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用于減少靜電的具有DNA酶活性的多肽的制作方法

文檔序號(hào):12509218閱讀:876來(lái)源:國(guó)知局

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發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及具有脫氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽用于從物品減少或去除靜電的用途;包含此類多肽的組合物;包含該多肽的擦拭巾;以及用于從物品減少或去除靜電的方法。

發(fā)明背景

靜電是材料材料表面內(nèi)或上的電荷的不平衡。電荷剩余直至它能夠通過(guò)電流或放電的方式而歷來(lái)。每當(dāng)兩個(gè)表面接觸并且分離時(shí)產(chǎn)生靜電電荷,并且這些表面中的至少一種對(duì)電流具有高電阻。靜電作用對(duì)于大多數(shù)人是熟悉的,因?yàn)槿丝梢愿械?、聽見、并且甚至看見?dāng)靠近大的導(dǎo)電體(例如,接地路徑)、或具有相反極性(陽(yáng)性或陰性)的過(guò)量電荷的區(qū)域時(shí)由于過(guò)量電荷被中和而產(chǎn)生的火花。靜態(tài)休克的熟悉現(xiàn)象,更確切地說(shuō)是一種靜電放電,是由電荷的中和引起的。

在其中靜電在一段時(shí)間內(nèi)積累的許多地方靜電會(huì)是一個(gè)問(wèn)題,例如當(dāng)洗滌由合成纖維(如聚酯、聚酰胺、尼龍、彈性纖維(Spandex(氨綸),Lycra)、聚酰胺、起絨布(聚乙烯對(duì)苯二甲酸乙二醇酯(PET)))或其他合成纖維或其混合物制成的洗滌物品時(shí)。在洗滌后,由于靜電,衣物傾向于附著到身體上并且吸引粉塵。這些衣服甚至可以轉(zhuǎn)移靜電至毛發(fā),例如當(dāng)T恤被拉過(guò)頭部時(shí)。對(duì)于穿著帶靜電的衣服的人來(lái)說(shuō),這甚至更是非常令人不愉快的,因?yàn)樵撿o電不容易放電。在衣物漂洗期間經(jīng)常使用軟化劑,然而,軟化劑的使用不防止該問(wèn)題出現(xiàn)。此外,不推薦使用軟化劑用于具有透氣膜(如)的運(yùn)動(dòng)服或戶外衣服。

隨著用于穿著(運(yùn)動(dòng)服、戶外衣服、日常衣服)或用于清潔(洗碗布、廚房布、除塵布或類似物)的合成材料的使用變得越來(lái)越流行,在使用期間和在洗滌期間積累的靜電是一個(gè)日益增長(zhǎng)的問(wèn)題。

其中靜電引起問(wèn)題的其他地方可以是連續(xù)接觸/分離發(fā)生于其中并且同時(shí)被用包含DNA的材料污染的所有其他地方,例如地板、傳送帶或其他健身設(shè)備、生產(chǎn)設(shè)備、生產(chǎn)工廠、汽車中的裝飾品、毛發(fā)、眼鏡、太陽(yáng)鏡、智能電話和平板電腦上的觸摸屏。

國(guó)際專利申請(qǐng)WO 2011/098579涉及細(xì)菌脫氧核糖核酸酶化合物以及用于生物膜的破壞和預(yù)防的方法。

發(fā)明概述

本發(fā)明涉及具有DNA酶活性的多肽用于從物品減少或去除靜電的用途。本發(fā)明進(jìn)一步涉及用于減少或去除靜電的組合物,該組合物包括具有脫氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽和抗靜電劑。

進(jìn)一步是要求保護(hù)一種用于減少或去除物品的靜電的方法,該方法包括以下步驟:

a.使物品與包括具有DNA酶活性的多肽的組合物進(jìn)行接觸;以及

b.任選地漂洗該物品,

其中該物品是紡織品或硬表面。

還要求保護(hù)的是包含具有DNA酶活性的多肽的擦拭巾。

定義

等位基因變體:術(shù)語(yǔ)“等位基因變體”意指占據(jù)同一染色體基因座的基因的兩種或更多種可替代形式中的任一種。等位基因變異由突變天然產(chǎn)生,并且可以導(dǎo)致群體內(nèi)多態(tài)性?;蛲蛔兛梢允浅聊?在所編碼的多肽中沒有改變)或可編碼具有改變的氨基酸序列的多肽。多肽的等位基因變體是由基因的等位基因變體編碼的多肽。

抗靜電劑是一種化合物,該化合物用于處理材料或它們的表面以降低或消除累積的靜電。其作用是通過(guò)導(dǎo)電自身、抑或通過(guò)吸收來(lái)自空氣的水分使該表面或該材料自身略微導(dǎo)電,所以可以使用一些保濕劑??轨o電劑的這些分子通常具有親水區(qū)域與疏水區(qū)域兩者,類似于表面活性劑中的那些;疏水側(cè)與材料的表面相互作用,同時(shí)親水側(cè)與空氣水分相互作用并結(jié)合水分子。

細(xì)菌的:在本發(fā)明的上下文中,術(shù)語(yǔ)“細(xì)菌的”相對(duì)于多肽(如酶,例如,DNA酶)是指由細(xì)菌基因組編碼并且因此直接從細(xì)菌基因組可衍生的多肽,其中這種細(xì)菌未經(jīng)過(guò)遺傳修飾來(lái)編碼所述多肽,例如,通過(guò)重組DNA技術(shù)將編碼序列引入基因組中。因此,在本發(fā)明的上下文中,術(shù)語(yǔ)“細(xì)菌DNA酶”或“獲得自細(xì)菌來(lái)源的具有DNA酶活性的多肽”或“細(xì)菌來(lái)源的多肽”是指由細(xì)菌物種的基因組編碼并且因此直接從細(xì)菌物種的基因組可衍生的DNA酶,其中該細(xì)菌物種未經(jīng)受通過(guò)引入編碼所述DNA酶的重組DNA進(jìn)行的遺傳修飾。因此,編碼具有DNA酶活性的細(xì)菌多肽的核苷酸序列是天然地存在于細(xì)菌物種遺傳背景中的序列。由這種序列編碼的具有DNA酶活性的細(xì)菌多肽還可以是指野生型DNA酶(或親本DNA酶)。在另外的方面中,本發(fā)明提供了具有DNA酶活性的多肽,其中所述多肽與細(xì)菌DNA酶基本上同源。在 本發(fā)明的上下文中,術(shù)語(yǔ)“基本上同源”表示一種具有DNA酶活性的多肽,該多肽與所選擇的細(xì)菌DNA酶的氨基酸序列至少80%,優(yōu)選地至少85%,更優(yōu)選地至少90%,更優(yōu)選地至少95%,甚至更優(yōu)選地至少96%、97%、98%,以及最優(yōu)選地至少99%的一致。

生物膜:生物膜是其中細(xì)胞彼此粘附在一起或粘附至表面(例如紡織品、餐具或硬表面)或另一種表面的任何群組的微生物。這些粘附細(xì)胞經(jīng)常包埋在胞外高聚物(EPS)的自身產(chǎn)生的基質(zhì)內(nèi)。生物膜EPS是一般由細(xì)胞外的DNA、蛋白、和多糖組成的聚合物團(tuán)塊。生物膜可以形成在活的或非活的表面上。在生物膜中生長(zhǎng)的微生物細(xì)胞與同一有機(jī)體的浮游細(xì)胞(相比之下,浮游細(xì)胞是可以在液體培養(yǎng)基中漂浮或浮游的單個(gè)細(xì)胞)是在生理上不同的。

生活在生物膜中的細(xì)菌通常與同一物種的浮游細(xì)菌具有顯著不同的特性,因?yàn)楸荒さ拿芗⑶沂鼙Wo(hù)的環(huán)境允許它們以不同方式協(xié)作和相互作用。這一環(huán)境對(duì)微生物的一個(gè)益處是增加對(duì)洗滌劑和抗生素的抗性,因?yàn)?,密集的?xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞的外層保護(hù)群落的內(nèi)部。

在衣物上,會(huì)發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生生物膜的細(xì)菌是在以下物種中:不動(dòng)桿菌屬物種、氣微菌屬物種、短波單胞菌屬物種、微桿菌屬物種、滕黃微球菌、假單胞菌屬物種、表皮葡萄球菌、和寡養(yǎng)單胞菌屬物種。在硬表面上,產(chǎn)生生物膜的細(xì)菌可以發(fā)現(xiàn)于以下物種中:不動(dòng)桿菌屬物種、氣微菌屬物種、短波單胞菌屬物種、微桿菌屬物種、滕黃微球菌、假單胞菌屬物種、表皮葡萄球菌、和寡養(yǎng)單胞菌屬物種。在一個(gè)實(shí)施例中,產(chǎn)生生物膜的菌株是短波單胞菌屬物種。在一個(gè)實(shí)施例中,產(chǎn)生生物膜的菌株是嗜堿性假單胞菌或熒光假單胞菌。

cDNA:術(shù)語(yǔ)“cDNA”意指可以通過(guò)從得自真核或原核細(xì)胞的成熟的、剪接的mRNA分子進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄而制備的DNA分子。cDNA缺乏可以存在于對(duì)應(yīng)基因組DNA中的內(nèi)含子序列。早先的初始RNA轉(zhuǎn)錄本是mRNA的前體,其在呈現(xiàn)為成熟的剪接的mRNA之前要經(jīng)一系列的步驟進(jìn)行加工,包括剪接。

編碼序列:術(shù)語(yǔ)“編碼序列”意指直接指定一個(gè)多肽的氨基酸序列的多核苷酸。編碼序列的邊界一般由開放閱讀框架決定,該開放閱讀框架從起始密碼子(如ATG、GTG或TTG)開始并且以終止密碼子(如TAA、TAG或TGA)結(jié)束。編碼序列可以是基因組DNA、cDNA、合成DNA或其組合。

控制序列:術(shù)語(yǔ)“控制序列”意指對(duì)于表達(dá)編碼本發(fā)明的成熟多肽的多核苷酸所必需的核酸序列。每個(gè)控制序列對(duì)于編碼該多肽的多核苷酸來(lái)說(shuō)可以是天然的(即,來(lái)自相同基因)或外源的(即,來(lái)自不同基因),或相對(duì)于彼此是天然的或外源的。這些調(diào)控序列包括但不限于前導(dǎo)序列、聚腺苷酸化序列、前肽序列、啟動(dòng)子、信號(hào)肽序列和轉(zhuǎn)錄終止子。至少,控制序列包 括啟動(dòng)子,以及轉(zhuǎn)錄和翻譯終止信號(hào)。出于引入有利于將這些控制序列與編碼多肽的多核苷酸的編碼區(qū)連接的特異性限制酶切位點(diǎn)的目的,這些控制序列可以提供有多個(gè)接頭。

洗滌劑組分:在此將術(shù)語(yǔ)“洗滌劑組分”定義為意指可以用于洗滌劑組合物中的化學(xué)品的類型。洗滌劑組分的實(shí)例是堿、表面活性劑、助水溶劑、助洗劑、共助洗劑、螯合劑(chelator)或螯合試劑(chelatingagent)、漂白系統(tǒng)或漂白組分、聚合物、織物調(diào)色劑、織物調(diào)理劑、增泡劑、抑泡劑、分散劑、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、熒光增白劑、香料、光增亮劑、殺細(xì)菌劑、殺真菌劑、污垢懸浮劑、污垢釋放聚合物、抗再沉積劑、酶抑制劑或穩(wěn)定劑、酶激活劑、抗氧化劑以及增溶劑。

洗滌劑組合物:術(shù)語(yǔ)“洗滌劑組合物”是指用于從有待清潔的物品(例如紡織品)除去不希望的化合物的組合物。該洗滌劑組合物可以用于例如清潔紡織品,用于家用清潔劑和工業(yè)清潔二者。這些術(shù)語(yǔ)涵蓋選擇用于希望的具體類型的清潔組合物和產(chǎn)品的形式(例如,液體、凝膠、粉末、顆粒、糊狀、或噴霧組合物)的任何材料/化合物,并且包括但不限于洗滌劑組合物(例如,液體和/或固體衣物洗滌劑和精細(xì)織物洗滌劑;織物清新劑;織物柔軟劑;以及紡織品和衣物預(yù)去污劑/預(yù)處理)。除了包含本發(fā)明的酶之外,該洗滌劑配制品還可以包含一種或多種另外的酶(例如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角質(zhì)酶、纖維素酶、內(nèi)切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果膠酶、果膠裂解酶、黃原膠酶、過(guò)氧化物酶、鹵代過(guò)氧合酶、過(guò)氧化氫酶以及甘露聚糖酶,或其任何混合物),和/或洗滌劑佐劑成分,例如表面活性劑、助洗劑、螯合劑(chelator)或螯合試劑(chelating agent)、漂白系統(tǒng)或漂白組分、聚合物、織物調(diào)理劑、增泡劑、抑泡劑、染料、香料、晦暗抑制劑、光學(xué)增亮劑、殺細(xì)菌劑、殺真菌劑、污垢懸浮劑、防蝕劑、酶抑制劑或穩(wěn)定劑、酶激活劑、一種或多種轉(zhuǎn)移酶、水解酶、氧化還原酶、上藍(lán)劑和熒光染料、抗氧化劑以及增溶劑。

DNA酶(脫氧核糖核酸酶):術(shù)語(yǔ)“DNA酶”意指具有DNA酶活性的多肽,該多肽催化DNA主鏈中的磷酸二酯鍵的水解斷裂,從而降解DNA。出于本發(fā)明的目的,根據(jù)測(cè)定I中所描述的程序確定DNA酶活性。在一個(gè)方面中,本發(fā)明的這些多肽具有SEQ ID NO:2的成熟多肽的至少20%,例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或至少100%的DNA酶活性。出于本發(fā)明的目的,根據(jù)測(cè)定I中所描述的程序確定DNA酶活性。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中,多肽具有的DNA酶活性是參照SEQ ID NO:2的成熟多肽,包括SEQ ID NO:3中所闡明的序列或由其組成的多肽,包括SEQ ID NO:5中所闡明的序列或由其組成的多肽,包括SEQ ID NO:6的成熟多肽或由其組成的多肽,包括SEQ ID NO:7的成熟多肽或由其組成的多 肽或包括SEQ ID NO:8的成熟多肽或由其組成的多肽的DNA酶活性的至少105%,例如至少110%、至少120%、至少130%、至少140%、至少160%、至少170%、至少180%、或至少200%。

