技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種植物等位基因不平衡表達(dá)檢測方法，包括以下步驟：1)比較候選基因序列，篩選標(biāo)記等位基因的SNPs位點(diǎn)；2)根據(jù)篩選到的SNPs位點(diǎn)設(shè)計qPCR特異引物和簡并引物；3)用qPCR特異引物和簡并引物分別對待測樣本的cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物；4)若擴(kuò)增產(chǎn)物的熔解曲線為單峰，根據(jù)PCR擴(kuò)增的Ct值計算待測樣本等位基因表達(dá)特異性；所述qPCR特異引物包括正向引物和反向引物，對引物3'末端與SNP位點(diǎn)3'末端互補(bǔ)的核苷酸進(jìn)行LNA修飾。所述方法增加了檢測結(jié)果的精確性和可靠性，并且簡化了實(shí)驗(yàn)配套條件，顯著地降低了實(shí)驗(yàn)成本。

技術(shù)研發(fā)人員：張德強(qiáng);宋躍朋;次東
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京林業(yè)大學(xué)
文檔號碼：201611200502
技術(shù)研發(fā)日：2016.12.22
技術(shù)公布日：2017.05.31