1.一種快速生產(chǎn)除蟲菊酯的方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)選無性系個(gè)體為母株,取其花蕾作外植體,當(dāng)花蕾長至長度為0.4~0.8 cm時(shí),將花蕾用70~80%的乙醇水溶液浸泡20~60s,取出再放入0.1~0.3wt%的消毒水浸泡15min,再用無菌水沖洗3~5次;
(2)在無菌條件下,從花蕾中剝?nèi)』ㄋ幗臃N于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)愈傷組織,先在20~25 ℃暗培養(yǎng)13~16 d,然后在20~28℃下進(jìn)行光照培養(yǎng)13~16d,光照14 ~16h/d,光強(qiáng)2000 ~3000lx;
(3)待愈傷組織長到花藥重量的50~100倍時(shí),取出愈傷組織搗碎,加入正己烷作為提取劑,渦旋振蕩40~120s,靜置25~60min,超聲萃取10~30 min,離心,取上清液,加入2~3%的硫酸鈉水溶液,振搖,收集上層有機(jī)相,經(jīng)吸水的干燥劑干燥后,濃縮,濃縮液加入PSA和C18渦旋振蕩,離心,取上清液,獲得除蟲菊酯產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速生產(chǎn)除蟲菊酯的方法,其特征在于:
所述步驟(1)中,消毒水為升汞水溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速生產(chǎn)除蟲菊酯的方法,其特征在于:
所述步驟(2)中,所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中為:MS +2,4-D 1.0 mg/ L +BA 1.0 mg/ L+IAA 0.5 mg/ L+NAA0.25 mg/L +蔗糖50 g/L +瓊脂7 g/L,pH值為5.4~5.6。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速生產(chǎn)除蟲菊酯的方法,其特征在于:
所述步驟(2)中,花藥接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)愈傷組織,先在25 ℃暗培養(yǎng)14 d,然后在28℃下進(jìn)行光照培養(yǎng)14d,光照16h/d,光強(qiáng)2000 lx。
5.根據(jù)權(quán)利1所述的快速生產(chǎn)除蟲菊酯的方法,其特征在于:
所述步驟(3)中,所述吸水的干燥劑為無水硫酸鈉。
6.根據(jù)權(quán)利1所述的快速生產(chǎn)除蟲菊酯的方法,其特征在于:
所述步驟(3)中,愈傷組織與正己烷的固液比為0.12~0.20g/mL。
7.根據(jù)權(quán)利1所述的快速生產(chǎn)除蟲菊酯的方法,其特征在于:
所述步驟(3)中,所述愈傷組織、PSA和C18的質(zhì)量比為100:2~5:2~5。