表達(dá):術(shù)語(yǔ)“表達(dá)”包括涉及多肽產(chǎn)生的任何步驟,包括但不限于,轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾、翻譯、翻譯后修飾、以及分泌。

表達(dá)載體:術(shù)語(yǔ)“表達(dá)載體”意指線性或環(huán)狀DNA分子,該分子包含編碼多肽的多核苷酸并且該多核苷酸可操作地與提供用于其表達(dá)的控制序列相連接。

片段:術(shù)語(yǔ)“片段”意指從成熟多肽或結(jié)構(gòu)域的氨基和/或羧基末端缺失的一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))氨基酸的多肽;其中片段具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,該片段包含至少206個(gè)氨基酸殘基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸1至206)、至少205個(gè)氨基酸殘基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸2至206)、或至少204個(gè)氨基酸殘基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸3至206)。在一個(gè)方面中,片段包含至少139個(gè)氨基酸殘基(例如,SEQ ID NO:5的氨基酸50至188)、或至少188個(gè)氨基酸殘基(例如,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188)。

真菌的:在本發(fā)明的上下文中,術(shù)語(yǔ)“真菌的”相對(duì)于多肽(如酶,例如,DNA酶)是指由真菌基因組編碼并且因此直接從真菌基因組衍生的多肽,其中這種真菌未經(jīng)過(guò)遺傳修飾來(lái)編碼所述多肽,例如,通過(guò)重組DNA技術(shù)將編碼序列引入基因組中。因此,在本發(fā)明的上下文中,術(shù)語(yǔ)“真菌DNA酶”或“獲得自真菌來(lái)源的具有DNA酶活性的多肽”或“真菌來(lái)源的多肽”是指由真菌基因組編碼并且因此直接從真菌基因組衍生的DNA酶,其中該真菌物種未經(jīng)受通過(guò)引入編碼所述DNA酶的重組DNA進(jìn)行的遺傳修飾。因此,編碼具有DNA酶活性的真菌多肽的核苷酸序列是真菌物種遺傳背景中的天然序列。由這種序列編碼的具有DNA酶活性的真菌多肽還可以是指野生型DNA酶(或親本DNA酶)。在另外的方面中,本發(fā)明提供了具有DNA酶活性的多肽,其中所述多肽與真菌DNA酶基本上同源。在本發(fā)明的上下文中,術(shù)語(yǔ)“基本上同源”表示一種具有DNA酶活性的多肽,該多肽與所選擇的真菌DNA酶的氨基酸序列具有至少80%,優(yōu)選地至少85%,更優(yōu)選地至少90%,更優(yōu)選地至少95%,甚至更優(yōu)選地至少96%、97%、98%,以及最優(yōu)選地至少99%的一致性。

硬表面:術(shù)語(yǔ)“硬表面”在本文中定義為不吸水的表面。具體地,術(shù)語(yǔ)“硬表面”不涵蓋紡織品或織物。

因此,具有硬表面并落入該術(shù)語(yǔ)的預(yù)期含義內(nèi)的物品包括家庭表面,醫(yī)院/機(jī)構(gòu)中的表面和室外表面,如地板、墻壁、屋頂?shù)?,連同硬物體,如汽車(汽車洗滌)、桌子和其他家具,以及餐具的表面。餐具洗滌包括但不限于陶器,如杯子,玻璃杯,碗,用餐工具(例如匙、刀、叉),上菜用具,以及用陶瓷、塑料、金屬、瓷器、玻璃及丙烯酸酯制成的其他物品等。

硬表面洗滌劑組合物:術(shù)語(yǔ)“硬表面洗滌劑組合物”指的是包括洗滌劑組分的組合物,該組合物是適合的并且旨在用于清潔硬表面區(qū)域。本發(fā)明不限于任何具體類型的硬表面清潔組合物或任何具體的洗滌劑。

宿主細(xì)胞:術(shù)語(yǔ)“宿主細(xì)胞”意指易于用包含本發(fā)明的多核苷酸的核酸構(gòu)建體或表達(dá)載體轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)等的任何細(xì)胞類型。術(shù)語(yǔ)“宿主細(xì)胞”涵蓋由于復(fù)制期間發(fā)生的突變而與親本細(xì)胞不同的親本細(xì)胞的任何后代。

分離的:術(shù)語(yǔ)“分離的”意指處于自然界中不存在的形式或環(huán)境中的物質(zhì)。分離的物質(zhì)的非限制性實(shí)例包括(1)任何非天然存在的物質(zhì),(2)包括但不限于任何酶、變體、核酸、蛋白、肽或輔因子的任何物質(zhì),該物質(zhì)至少部分地從與其本質(zhì)相關(guān)的一種或多種或所有天然存在的成分中去除;(3)相對(duì)于天然發(fā)現(xiàn)的物質(zhì)通過(guò)人工修飾的任何物質(zhì);或(4)通過(guò)相對(duì)于與其天然相關(guān)的其他組分,增加物質(zhì)的量而修飾的任何物質(zhì)(例如宿主細(xì)胞中的重組產(chǎn)生;編碼該物質(zhì)的基因的多個(gè)拷貝;以及使用比與編碼該物質(zhì)的基因天然相關(guān)的啟動(dòng)子更強(qiáng)的啟動(dòng)子)。分離的物質(zhì)可以存在于發(fā)酵液樣品中,例如,可以將宿主細(xì)胞進(jìn)行遺傳修飾來(lái)表達(dá)本發(fā)明多肽。來(lái)自宿主細(xì)胞的發(fā)酵液將包括分離的多肽。

洗衣:術(shù)語(yǔ)“洗衣”涉及家用洗衣和工業(yè)洗衣兩者并且意指用包含本發(fā)明的清潔或洗滌劑組合物的溶液處理紡織品的過(guò)程。洗衣過(guò)程可以例如使用例如家用或工業(yè)洗衣機(jī)進(jìn)行或可以手動(dòng)進(jìn)行。

關(guān)于術(shù)語(yǔ)“惡臭”意指在清潔物品上不希望的氣味。清潔的物品應(yīng)氣味清新并且干凈,而沒有附著在該物品上的惡臭。惡臭的一個(gè)實(shí)例是具有使人不愉快的氣味的化合物,所述氣味可以是微生物產(chǎn)生的。另一實(shí)例是令人不愉悅的氣味可以是附著至已經(jīng)與人類或動(dòng)物接觸的物品的汗水或體味。惡臭的另一實(shí)例可以是來(lái)自香料、香草或香水的氣味,其粘附于物品,例如氣味強(qiáng)烈的咖喱或其他異國(guó)香料。檢測(cè)物品上的惡臭的存在的一種方法是通過(guò)使用測(cè)定II。

成熟多肽:術(shù)語(yǔ)“成熟多肽”意指在翻譯和任何翻譯后修飾如N-末端加工、C-末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后處于其最終形式的多肽。在一個(gè)方面中,成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,并且SEQ ID NO:2的氨基酸-37至-16是信號(hào)肽,并且SEQ ID NO:2的氨基酸-15至-1是前肽。在一個(gè)方面中,該成熟多肽是SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,并且SEQ ID NO:2的氨基酸-17至-1是信號(hào)肽。在一個(gè)方面中,成熟多肽是SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,成熟多肽是SEQ ID NO:7的氨基酸1至109或成熟多肽是SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。本領(lǐng)域已知,宿主細(xì)胞可以產(chǎn)生由同一多核苷酸表達(dá) 的兩種或更多種不同成熟多肽(即,具有不同C-末端和/或N-末端氨基酸)的混合物。本領(lǐng)域還已知,不同的宿主細(xì)胞不同地加工多肽,并且因此一個(gè)表達(dá)一種多核苷酸的宿主細(xì)胞當(dāng)與另一個(gè)表達(dá)相同多核苷酸的宿主細(xì)胞相比時(shí)可以產(chǎn)生一種不同的成熟多肽(例如,具有一個(gè)不同的C-末端和/或N-末端氨基酸)。在一個(gè)方面中,成熟多肽包含SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8的高達(dá)206個(gè)氨基酸殘基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸1至206)、或高達(dá)204個(gè)氨基酸殘基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸3至206)。

成熟多肽編碼序列:術(shù)語(yǔ)“成熟多肽編碼序列”意指編碼具有DNA酶活性的成熟多肽的多核苷酸。在一個(gè)方面中,成熟多肽編碼序列是SEQ ID NO:1的連接的核苷酸1至242、309至494、556至714和766至907。在一個(gè)方面中,該成熟多肽編碼序列是SEQ ID NO:4的核苷酸52至864,其中在SEQ ID NO:4中的氨基酸序列中的位置76-164、289-362和520-615中預(yù)測(cè)三個(gè)內(nèi)含子。分泌信號(hào)存在于SEQ ID NO:4的位置1-51中的氨基酸處。

核酸構(gòu)建體:術(shù)語(yǔ)“核酸構(gòu)建體”意指單鏈或雙鏈的核酸分子,該核酸分子是從天然存在的基因中分離的,或以本來(lái)不存在于自然界中的方式被修飾成包含核酸的區(qū)段,或是合成的,該核酸分子包括一個(gè)或多個(gè)控制序列。

可操作地連接:術(shù)語(yǔ)“可操作地連接”意指如下的構(gòu)造,其中,控制序列相對(duì)于多核苷酸的編碼序列安置在適當(dāng)位置,從而使得該控制序列指導(dǎo)該編碼序列的表達(dá)。

術(shù)語(yǔ)“靜電”意指材料或物品的表面內(nèi)或上的電荷的不平衡。電荷剩余直至它能夠通過(guò)電流或放電的方式而歷來(lái)。每當(dāng)兩個(gè)表面接觸并且分離時(shí)可以產(chǎn)生靜電電荷,并且這些表面中的至少一種對(duì)電流具有高電阻,或當(dāng)DNA存在于表面上時(shí)可以產(chǎn)生靜電電荷。存在于一個(gè)表面上的及其與另一個(gè)表面接觸和分離的DNA的組合還可會(huì)導(dǎo)致在表面內(nèi)/上的靜電的積累。靜電作用對(duì)于大多數(shù)人是熟悉的,因?yàn)槿丝梢愿械健⒙犚?、并且甚至看見?dāng)靠近大的導(dǎo)電體(例如,接地路徑)、或具有相反極性(陽(yáng)性或陰性)的過(guò)量電荷的區(qū)域時(shí)由于過(guò)量電荷被中和而產(chǎn)生的火花。靜電的去除被展示于實(shí)例1中。

序列一致性:用參數(shù)“序列一致性”來(lái)描述兩個(gè)氨基酸序列之間或兩個(gè)核苷酸序列之間的相關(guān)性。出于本發(fā)明的目的,使用如在EMBOSS包(EMBOSS:歐洲分子生物學(xué)開放軟件套件(The European Molecular Biology Open Software Suite),賴斯(Rice)等人,2000,遺傳學(xué)趨勢(shì)(Trends Genet.)16:276-277)(優(yōu)選5.0.0版或更新版本)的尼德爾(Needle)程序中所實(shí)施的尼德爾曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(Needleman(尼德爾曼)和Wunsch(翁施),1970,分子生物學(xué)雜志(J.Mol.Biol.)48:443-453)可以確定兩個(gè)氨基酸序列之間的序列一致性。所使用的參數(shù)是空位開放罰分10,空位延伸罰分0.5,以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取 代矩陣。將標(biāo)記為“最長(zhǎng)同一性”的Needle輸出(使用-nobrief選項(xiàng)獲得)用作百分比同一性并且是如下計(jì)算的:

(一致的殘基X 100)/(比對(duì)長(zhǎng)度-比對(duì)中的空位總數(shù))

為了本發(fā)明的目標(biāo),使用Needleman(尼德曼)-Wunsch(翁施)算法(Needleman(尼德曼)和Wunsch(翁施),1970,同上)可以確定兩個(gè)脫氧核糖核苷酸序列之間的序列一致性,如在EMBOSS包中的Needle(尼德爾)程序中實(shí)施(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite(EMBOSS:歐洲分子生物學(xué)開放軟件套裝),Rice(賴斯)等人,2000,同上),優(yōu)選是版本5.0.0或更新版本。所使用的參數(shù)是空位開放罰分10,空位拓展罰分0.5,和EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版)取代矩陣。將標(biāo)記為“最長(zhǎng)同一性”的Needle輸出(使用-nobrief選項(xiàng)獲得)用作百分比同一性并且是如下計(jì)算的:

(一致的脫氧核糖核苷酸X 100)/(比對(duì)長(zhǎng)度-比對(duì)中的空位總數(shù))。

嚴(yán)格條件

術(shù)語(yǔ)“非常低嚴(yán)格條件”意指對(duì)于至少100個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的探針,按照標(biāo)準(zhǔn)DNA印跡程序在42℃于5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切和變性的鮭精DNA和25%甲酰胺中預(yù)雜交和雜交12至24小時(shí)。最后在45℃下使用2X SSC、0.2%SDS將載體材料洗滌三次,每次15分鐘。

術(shù)語(yǔ)“低嚴(yán)格條件”意指對(duì)于至少100個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的探針,按照標(biāo)準(zhǔn)DNA印跡程序在42℃于5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切和變性的鮭精DNA和25%甲酰胺中預(yù)雜交和雜交12至24小時(shí)。最后在50℃下使用2X SSC、0.2%SDS將載體材料洗滌三次,每次15分鐘。

