本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種(1-芳基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮、甲酮肟類化合物及其用途，確切地說，涉及該類化合物及其作為腫瘤細(xì)胞增殖抑制劑在抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤是威脅人類健康與生命的嚴(yán)重疾病，在中國為第一致死病因。尋找和發(fā)現(xiàn)治療與預(yù)防腫瘤的新藥是當(dāng)前面臨的重大課題。

4-取代的甲氧苯基-芳基-噻唑(4-Substituted Methoxybenzoyl-aryl-thiazole,SMART)類化合物是2009年由Miller課題組發(fā)現(xiàn)的，在體外抑制黑色素瘤和前列腺癌達(dá)到納摩爾水平。SMART是一個(gè)作用于微管蛋白秋水仙堿結(jié)合部位的噻唑類化合物。研究發(fā)現(xiàn)，其能通過抑制微管蛋白聚合，破壞細(xì)胞骨架并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。盡管SMART的抗腫瘤活性突出，但文獻(xiàn)報(bào)道其體內(nèi)穩(wěn)定性不佳，主要原因是由于噻唑環(huán)可發(fā)生氧化裂解，生成氮氧自由基。因此，通過化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾可避免上述問題的產(chǎn)生，并開發(fā)出活性突出的抗腫瘤藥物。

本發(fā)明涉及的(1-芳基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮、甲酮肟類化合物用作抗腫瘤活性研究目前尚未見報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)、合成具有良好抗腫瘤活性的SMART的結(jié)構(gòu)類似物，即(1-芳基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮、甲酮肟類化合物；所制備的化合物在體內(nèi)外抗腫瘤活性測(cè)試中顯現(xiàn)良好的結(jié)果。

本發(fā)明涉及定義如下的通式Ⅰ的化合物：

其中，

(1)R⁵為氫時(shí)，

X為C＝O、C＝N-OR⁶；

R¹～R⁴各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基氧基、鹵素原子；

R⁶為H、C₁-C₆烷基；

(2)R⁵為氨基時(shí)，

X為C＝O；

R¹～R⁴各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基氧基、鹵素原子。

本發(fā)明優(yōu)選涉及定義如下的通式Ⅰ的化合物：

其中，

(1)R⁵為氫時(shí)，

X為C＝O、C＝N-OR⁶；

R¹～R⁴各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基氧基、鹵素原子；

R⁶為H、C₁-C₃烷基；

(2)R⁵為氨基時(shí)，

X為C＝O；

R¹～R⁴各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基氧基、鹵素原子。

本發(fā)明最優(yōu)選涉及定義如下的通式Ⅰ的化合物：

其中，

(1)R⁵為氫時(shí)，

X為C＝O、C＝N-OR⁶；

R¹～R⁴各自獨(dú)立地為氫、甲基、乙基、甲氧基、氟、氯、溴；

R⁶為H、甲基；

(2)R⁵為氨基時(shí)，

X為C＝O；

R¹～R⁴各自獨(dú)立地為氫、甲基、乙基、甲氧基、氟、氯、溴。

本發(fā)明的化合物還包括上述結(jié)構(gòu)式所示化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的無毒鹽及其水合物，這些藥學(xué)上可接受的無毒鹽包括該化合物與酸所形成的鹽。所述的酸可以為鹽酸、硫酸、氫溴酸、磷酸的無機(jī)酸或選自乙酸、檸檬酸、草酸、酒石酸、苯甲酸、蘋果酸的有機(jī)酸。所述水合物的結(jié)晶水?dāng)?shù)目為0～16中的任意實(shí)數(shù)。

