專利名稱：一種海洋紅酵母培養(yǎng)物的發(fā)酵方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種微生物培養(yǎng)物的發(fā)酵方法，具體地說是一種海洋紅酵母培養(yǎng) 物的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
海洋紅酵母(Phodotorula benthica)是海洋中存在的一類抗逆性很強的天然真 菌。菌體圓形或卵圓形，菌落色紅，亮麗。富含蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素，不飽和脂肪酸、肝糖、 類胡蘿卜素、蝦青素和各種未知營養(yǎng)因子等生物活性物質(zhì)。海洋紅酵母抗氧化能力極強，被 譽為“超級維生素E”，并具有增食、益生腸道和抗病功效，多用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。如何降低海 洋紅酵母的生產(chǎn)成本，使其更廣泛應(yīng)用于畜禽水產(chǎn)動物的養(yǎng)殖，具有重要的實踐意義。申請?zhí)枮?00610047848的中國專利申請文件中公開了一種海參用海洋膠紅酵 母的生產(chǎn)方法，目的是獲取活的一種在海參上應(yīng)用效果好的海洋紅酵母菌。申請?zhí)枮?200810238710的中國專利申請文件中公開了一種海洋紅酵母發(fā)酵飼料的制備方法，是一種 海洋紅酵母和乳酸菌混合發(fā)酵的制備方法。對固體發(fā)酵和固體發(fā)酵階段對海洋紅酵母培養(yǎng) 物的破壁過程等生產(chǎn)過程沒見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種充分產(chǎn)海洋紅酵母代謝產(chǎn)物、酵母細胞壁和酵母內(nèi)容 物的發(fā)酵方法。本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的包括如下步驟(1)將海洋紅酵母菌菌種分離、篩選與純化；(2)純化后的海洋紅酵母菌進行液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化；(3)經(jīng)液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化海洋紅酵母菌進行固體有氧發(fā)酵以及固體厭氧發(fā)酵海 洋紅酵母破壁；(4)低溫干燥。本發(fā)明還可以包括1、所述液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化，是在重量百分比為葡萄糖1 3%、蛋白胨0.5 1.2%、酵母膏0.2 0.5%、硫酸銨0.5 1.0%、磷酸氫二鉀0. 1 0.3%、磷酸二氫鉀 0. 1 0. 3%、硫酸鎂0. 1 0. 5%、余量為海水或半海水構(gòu)成的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵轉(zhuǎn) 化72 100小時。2、所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基是由葡萄糖、蔗糖、油脂、豆粕、棉粕、菜粕、花生粕、胡麻 粕、甜菜粕、麥麩、稻糠、次粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米一種或者是兩種或 兩種以上的混合物組成的固體發(fā)酵培養(yǎng)基；液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化后的轉(zhuǎn)化液與固體發(fā)酵培 養(yǎng)基的重量比為比例為1 2 1 3。3、所述固體厭氧發(fā)酵是在不超45°C的溫度下發(fā)酵36小時；所述固體厭氧發(fā)酵海洋紅酵母破壁是在50 60°C溫度下，發(fā)酵12 24小時。本發(fā)明方法所得產(chǎn)品，具有獨特的芳香氣味。經(jīng)破壁后紅酵母細胞壁、內(nèi)容物等益 生成分，可發(fā)揮活菌所不具備或體現(xiàn)不充分的增食、抗氧化、吸附毒素、腸道益生等功效，按 0. 01% 20%添加比例生產(chǎn)豬、牛、羊、禽類、水產(chǎn)動物、毛皮動物飼料。