術(shù)語(yǔ)“中嚴(yán)格條件”是指對(duì)于長(zhǎng)度為至少100個(gè)核苷酸的探針而言,遵循標(biāo)準(zhǔn)DNA印跡程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并變性的鮭精DNA和35%甲酰胺中預(yù)雜交和雜交12至24小時(shí)。最后在55℃下使用2X SSC、0.2%SDS將載體材料洗滌三次,每次15分鐘。

術(shù)語(yǔ)“中-高嚴(yán)格條件”意指對(duì)于長(zhǎng)度為至少100個(gè)核苷酸的探針而言,遵循標(biāo)準(zhǔn)DNA印跡程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并變性的鮭精DNA和35%甲酰胺中預(yù)雜交和雜交12至24小時(shí)。最后在60℃下使用2X SSC、0.2%SDS將載體材料洗滌三次,每次15分鐘。

術(shù)語(yǔ)“高嚴(yán)格條件”意指對(duì)于長(zhǎng)度為至少100個(gè)核苷酸的探針而言,遵循標(biāo)準(zhǔn)DNA印跡程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并變性的鮭精DNA和50%甲酰胺中預(yù)雜交和雜交12至24小時(shí)。最后在65℃下使用2X SSC、0.2%SDS將載體材料洗滌三次,每次15分鐘。

術(shù)語(yǔ)“非常高嚴(yán)格條件”是指對(duì)于長(zhǎng)度為至少100個(gè)核苷酸的探針而言,遵循標(biāo)準(zhǔn)DNA印跡程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml 剪切并變性的鮭精DNA和50%甲酰胺中預(yù)雜交和雜交12至24小時(shí)。最后在70℃下使用2X SSC、0.2%SDS將載體材料洗滌三次,每次15分鐘。

子序列:術(shù)語(yǔ)“子序列”意指使一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))核苷酸從成熟多肽編碼序列的5'端和/或3'端缺失的多核苷酸;其中該子序列編碼具有DNA酶活性的片段。在一個(gè)方面中,子序列包含至少796個(gè)核苷酸(例如,SEQ ID NO:1的核苷酸112至907),至少793個(gè)核苷酸(例如,SEQ ID NO:1的核苷酸115至907),或至少790個(gè)核苷酸(例如,SEQ ID NO:1的核苷酸118至907)。在一個(gè)方面中,子序列包含至少587個(gè)核苷酸(例如,SEQ ID NO:4的核苷酸278至864)、至少650個(gè)核苷酸(例如,SEQ ID NO:4的核苷酸215至864)、或至少816個(gè)核苷酸(例如,SEQ ID NO:4的核苷酸52至864)。

紡織品:術(shù)語(yǔ)“紡織品”意指包括紗線、紗線中間體、纖維、非機(jī)織物材料、天然材料、合成材料、以及任何其他紡織品材料的任何紡織品材料,這些材料制造的織物和由這些織物制成的產(chǎn)品(例如服裝和其他物品)。該紡織品或織物可以處于針織品、機(jī)織物、牛仔布、非機(jī)織物、氈、紗線、以及毛巾布的形式。這些紡織品可以是纖維素基的,如天然纖維素,包括棉布、亞麻/亞麻布、黃麻、苧麻、劍麻或椰殼纖維或者人造纖維素(例如,來(lái)源于木漿),包括纖維膠/人造絲、醋酸纖維素纖維(三胞)、萊賽爾纖維(lyocell)或其共混物。紡織品或織物也可以不基于纖維素,如天然聚酰胺,包括羊毛、駝毛、羊絨、馬海毛、兔毛和蠶絲或合成聚合物如尼龍、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨綸/彈性纖維(spandex/elastane)、或其共混物其以及基于纖維素和不基于纖維素的纖維的共混物。共混物的實(shí)例是棉布和/或人造絲/纖維膠與一種或幾種伴隨材料的共混物,該伴隨材料例如是羊毛、合成纖維(例如聚酰胺纖維、丙烯酸纖維、聚酯纖維、聚氯乙烯纖維、聚氨酯纖維、聚脲纖維、芳族聚酰胺纖維)和/或含纖維素的纖維(例如人造絲/纖維膠、苧麻、亞麻/亞麻布、黃麻、醋酸纖維素纖維、萊賽爾纖維)。該紡織品還可以由微纖維或微纖維制成,該微纖維是由聚酯,聚酰胺(例如,尼龍、Kevlar、Nomex(諾梅克斯)、trogamide)制成,或由聚酯、聚酰胺、以及聚丙烯(Prolen)的組合制成的合成纖維??椢锟梢允浅R?guī)的可洗滌衣物,例如弄臟的家居衣物。當(dāng)使用術(shù)語(yǔ)織物或衣服時(shí),旨在也包括廣義術(shù)語(yǔ)紡織品。

變體:術(shù)語(yǔ)“變體”意指在一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))位置包括改變(即,取代、插入和/或缺失)的與親本酶具有相同活性的多肽。取代意指占據(jù)一個(gè)位置的氨基酸由不同的氨基酸代替;缺失意指除去占據(jù)一個(gè)位置的氨基酸;以及插入意指在占據(jù)一個(gè)位置的氨基酸的毗鄰處和緊鄰處添加一個(gè)氨基酸。在本發(fā)明的上下文中,所鑒別的DNA酶的變體具有親本的酶活性, 即,催化DNA主鏈中的磷酸二酯鍵水解斷裂的能力(脫氧核糖核酸酶活性)。在一個(gè)實(shí)施例中,變體的脫氧核糖核酸酶活性關(guān)于親本DNA酶是增加的,例如,SEQ ID NO:2的成熟多肽。

洗滌周期:在此將術(shù)語(yǔ)“洗滌周期”定義為一個(gè)洗滌操作,其中將紡織品浸泡在洗液中,將某種機(jī)械作用施加至該紡織品,以釋放污物,并且協(xié)助洗液流進(jìn)和流出該紡織品,并且最終去除多余的洗液。在一個(gè)或多個(gè)洗滌周期后,總體上對(duì)該紡織品進(jìn)行沖洗和干燥。

洗滌液:術(shù)語(yǔ)“洗滌液”旨在表示任選地包括用于將紡織品洗衣、用于硬表面清潔或用于餐具洗滌的酶類的水和洗滌劑的溶液或混合物。

擦拭巾:術(shù)語(yǔ)擦拭巾是指毛巾或濕巾,以及是一小塊紙或擦拭材料,例如紡織品。擦拭巾可以由任何種類的紡織品(如無(wú)紡紡織品)制成。紡織品的一個(gè)實(shí)例是用于清潔產(chǎn)品的處于墊子、針織物和織物形式的微纖維。針對(duì)具體的特征,包括柔軟性、韌性、吸收性、防水性、電動(dòng)力學(xué)以及過(guò)濾能力來(lái)選擇合成纖維的形狀、尺寸和組合。

濕擦拭巾:術(shù)語(yǔ)濕擦拭巾是指濕毛巾或濕濕巾,并且是小的潤(rùn)濕的紙或擦拭材料,例如,經(jīng)常折疊并方便單獨(dú)包裝的紡織品。濕擦拭巾用于清潔目的,像個(gè)人衛(wèi)生(嬰兒擦拭巾)或家庭清潔。例如,濕擦拭巾可用于擦除眼鏡、太陽(yáng)鏡、護(hù)目鏡、手機(jī)(cell)/智能手機(jī)屏幕、電腦/筆記本電腦屏幕以及更多的上的指紋和油膩污跡。

發(fā)明詳述

發(fā)明人已經(jīng)出人意料地地發(fā)現(xiàn),具有脫氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽可以用于從靜電在其上積累的物品(如紡織品和硬表面)防止、減少或去除靜電。合成紡織品,如由聚酯、聚酰胺、尼龍、彈性纖維、聚酰胺或起絨布制成的紡織品在穿著時(shí)或在洗衣期間容易積累靜電。據(jù)信,物品上DNA的積累增加了物品的靜電。帶靜電的紡織品容易粘附毛發(fā)或身體并積累塵土。這對(duì)于穿著該紡織品的人來(lái)說(shuō)是不方便的。通過(guò)使用具有脫氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽可以防止、減少或甚至完全去除靜電。DNA酶的使用可以賦予物品降低的吸收和/或保留靜電荷的趨勢(shì),并且由此也降低了吸引污物的趨勢(shì)。DNA酶的使用可以保護(hù)織物在洗衣之后的機(jī)器干燥期間不會(huì)獲得靜電荷。

此外,在覆蓋有DNA和特定材料的地板或地面上行走,對(duì)于行走的人也示出為積累靜電。例如,一些合成地毯、合成地板或甚至跑步機(jī)的帶可以積累靜電,使得當(dāng)放電時(shí)人將經(jīng)歷靜電沖擊。具有DNA酶活性的多肽的使用可以防止、減少或去除靜電的積累。

觸摸例如智能手機(jī)或平板電腦的觸摸屏沉積DNA在屏幕上。這增加了屏 幕的靜電,這由此增加了吸收至屏幕上的污物的量。因此屏幕顯現(xiàn)為甚至更臟。具有DNA酶活性的多肽的使用可以防止、減少或去除靜電的積累,并且因此也防止、減少或去除污物/粒子的積累。具有DNA酶活性的多肽的使用可以防止、減少或去除靜電的積累。

具有DNA酶活性的多肽可以例如噴灑至積累靜電的物品上??梢酝ㄟ^(guò)用該多肽噴射這類物品來(lái)減少或去除在生產(chǎn)和使用合成物品期間積累的靜電。示例性物品包括地毯、地板、床單或亞麻織物。

防止、減少或去除靜電的另一種方式是使物品與包含具有DNA酶活性的多肽的液體溶液接觸。該物品可以與液體溶液例如通過(guò)將物品浸泡在該液體溶液中進(jìn)行接觸。該液體溶液可以是洗滌液,并且可以同時(shí)洗滌該物品?;蛟撘后w溶液可以是用于在漂洗或干燥物品時(shí)使用的軟化劑。該軟化劑可以在漂洗水中使用或應(yīng)用至在漂洗或干燥期間使用的片上。本發(fā)明的該實(shí)施例優(yōu)選用于紡織品(如洗衣紡織品),其可以在去除靜電的同時(shí)被洗滌、漂洗或干燥。

該洗滌液也可用于洗滌需要抗靜電處理的地板或其它硬表面。

該液體溶液也可以是浸漬液體,該液體防止物品積累靜電。用于浸漬的液體溶液可以同時(shí)用作洗滌劑和抗靜電溶液。

具有DNA酶活性的多肽還可以包衣或涂覆到需要抗靜電處理的物品,例如地板或跑步機(jī)上。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及用于減少或去除靜電的組合物,其中該組合物包括具有脫氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽和抗靜電劑。

所述組合物可以是洗衣洗滌劑組合物、餐具洗滌劑組合物、用于硬表面清潔的組合物、洗衣柔軟組合物或用于個(gè)人護(hù)理的組合物。

在一個(gè)實(shí)施例中,該組合物是洗衣洗滌劑組合物、餐具洗滌劑組合物或用于硬表面清潔的組合物。

在一個(gè)實(shí)施例中,該組合物是洗衣柔軟組合物。該洗衣柔軟組合物可以應(yīng)用至紡織品,該組合物可以在洗滌、漂洗或干燥物品期間使用。

該組合物可以進(jìn)一步包括表面活性劑、助洗劑、絮凝助劑、螯合劑、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、酶、酶穩(wěn)定劑、酶抑制劑、催化材料、漂白活化劑、過(guò)氧化氫、過(guò)氧化氫源、預(yù)形成的過(guò)酸、聚合的分散劑、粘土去污劑/抗再沉淀劑、增白劑、抑泡劑、染料、香料、結(jié)構(gòu)彈力劑、織物柔軟劑、載體、助水溶物、助洗劑和共助洗劑、織物調(diào)色劑、防沫劑、分散劑、加工助劑、殺細(xì)菌劑、殺真菌劑和/或色素。

該組合物可以包括一種或多種選自下組的酶,該組由以下各項(xiàng)組成:蛋白酶、脂肪酶、角質(zhì)酶、淀粉酶、糖酶、纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶和氧化酶。

該組合物可以是適合于洗衣或硬表面清潔的洗滌劑組合物。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種液體洗滌劑組合物,該組合物包括總濃度按重量計(jì)是至少3%的表面活性劑和洗滌劑以及洗滌劑助洗劑,以及含洗滌劑酶的微囊,其中該微囊的膜是通過(guò)具有高于1kDa分子量的多支化的多胺的交聯(lián)而產(chǎn)生。本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn),將酶包封在具有半透膜的微囊中,并且在這些囊(在添加至該液體洗滌劑之前)中具有高于該液體洗滌劑中的水活度時(shí),當(dāng)被添加到該洗滌劑(水正溢出)中時(shí)這些囊將經(jīng)歷(部分地)崩潰,因此在這些囊中留下更為濃縮的并且更粘的含酶內(nèi)部。該膜的崩潰還可導(dǎo)致可透性的降低。

這可以通過(guò)添加穩(wěn)定劑/聚合物進(jìn)一步使用,尤其是不會(huì)通過(guò)該膜可透的那些。該崩潰和所得黏度增加將降低/妨礙敵對(duì)組分(例如,表面活性劑或螯合劑)擴(kuò)散進(jìn)入這些囊中,并且因此增加液體洗滌劑中酶的儲(chǔ)存穩(wěn)定性。該液體洗滌劑中的對(duì)該酶敏感的組分(例如,充當(dāng)該酶底物的組分)還被保護(hù)免于受該酶的降解。在洗滌過(guò)程中,該液體洗滌劑被水稀釋,因此增加了水活度。水現(xiàn)在將擴(kuò)散進(jìn)這些囊(滲透作用)中。這些囊將溶脹并且該膜將變得對(duì)該酶可透過(guò)由此它們可以離開這些囊,或簡(jiǎn)單地脹裂并且以此方式釋放該酶。該概念在穩(wěn)定這些酶對(duì)抗液體洗滌劑中的敵對(duì)組分方面非常有效,反之亦然還保護(hù)該液體洗滌劑中酶敏感的組分不受酶的影響。

