本發(fā)明涉及一種酪氨酸的合成方法，特別涉及一種nα-芴甲氧羰基-間羥基酪氨酸的合成方法。

背景技術(shù)：

間羥基酪氨酸是一種含有酚羥基的芳香族極性α氨基酸，間羥基酪氨酸是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸中的一種，是哺乳動(dòng)物的必需氨基酸，間羥基酪氨酸是一種白色結(jié)晶體或結(jié)晶粉末，無味，易溶于甲酸，難溶于水，不溶于乙醇和乙醚的化學(xué)品。

間羥基酪氨酸及其衍生物在藥物化學(xué)中廣泛應(yīng)用，特別是應(yīng)用在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥物研究上，如帕金森癥（eur.j.pharmacol.1973,21,230–237）(j.med.chem.1992,35,1410–1417)、阿爾茲海默癥wo2004062625,2004)、關(guān)節(jié)炎(wo19961465,1999)(wo2005058884,2005)。也可做藥針對(duì)甲狀腺功能亢進(jìn)，或食品添加劑。同時(shí)也是一種重要的生化試劑，是合成多肽類激素，抗生素，l-多巴等藥物的主要原料。廣泛用于農(nóng)業(yè)科學(xué)研究，也作飲料添加劑和配制人工昆蟲飼料。

目前nα-芴甲氧羰基-間羥基酪氨酸的合成方法主要以dmf、tea為主要溶劑，表現(xiàn)為成本高，污染大，在當(dāng)前政府空前重視環(huán)保的情況下不利于規(guī)模化大生產(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種nα-芴甲氧羰基-間羥基酪氨酸的合成方法，主要解決現(xiàn)有合成方法中存在的成本高、污染大的技術(shù)問題。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種nα-芴甲氧羰基-間羥基酪氨酸的合成方法，包括以下步驟：

a、將dl-間酪氨酸（dl-m-tyrosine）溶于堿溶液，加入丙酮后冰水浴降溫至0℃，加入芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺（fmoc-osu），調(diào)節(jié)溶液ph值=8-9，tlc跟蹤至反應(yīng)終點(diǎn)；

b、反應(yīng)溶液經(jīng)抽濾、萃取，加入乙酸乙酯，經(jīng)酸化、分層、萃取，tlc檢測產(chǎn)物已完全萃取到乙酸乙酯相中，再經(jīng)過酸洗、水洗和飽和食鹽水洗后無水硫酸鈉干燥過夜；過濾和洗滌無水硫酸鈉，減壓蒸餾溶劑，加石油醚至出現(xiàn)白色渾濁，然后靜置；

c、將靜置產(chǎn)物溶于堿溶液，加入乙醚，經(jīng)酸化、分層、萃取，tlc檢測產(chǎn)物已經(jīng)完全萃取到乙醚相中，水洗乙醚相，飽和食鹽水洗乙醚相，無水硫酸鈉干燥過夜；過濾，洗滌無水硫酸鈉，減壓蒸餾溶劑，加石油醚至白色渾濁，即可析出白色固體產(chǎn)品。

反應(yīng)式如下：

。

步驟a所述的堿溶液為碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉中的一種或兩種混合溶液，優(yōu)選質(zhì)量百分濃度10%碳酸鈉和質(zhì)量百分濃度5%碳酸氫鈉混合溶液。步驟b、c所述的酸化采用固體檸檬酸調(diào)節(jié)ph值=3-5；優(yōu)選ph值=5。

本發(fā)明中一些常用的縮寫具有以下含義：

fmoc-：芴甲氧羰基

dl-m-tyrosine:間羥基酪氨酸

dl-m-tyrosine：dl-間酪氨酸

fmoc-osu：芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明主要解決了現(xiàn)有nα-芴甲氧羰基-間羥基酪氨酸的合成方法成本較高，污染高，不利于大量生產(chǎn)的技術(shù)問題，同時(shí)得到的目標(biāo)物直接可以結(jié)晶析出，不用通過高效液相色譜純化。

附圖說明

圖1：本發(fā)明產(chǎn)品核磁共振圖譜。

圖2：本發(fā)明產(chǎn)品高效液相色譜。

圖3：本發(fā)明產(chǎn)品紅外圖譜。

圖4：本發(fā)明質(zhì)譜圖譜。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明所需儀器：

2f-i型三用紫外分析儀上海寶山顧村電光器材廠

85-1型磁力攪拌器上海志威電器有限公司

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海申生科技有限公司

brukerascendavanceⅲ400mhz核磁共振譜儀brukerbiospininternationalag

wps-1b數(shù)字熔點(diǎn)儀上海精密科學(xué)儀器有限公司

sgw-1光譜儀上海精密科學(xué)儀器有限公司

lc-20at高效液相色譜儀shimaducorporatidn。

實(shí)施例

將dl-m-tyrosine20克懸浮在質(zhì)量百分濃度10%碳酸鈉水溶液100ml和質(zhì)量百分濃度5%的碳酸氫鈉水溶液100ml中，攪拌均勻后，加入200ml丙酮。冰水浴降溫。于0℃15分鐘內(nèi)慢慢加入fmoc-osu。并且用質(zhì)量百分濃度10%的碳酸鈉水溶液維持反應(yīng)液的ph值8-9之間。tlc（展開劑體積比三氯甲烷:甲醇:冰乙酸=90:8:2）跟蹤反應(yīng)液反應(yīng)終點(diǎn)。