本發(fā)明的產(chǎn)品與方法相對于現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)點(1)本發(fā)明吸取有關(guān)微生物制劑生產(chǎn)方法的優(yōu)點，采用已知的海洋紅酵母為菌種， 以蔗糖、豆粕(餅)、棉粕(餅)、菜粕(餅)、花生粕(餅)、胡麻粕(餅)等為原料，來源廣 泛，方法過程簡單，產(chǎn)品價格低廉。(2)本發(fā)明采用微生物液體-固體兩相發(fā)酵新方法，通過大劑量接種，能夠解決固 體發(fā)酵過程中，發(fā)酵周期長，容易污染等問題，生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。(3)本發(fā)明采用微生物液體_固體兩相發(fā)酵新方法，還通過破壁產(chǎn)生大量酵母培 養(yǎng)物成分，具有益生飼料的特點。(4)本發(fā)明生產(chǎn)出的海洋紅酵母培養(yǎng)物用于畜禽水產(chǎn)毛皮動物飼料，可以提高動 物抗應(yīng)激能力，提高增重速度，改善母畜繁殖性能，提升肉、蛋、奶、水產(chǎn)品品質(zhì)。(5)本發(fā)明所有培養(yǎng)菌液均混入固體料，繼續(xù)發(fā)酵制成成品，無廢液廢渣排放，完 全符合環(huán)保要求。(6)本產(chǎn)品低溫干燥，極大保護了生物學效價，具有發(fā)酵香味，從而增加了飼料的 適口性。
具體實施例方式下面舉例對本發(fā)明做更詳細地描述實施例11、菌種本發(fā)明所述酵母為海洋紅酵母。菌種分離、篩選與純化步驟中，可在海水 或半海水特定的紅酵母培養(yǎng)基中，表現(xiàn)出脂溶性艷麗紅色色素的特定特征，以此確定所用 菌株。2、培養(yǎng)基葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏1.0%、硫酸銨0.5、磷酸氫二鉀 0. 1%、磷酸二氫鉀0. 1%、硫酸鎂0. 1%、瓊脂2%、余量為海水或半海水。pH 6.8，培養(yǎng)4811， 確認菌種能在上述培養(yǎng)液中保持生長良好。3、斜面培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏1.0%、磷酸氫二鉀0. 1%、磷酸二氫鉀0. 1%, 硫酸鎂0. 1%、瓊脂2. 0%、余量為海水或半海水，PH 6. 8、115°C滅菌18分鐘。將試管菌種 擴繁至培養(yǎng)皿，放入30°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)36h。4、搖瓶種子培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏1.0%、硫酸銨0.5%、磷酸氫二鉀0. 1%、磷酸 二氫鉀0. 1%、硫酸鎂0. 1%、余量為海水或半海水、起始pH 6.8、115°C滅菌18分鐘。將培 養(yǎng)皿菌種接入搖瓶，放入30°C恒溫搖床中，200r/min振蕩培養(yǎng)36h。5、一級種子罐擴繁培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件培養(yǎng)基豆粕1.0%、玉米0.5%、蔗糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏1.0%、硫酸銨 0. 5 %、磷酸二氫鉀0. 1 %、硫酸銨0.2%、氯化鈉0. 05 %、硫酸鎂0.05%、消泡劑0. 05 %。起
4始pH 6. 8、121°C滅菌30分鐘。搖瓶到種子罐接種量按10%接種，種子罐培養(yǎng)時間為24h。6、二級種子罐擴繁轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件二級種子罐擴繁培養(yǎng)基與上述培養(yǎng)基配方相同，培養(yǎng)條件種的培養(yǎng)時間為72h。7、固體發(fā)酵將二級種子罐擴繁轉(zhuǎn)化培養(yǎng)液與固體發(fā)酵料按照1 2比例混合；固體培養(yǎng)基于 含有葡萄糖或蔗糖；含有豆粕(餅)、棉粕(餅)、菜粕(餅)、玉米、麥麩中的兩種或多種混 合物；調(diào)整固體含水量達到45%開始發(fā)酵。對發(fā)酵物料溫度進行監(jiān)控，使溫度不超45°C;有 氧發(fā)酵36h后進入?yún)捬醢l(fā)酵，溫度達到50°C以上，發(fā)酵6 10小時破壁，之后在低于80°C 條件下干燥。干燥好的發(fā)酵料具有發(fā)酵香味，呈微酸性。實施例2 將本發(fā)明生產(chǎn)出的海洋紅酵母培養(yǎng)物按每噸母豬全價飼料添加1kg，將飼料喂給 哺乳母豬，分組測定采食量，結(jié)果使用本發(fā)明產(chǎn)品組，母豬日采食量提高200克以上，仔豬 斷奶窩重日提高130克以上。實施例3將本發(fā)明生產(chǎn)出的海洋紅酵母培養(yǎng)物按每噸乳豬全價飼料添加1kg，將飼料喂給 斷奶10天后的乳豬，分組測定采食量，結(jié)果使用本發(fā)明產(chǎn)品組，乳豬日采食量比對照組提 高30克以上。本發(fā)明產(chǎn)品測定結(jié)果按國標方法進行測定，類胡蘿卜素含量> 20yg/kg;酵母細胞壁多糖> IOOmg/ kg，粗蛋白含量10% 50% ；黃曲霉毒素< 30yg/kg。