對(duì)酶敏感并且可以被酶降解的洗滌劑組分的實(shí)例包括(括號(hào)中的相關(guān)酶):黃原膠(黃原膠酶)、具有酯鍵的聚合物(脂肪酶)、氫化蓖麻油(脂肪酶)、香料(脂肪酶)、甲酯磺酸鹽表面活性劑(脂肪酶)、纖維素和纖維素衍生物(例如,CMC)(纖維素酶)、和糊精和環(huán)糊精(淀粉酶)。

敏感的洗滌劑成分還可以被囊化,并且由此被穩(wěn)定化在微囊中。敏感的洗滌劑成分在儲(chǔ)存期間易于降解。這類洗滌劑成分包括漂白化合物、漂白活化劑、香料、聚合物、助洗劑、表面活性劑等。

通常,這些微囊可以被用于分離洗滌劑中不相容的組分/化合物。

將這些微囊添加到洗滌劑中可以被用于影響該洗滌劑產(chǎn)品的可視外觀,例如不透光效應(yīng)(小型微囊)或明顯可見的顆粒(大型微囊)的效應(yīng)。這些微囊也可以是著色的。

這些微囊可以被用于在處理和加工酶產(chǎn)品期間降低酶塵埃水平。

除非另外指明,貫穿本申請(qǐng)所有的百分比指示為重量百分比(%w/w)。

微囊:典型地,這些微囊通過(guò)將水滴形成不可與水混溶的連續(xù)體而產(chǎn)生-即典型地通過(guò)制備一種油包水乳劑-并且隨后通過(guò)界面聚合經(jīng)由添加一種交聯(lián)劑形成該膜。在最終固化之后,可以收獲這些囊并進(jìn)行進(jìn)一步清洗并通過(guò)本 領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行配制。隨后將該囊配制品添加至該洗滌劑中。

有效負(fù)載、有待囊化的主膜成分和最終另外的組分是在水相中發(fā)現(xiàn)的。在該連續(xù)體中發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定化這些水滴趨向凝聚的組分(乳化劑、乳化穩(wěn)定劑、表面活性劑等),并且還通過(guò)該連續(xù)體添加該交聯(lián)劑。

可以通過(guò)本領(lǐng)域中任何方法來(lái)制備該乳劑,例如,通過(guò)機(jī)械攪動(dòng)、滴注方法、膜乳化、微流體技術(shù)、超聲處理等。在一些情況下,這些相的簡(jiǎn)單混合將自動(dòng)導(dǎo)致一種乳劑,通常被稱為自乳化。使用方法導(dǎo)致一個(gè)窄的粒度分布是有利的。

隨后典型地將該或這些交聯(lián)劑添加至該乳劑中,這是直接或更典型地通過(guò)制備交聯(lián)劑在一種溶劑中的溶液,該溶劑在連續(xù)相中是可溶的。該乳劑和交聯(lián)劑或其溶液可以通過(guò)本領(lǐng)域中常規(guī)使用的方法來(lái)混合,例如,通過(guò)簡(jiǎn)單混合或通過(guò)仔細(xì)地控制該乳劑以及該交聯(lián)劑溶液流動(dòng)通過(guò)一個(gè)串聯(lián)混合器。

在一些情況下,需要固化這些囊來(lái)完成膜的形成。固化經(jīng)常是簡(jiǎn)單的攪拌這些囊一段時(shí)間以允許界面聚合反應(yīng)結(jié)束。在其他情況下,該膜的形成可以通過(guò)添加反應(yīng)淬滅劑來(lái)終止。

這些囊可以被后修飾,例如通過(guò)使組分反應(yīng)到該膜上以阻礙或減少這些顆粒在如在WO 99/01534中所述的洗滌劑中的絮凝。

可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的方法分離或濃縮這些產(chǎn)生的囊,例如,通過(guò)過(guò)濾、離心、蒸餾或傾析該囊分散體。

這些所得囊可以被進(jìn)一步配制,例如,通過(guò)添加表面活性劑以賦予產(chǎn)物對(duì)于存儲(chǔ)、運(yùn)輸和稍后處理以及添加至洗滌劑的所需性質(zhì)。其他微囊配制劑包括流變改性劑、殺生物劑(例如,Proxel)、用于pH調(diào)節(jié)的酸/堿(其也將在這些微囊內(nèi)調(diào)節(jié))、以及用于調(diào)節(jié)水活度的水。

該囊形成方法可以包括以下步驟:

-制備初始的一個(gè)或多個(gè)水相和油相,

-形成油包水乳劑,

-通過(guò)界面聚合形成膜,

-任選的后修飾,

-任選的分離和/或配制,

-添加至洗滌劑。

該方法可以是一個(gè)分批法或是一個(gè)連續(xù)或半連續(xù)方法。

根據(jù)本發(fā)明的微囊是小型的水性球體,其周圍有一個(gè)均勻的膜。該微囊內(nèi)部的材料被稱為核心、內(nèi)相、或填充物,而該膜有時(shí)被稱為殼、包衣、或壁。這些微囊具有在0.5μm和2毫米之間的直徑。優(yōu)選地,這些微囊的平均直徑是在1μm至1000μm的范圍中,更優(yōu)選地在5μm至500μm的范圍中,甚至更優(yōu)選地在10μm至500μm的范圍中,甚至更優(yōu)選地在50μm至500μm的范圍 中,并且最優(yōu)選地在50μm至200μm的范圍中??商娲兀@些微囊的直徑是在0.5μm至30μm的范圍中;或在1μm至25μm的范圍中。該微囊的直徑是當(dāng)聚合作用完成之后在油相中測(cè)定的。該囊的直徑可以根據(jù)周圍化學(xué)環(huán)境的水活度改變。

酶的微囊化(如本發(fā)明中所用的)可以通過(guò)界面聚合來(lái)進(jìn)行,其中聚合反應(yīng)中的這兩種反應(yīng)物在一個(gè)界面處相遇并且快速反應(yīng)。這一方法的基礎(chǔ)是多胺與酸衍生物的反應(yīng),通常是酸性鹵化物,充當(dāng)一種交聯(lián)劑。該多胺優(yōu)選地是基本上水溶性的(當(dāng)處于游離堿形式時(shí))。在正確的條件下,柔性薄膜在該界面處快速形成。進(jìn)行該聚合作用的一種方式是使用該酶和多胺的一種水性溶液,其與一種非水溶劑(以及一種乳化劑)進(jìn)行乳化,并添加包含該酸衍生物的溶液。該酶溶液中可以存在堿劑以中和在該反應(yīng)過(guò)程中形成的酸。聚合物(聚酰胺)膜在這些乳滴的界面處立即形成。該微囊的聚合物膜典型地具有陽(yáng)離子性質(zhì),并且因此與具有陰離子性質(zhì)的化合物結(jié)合/絡(luò)合。

這些微囊的直徑是通過(guò)這些乳滴的大小而確定的,乳滴的大小通過(guò)例如攪拌速率來(lái)控制。

乳劑:乳劑是一個(gè)液相在第二液相內(nèi)暫時(shí)或永久的分散體。該第二液相通常被稱為連續(xù)相。表面活性劑通常用于幫助乳劑的形成和穩(wěn)定化。不是所有的表面活性劑都能同樣地穩(wěn)定化乳劑。需要針對(duì)最優(yōu)乳劑效用選擇表面活性劑的類型和數(shù)量,尤其是對(duì)于該乳劑的制備和物理穩(wěn)定性,以及在稀釋或進(jìn)一步加工過(guò)程中的穩(wěn)定性。物理穩(wěn)定性是指將乳劑以分散體形式進(jìn)行維持。例如凝聚、聚合、吸附至容器壁、沉降和乳油化的過(guò)程是物理不穩(wěn)定性的多種形式,并且應(yīng)被避免。合適的表面活性劑的實(shí)例描述于WO 97/24177,第19-21頁(yè);以及WO 99/01534中。

可以將乳劑進(jìn)一步分類為簡(jiǎn)單的乳劑,其中該分散的液相是一種簡(jiǎn)單的均質(zhì)液體,或一種更復(fù)雜的乳劑,其中該分散的液相是液相或固相的非均質(zhì)組合,例如雙重乳劑或復(fù)合型乳劑。例如,可以形成一種油包水雙重乳劑或復(fù)合型乳劑,其中該水相自身進(jìn)一步包含乳化的油相;這種類型的乳劑可以被指定為一種油包水包油(o/w/o)乳劑。可替代地,可以形成油包水乳劑,其中該水相包含分散的固相,通常被稱為一種懸浮液-乳劑??梢悦枋銎渌鼜?fù)雜的乳劑。因?yàn)樵诿枋鲞@類系統(tǒng)方面固有的困難,術(shù)語(yǔ)乳劑用于描述簡(jiǎn)單和更復(fù)雜的乳劑兩者,不必要限制乳劑的形式或存在的相類型和相數(shù)。

多胺:膜的剛性/柔性和可透性主要受多胺選擇的影響。根據(jù)本發(fā)明的多胺是一種多支化的多胺。每個(gè)分支(優(yōu)選地以一個(gè)伯氨基團(tuán)結(jié)束)充當(dāng)膜網(wǎng)絡(luò)中的一個(gè)系拴點(diǎn),從而產(chǎn)生有利性質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明的多支化的多胺是一種具有多于兩個(gè)分支點(diǎn)和多于兩個(gè)反應(yīng)性氨基的多胺(能夠與交聯(lián)劑反應(yīng),即,伯氨基團(tuán)和仲氨基團(tuán))。當(dāng)制備該乳劑時(shí),該多支化的多胺被用作起始 材料–它不是從其他起始材料原位形成的。為了得到引人注目的特性,該多胺的多支化結(jié)構(gòu)必須作為起始材料存在。

分支點(diǎn)數(shù)目和伯胺數(shù)目之間存在密切的關(guān)系,由于伯胺將總是位于分支的末端:一個(gè)線性胺只能包含兩個(gè)伯胺。對(duì)于假設(shè)地引入這樣一種線性二胺的每個(gè)分支點(diǎn)將允許一個(gè)或多個(gè)伯胺引入到該或這些被引入的分支的末端。在本文中,我們將該伯氨基團(tuán)理解為該分支的一部分,即該分支的端點(diǎn)。例如,我們認(rèn)為三(2-氨乙基)胺或1,2,3-丙烷三胺都是具有一個(gè)分支點(diǎn)的分子。對(duì)于本發(fā)明,該多胺具有至少四個(gè)伯胺??梢詮闹咀鍩N鏈(如在之前所述實(shí)例中)或從不飽和的碳鍵(例如在,例如3,3’-二氨基聯(lián)苯胺中)、或從叔氨基團(tuán)(例如在N,N,N’,N’-四-(2-氨乙基)乙二胺)中引入多個(gè)分支點(diǎn)。

除了分支點(diǎn)的數(shù)目之外,我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn),反應(yīng)性氨基團(tuán)的緊密度非常重要。例如,N,N,N’,N’-四-(12-氨十二基)乙二胺的物質(zhì)是不適合的。肽或蛋白(例如一種酶)都不適合用于膜形成。因此,該多支化的多胺不是肽或蛋白。

在一個(gè)實(shí)施例中,這些反應(yīng)性氨基團(tuán)構(gòu)成該多支化的多胺至少15%的分子量,例如超過(guò)20%,或超過(guò)25%。優(yōu)選地,該多支化的多胺的分子量至少為1kDa;更優(yōu)選地,該多支化的多胺的分子量至少為1.3kDa。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中,該多支化的多胺是聚乙烯亞胺(PEI),及其修飾體,具有多于兩個(gè)分支點(diǎn)和多于兩個(gè)反應(yīng)性氨基,其中這些反應(yīng)性氨基構(gòu)成該P(yáng)EI至少15%的分子量,例如超過(guò)20%,或超過(guò)25%。優(yōu)選地,該P(yáng)EI的分子量是至少為1kDa。

不同的多支化的多胺的組合可以用于制備根據(jù)本發(fā)明的微囊。

可以通過(guò)添加一種或多種具有小于1kDa分子量的小胺來(lái)改進(jìn)微囊的有利特性(例如,酶儲(chǔ)存穩(wěn)定性、降低的酶滲出、降低的洗滌劑成分的入通量)。該小胺優(yōu)選地是基本上水溶性的(當(dāng)處于游離堿形式時(shí))并且可以是一種例如乙二胺、六亞甲基二胺、己二胺、二亞乙基四胺、乙四胺、苯二胺、哌嗪、四亞甲基五胺或、優(yōu)選地二亞乙基三胺(DETA)的物質(zhì)。在制備微囊時(shí),可以按小胺和多支化的多胺的總含量重量計(jì)高達(dá)50%、優(yōu)選地高達(dá)40%、高達(dá)30%、高達(dá)20%、高達(dá)10%、高達(dá)5%的量添加這些小胺。

交聯(lián)劑:如在本發(fā)明中所使用的交聯(lián)劑是一種具有至少兩個(gè)能夠與胺類反應(yīng)形成共價(jià)鍵的基團(tuán)/位點(diǎn)的分子。

該交聯(lián)劑優(yōu)選地是油可溶性的并且可以呈酸酐或酸性鹵化物的形式,優(yōu)選地為?;取@?,它可以是己二酰氯、癸二酰氯、十二烷基二酰氯、鄰苯二甲酰氯、對(duì)苯二甲酰氯、間苯二甲酰氯、或均苯三甲酰氯,但優(yōu)選地,該交聯(lián)劑是對(duì)苯二甲酰氯或均苯三甲酰氯。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及用于減少或去除物品的靜電的方法,該方法包括以下 步驟:

a.使物品與根據(jù)本發(fā)明的組合物接觸、根據(jù)本發(fā)明的擦拭巾或包括具有DNA酶活性的多肽的液體溶液;以及

b.任選地漂洗該物品,

其中該物品是紡織品或硬表面。

在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中,該方法進(jìn)一步包括在該液體溶液中或用該液體溶液洗滌該物品。