本發(fā)明優(yōu)選的部分化合物結(jié)構(gòu)如下：

化合物1

(5-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物2

(1-苯基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物3

(1-苯基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物4

(5-氨基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物5

(1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物6

(1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物7

(5-氨基-1-(4-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物8

(1-(4-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物9

(1-(4-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物10

(5-氨基-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物11

(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物12

(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物13

(5-氨基-1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物14

(1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物15

(1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物16

(5-氨基-1-(2,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物17

(1-(2,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物18

(1-(2,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物19

(5-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物20

(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物21

(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物22

(5-氨基-1-(2-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物23

(1-(2-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物24

(1-(2-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物25

(5-氨基-1-(3-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物26

(1-(3-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物27

(1-(3-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物28

(5-氨基-1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物29

(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物30

(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物31

(5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物32

(1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物33

(1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物34

(5-氨基-1-(2,4-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物35

(1-(2,4-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物36

(1-(2,4-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物37

(5-氨基-1-(3,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物38

(1-(3,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物39

(1-(3,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物40

(5-氨基-1-(3-氯-2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物41

(1-(3-氯-2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物42

(1-(3-氯-2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

化合物43

(5-氨基-1-(2-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物44

(1-(2-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮

化合物45

(1-(2-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟

本發(fā)明的(1-芳基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮、甲酮肟類化合物可以按照以下反應(yīng)路線合成得到：

以3,4,5-三甲氧基苯甲醛為起始原料，經(jīng)縮合環(huán)化、去氨基及成肟等反應(yīng)，制得(1-芳基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟、-甲酮肟類化合物。

本發(fā)明所提供的(1-芳基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟、-甲酮肟類化合物，制備方法簡(jiǎn)單可行，收率較高。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了上述化合物在制備治療腫瘤疾病的藥物中的應(yīng)用。

(1-芳基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟、-甲酮肟類化合物具有較好的治療腫瘤疾病的作用，在制備抗腫瘤藥物中具有較好的發(fā)展前景。

具體實(shí)施方式

通過下述實(shí)例將有助于理解本發(fā)明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不限于所舉實(shí)例。

本發(fā)明所用試劑均為市售，核磁共振譜由AVANCE-400、Bruker ARX-400傅立葉變換核磁共振波譜儀測(cè)定，質(zhì)譜由BrukeeEsqure2000、Shimadzu GCMS-QP5050A型質(zhì)譜儀測(cè)定。

實(shí)施例1：3-苯胺基-2-(3,4,5-三甲氧基苯甲?；?丙烯腈的制備

將3,4,5-三甲氧基苯甲醛(10.0g,50.97mmol)、氫氧化鉀(8.56g,152.91mmol)、無水氯化銅(0.087g,0.51mmol)、無水乙腈(20.92g,509.68mmol)、無水N,N’-二甲基乙酰胺50mL混合，在氧氣氛圍下反應(yīng)12小時(shí)，反應(yīng)完畢，減壓蒸除多余的乙腈，然后加入適量的水，稀鹽酸調(diào)節(jié)pH＝5，析出淺黃色固體，過濾，干燥，即得化合物3-氧代-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙腈，不經(jīng)純化直接用于下一步。將化合物3-氧代-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙腈(5.0g,21.25mmol)、N,N’-二苯基甲脒(4.17g,21.25mmol)加入反應(yīng)瓶中，加二甲苯溶解，氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下回流反應(yīng)2小時(shí)。減壓蒸除二甲苯，經(jīng)柱層析分離純化即可得到化合物3-苯基氨基-2-(3,4,5-三甲氧基苯甲?；?丙烯腈。

實(shí)施例2：(5-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物1)的制備

將3-苯胺基-2-(3,4,5-三甲氧基苯甲酰基)丙烯腈(1.0g,2.96mmol)、苯肼鹽酸鹽(0.43g,2.96mmol)加入微波反應(yīng)管中，加入適量乙醇溶解，加入三乙胺(0.30g,2.96mmol)，微波120℃反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)完畢，減壓蒸除乙醇，經(jīng)柱層析分離純化即可得到化合物1。收率86％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.93(9H,s),6.09(2H,s),7.09(2H,s),7.44(1H,m),7.55(4H,m),7.85(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝354.1,[M+Na]⁺＝376.1。

