1.一個影響豬體重和PRRSV抗性的分子標(biāo)記,其特征在于所述分子標(biāo)記位于豬SLA-DRB1基因啟動子區(qū)-58位點,且具有C/T多態(tài)性,CC型體重顯著高于CT型和TT型,仔豬感染PRRSV后CC型豬血液中病毒載量低于CT型和TT型。
2.權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記在豬分子育種中的應(yīng)用。
3.一種用于檢測權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的引物對,其特征在于上游引物P1如序列表中SEQ ID NO:1所示,下游引物P2如序列表中SEQ ID NO:2所示。
4.權(quán)利要求3所述的引物對在豬分子育種中的應(yīng)用。
5.一種檢測權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的方法,其特征在于包含PCR擴增豬基因組中含有權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的一段序列,對擴增產(chǎn)物進(jìn)行測序,判讀豬SLA-DRB1基因啟動子區(qū)-58位點的C/T多態(tài)性。
6.一種檢測權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的方法,其特征在于包括利用權(quán)利要求3所述的引物對PCR擴增豬基因組中含有權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的一段序列,利用KpnⅠ限制性內(nèi)切酶對所述的擴增產(chǎn)物進(jìn)行酶切、電泳分型,獲得216bp、31bp兩個片段的定義為CC型,獲得247bp、216bp、31bp三個片段的定義為CT型,獲得247bp片段的定義為TT型。
7.一種篩選高生長性狀和具有PRRSV抗性的豬品系的方法,其特征在于包括檢測豬SLA-DRB1基因啟動子區(qū)-58位點的多態(tài)性,選擇CC型個體留種。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于包括以下步驟:
1)提取豬基因組DNA;
2)利用權(quán)利要求3所述的引物對PCR擴增SLA-DRB1基因啟動子區(qū)序列,得到247bp擴增產(chǎn)物;
3)利用KpnⅠ限制性內(nèi)切酶對所述的擴增產(chǎn)物進(jìn)行酶切、電泳分型,獲得216bp、31bp兩個片段的定義為CC型,獲得247bp、216bp、31bp三個片段的定義為CT型,獲得247bp片段的定義為TT型;
4)CC型體重顯著高于CT型和TT型,仔豬感染PRRSV后CC型豬對PRRSV的抗性高于CT型和TT型,選擇CC型個體留種。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于所述PCR擴增的反應(yīng)總體系為20μL,模板DNA 15-100ng,5U/μL Taq聚合酶0.2μL,10mM的dNTP0.5μL,引物P1和P2各5pmol,25mM的MgCl21.2-1.6μL,10×緩沖液2μL,加滅菌雙蒸水至20μL;所述PCR擴增的反應(yīng)程序為:94℃預(yù)變性5min;94℃變性30s,60-65℃退火30s,72℃延伸30s,35個循環(huán);72℃延伸7min。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于:所述酶切的反應(yīng)體系為10-16μL,PCR產(chǎn)物3-5μL,10U/μL KpnⅠ酶0.2-0.5μL,10×緩沖液1.0-1.6μL,補充滅菌雙蒸水至10-16μL;37℃酶切3-5h。