關(guān)于使物品與組合物或液體溶液接觸意指例如通過(guò)用該組合物或液體溶液噴射、包衣、浸泡該物品使該物品與組合物/溶液接觸。該項(xiàng)可以與物品短時(shí)間段接觸,如1-60秒,或者更長(zhǎng)的時(shí)間段如1-60分鐘,或甚至更長(zhǎng)如1-12小時(shí)。

該液體溶液可以進(jìn)一步包含抗靜電劑、表面活性劑、助洗劑、絮凝助劑、螯合劑、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、酶、酶穩(wěn)定劑、酶抑制劑、催化材料、漂白活化劑、過(guò)氧化氫、過(guò)氧化氫源、預(yù)形成的過(guò)酸、聚合的分散劑、粘土去污劑/抗再沉淀劑、增白劑、抑泡劑、染料、香料、結(jié)構(gòu)彈力劑、織物柔軟劑、載體、助水溶物、助洗劑和共助洗劑、織物調(diào)色劑、防沫劑、分散劑、加工助劑、殺細(xì)菌劑、殺真菌劑和/或色素。

在一個(gè)實(shí)施例中,該液體溶液進(jìn)一步包括一種或多種選自下組的酶,該組由以下各項(xiàng)組成:蛋白酶、脂肪酶、角質(zhì)酶、淀粉酶、糖酶、纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶和氧化酶。

該液體溶液的pH在1到11的范圍內(nèi),如在5.5到11的范圍內(nèi),如在7到9的范圍內(nèi),在7到8的范圍內(nèi)或在7到8.5的范圍內(nèi)。

該液體溶液的溫度可以在5℃至95℃的范圍內(nèi)、或在10℃至80℃的范圍內(nèi)、在10℃至70℃的范圍內(nèi)、在10℃至60℃的范圍內(nèi)、在10℃至50℃的范圍內(nèi)、在15℃至40℃的范圍內(nèi)或在20℃至30℃的范圍內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施例中,該液體溶液的溫度是30℃。

在一個(gè)實(shí)施例中,在與該液體溶液或該組合物接觸后漂洗該物品。可以將該物品用水或用包括調(diào)節(jié)劑的水進(jìn)行沖洗。

可以將本發(fā)明的DNA酶以一定量存在于洗滌劑組合物中,該量對(duì)應(yīng)于至少0.002mg的DNA酶蛋白,如至少0.004mg的DNA酶蛋白、至少0.006mg的DNA酶蛋白、至少0.008mg的DNA酶蛋白、至少0.01mg的DNA酶蛋白、至少0.1mg的蛋白,優(yōu)選地1mg的蛋白,更優(yōu)選地至少10mg的蛋白,甚至更優(yōu)選地至少15mg的蛋白,最優(yōu)選地至少20mg的蛋白,并且甚至最優(yōu)選地至少25mg的蛋白。因此,該洗滌劑組合物可以包括至少0.00008%DNA酶蛋白,優(yōu)選地至少0.002%、0.003%、0.004%、0.005%、0.006%、0.008%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9% 或1.0%的DNA酶蛋白。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及用于防止、減少或去除靜電的擦拭巾,該擦拭巾包含具有DNA酶活性的多肽。該擦拭巾可以用具有DNA酶活性的多肽進(jìn)行浸漬或包衣。擦拭巾擦除來(lái)自物品的污物和污垢,并且具有DNA酶活性的多肽進(jìn)一步改進(jìn)了清潔,因?yàn)槠鋸奈锲啡コ鼶NA并且由此清潔物品,并且此外防止、減少和去除了物品上的靜電。

在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中,該擦拭巾由紡織品或紙制成。該紡織品可以選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:棉、亞麻(flax/linen)、黃麻、苧麻、劍麻、椰殼纖維、粘膠纖維/人造纖維、乙酸纖維素纖維(三胞)、萊賽爾纖維(lyocell)、羊毛、駝毛、羊絨、馬海毛、兔毛和絲綢、尼龍、芳香聚酰胺、聚酯、丙烯酸的、聚丙烯、氨綸/彈性纖維、微纖維或其共混物。

在一個(gè)實(shí)施例中,該紡織品是非織造紡織品或水刺織物,其可由微纖維制成。

該擦拭巾可以是選自下組的薄棉紙,該組由以下各項(xiàng)組成:衛(wèi)生薄紙、面部薄紙、紙巾、濕巾、衛(wèi)生紙、餐巾、廚房卷紙、手帕以及玻璃清潔薄紙。擦拭巾可以是單獨(dú)包裝的濕擦拭巾或處于包括兩個(gè)或更多個(gè)濕擦拭巾的包裝中。這種包裝容易保存在錢包或包里,在家、學(xué)?;蚬ぷ魈?。

擦拭巾可用于從表面,例如屏幕、觸摸屏、電話、平板電腦、照相機(jī)、鏡頭、珠寶、眼鏡、健身器材以及CD上的表面,防止、減少或去除靜電。

具有DNA酶活性的多肽可以是動(dòng)物、植物或微生物來(lái)源的。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽具有人類來(lái)源。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽獲得自植物材料,例如綠豆。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽具有細(xì)菌或真菌來(lái)源。

真菌來(lái)源的多肽可以選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:

a.與SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽

b.由如下多核苷酸編碼的多肽,該多核苷酸在低嚴(yán)格條件下與以下各項(xiàng)雜交

i.SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列

ii.其cDNA序列,或

iii.(i)或(ii)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體;

c.由與SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽、或由與SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽;

d.在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:5的成熟多肽的變體或在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體;以及

e.具有DNA酶活性的(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的片段。

歐洲專利申請(qǐng)?zhí)?4164424.5在實(shí)施例1至3中披露了如何產(chǎn)生SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:8的多肽。歐洲專利申請(qǐng)?zhí)?4164429.4在實(shí)施例1至2中披露了如何產(chǎn)生SEQ ID NO:5的多肽。

細(xì)菌來(lái)源的多肽可以選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:

a.與SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或與SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;

b.在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:6的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:7的成熟多肽的變體;以及

c.具有DNA酶活性的(a)、或(b)的多肽的片段;

該多肽與SEQ ID NO:2的成熟多肽、與SEQ ID NO:3的成熟多肽、與SEQ ID NO:5的成熟多肽、或與SEQ ID NO:6的成熟多肽、或與SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。

在編號(hào)WO 2011098579公開的國(guó)際專利申請(qǐng)?jiān)趯?shí)施例3中披露了如何克隆和表達(dá)SEQ ID NO:6的多肽。

該多肽可以包括SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:2的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:5的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:6的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:7的成熟多肽或由它們組成,或者該多肽包括SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:8的成熟多肽或由它們組成。

該成熟多肽可以包括SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,SEQ ID NO:7的氨基酸1至109或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。

該多肽可以是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體,其中該變體在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的變 體,該變體在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入。

該多肽可以是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的片段,其中該片段具有DNA酶活性。

具有DNA酶活性的多肽可以獲得自曲霉屬,例如獲得自米曲霉。

在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及與SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,這些多肽具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,這些多肽與SEQ ID NO:2的成熟多肽具有多達(dá)10個(gè)(例如1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、或10個(gè))氨基酸的差異。

在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及與SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,這些多肽具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,這些多肽與SEQ ID NO:3的成熟多肽具有多達(dá)10個(gè)(例如1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、或10個(gè))氨基酸的差異。

在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,這些多肽具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,這些多肽與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有多達(dá)10個(gè)(例如1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、或10個(gè))氨基酸的差異。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及由以下多核苷酸編碼的具有DNA酶活性的多肽,該多核苷酸與SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且其中該多肽用于從物品防止、減少或去除靜電。

在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。本發(fā)明的多肽優(yōu)選地包括SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其等位基因變體或由其組成;或?yàn)槠渚哂蠨NA酶活性的片段。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:2的成熟多肽或由其組成。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:2的氨基酸1至206或由其組成。

在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。本發(fā)明的多肽優(yōu)選地包括SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其等位基因變體或由其組成;或?yàn)槠渚哂蠨NA酶活性的片段。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:3的成熟多肽或由其組成。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:3的氨基酸1至206或由其組成。

在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。本發(fā)明的多肽優(yōu)選地包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列或其等位基因變體或由其組成;或?yàn)槠渚哂蠨NA酶活性的片段。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:8的成熟多肽或由其組成。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:8的氨基酸1至206或由其組成。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及一種具有DNA酶活性的分離的多肽,該分離的多肽是由在低嚴(yán)格條件下與(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全長(zhǎng)補(bǔ)體雜交的一種多核苷酸所編碼(薩姆布魯克等,1989,分子克隆實(shí)驗(yàn)指南,第2版,紐約冷泉港)。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及由以下多核苷酸編碼的具有DNA酶活性的多肽,該多核苷酸與SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在另外的實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及由以下多核苷酸編碼的具有DNA酶活性的多肽,該多核苷酸與SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且其中該多肽用于從物品防止、減少或去除靜電。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及在一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的變體。在一個(gè)實(shí)施例中,引入SEQ ID NO:2的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的數(shù)目多達(dá)10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。這些氨基酸變化可以具有微小性質(zhì),即,不會(huì)顯著地影響蛋白的折疊和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地為1-30個(gè)氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸殘基;高達(dá)20-25個(gè)殘基的小連接肽;或通過(guò)改變凈電荷或另一功能有利于純化的小的延伸,例如聚組氨酸段、抗原表位或結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及在一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的變體。在一個(gè)實(shí)施例中,引入SEQ ID NO:3的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的數(shù)目多達(dá)10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。這些氨基酸變化可以具有微小 性質(zhì),即,不會(huì)顯著地影響蛋白的折疊和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地為1-30個(gè)氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸殘基;高達(dá)20-25個(gè)殘基的小連接肽;或通過(guò)改變凈電荷或另一功能有利于純化的小的延伸,例如聚組氨酸段、抗原表位或結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

具有DNA酶活性的多肽還可以獲得自木霉屬,例如獲得自哈茨木霉。在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及與SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,這些多肽具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,這些多肽與SEQ ID NO:5的成熟多肽具有多達(dá)10個(gè)(例如1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、或10個(gè))氨基酸的差異。

在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。本發(fā)明的多肽優(yōu)選地包括SEQ ID NO:5的氨基酸序列或其等位基因變體或由其組成;或?yàn)槠渚哂蠨NA酶活性的片段。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:5的成熟多肽或由其組成。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:5的氨基酸1至188或由其組成。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及一種具有DNA酶活性的分離的多肽,該分離的多肽是由在低嚴(yán)格條件下與(i)SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全長(zhǎng)補(bǔ)體雜交的一種多核苷酸所編碼(薩姆布魯克等,1989,分子克隆實(shí)驗(yàn)指南,第2版,紐約冷泉港)。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

可以使用SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4或其子序列,連同SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3的多肽或其片段來(lái)設(shè)計(jì)核酸探針以便根據(jù)本領(lǐng)域熟知的方法鑒定和克隆編碼來(lái)自不同屬或物種的菌株的具有DNA酶活性的多肽的DNA。

具體地,可以遵循標(biāo)準(zhǔn)DNA印跡程序,使用此類探針與感興趣的細(xì)胞的基因組DNA或cDNA雜交,以便鑒定和分離其中的對(duì)應(yīng)基因。此類探針可以明顯短于完整序列,但是長(zhǎng)度應(yīng)為至少15,例如至少25、至少35、或至少70個(gè)核苷酸。優(yōu)選地,核酸探針的長(zhǎng)度為至少100個(gè)核苷酸,例如長(zhǎng)度為至少200個(gè)核苷酸、至少300個(gè)核苷酸、至少400個(gè)核苷酸、至少500個(gè)核苷酸、至少600個(gè)核苷酸、至少700個(gè)核苷酸、至少800個(gè)核苷酸、或至少900個(gè)核苷酸。DNA和RNA探針兩者都可使用。典型地將探針進(jìn)行標(biāo)記(例如,用32P、3H、 35S、生物素、或抗生物素蛋白),以檢測(cè)相應(yīng)的基因。本發(fā)明涵蓋此類探針。

可以篩選從此類其他菌株制備的基因組DNA或cDNA文庫(kù)的與上述探針雜交并編碼具有DNA酶活性的多肽的DNA。來(lái)自此類其他菌株的基因組DNA或其他DNA可以通過(guò)瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳、或其他分離技術(shù)來(lái)分 離。來(lái)自文庫(kù)的DNA或分離的DNA可轉(zhuǎn)移到并固定在硝酸纖維素或其他適合的載體材料上。為了鑒定與SEQ ID NO:4或其子序列雜交的克隆或DNA,將載體材料用于DNA印跡中。

出于本發(fā)明的目的,雜交表示多核苷酸與對(duì)應(yīng)于以下項(xiàng)的標(biāo)記的核酸探針雜交:(i)SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4;(ii)SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列;(iii)其cDNA序列,(iv)其全長(zhǎng)互補(bǔ)體;或(v)其子序列;雜交是在非常低的至非常高的嚴(yán)格條件下進(jìn)行??梢允褂美鏧-射線膠片或本領(lǐng)域已知的任何其他檢測(cè)手段來(lái)檢測(cè)在這些條件下核酸探針雜交的分子。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及由以下多核苷酸編碼的具有DNA酶活性的多肽,該多核苷酸與SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在另外的實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5的成熟多肽的變體,這些變體在一個(gè)或多個(gè)(例如若干個(gè))位置包括取代、缺失和/或插入。在一個(gè)實(shí)施例中,引入SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的數(shù)目多達(dá)10個(gè),例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)。這些氨基酸變化可以具有微小性質(zhì),即,不會(huì)顯著地影響蛋白的折疊和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地為1-30個(gè)氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸殘基;高達(dá)20-25個(gè)殘基的小連接肽;或通過(guò)改變凈電荷或另一功能有利于純化的小的延伸,例如聚組氨酸段、抗原表位或結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

具有DNA酶活性的多肽還可以獲得自芽胞桿菌屬,例如獲得自枯草芽孢桿菌或地衣芽孢桿菌。

在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及與SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,這些多肽具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,這些多肽與SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽具有多達(dá)10個(gè)(例如1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、或10個(gè))氨基酸的差異。