實(shí)施例3：(1-苯基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物2)的制備

將化合物1(0.50g,1.42mmol)加入茄型瓶中，用適量四氫呋喃溶解，滴加亞硝酸異戊酯(0.33,2.84mmol)，室溫反應(yīng)2小時(shí)，反應(yīng)完畢，減壓蒸除四氫呋喃，經(jīng)柱層析分離純化即可得到化合物2。收率70％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.92(6H,s),3.94(3H,s),7.17(2H,s),7.38(1H,t,J＝7.4Hz),7.50(2H,dd,J＝8.2,J＝7.6Hz),7.75(2H,d,J＝7.6Hz),8.15(1H,s),8.50(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝339.1,[M+Na]⁺＝361.1。

實(shí)施例4：(1-苯基-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物3)的制備

將化合物2(0.20g,0.59mmol)溶于無水乙醇中，加入鹽酸羥胺(0.41g,5.90mmol)和無水乙酸鈉(0.48g,5.90mmol)，回流反應(yīng)3小時(shí)，將反應(yīng)液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用飽和氯化鈉溶液洗滌并用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，經(jīng)柱層析分離純化即可得到化合物3。收率85％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.73(3H,s),3.81(6H,s),6.84(2H,s),7.35(1H,t,J＝7.4Hz),7.51(2H,dd,J＝8.0Hz,J＝7.7Hz),7.92(2H,d,J＝7.9Hz),8.09(1H,s),8.88(1H,s),11.75(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.78(9H,s),6.72(2H,s),7.03(3H,m),7.85(2H,d,J＝10.3Hz),7.88(1H,s),8.38(1H,s),11.08(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝354.1,[M+Na]⁺＝376.1。

實(shí)施例5：(5-氨基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物4)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物4。收率76％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.20(3H,s),3.91(3H,s),3.92(6H,s),5.78(2H,s),7.09(2H,s),7.36(4H,m),7.84(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝368.2,[M+Na]⁺＝390.1。

實(shí)施例6：(1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物5)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物5。收率78％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.29(3H,s),3.91(3H,s),3.93(6H,s),7.17(2H,s),7.34(4H,m),8.15(1H,s),8.17(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝353.1,[M+Na]⁺＝375.1。

實(shí)施例7：(1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物6)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物6。收率80％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.26(3H,s),3.72(3H,s),3.81(6H,s),6.86(2H,s),7.41(4H,m),8.05(1H,s),8.45(1H,s),11.66(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.22(3H,s),3.72(3H,s),3.78(6H,s),6.75(2H,s),7.32(4H,m),7.85(1H,s),7.93(1H,s),11.03(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝368.2,[M+Na]⁺＝390.1。

實(shí)施例8：(5-氨基-1-(4-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物7)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物7。收率79％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.40(3H,s),3.90(6H,s),3.91(3H,s),6.09(2H,s),7.08(2H,s),7.31(2H,d,J＝8.2Hz),7.42(2H,d,J＝8.2Hz),7.81(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝368.2,[M+Na]⁺＝390.1。

實(shí)施例9：(1-(4-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物8)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物8。收率68％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.39(3H,s),3.90(6H,s),3.92(3H,s),7.15(2H,s),7.27(2H,d,J＝8.5Hz),7.60(2H,d,J＝8.5Hz),8.11(1H,s),8.44(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝353.1,[M+Na]⁺＝375.1。

實(shí)施例10：(1-(4-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物9)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物9。收率83％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.35(3H,s),3.71(3H,s),3.79(6H,s),6.81(2H,s),7.30(2H,d,J＝8.3Hz),7.77(2H,m,J＝8.3Hz),8.03(1H,s),8.80(1H,s),11.67(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.32(3H,s),3.73(3H,s),3.77(6H,s),6.70(2H,s),7.26(2H,d,J＝8.5Hz),7.73(2H,d,J＝8.5Hz),7.83(1H,s),8.30(1H,s),11.02(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝368.2,[M+Na]⁺＝390.1。