反應(yīng)結(jié)束后，用布氏漏斗抽濾，固體經(jīng)過tlc檢測沒有產(chǎn)物，固體棄之。液相用乙酸乙酯和石油醚2:1萃取3次，以萃取掉尚未反應(yīng)干凈的fmoc。接著加入300ml的乙酸乙酯，用固體檸檬酸酸化ph值=3。分層，萃取。留有機(jī)相，經(jīng)過tlc檢測，產(chǎn)物已經(jīng)完全萃取到乙酸乙酯相中。5%質(zhì)量百分濃度的檸檬酸水溶液洗滌乙酸乙酯相3次以以最大限度洗掉殘留的osu，然后水洗乙酸乙酯相，飽和食鹽水洗，用無水硫酸鈉干燥過夜，以除去乙酸乙酯中的少量水份。過濾無水硫酸鈉，用少量的乙酸乙酯洗滌無水硫酸鈉。45℃減壓蒸餾（真空-0.09mpa）。蒸掉二分之一的溶劑，加石油醚至出現(xiàn)白色渾濁，然后靜置。

靜置產(chǎn)物溶于質(zhì)量百分濃度10%的碳酸鈉水溶液中，加入500ml乙醚，固體檸檬酸酸化ph值=5。分層，萃取。經(jīng)過tlc檢測產(chǎn)物已經(jīng)完全萃取到乙醚相中，水洗乙醚相，飽和食鹽水洗乙醚相，無水硫酸鈉干燥過夜。

過濾，少量乙醚洗滌無水硫酸鈉。45℃下減壓蒸餾（真空-0.065mpa）。加石油醚至白色渾濁，即可析出白色固體。經(jīng)過濾，40℃烘箱烘干。得到32克fmoc-dl-m-tyrosine。得率71%。hplc：96.75%。熔點(diǎn)57.1℃。經(jīng)核磁共振，紅外光譜分析符合產(chǎn)物特性。參照?qǐng)D1,2,3。

步驟a中堿溶液對(duì)比試驗(yàn)如下：

實(shí)驗(yàn)1:

1.8克dl-m-tyrosine溶解在1n氫氧化鈉水溶液18ml中，加入等量的丙酮18ml用冰鹽浴降溫。于0℃以下慢慢加入fmoc-osu,并且用1nnaoh水溶液維持反應(yīng)液ph值9。tlc（展開劑體積比三氯甲烷:甲醇:冰乙酸=90:8:2）體系跟蹤反應(yīng)情況，tlc觀察在rf值0.7位置有較大副反應(yīng)生成。2小時(shí)反應(yīng)結(jié)束。

實(shí)驗(yàn)2：

1.8克dl-m-tyrosine溶解在質(zhì)量百分濃度10%碳酸鈉水溶液18ml中，加入等量的丙酮18ml用冰浴降溫。于0℃以下慢慢加入fmoc-osu,并且用質(zhì)量百分濃度10%碳酸氫鈉水溶液維持反應(yīng)液ph值9。tlc（展開劑體積比三氯甲烷:甲醇:冰乙酸=90:8:2）體系跟蹤反應(yīng)情況，tlc觀察分析有副產(chǎn)物生成。2.5小時(shí)反應(yīng)結(jié)束。

實(shí)驗(yàn)3：

1.8克dl-m-tyrosine溶解在10ml質(zhì)量百分濃度10%碳酸鈉水溶液和質(zhì)量百分濃度5%10ml碳酸氫鈉水溶液中，于0℃以下慢慢加入fmoc-osu,并且用質(zhì)量百分濃度10%碳酸鈉水溶液維持反應(yīng)液ph值9。tlc（展開劑體積比三氯甲烷:甲醇:冰乙酸=90:8:2）體系跟蹤反應(yīng)情況，tlc觀察分析很少有副產(chǎn)物生成，2.5小時(shí)反應(yīng)結(jié)束。

通過以上三種反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)表面實(shí)驗(yàn)3的反應(yīng)所使用的堿水最適合該產(chǎn)物，所產(chǎn)生的副產(chǎn)物最少。參照?qǐng)D4。

步驟b、c所述的酸化ph值選擇對(duì)比試驗(yàn)如下：

實(shí)驗(yàn)4：（酸化萃取時(shí)ph值的選擇）

用固體檸檬酸酸化反應(yīng)液ph值=3，乙酸乙酯萃取，tlc（展開劑體積比三氯甲烷:甲醇:冰乙酸=90:8:2）體系分析表明可以將雜質(zhì)一并萃取到有機(jī)相中。

實(shí)驗(yàn)5：

用固體檸檬酸酸化反應(yīng)液ph值=3，乙醚萃取，tlc（展開劑體積比三氯甲烷:甲醇:冰乙酸=90:8:2）體系分析表明可以將少量雜質(zhì)萃取到有機(jī)相中。

實(shí)驗(yàn)6；

用固體檸檬酸酸化反應(yīng)液ph值=5，乙酸乙酯萃取，tlc（展開劑體積比三氯甲烷:甲醇:冰乙酸=90:8:2）體系分析表面可以將少量雜質(zhì)一并萃取到有機(jī)相中。

實(shí)驗(yàn)7：

用固體檸檬酸酸化反應(yīng)液ph值=5，乙醚萃取，tlc（展開劑體積比三氯甲烷:甲醇:冰乙酸=90:8:2）體系分析表面只有產(chǎn)物被萃取到有機(jī)相中。

通過上述實(shí)驗(yàn)表面在酸化過程中ph=5為最佳，所萃取到有機(jī)相的雜質(zhì)最少，萃取到有機(jī)相中的目標(biāo)物最純。