在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。本發(fā)明的多肽優(yōu)選地包括SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其等位基因變體或由其組成;或?yàn)槠渚哂蠨NA酶活性的片段。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽或由其組成。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:6的氨基酸1至110或SEQ ID NO:7的氨基酸1至109或由它們組成。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及由以下多核苷酸編碼的具有DNA酶活性的多肽,該多核苷酸與SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在另外的實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽的變體,這些變體在一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))位置包含取代、缺失和/或插入。在一個(gè)實(shí)施例中,引入SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的數(shù)目多達(dá)10個(gè),例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)。這些氨基酸變化可以具有微小性質(zhì),即,不會(huì)顯著地影響蛋白的折疊和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地為1-30個(gè)氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸殘基;高達(dá)20-25個(gè)殘基的小連接肽;或通過(guò)改變凈電荷或另一功能有利于純化的小的延伸,例如聚組氨酸段、抗原表位或結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

保守取代的實(shí)例是在下組的范圍內(nèi):堿性氨基酸(精氨酸、賴氨酸及組氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、極性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、異亮氨酸及纈氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸)及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸及甲硫氨酸)。一般不會(huì)改變比活性的氨基酸取代是本領(lǐng)域已知的并且例如由H.諾伊拉特(Neurath)和R.L.希爾(Hill),1979,在蛋白質(zhì)(The Proteins),學(xué)術(shù)出版社(Academic Press),紐約中描述。常見的取代為Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、和Asp/Gly。

可替代地,氨基酸改變具有這樣一種性質(zhì):改變多肽的物理化學(xué)特性。例如,氨基酸改變可以提高多肽的熱穩(wěn)定性、改變底物特異性、改變最適pH,等等。

可以根據(jù)本領(lǐng)域中已知的程序,如定點(diǎn)誘變或丙氨酸掃描誘變(坎寧漢(Cunningham)和威爾斯(Wells),1989,科學(xué)(Science)244:1081-1085)來(lái)鑒定多肽中的必需氨基酸。在后一項(xiàng)技術(shù)中,在該分子中的每個(gè)殘基處引入單個(gè)丙氨酸突變,并且對(duì)所得突變體分子的DNA酶活性進(jìn)行測(cè)試以鑒定對(duì)于該分子的活性至關(guān)重要的氨基酸殘基。還參見希爾頓(Hilton)等人,1996,生物化學(xué)雜志(J.Biol.Chem.)271:4699-4708。酶活性位點(diǎn)或其 他生物學(xué)相互作用也可以通過(guò)對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行物理學(xué)分析來(lái)進(jìn)行確定,如通過(guò)以下技術(shù)例如核磁共振、結(jié)晶學(xué)、電子衍射、或光親和標(biāo)記,與假定接觸位點(diǎn)氨基酸的突變相結(jié)合來(lái)進(jìn)行確定。參見,例如,德沃斯(de Vos)等人,1992,科學(xué)(Science)255:306-312;史密斯(Smith)等人,1992,分子生物學(xué)雜志(J.Mol.Biol.)224:899-904;Wlodaver等人,1992,歐洲生化學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)快報(bào)(FEBS Lett.)309:59-64。還可以從與相關(guān)多肽的比對(duì)推斷鑒別必需氨基酸。

可以做出單個(gè)或多個(gè)氨基酸取代、缺失和/或插入并且使用誘變、重組和/或改組的已知方法進(jìn)行測(cè)試,隨后進(jìn)行相關(guān)篩選程序,如由里德哈爾-奧爾森(Reidhaar-Olson)和薩奧爾(Sauer),1988,科學(xué)(Science)241:53-57;博維(Bowie)和薩奧爾,1989,美國(guó)科學(xué)院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)86:2152-2156;WO 95/17413;或WO 95/22625所披露的那些??梢允褂玫钠渌椒òㄒ族e(cuò)PCR、噬菌體展示(例如,羅曼(Lowman)等人,1991,生物化學(xué)(Biochemistry)30:10832-10837;美國(guó)專利號(hào)5,223,409;WO 92/06204)和區(qū)域定向誘變(德比舍爾(Derbyshire)等人,1986,基因(Gene)46:145;內(nèi)爾(Ner)等人,1988,DNA 7:127)。

可以結(jié)合誘變/改組方法與高通量自動(dòng)化篩選方法來(lái)檢測(cè)由宿主細(xì)胞表達(dá)的克隆的、誘變的多肽的活性(內(nèi)斯(Ness)等人,1999,自然生物技術(shù)(Nature Biotechnology)17:893-896)。編碼活性多肽的誘變的DNA分子可以回收自宿主細(xì)胞,并且使用本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)其進(jìn)行迅速測(cè)序。這些方法允許迅速確定多肽中單個(gè)氨基酸殘基的重要性。

該多肽可以是雜合多肽,其中一種多肽的區(qū)域在另一種多肽的區(qū)域的N-末端或C-末端處融合。

該多肽可以是融合多肽或可裂解的融合多肽,其中另一種多肽在本發(fā)明多肽的N-末端或C-末端處融合。通過(guò)將編碼另一多肽的多核苷酸融合到本發(fā)明的多核苷酸而產(chǎn)生融合多肽。用于產(chǎn)生融合多肽的技術(shù)在本領(lǐng)域是已知的,并且包括連接編碼多肽的編碼序列,這樣使得它們?cè)诳騼?nèi)并且使得融合多肽的表達(dá)處于相同的一個(gè)或多個(gè)啟動(dòng)子和終止子的控制下。還可以使用內(nèi)含肽技術(shù)構(gòu)建融合多肽,其中在翻譯后產(chǎn)生融合多肽(庫(kù)珀(Cooper)等人,1993,歐洲分子生物學(xué)學(xué)會(huì)雜志12:2575-2583;道森(Dawson),1994,科學(xué)(Science)266:776-779)。

融合多肽可以在兩種多肽之間進(jìn)一步包括切割位點(diǎn)。在融合蛋白分泌之時(shí),該位點(diǎn)被切割,從而釋放出這兩種多肽。切割位點(diǎn)的實(shí)例包括但不限于以下各項(xiàng)中披露的位點(diǎn):馬丁(Martin)等人,2003,工業(yè)微生物學(xué)與生物技術(shù)雜志(J.Ind.Microbiol.Biotechnol.)3:568-576;斯韋蒂納(Svetina)等人,2000,生物技術(shù)雜志(J.Biotechnol.)76:245-251;拉斯馬森(Rasmussen)-威 爾遜(Wilson)等人,1997,應(yīng)用環(huán)境微生物學(xué)(Appl.Environ.Microbiol.)63:3488-3493;華德(Ward)等人,1995,生物技術(shù)(Biotechnology)13:498-503;以及孔特拉斯(Contreras)等人,1991,生物技術(shù)9:378-381;伊頓(Eaton)等人,1986,生物化學(xué)(Biochemistry)25:505-512;柯林斯(Collins)-萊斯(Racie)等人,1995,生物技術(shù)13:982-987;卡特(Carter)等人,1989,蛋白:結(jié)構(gòu)、功能和遺傳學(xué)(Proteins:Structure,F(xiàn)unction,and Genetics)6:240-248;以及史蒂文斯(Stevens),2003,世界藥物發(fā)現(xiàn)(Drug Discovery World)4:35-48。

脫氧核糖核酸酶(DNA酶)

具有DNA酶活性的多肽或脫氧核糖核酸酶(DNA酶)是催化DNA骨架中的磷酸二酯鍵的水解切割從而降解DNA的任何酶??苫Q地使用兩個(gè)術(shù)語(yǔ),具有DNA酶活性的多肽和DNA酶。

根據(jù)本發(fā)明,可獲得自真菌的DNA酶是優(yōu)選的;具體地,可獲得自曲霉屬的DNA酶是優(yōu)選的;具體地,可獲得自米曲霉的DNA酶是優(yōu)選的。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中,具有脫氧核糖核酸酶活性的多肽不是來(lái)自米曲霉的S1核酸酶。

本發(fā)明中使用的DNA酶包括示為SEQ ID NO:2的氨基酸1至206的SEQ ID NO:2的成熟多肽,其獲得自米曲霉。具有DNA酶活性的多肽可以獲得自曲霉屬,例如獲得自米曲霉。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中,具有DNA酶活性的多肽是要求保護(hù)的多肽。

本發(fā)明的一個(gè)方面涉及與SEQ ID NO:2成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的分離的多肽,這些分離的多肽具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,這些多肽與SEQ ID NO:2的成熟多肽具有多達(dá)10個(gè)(例如1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、或10個(gè))氨基酸的差異。

在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及與SEQ ID NO:3成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的分離的多肽,這些分離的多肽具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,這些多肽與SEQ ID NO:3的成熟多肽具有多達(dá)10個(gè)(例如1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、或10個(gè))氨基酸的差異。

在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及與SEQ ID NO:8具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至 少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的分離的多肽,這些分離的多肽具有DNA酶活性。在一個(gè)方面中,這些多肽與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有多達(dá)10個(gè)(例如1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、或10個(gè))氨基酸的差異。

本發(fā)明的多肽優(yōu)選地包括SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其等位基因變體或由其組成;或?yàn)槠渚哂蠨NA酶活性的片段。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:2的成熟多肽或由其組成。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:2的氨基酸1至206或由其組成。

在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。本發(fā)明的多肽優(yōu)選地包括SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其等位基因變體或由其組成;或?yàn)槠渚哂蠨NA酶活性的片段。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:3的成熟多肽或由其組成。在另一方面中,該多肽包括SEQ ID NO:3的氨基酸1至204或由其組成。本發(fā)明的一個(gè)方面涉及組合物,該組合物包括由SEQ ID NO:8的氨基酸序列組成的多肽和由SEQ ID NO:3的氨基酸序列組成的本發(fā)明的多肽,或由其組成。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及一種具有DNA酶活性的分離的多肽,該分離的多肽是由在低嚴(yán)格條件下與(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全長(zhǎng)補(bǔ)體雜交的一種多核苷酸所編碼(薩姆布魯克等,1989,分子克隆實(shí)驗(yàn)指南,第2版,紐約冷泉港)。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及一種具有DNA酶活性的分離的多肽,該分離的多肽是由在低-中嚴(yán)格條件下與(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全長(zhǎng)補(bǔ)體雜交的一種多核苷酸所編碼。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及一種具有DNA酶活性的分離的多肽,該分離的多肽是由在中嚴(yán)格條件下與(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全長(zhǎng)補(bǔ)體雜交的一種多核苷酸所編碼。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及一種具有DNA酶活性的分離的多肽,該分離的多肽是由在中-高嚴(yán)格條件下與(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全長(zhǎng)補(bǔ)體雜交的一種多核苷酸所編碼。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及一種具有DNA酶活性的分離的多肽,該分離的多肽是由在高嚴(yán)格條件下與(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全長(zhǎng)補(bǔ)體雜交的一種多核苷酸所編碼。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及一種具有DNA酶活性的分離的多肽,該分離的多肽是由在非常高嚴(yán)格條件下與(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全長(zhǎng)補(bǔ)體雜交的一種多核苷酸所編碼。在一個(gè)實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及由以下多核苷酸編碼的具有DNA酶活性的多肽,該多核苷酸與SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在另外的實(shí)施例中,該多肽已經(jīng)被分離。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及在一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的變體。在一個(gè)實(shí)施例中,引入SEQ ID NO:2的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的數(shù)目多達(dá)10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。這些氨基酸變化可以具有微小性質(zhì),即,不會(huì)顯著地影響蛋白的折疊和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地為1-30個(gè)氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸殘基;高達(dá)20-25個(gè)殘基的小連接肽;或通過(guò)改變凈電荷或另一功能有利于純化的小的延伸,例如聚組氨酸段、抗原表位或結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

在另一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明涉及在一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的變體。在一個(gè)實(shí)施例中,引入SEQ ID NO:3的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的數(shù)目多達(dá)10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。這些氨基酸變化可以具有微小性質(zhì),即,不會(huì)顯著地影響蛋白的折疊和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地為1-30個(gè)氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸殘基;高達(dá)20-25個(gè)殘基的小連接肽;或通過(guò)改變凈電荷或另一功能有利于純化的小的延伸,例如聚組氨酸段、抗原表位或結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

該DNA酶可以包括SEQ ID NO:2的氨基酸-37至206所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段,如成熟多肽,或由其組成?;蛘咴揇NA酶可以包括SEQ ID NO:2的氨基酸-37至206的片段或SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,或由其組成,針對(duì)該片段從SEQ ID NO:2的氨基和/或羧基末端刪除一個(gè)或多個(gè)氨基酸。

該DNA酶可以包括SEQ ID NO:3的氨基酸1至206所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段,如成熟多肽,或由其組成?;蛘咴揇NA酶可以包括SEQ ID NO:3的氨基酸1至206的片段或SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,或由其組成,針對(duì)該片段從SEQ ID NO:3的氨基和/或羧基末端刪除一個(gè)或多個(gè)氨基酸。

該DNA酶可以包括SEQ ID NO:8的氨基酸1至206所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段,如成熟多肽,或由其組成?;蛘咴揇NA酶可以包括SEQ ID NO:8的氨基酸1至206的片段或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206,或由其組成,針對(duì)該片段從SEQ ID NO:8的氨基和/或羧基末端刪除一個(gè)或多個(gè)氨基酸。

本發(fā)明還提供了基本上與以上多肽同源的DNA酶多肽及其種類同系物(旁系同源物或直系同源物)。在此使用術(shù)語(yǔ)“基本上同源”表示與SEQ ID NO:2的氨基酸序列或SEQ ID NO:3的氨基酸序列至少80%、優(yōu)選至少85%、更優(yōu)選至少90%、更優(yōu)選至少95%、甚至更優(yōu)選至少97%相同,并且最優(yōu)選至少99%或更多相同的多肽、或其具有DNA酶活性的片段、或其直系同源物或旁系同源物。