實(shí)施例11：(5-氨基-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物10)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物10。收率69％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.94(9H,s),6.08(2H,s),7.09(2H,s),7.21(3H,m),7.55(2H,m),7.85(1H,s),8.05(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝372.1。

實(shí)施例12：(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物11)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物11。收率57％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.98(9H,s),7.22(4H,m),7.76(2H,d,J＝8.0Hz),8.17(1H,s),8.56(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝357.1,[M+Na]⁺＝379.1。

實(shí)施例13：(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物12)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物12。收率73％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.72(3H,s),3.82(6H,s),6.84(2H,s),7.37(2H,m),7.97(2H,m),8.09(1H,s),8.86(1H,s),11.73(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.75(3H,s),3.78(6H,s),6.71(2H,s),7.29(2H,m),7.87(1H,s),7.90(2H,m),8.37(1H,s),11.08(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝372.1。

實(shí)施例14：(5-氨基-1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物13)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物13。收率65％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.94(3H,s),3.94(6H,s),5.98(2H,s),7.11(2H,s),7.49(3H,m),7.63(1H,m),7.90(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝388.1,[M+Na]⁺＝410.1。

實(shí)施例15：(1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物14)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物14。收率62％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.93(6H,s),3.95(3H,s),7.20(2H,s),7.43(1H,m),7.57(1H,m),7.66(1H,m),8.22(1H,s),8.42(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+Na]⁺＝395.1。

實(shí)施例16：(1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物15)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物15。收率75％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.71(3H,s),3.81(6H,s),6.84(2H,s),7.52(2H,m),7.68(2H,m),8.10(1H,s),8.58(1H,s),11.69(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.71(3H,s),3.77(6H,s),6.73(2H,s),7.52(2H,m),7.68(2H,m),7.89(1H,s),8.03(1H,s),11.08(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝388.1,[M+Na]⁺＝410.1。

實(shí)施例17：(5-氨基-1-(2,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物16)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物16。收率76％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.14(3H,s),2.36(3H,s),3.93(9H,s),5.84(2H,s),7.08(2H,s),7.14(1H,s),7.19(1H,s),7.24(1H,s),7.82(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝382.2,[M+Na]⁺＝404.2。

實(shí)施例18：(1-(2,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物17)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物17。收率70％。1H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.24(3H,s),2.34(3H,s),3.90(6H,s),3.91(3H,s),7.18(5H,m),8.14(1H,s),8.15(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝367.2,[M+Na]⁺＝389.1。

實(shí)施例19：(1-(2,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物18)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物18。收率89％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.21(3H,s),2.34(3H,s),3.72(3H,s),3.82(6H,s),6.84(2H,s),7.23(3H,m),8.03(1H,s),8.44(1H,s),11.63(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.17(3H,s),2.30(3H,s),3.72(3H,s),3.78(6H,s),6.72(2H,s),7.19(3H,m),7.82(1H,s),7.90(1H,s),11.00(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝382.2,[M+Na]⁺＝404.2。

實(shí)施例20：(5-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物19)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物19。收率80％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.83(3H,s),3.92(9H,s),6.04(2H,s),7.00(2H,d,J＝7.8Hz),7.08(2H,s),7.43(2H,d,J＝7.8Hz),7.79(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝384.1。

實(shí)施例21：(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物20)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物20。收率76％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.86(3H,s),3.92(6H,s),3.95(3H,s),7.00(2H,d,J＝8.0Hz),7.17(2H,s),7.64(2H,d,J＝8.0Hz),8.12(1H,s),8.41(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝369.1。

實(shí)施例22：(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物21)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物21。收率91％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.70(3H,s),3.77(6H,s),3.78(3H,s),6.80(2H,s),7.03(2H,m,J＝9.03Hz),7.78(2H,m,J＝9.0Hz),7.99(1H,s),8.73(1H,s),11.65(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.72(3H,s),3.76(9H,s),6.69(2H,s),7.00(2H,m,J＝9.1Hz),7.74(2H,m,J＝9.1Hz),7.80(1H,s),8.25(1H,s),10.98(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝384.1。

