本發(fā)明涉及一種透明質(zhì)酸的制備方法，具體涉及一種從海蜇中提取透明質(zhì)酸的方法。
背景技術(shù)：
海蜇是一種大型的食用水母，在我國(guó)有著廣泛的分布，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。據(jù)測(cè)定，每百克海蜇含蛋白質(zhì)12.3克，碳水化合物4克，鈣182毫克，碘132微克以及多種維生素及膠原蛋白。膠原蛋白含親水性的天然保濕因子，且三螺旋結(jié)構(gòu)能強(qiáng)勁鎖住水分，對(duì)皮膚的滲透性強(qiáng)，可透過(guò)角質(zhì)層與皮膚上皮細(xì)胞結(jié)合，參與和改善皮膚細(xì)胞的代謝，使皮膚中的膠原蛋白活性加強(qiáng)，它能保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性，改善皮膚細(xì)胞生存環(huán)境和促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝，增強(qiáng)血液循環(huán)，達(dá)到滋潤(rùn)皮膚的目的。皮膚的光澤取決于含水量，膠原蛋白良好的保水能力使皮膚水潤(rùn)亮澤，散發(fā)健康的光彩。當(dāng)膠原蛋白被皮膚吸收后，填充在皮膚真皮之間，增加皮膚緊密度，產(chǎn)生皮膚張力，縮小毛孔，使皮膚緊繃而富有彈性。真皮中豐滿的膠原蛋白層將皮膚細(xì)胞撐起，結(jié)合保濕和抑制皺紋的作用，共同達(dá)到舒展粗紋、淡化細(xì)紋的功效?；钚阅z原蛋白本身具有消炎和更新肌膚的作用，能直接滲入肌膚用于填充深的皺紋、皮膚損傷造成的缺損（如青春痘疤）和修補(bǔ)臉形的缺陷等。
海蜇體內(nèi)含有保濕因子，保濕因子的典型代表物透明質(zhì)酸（HA），HA是目前世界公認(rèn)的性能優(yōu)越的保濕因子，其分子中的羧基和其他極性基因可與水形成氫鍵而結(jié)合大量的水，當(dāng)含量低于0.1%時(shí)，HA可結(jié)合其質(zhì)量1000倍的水，這種天然保濕因子可使皮膚含水量增加，表皮角質(zhì)層柔軟，改善皮膚表面的血液循環(huán)，增強(qiáng)皮膚彈性，阻止表皮細(xì)胞纖維化，從而起到護(hù)膚作用。但是HA與蛋白質(zhì)是以結(jié)合狀態(tài)存在，不易提取和純化。隨著人們生活水平的日益提高，越來(lái)越多的人更注重健康與美容，而純天然提取制成的美容化妝品將更受青睞，市場(chǎng)前景潛力很大。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了一種工藝簡(jiǎn)單、效率高的以海蜇為原料提取透明質(zhì)酸的方法。
本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
一種以海蜇為原料提取透明質(zhì)酸的方法，包括下述步驟:
a.原料處理：取新鮮的海蜇，剪碎，陰涼處晾干；
b.浸泡：取晾干后的海蜇，加入2重量份的丙酮浸泡24小時(shí)，直至海蜇變硬；
c.提取：取出上步驟的海蜇，加3-5重量份0.5M醋酸加熱回流提取6-8h，過(guò)濾，收集濾液，向?yàn)V液中加入等體積的Seavg試劑（氯仿、正丁醇混合液（氯仿：正丁醇＝4：1）），攪拌均勻，靜置；
d.醇沉：待靜置分層后取上清液加入2重量份95%（v/v）乙醇攪拌均勻，靜置使分層，過(guò)濾；
e.取濾液，重復(fù)d步驟一次；
f.干燥：將上步驟兩次醇沉后得到的濾液，進(jìn)行真空干燥，真空度維持在0.1MPa，分兩個(gè)階段干燥，第一階段保持溫度85℃，時(shí)間維持1小時(shí)，然后升溫，第二階段溫度115℃，時(shí)間維持3小時(shí)，即得成品。
采用本發(fā)明的方法得到的透明質(zhì)酸，具有如下性狀：白色無(wú)定形粉末,無(wú)臭無(wú)味，易吸濕，含量在94%以上。