在另一個(gè)實(shí)施例中,SEQ ID NO:2的DNA酶在一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))位置包括取代、缺失和/或插入。在另一個(gè)實(shí)施例中,SEQ ID NO:3的DNA酶在一個(gè)或多個(gè)(例如,若干個(gè))位置包括取代、缺失和/或插入。在一個(gè)實(shí)施例中,引入SEQ ID NO:2的成熟多肽中或SEQ ID NO:3的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的數(shù)目不超過(guò)10個(gè),例如1、2、3、4、5、6、7、8或9個(gè)。這些氨基酸變化可以具有微小性質(zhì),即,不會(huì)顯著地影響蛋白的折疊和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地為1-30個(gè)氨基酸;小氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端甲硫氨酸殘基;高達(dá)20-25個(gè)殘基的小連接肽;或通過(guò)改變凈電荷或另一功能有利于純化的小的延伸,例如聚組氨酸段、抗原表位或結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

根據(jù)本發(fā)明,可獲得自真菌的DNA酶是優(yōu)選的;具體地,可獲得自木霉屬的DNA酶是優(yōu)選的;具體地,可獲得自哈茨木霉的DNA酶是優(yōu)選的。

本發(fā)明中使用的DNA酶包括示為SEQ ID NO:5的氨基酸1至188的SEQ ID NO:5的成熟多肽,其獲得自哈茨木霉。

該DNA酶可以包括SEQ ID NO:5的氨基酸-17至188所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段,如成熟多肽,或由其組成?;蛘咴揇NA酶可以包括SEQ ID NO:5的氨基酸-17至188的片段或SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,或由其組成,針對(duì)該片段從SEQ ID NO:5的氨基和/或羧基末端刪除一個(gè)或多個(gè)氨基酸。

本發(fā)明還提供了基本上與以上多肽同源的DNA酶多肽及其種類同系物(旁系同源物或直系同源物)。在此使用術(shù)語(yǔ)“基本上同源”表示與SEQ ID NO:5的氨基酸序列至少80%、優(yōu)選至少85%、更優(yōu)選至少90%、更優(yōu)選至少95%、甚至更優(yōu)選至少97%相同,并且最優(yōu)選至少99%或更多相同的多肽、或其具有DNA酶活性的片段、或其直系同源物或旁系同源物。

根據(jù)本發(fā)明,可獲得自細(xì)菌的DNA酶是優(yōu)選的;具體地,可獲得自芽孢 桿菌屬的DNA酶是優(yōu)選的;具體地,可獲得自枯草芽孢桿菌或地衣芽孢桿菌的DNA酶是優(yōu)選的。

在本發(fā)明中使用的DNA酶包括SEQ ID NO:6的成熟多肽,該成熟多肽如SEQ ID NO:6的氨基酸1至110所示,其來(lái)源于枯草芽孢桿菌;或SEQ ID NO:7的成熟多肽,該成熟多肽如SEQ ID NO:7的氨基酸1至109所示,其來(lái)源于地衣芽孢桿菌。

該DNA酶可以包括SEQ ID NO:6的氨基酸-26至110或SEQ ID NO:7的氨基酸-33至109所示的氨基酸序列或其具有DNA酶的片段(如成熟多肽),或由其組成。SEQ ID NO:6的氨基酸-26至110或SEQ ID NO:6的氨基酸1至110的片段是多肽,該多肽具有一個(gè)或多個(gè)從SEQ ID NO:6的氨基和/或羧基末端缺失的氨基酸。SEQ ID NO:7的氨基酸-33至109或SEQ ID NO:7的氨基酸1至109的片段是一種多肽,該多肽具有一個(gè)或多個(gè)從SEQ ID NO:7的氨基和/或羧基末端缺失的氨基酸。

本發(fā)明還提供了基本上與以上多肽同源的DNA酶多肽及其種類同系物(旁系同源物或直系同源物)。在此使用術(shù)語(yǔ)“基本上同源”表示與SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的氨基酸序列至少80%、優(yōu)選至少85%、更優(yōu)選至少90%、更優(yōu)選至少95%、甚至更優(yōu)選至少97%相同,并且最優(yōu)選至少99%或更多相同的多肽、或其具有DNA酶活性的片段、或其直系同源物或旁系同源物。

保守取代的實(shí)例是在下組的范圍內(nèi):堿性氨基酸(精氨酸、賴氨酸及組氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、極性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、異亮氨酸及纈氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸)及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸及甲硫氨酸)。一般不會(huì)改變比活性的氨基酸取代是本領(lǐng)域已知的并且例如由H.諾伊拉特(Neurath)和R.L.希爾(Hill),1979,在蛋白質(zhì)(The Proteins),學(xué)術(shù)出版社(Academic Press),紐約中描述。常見的取代為Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、和Asp/Gly。

可替代地,氨基酸改變具有這樣一種性質(zhì):改變多肽的物理化學(xué)特性。例如,氨基酸改變可以提高多肽的熱穩(wěn)定性、改變底物特異性、改變最適pH,等等。

可以根據(jù)本領(lǐng)域中已知的程序,如定點(diǎn)誘變或丙氨酸掃描誘變(坎寧漢(Cunningham)和威爾斯(Wells),1989,科學(xué)(Science)244:1081-1085)來(lái)鑒定多肽中的必需氨基酸。在后一項(xiàng)技術(shù)中,在該分子中的每個(gè)殘基處引入單個(gè)丙氨酸突變,并且對(duì)所得突變體分子的DNA酶活性進(jìn)行測(cè)試以 鑒定對(duì)于該分子的活性至關(guān)重要的氨基酸殘基。還參見希爾頓(Hilton)等人,1996,生物化學(xué)雜志(J.Biol.Chem.)271:4699-4708。酶活性位點(diǎn)或其他生物學(xué)相互作用也可以通過(guò)對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行物理學(xué)分析來(lái)進(jìn)行確定,如通過(guò)以下技術(shù)例如核磁共振、結(jié)晶學(xué)、電子衍射、或光親和標(biāo)記,與假定接觸位點(diǎn)氨基酸的突變相結(jié)合來(lái)進(jìn)行確定。參見,例如,德沃斯(de Vos)等人,1992,科學(xué)(Science)255:306-312;史密斯(Smith)等人,1992,分子生物學(xué)雜志(J.Mol.Biol.)224:899-904;Wlodaver等人,1992,歐洲生化學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)快報(bào)(FEBS Lett.)309:59-64。還可以從與相關(guān)多肽的比對(duì)推斷鑒別必需氨基酸。

可以做出單個(gè)或多個(gè)氨基酸取代、缺失和/或插入并且使用誘變、重組和/或改組的已知方法進(jìn)行測(cè)試,隨后進(jìn)行相關(guān)篩選程序,如由里德哈爾-奧爾森(Reidhaar-Olson)和薩奧爾(Sauer),1988,科學(xué)(Science)241:53-57;博維(Bowie)和薩奧爾,1989,美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)86:2152-2156;WO 95/17413;或WO 95/22625披露的那些??梢允褂玫钠渌椒òㄒ族e(cuò)PCR、噬菌體展示(例如,洛曼(Lowman)等人,1991,生物化學(xué)(Biochemistry)30:10832-10837;美國(guó)專利號(hào)5,223,409;WO 92/06204)以及區(qū)域定向誘變(德比什爾(Derbyshire)等人,1986,基因(Gene)46:145;內(nèi)爾(Ner)等人,1988,DNA 7:127)。

可以結(jié)合誘變/改組方法與高通量自動(dòng)化篩選方法來(lái)檢測(cè)由宿主細(xì)胞表達(dá)的克隆的、誘變的多肽的活性(內(nèi)斯(Ness)等人,1999,自然生物技術(shù)(Nature Biotechnology)17:893-896)。編碼活性多肽的誘變的DNA分子可以回收自宿主細(xì)胞,并且使用本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)其進(jìn)行迅速測(cè)序。這些方法允許迅速確定多肽中單個(gè)氨基酸殘基的重要性。

該多肽可以是一種雜交多肽,其中一個(gè)多肽的一個(gè)區(qū)域融合在另一個(gè)多肽的一個(gè)區(qū)域的N-末端或C-末端。

該多肽可以是一種融合多肽或可裂解的融合多肽,其中另一個(gè)多肽是在本發(fā)明多肽的N末端或C末端處融合。通過(guò)將編碼另一多肽的多核苷酸融合到本發(fā)明的多核苷酸而產(chǎn)生融合多肽。用于產(chǎn)生融合多肽的技術(shù)在本領(lǐng)域是已知的,并且包括連接編碼多肽的編碼序列,這樣使得它們?cè)诳騼?nèi)并且使得融合多肽的表達(dá)處于相同的一個(gè)或多個(gè)啟動(dòng)子和終止子的控制下。還可以使用內(nèi)含肽技術(shù)構(gòu)建融合多肽,其中在翻譯后產(chǎn)生融合多肽(庫(kù)珀(Cooper)等人,1993,歐洲分子生物學(xué)學(xué)會(huì)雜志12:2575-2583;道森(Dawson),1994,科學(xué)(Science)266:776-779)。

融合多肽可以在兩種多肽之間進(jìn)一步包括切割位點(diǎn)。在融合蛋白分泌之時(shí),該位點(diǎn)被切割,從而釋放出這兩種多肽。切割位點(diǎn)的實(shí)例包括但不限于以下各項(xiàng)中披露的位點(diǎn):馬丁(Martin)等人,2003,工業(yè)微生物學(xué)與生物技 術(shù)雜志(J.Ind.Microbiol.Biotechnol.)3:568-576;斯韋蒂納(Svetina)等人,2000,生物技術(shù)雜志(J.Biotechnol.)76:245-251;拉斯馬森(Rasmussen)-威爾遜(Wilson)等人,1997,應(yīng)用環(huán)境微生物學(xué)(Appl.Environ.Microbiol.)63:3488-3493;華德(Ward)等人,1995,生物技術(shù)(Biotechnology)13:498-503;以及孔特拉斯(Contreras)等人,1991,生物技術(shù)9:378-381;伊頓(Eaton)等人,1986,生物化學(xué)(Biochemistry)25:505-512;柯林斯(Collins)-萊斯(Racie)等人,1995,生物技術(shù)13:982-987;卡特(Carter)等人,1989,蛋白:結(jié)構(gòu)、功能和遺傳學(xué)(Proteins:Structure,F(xiàn)unction,and Genetics)6:240-248;以及史蒂文斯(Stevens),2003,世界藥物發(fā)現(xiàn)(Drug Discovery World)4:35-48。

洗滌液中DNA酶的濃度典型地在以下范圍內(nèi):0.00004-100ppm酶蛋白,如在0.00008-100范圍內(nèi)、在0.0001-100范圍內(nèi)、在0.0002-100范圍內(nèi)、在0.0004-100范圍內(nèi)、在0.0008-100范圍內(nèi)、在0.001-100ppm酶蛋白的范圍內(nèi)、0.01-100ppm酶蛋白,優(yōu)選地0.05-50ppm酶蛋白,更優(yōu)選地0.1-50ppm酶蛋白,更優(yōu)選地0.1-30ppm酶蛋白,更優(yōu)選地0.5-20ppm酶蛋白,并且最優(yōu)選地0.5-10ppm酶蛋白。

可以將本發(fā)明的DNA酶以一定量添加到洗滌劑組合物中,該量對(duì)應(yīng)于至少0.002mg的DNA酶蛋白,如至少0.004mg的DNA酶蛋白、至少0.006mg的DNA酶蛋白、至少0.008mg的DNA酶蛋白、至少0.01mg的DNA酶蛋白、至少0.1mg的蛋白,優(yōu)選地1mg的蛋白,更優(yōu)選地至少10mg的蛋白,甚至更優(yōu)選地至少15mg的蛋白,最優(yōu)選地至少20mg的蛋白,并且甚至最優(yōu)選地至少25mg的蛋白。因此,該洗滌劑組合物可以包括至少0.00008%DNA酶蛋白,優(yōu)選地至少0.002%、0.003%、0.004%、0.005%、0.006%、0.008%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%或1.0%的DNA酶蛋白。

可以使用常規(guī)穩(wěn)定劑穩(wěn)定本發(fā)明的清潔劑組合物的DNA酶,這些常規(guī)穩(wěn)定劑例如是多元醇,例如丙二醇或甘油、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物,例如芳香族硼酸酯,或苯基硼酸衍生物,例如4-甲酰苯基硼酸,并且可以如在例如WO 92/19709和WO 92/19708中所述配置該組合物。

本發(fā)明的多肽還可以結(jié)合到WO 97/07202中所披露的洗滌劑配制品中,通過(guò)引用將其結(jié)合在此。

洗滌劑組合物

在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明針對(duì)洗滌劑組合物,該洗滌劑組合物包含結(jié)合一種或多種額外的清潔組合物組分的本發(fā)明的酶。另外的組分的選擇在普通技術(shù)人員技術(shù)內(nèi)并且包括常規(guī)成分,包括以下列出的示例性、非限制性組分。

表面活性劑

洗滌劑組合物可以包括一種或多種表面活性劑,它們可以是陰離子的和/或陽(yáng)離子的和/或非離子的和/或半極性的和/或兼性離子的或其混合物。在一個(gè)具體實(shí)施例中,洗滌劑組合物包括一種或多種非離子型表面活性劑和一種或多種陰離子表面活性劑的混合物。這種或這些表面活性劑典型地以按重量計(jì)從約0.1%至60%的水平存在,例如約1%至約40%、或約3%至約20%、或約3%至約10%。基于所希望的清潔應(yīng)用來(lái)選擇這種或這些表面活性劑,并且這種或這些表面活性劑包括本領(lǐng)域中已知的任何一種或多種常規(guī)表面活性劑。