實(shí)施例23：(5-氨基-1-(2-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物22)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物22。收率71％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.91(3H,s),3.92(6H,s),5.93(2H,s),7.06(2H,s),7.34(1H,m),7.44(1H,m),7.73(1H,d,J＝8.2Hz),7.83(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝434.1,[M+Na]⁺＝456.0。

實(shí)施例24：(1-(2-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物23)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物23。收率79％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.93(6H,s),3.94(3H,s),7.20(2H,s)7.35(1H,m),7.48(1H,m),7.60(1H,m),7.75(1H,m),8.23(1H,s),8.37(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝417.0。

實(shí)施例25：(1-(2-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物24)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物24。收率74％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.77(3H,s),3.80(6H,s),6.82(2H,s),7.47(1H,m),7.57(1H,m),7.62(1H,m),7.85(1H,m),8.09(1H,s),8.53(1H,s),11.68(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.72(9H,s),6.72(2H,s),7.44(1H,m),7.54(1H,m),7.59(1H,m),7.81(1H,m),7.87(1H,s),8.01(1H,s),11.06(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝434.1,[M+Na]⁺＝456.0。

實(shí)施例26：(5-氨基-1-(3-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物25)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物25。收率81％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.91(9H,s),6.15(2H,s),7.06(2H,s),7.40(1H,dd,J＝8.1Hz,J＝8.0Hz),7.53(2H,m),7.77(1H,s),7.83(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝434.1,[M+Na]⁺＝456.0。

實(shí)施例27：(1-(3-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物26)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物26。收率74％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.94(6H,s),3.96(3H,s),7.18(2H,s),7.39(1H,dd,J＝8.1Hz,J＝8.0Hz),7.52(1H,d,J＝8.1Hz),7.69(1H,m),7.99(1H,s),8.16(1H,s),8.50(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝417.0。

實(shí)施例28：(1-(3-溴苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物27)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物27。收率70％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.72(3H,s),3.81(6H,s),6.84(2H,s),7.46(1H,m),7.53(1H,m),7.97(1H,m),8.12(1H,s),8.18(1H,t),8.96(1H,s),11.78(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.74(3H,s),3.78(6H,s),6.71(2H,s),7.39(2H,m),7.91(1H,m),7.92(1H,s),8.12(1H,s),8.48(1H,s),11.13(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝434.1,[M+Na]⁺＝456.0。

實(shí)施例29：(5-氨基-1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物28)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物28。收率82％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.93(6H,s),3.93(3H,s),6.11(2H,s),7.08(2H,s),7.53(4H,m),7.86(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝388.1,[M+Na]⁺＝410.1

實(shí)施例30：(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物29)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物29。收率85％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.91(6H,s),3.94(3H,s),7.14(2H,s),7.47(2H,d,J＝8.9Hz),7.69(2H,d,J＝8.9Hz),8.13(1H,s),8.46(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+Na]⁺＝395.1。

實(shí)施例31：(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物30)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物30。收率77％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.70(3H,s),3.81(6H,s),6.82(2H,s),7.57(2H,d,J＝8.8Hz),7.96(2H,d,J＝8.8Hz),8.09(1H,s),8.89(1H,s),11.74(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.73(3H,s),3.76(6H,s),6.70(2H,s),7.50(2H,d,J＝8.8Hz),7.88(2H,d,J＝8.8Hz),7.92(1H,s),8.39(1H,s),11.09(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝388.1,[M+Na]⁺＝410.1。

實(shí)施例32：(5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物31)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物31。收率87％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.90(9H,s),6.19(2H,s),7.04(2H,s),7.36(1H,m),7.45(2H,m),7.59(1H,s),7.83(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝388.1,[M+Na]⁺＝410.1。

