生窩重與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(p＞0.05)。從表3可見(jiàn)，試驗(yàn)組仔豬斷奶質(zhì)量為6.37kg，比對(duì)照組提高22.5％。統(tǒng)計(jì)分析表明，試驗(yàn)組的仔豬斷奶質(zhì)量顯著高于對(duì)照組。由此可見(jiàn)，添加本發(fā)明酵母培養(yǎng)物在母豬日糧中，能顯著提高仔豬斷奶質(zhì)量。在仔豬初生重?zé)o顯著差異的情況下，添加0.10％產(chǎn)品日增重分別比對(duì)照組提高了28.8％，差異極顯著(p＜0.01)。當(dāng)前第1頁(yè)12