權(quán)利要求
一種海洋紅酵母培養(yǎng)物的發(fā)酵方法，其特征是包括如下步驟(1)將海洋紅酵母菌菌種分離、篩選與純化；(2)純化后的海洋紅酵母菌進行液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化；(3)經(jīng)液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化海洋紅酵母菌進行固體有氧發(fā)酵以及固體厭氧發(fā)酵海洋紅酵母破壁；(4)低溫干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海洋紅酵母培養(yǎng)物的發(fā)酵方法，其特征是所述液體發(fā)酵擴 繁與轉(zhuǎn)化，是在重量百分比為葡萄糖1 3%、蛋白胨0. 5 1. 2%、酵母膏0. 2 0. 5%, 硫酸銨0.5 1.0%、磷酸氫二鉀0. 1 0. 3%、磷酸二氫鉀0. 1 0.3%、硫酸鎂0. 1 0. 5%、余量為海水或半海水構(gòu)成的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵轉(zhuǎn)化72 100小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的海洋紅酵母培養(yǎng)物的發(fā)酵方法，其特征是所述固體發(fā) 酵培養(yǎng)基是由葡萄糖、蔗糖、油脂、豆粕、棉粕、菜粕、花生粕、胡麻粕、甜菜粕、麥麩、稻糠、次 粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米一種或者是兩種或兩種以上的混合物組成的 固體發(fā)酵培養(yǎng)基；液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化后的轉(zhuǎn)化液與固體發(fā)酵培養(yǎng)基的重量比為比例為 1 2 1 3。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的海洋紅酵母培養(yǎng)物的發(fā)酵方法，其特征是所述固體厭 氧發(fā)酵是在不超45°C的溫度下發(fā)酵36小時；所述固體厭氧發(fā)酵海洋紅酵母破壁是在50 60°C溫度下，發(fā)酵12 24小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的海洋紅酵母培養(yǎng)物的發(fā)酵方法，其特征是所述固體厭氧發(fā) 酵是在不超45°C的溫度下發(fā)酵36小時；所述固體厭氧發(fā)酵海洋紅酵母破壁是在50 60°C 溫度下，發(fā)酵12 24小時。
全文摘要
本發(fā)明提供的是一種海洋紅酵母培養(yǎng)物的發(fā)酵方法。包括如下步驟(1)將海洋紅酵母菌菌種分離、篩選與純化；(2)純化后的海洋紅酵母菌進行液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化；(3)經(jīng)液體發(fā)酵擴繁與轉(zhuǎn)化海洋紅酵母菌進行固體有氧發(fā)酵以及固體厭氧發(fā)酵海洋紅酵母破壁；(4)低溫干燥。本發(fā)明具有生產(chǎn)工藝簡單，周期短，成本低，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定等特點。本發(fā)明的方法得到的產(chǎn)品具有很好的增食、腸道益生、抗氧化作用，可作為飼料原料或飼料添加劑用于畜禽水產(chǎn)毛皮動物的飼養(yǎng)。
文檔編號C12N1/16GK101914460SQ201010226038
公開日2010年12月15日 申請日期2010年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月13日
發(fā)明者劉娜, 張偉強, 潘軍, 薛德林 申請人:廣州市博善生物飼料有限公司