實(shí)施例33：(1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物32)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物32。收率68％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.93(6H,s),3.96(3H,s),7.16(2H,s),7.36(1H,d,J＝8.0Hz),7.44(1H,dd,J＝8.1Hz,J＝8.0Hz),7.65(1H,d,J＝8.1Hz),7.83(1H,s),8.17(1H,s),8.51(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+Na]⁺＝395.1。

實(shí)施例34：(1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物33)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物33。收率82％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.72(3H,s),3.82(6H,s),6.82(2H,s),7.41(1H,d,J＝8.0Hz),7.54(1H,dd,J＝8.0Hz,J＝8.0Hz),7.94(1H,d,J＝7.9Hz),8.06(1H,s),8.14(1H,s),8.95(1H,s),11.76(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.74(3H,s),3.78(6H,s),6.72(2H,s),7.35(1H,d,J＝8.2Hz),7.48(1H,m),7.88(1H,d,J＝8.2Hz),7.93(1H,s),8.01(1H,s),8.49(1H,s),11.12(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝388.1,[M+Na]⁺＝410.1。

實(shí)施例35：(5-氨基-1-(2,4-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物34)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物34。收率66％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.16(3H,s),2.40(3H,s),3.93(3H,s),3.94(6H,s),7.10(2H,s),7.15(1H,d,J＝8.0Hz),7.19(1H,s),7.22(1H,d,J＝8.0Hz),7.85(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝382.2,[M+Na]⁺＝404.2。

實(shí)施例36：(1-(2,4-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物35)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物35。收率69％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.25(3H,s),2.39(3H,s),3.93(6H,s),3.94(3H,s),7.14(5H,m),8.17(2H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝367.2,[M+Na]⁺＝389.1。

實(shí)施例37：(1-(2,4-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物36)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物36。收率86％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.22(3H,s),2.35(3H,s),3.72(3H,s),3.82(6H,s),6.85(2H,s),7.13(1H,d,J＝8.0Hz),7.20(1H,s),7.30(1H,d,J＝8.0Hz),8.03(1H,s),8.40(1H,s),11.64(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.17(3H,s),2.32(3H,s),3.72(3H,s),3.78(6H,s),6.74(2H,s),7.20(3H,m),7.82(1H,s),7.89(1H,s),11.00(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝382.2,[M+Na]⁺＝404.2。

實(shí)施例38：(5-氨基-1-(3,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物37)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物37。收率74％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.38(6H,s),3.92(9H,s),6.12(2H,s),7.05(1H,s),7.08(2H,s),7.17(2H,s),7.82(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝382.2,[M+Na]⁺＝404.2。

實(shí)施例39：(1-(3,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物38)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物38。收率80％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.39(6H,s),3.91(6H,s),3.95(3H,s),7.01(1H,s),7.16(2H,s),7.36(2H,s),8.13(1H,s),8.45(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝367.2,[M+Na]⁺＝389.1。

實(shí)施例40：(1-(3,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物39)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物39。收率77％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.35(6H,s),3.72(3H,s),3.80(6H,s),6.82(2H,s),6.98(1H,s),7.54(2H,s),8.04(1H,s),8.81(1H,s),11.71(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.31(6H,s),3.74(3H,s),3.77(6H,s),6.71(2H,s),6.93(1H,s),7.49(2H,s),7.86(1H,s),8.29(1H,s),11.03(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝382.2,[M+Na]⁺＝404.2。

實(shí)施例41：(5-氨基-1-(3-氯-2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物40)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物40。收率86％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.24(3H,s),3.94(3H,s),3.95(6H,s),7.12(2H,s),7.33(2H,m),7.56(1H,dd,J＝6.8Hz,J＝6.8Hz),7.89(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝402.1,[M+Na]⁺＝424.1。

實(shí)施例42：(1-(3-氯-2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物41)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物41。收率72％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.29(3H,s),3.93(6H,s),3.94(3H,s),7.17(2H,s),7.28(2H,m),7.51(1H,dd,J＝7.2Hz,J＝7.2Hz),8.17(1H,s),8.17(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+Na]⁺＝409.1。