采用本發(fā)明的方法以海蜇為原料提取透明質(zhì)酸，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
1、用丙酮浸泡海蜇可以使海蜇脫水；
2、采用加熱回流的方式進(jìn)行提取純化，相比直接加熱提取，效果很好；
3、在濾液中加入Seavg試劑（氯仿：正丁醇＝4：1）可有效去除蛋白質(zhì)，再靜置分層后除去蛋白雜質(zhì)和其他膠質(zhì)；
4、真空干燥真空度保持在0.1MPa，分兩個(gè)階段，不同的溫度、時(shí)間來(lái)干燥，所得產(chǎn)品性狀比同一個(gè)溫度維持一段時(shí)間干燥，效果要好。
具體實(shí)施方式
下面以實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例1：
一種以海蜇為原料提取透明質(zhì)酸的方法，包括下述步驟:
a.原料處理：取新鮮的海蜇，剪碎，陰涼處晾干；
b.浸泡：取晾干后的海蜇，加入2重量份的丙酮浸泡24小時(shí)，直至海蜇變硬；
c.提?。喝〕錾喜襟E的海蜇，加3重量份0.5M醋酸加熱回流提取8h，過(guò)濾，收集濾液，向?yàn)V液中加入等體積的Seavg試劑（氯仿、正丁醇混合液（氯仿：正丁醇＝4：1）），攪拌均勻，靜置；
d.醇沉：待靜置分層后取上清液加入2重量份95%（v/v）乙醇攪拌均勻，靜置使分層，過(guò)濾；
e.取濾液，重復(fù)d步驟一次；
f.干燥：將上步驟兩次醇沉后得到的濾液，進(jìn)行真空干燥，真空度維持在0.1MPa，分兩個(gè)階段干燥，第一階段保持溫度85℃，時(shí)間維持1小時(shí)，然后升溫，第二階段溫度115℃，時(shí)間維持3小時(shí)，即得成品，含量94.5%。
實(shí)施例2：
一種以海蜇為原料提取透明質(zhì)酸的方法，包括下述步驟:
a.原料處理：取新鮮的海蜇，剪碎，陰涼處晾干；
b.浸泡：取晾干后的海蜇，加入2重量份的丙酮浸泡24小時(shí)，直至海蜇變硬；
c.提?。喝〕錾喜襟E的海蜇，加5重量份0.5M醋酸加熱回流提取6h，過(guò)濾，收集濾液，向?yàn)V液中加入等體積的Seavg試劑（氯仿、正丁醇混合液（氯仿：正丁醇＝4：1）），攪拌均勻，靜置；
d.醇沉：待靜置分層后取上清液加入2重量份95%（v/v）乙醇攪拌均勻，靜置使分層，過(guò)濾；
e.取濾液，重復(fù)d步驟一次；
f.干燥：將上步驟兩次醇沉后得到的濾液，進(jìn)行真空干燥，真空度維持在0.1MPa，分兩個(gè)階段干燥，第一階段保持溫度85℃，時(shí)間維持1小時(shí)，然后升溫，第二階段溫度115℃，時(shí)間維持3小時(shí)，即得成品，含量95.5%。
實(shí)施例3：
一種以海蜇為原料提取透明質(zhì)酸的方法，包括下述步驟:
a.原料處理：取新鮮的海蜇，剪碎，陰涼處晾干；
b.浸泡：取晾干后的海蜇，加入2重量份的丙酮浸泡24小時(shí)，直至海蜇變硬；
c.提取：取出上步驟的海蜇，加4重量份0.5M醋酸加熱回流提取8h，過(guò)濾，收集濾液，向?yàn)V液中加入等體積的Seavg試劑（氯仿、正丁醇混合液（氯仿：正丁醇＝4：1）），攪拌均勻，靜置；
d.醇沉：待靜置分層后取上清液加入2重量份95%（v/v）乙醇攪拌均勻，靜置使分層，過(guò)濾；
e.取濾液，重復(fù)d步驟一次；
f.干燥：將上步驟兩次醇沉后得到的濾液，進(jìn)行真空干燥，真空度維持在0.1MPa，分兩個(gè)階段干燥，第一階段保持溫度85℃，時(shí)間維持1小時(shí)，然后升溫，第二階段溫度115℃，時(shí)間維持3小時(shí)，即得成品，含量96.3%。
實(shí)施例4：
將實(shí)施例1所得到的產(chǎn)品，用紅外分光光度計(jì)法進(jìn)行鑒定。
檢測(cè)儀器：紅外光譜儀；
波長(zhǎng)范圍：4000～400cm-1,掃描速度64次/s，樣品制備采用溴化鉀壓片法。
按紅外分光光譜法操作方法進(jìn)行操作，掃描出的圖譜與標(biāo)準(zhǔn)HA的圖譜對(duì)比，保留時(shí)間一致即可。