實(shí)施例43：(1-(3-氯-2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物42)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物42。收率83％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.24(3H,s),3.72(3H,s),3.80(6H,s),6.84(2H,s),7.42(2H,m),7.59(1H,d,J＝7.7Hz),8.08(1H,s),8.49(1H,s),11.66(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ2.20(3H,s),3.78(9H,s),6.73(2H,s),7.36(2H,m),7.55(1H,m),7.87(1H,s),7.95(1H,s),11.05(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝402.1,[M+Na]⁺＝424.1。

實(shí)施例44：(5-氨基-1-(2-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物43)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物43。收率83％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ1.12(3H,t,J＝7.6Hz),2.50(2H,q,J＝7.6Hz),3.90(3H,s),3.91(6H,s),5.82(2H,s),7.09(2H,s),7.30(2H,m),7.42(2H,m),7.82(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝382.2,[M+Na]⁺＝404.2。

實(shí)施例45：(1-(2-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物44)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例3相同的方法制備化合物44。收率58％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ1.13(3H,t,J＝7.3Hz),2.52(2H,q,J＝7.3Hz),3.93(3H,s),3.94(6H,s),7.05(2H,s),7.31(2H,m),7.44(2H,m),8.02(1H,s),8.39(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝367.2,[M+Na]⁺＝389.1。

實(shí)施例46：(1-(2-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮肟(化合物45)的制備

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例4相同的方法制備化合物45。收率79％。(Z):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ1.02(3H,t,J＝7.5Hz),2.58(2H,m,J＝7.5Hz),3.71(3H,s),3.80(6H,s),6.83(2H,s),7.39(4H,m),8.04(1H,s),8.41(1H,s),11.65(1H,s)ppm；(E):¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.02(3H,t,J＝7.6Hz),2.58(2H,m),3.71(3H,s),3.77(6H,s),6.73(2H,s),7.39(4H,m),7.84(1H,s),7.90(1H,s),11.03(1H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝382.2,[M+Na]⁺＝404.2。

實(shí)施例47：本發(fā)明的化合物的體外抗腫瘤活性測(cè)試

體外活性測(cè)試方法和結(jié)果如下：其中，臨床常用的抗腫瘤藥物阿霉素(DOX)為陽性實(shí)驗(yàn)組。

篩選方法：四氮唑鹽(micoculturetetrozolium,MTT)還原法

細(xì)胞株：人胃癌細(xì)胞株(SGC-7901 cell line)、人肺腺癌(A549 cell line)、人結(jié)腸癌細(xì)胞株(HT-1080 cell line)

作用時(shí)間：72h

各化合物對(duì)三種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率(30μg/mL)見表-1。

表-1

實(shí)施例48：本發(fā)明的化合物的動(dòng)物體內(nèi)抗腫瘤活性測(cè)試

選擇體外活性較好的化合物21和化合物30進(jìn)行了動(dòng)物體內(nèi)抗腫瘤活性測(cè)試，所用模型為小鼠S-180肉瘤模型，陽性對(duì)照藥物為臨床常用的抗腫瘤藥物氟尿嘧啶(Fluorouracil,5-Fu)。

實(shí)驗(yàn)方法：選用18-22克雌性昆明小鼠及生長(zhǎng)良好的7-11天的S-180瘤種，將瘤組織制成細(xì)胞懸液，接種至小鼠右側(cè)腋部皮下，約1.0-2.0×106細(xì)胞/只，接種24小時(shí)后隨機(jī)分籠，腹腔注射給藥連續(xù)7天。停藥后24小時(shí)處死動(dòng)物，稱體重、瘤重，計(jì)算各組平均瘤重，按如下公式求出腫瘤抑制率并進(jìn)行t檢驗(yàn)。

腫瘤抑制率＝[(空白對(duì)照組平均瘤重-治療組平均瘤重)/(空白對(duì)照組平均瘤重)]×100％

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表-2

表-2