當(dāng)包含在其中時(shí),該洗滌劑通常將會(huì)包含按重量計(jì)約1%至約40%的陰離子表面活性劑,如約5%至約30%,包括從約5%至約15%,或從約15%至約20%,或從約20%至約25%的陰離子型表面活性劑。陰離子表面活性劑的非限制性實(shí)例包括硫酸鹽和磺酸鹽,具體地說(shuō)是直鏈烷基苯磺酸鹽(LAS)、LAS的異構(gòu)體、支鏈烷基苯磺酸鹽(BABS)、苯基鏈烷磺酸鹽、α-烯烴磺酸鹽(AOS)、烯烴磺酸鹽、鏈烯烴磺酸鹽、鏈烷-2,3-二基雙(硫酸鹽)、羥基鏈烷磺酸鹽以及二磺酸鹽、烷基硫酸鹽(AS)(如十二烷基硫酸鈉(SDS))、脂肪醇硫酸鹽(FAS)、伯醇硫酸鹽(PAS)、醇醚硫酸鹽(AES或AEOS或FES,也被稱為醇乙氧基硫酸鹽或脂肪醇醚硫酸鹽)、仲鏈烷磺酸鹽(SAS)、石蠟烴磺酸鹽(PS)、酯磺酸鹽、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸鹽(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或脂肪酸鹽(皂)的二酯和單酯及其組合。

當(dāng)被包括在其中時(shí),該洗滌劑將通常包含按重量計(jì)從約1%至約40%的陽(yáng)離子表面活性劑,例如從約0.5%至約30%,特別是從約1%至約20%、從約3%至約10%,如從約3%至約5%、從約8%至約12%或從約10%至約12%。陽(yáng)離子表面活性劑的非限制性實(shí)例包括烷基二甲基乙醇季胺(ADMEAQ)、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)、二甲基二硬脂酰氯化銨(DSDMAC)、以及烷基芐基二甲基銨、烷基季銨化合物、烷氧基化季銨(AQA)化合物、酯季銨及其組合。

當(dāng)被包括在其中時(shí),該洗滌劑將通常包含按重量計(jì)從約0.2%至約40%的非離子表面活性劑,例如從約0.5%至約30%,特別是從約1%至約20%、從約3%至約10%,如從約3%至約5%、從約8%至約12%或從約10%至約12%。非離子型表面活性劑的非限制性實(shí)例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA),烷氧基化的脂肪酸烷基酯(例如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯),烷基酚乙氧基化物(APE),壬基酚乙氧基化物(NPE),烷基多糖苷(APG),烷氧基化胺,脂肪酸單乙醇酰胺(FAM),脂肪酸二乙醇酰胺(FADA),乙氧基化的脂肪酸單乙醇酰胺(EFAM),丙氧基化的脂肪酸單乙醇酰胺(PFAM),多羥基烷基脂肪酸酰 胺,或葡萄糖胺的N-?;鵑-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA),或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA)),連同在SPAN和TWEEN商品名下可獲得的產(chǎn)品,及其組合。

當(dāng)被包括在其中時(shí),洗滌劑將通常包含按重量計(jì)從約0%至約40%的半極性表面活性劑。半極化表面活性劑的非限制性實(shí)例包括氧化胺(AO),如烷基二甲胺氧化物、N-(椰油基烷基)-N,N-二甲胺氧化物和N-(牛油-烷基)-N,N-雙(2-羥乙基)胺氧化物,及其組合。

當(dāng)被包括在其中時(shí),洗滌劑將通常包含按重量計(jì)從約0%至約40%的兼性離子表面活性劑。兼性離子表面活性劑的非限制性實(shí)例包括甜菜堿,如烷基二甲基甜菜堿、磺基甜菜堿及其組合。

助水溶劑

助水溶劑是如下化合物,該化合物在水性溶液中溶解疏水化合物(或相反地,在非極性環(huán)境中的極性物質(zhì))。一般地,助水溶物具有親水和疏水兩種特征(所謂的兩親性質(zhì),如由表面活性劑已知的);然而,助水溶劑的分子結(jié)構(gòu)一般不利于自發(fā)性自聚集,參見例如通過(guò)霍奇登(Hodgdon)和卡勒(Kaler)(2007),膠體&界面科學(xué)新見(Current Opinion in Colloid&Interface Science)12:121-128的綜述。助水溶劑并不顯示臨界濃度,高于該濃度就會(huì)發(fā)生如對(duì)表面活性劑而言所發(fā)現(xiàn)的自聚集以及脂質(zhì)形成膠束、薄層或其他很好地定義的中間相。相反,許多助水溶物顯示連續(xù)類型的聚集過(guò)程,其中聚集物的大小隨著濃度增加而增長(zhǎng)。然而,很多助水溶劑改變了包括極性和非極性特征的物質(zhì)的系統(tǒng)(包括水、油、表面活性劑、和聚合物的混合物)的相行為、穩(wěn)定性、和膠體特性。經(jīng)典地從制藥、個(gè)人護(hù)理、食品跨行業(yè)至技術(shù)應(yīng)用使用助水溶劑。助水溶劑在洗滌劑組合物中的使用允許例如更濃的表面活性劑配制品(如在通過(guò)除去水而壓縮液體洗滌劑的過(guò)程中)而不引起不希望的現(xiàn)象,例如相分離或高粘度。

洗滌劑可以包含按重量計(jì)0-10%,例如按重量計(jì)0-5%,例如約0.5%至約5%、或約3%至約5%的助水溶劑??梢岳帽绢I(lǐng)域中已知的用于在洗滌劑中使用的任何助水溶劑。助水溶劑的非限制性實(shí)例包括苯磺酸鈉、對(duì)甲苯磺酸鈉(STS)、二甲苯磺酸鈉(SXS)、枯烯磺酸鈉(SCS)、傘花烴磺酸鈉、氧化胺、醇和聚乙二醇醚、羥基萘甲酸鈉、羥基萘磺酸鈉、乙基己基磺酸鈉、及其組合。

助洗劑和共助洗劑

洗滌劑組合物可以包含按重量計(jì)約0-65%,例如約5%至約50%的洗滌劑助洗劑或共助洗劑或其混合物。助洗劑和/或共助洗劑可以具體是形成具有Ca和Mg的水溶性復(fù)合物的螫合劑??梢允褂帽绢I(lǐng)域中已知用于在洗滌劑中使用的任何助洗劑和/或共助洗劑。助洗劑的非限制性實(shí)例包括沸石、二磷酸鹽(焦磷酸鹽)、三磷酸鹽例如三磷酸鈉(STP或STPP)、碳酸鹽例如碳酸鈉、可溶 性硅酸鹽例如硅酸鈉、層狀硅酸鹽(例如來(lái)自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺例如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA,也稱為2,2’-亞氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA,也稱為2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)、以及羧甲基菊粉(CMI)、及其組合。

該洗滌劑組合物還可以包含按重量計(jì)0-50%,例如約5%至約30%的洗滌劑共助洗劑。洗滌劑組合物可以單獨(dú)地包括一種共助洗劑,或與一種助洗劑,例如沸石助洗劑組合。共助洗劑的非限制性實(shí)例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物,例如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/馬來(lái)酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性實(shí)例包括檸檬酸鹽,螯合劑,例如氨基羧酸鹽、氨基多羧酸鹽和膦酸鹽,以及烷基-或烯基琥珀酸。另外的具體實(shí)例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、亞氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羥基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亞甲基膦酸)(EDTMPA)、二亞乙基三胺五(亞甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羥乙基)亞氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-單乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-單丙酸(ASMP)、亞氨基二丁二酸(iminodisuccinic acid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亞氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、絲氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、異絲氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、鄰氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、?;撬?N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羥乙基)-亞乙基二胺-N,N’,N”-三乙酸鹽(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亞乙基三胺五(亞甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亞甲基膦酸)(ATMP)及其組合和鹽。其他示例性助洗劑和/或共助洗劑描述于例如WO 09/102854、US 5977053中

漂白系統(tǒng)

洗滌劑可以包含按重量計(jì)0-30%,如大約1%至大約20%的漂白系統(tǒng)??梢允褂帽绢I(lǐng)域中已知用于洗滌劑中的任何漂白系統(tǒng)。適合的漂白系統(tǒng)組分包括漂白催化劑、光漂白劑、漂白活化劑、過(guò)氧化氫源如過(guò)碳酸鈉、過(guò)硼酸鈉和過(guò)氧化氫―尿素(1:1)、預(yù)成型過(guò)酸及其混合物。適合的預(yù)成型過(guò)酸包括但不限于過(guò)氧羧酸及鹽、二過(guò)氧二羧酸、過(guò)亞氨酸(perimidic acid)及鹽、過(guò)氧單硫酸及鹽(例如過(guò)硫酸氫鉀(Oxone(R))及其混合物。漂白系統(tǒng)的非限制性實(shí)例包括基于過(guò)氧化物的漂白系統(tǒng),這些系統(tǒng)可以包括例如與過(guò)酸形成漂白活化劑組合的無(wú)機(jī)鹽,包括堿金屬鹽,如過(guò)硼酸鹽(通常是單水合物或四水合 物)、過(guò)碳酸鹽、過(guò)硫酸鹽、過(guò)磷酸鹽、過(guò)硅酸鹽的鈉鹽。術(shù)語(yǔ)漂白活化劑在此意指與過(guò)氧化氫反應(yīng)以經(jīng)由過(guò)水解反應(yīng)形成過(guò)酸的化合物。以此方式形成的過(guò)酸構(gòu)成活化的漂白劑。有待在此使用的適合漂白活化劑包括屬于酯、酰胺、酰亞胺或酸酐類別的那些。適合的實(shí)例是四乙?;叶?TAED)、4-[(3,5,5-三甲基己?;?氧基]苯-1-磺酸鈉(ISONOBS)、4-(十二?;趸?苯-1-磺酸鹽(LOBS)、4-(癸?;趸?苯-1-磺酸鹽、4-(癸?;趸?苯甲酸鹽(DOBS或DOBA)、4-(壬?;趸?苯-1-磺酸鹽(NOBS)和/或披露于WO 98/17767中的那些。感興趣的漂白活化劑的具體家族披露于EP 624154中并且在那個(gè)家族中特別優(yōu)選的是乙酰檸檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短鏈甘油三酸酯(像三醋汀)具有以下優(yōu)點(diǎn),它是環(huán)境友好的。此外,乙酰檸檬酸三乙酯和三醋汀在存儲(chǔ)時(shí)在產(chǎn)品中具有良好的水解穩(wěn)定性,并且是有效的漂白活化劑。最后,ATC是多功能的,因?yàn)樵谶^(guò)水解反應(yīng)中釋放的檸檬酸鹽可以作為助洗劑起作用??商娲兀紫到y(tǒng)可以包括例如酰胺、酰亞胺、或砜型的過(guò)氧酸。漂白系統(tǒng)還可以包括過(guò)酸,例如6-(苯二甲酰亞氨基)過(guò)己酸(PAP)。漂白系統(tǒng)還可以包括漂白催化劑。在一些實(shí)施例中,漂白組分可以是選自下組的有機(jī)催化劑,該組由以下各項(xiàng)組成:具有下式的有機(jī)催化劑:

(iii)及其混合物;

其中每個(gè)R1獨(dú)立地是包含從9到24個(gè)碳的支鏈烷基或包含從11到24個(gè)碳的直鏈烷基,優(yōu)選地每個(gè)R1獨(dú)立地是包含從9到18個(gè)碳的支鏈烷基或包含從11到18個(gè)碳的直鏈烷基,更優(yōu)選地每個(gè)R1獨(dú)立地選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:2-丙基庚基、2-丁基辛基、2-戊基壬基、2-己基癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、異壬基、異癸基、異十三烷基以及異十五烷基。其他示例性漂白系統(tǒng)描述于例如WO 2007/087258、WO 2007/087244、WO 2007/087259、EP 1867708(維生素K)以及WO 2007/087242中。適合的光漂白劑可以例如是磺化的酞菁鋅或酞菁鋁。

優(yōu)選地,除了漂白催化劑、特別是有機(jī)漂白催化劑以外,漂白組分還包括過(guò)酸源。過(guò)酸源可以選自(a)預(yù)形成的過(guò)酸;(b)過(guò)碳酸鹽、過(guò)硼酸鹽或過(guò)硫酸鹽(過(guò)氧化氫源),優(yōu)選與一種漂白活化劑組合;和(c)過(guò)水解酶以及酯,用于在紡織品處理步驟中在水的存在下原位形成過(guò)酸。

聚合物

該洗滌劑可以包含按重量計(jì)0-10%,例如0.5%-5%、2%-5%、0.5%-2%或0.2%-1%的聚合物??梢岳帽绢I(lǐng)域中已知的用于在洗滌劑中使用的任何聚合 物。聚合物可以作為如以上提到的共助洗劑起作用,或可以提供抗再沉積、纖維保護(hù)、污垢釋放、染料轉(zhuǎn)移抑制、油污清潔和/或防沫特性。一些聚合物可以具有多于一種的以上提到的特性和/或多于一種的以下提到的基序(motif)。示例性聚合物包括(羧甲基)纖維素(CMC)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)或聚(環(huán)氧乙烷)(PEG)、乙氧基化的聚(亞乙基亞胺)、羧甲基菊粉(CMI)、和聚羧化物,例如PAA、PAA/PMA、聚-天冬氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物、疏水修飾CMC(HM-CMC)和硅酮、對(duì)苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物、聚(對(duì)苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯對(duì)苯二甲酸乙二酯)的共聚物(PET-POET)、PVP、聚(乙烯基咪唑)(PVI)、聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或PVPNO)以及聚乙烯吡咯烷酮-乙烯基咪唑(PVPVI)。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、聚環(huán)氧乙烷和聚環(huán)氧丙烷(PEO-PPO)以及乙氧基硫酸二季銨鹽。其他示例性聚合物披露于例如WO 2006/130575中。也考慮了以上提到的聚合物的鹽。

織物調(diào)色劑

本發(fā)明的洗滌劑組合物還可以包括織物調(diào)色劑,例如染料或色素,當(dāng)配制在洗滌劑組合物中時(shí),當(dāng)所述織物與一種洗滌液接觸時(shí)織物調(diào)色劑可以沉積在織物上,該洗滌液包括所述洗滌劑組合物,并且因此通過(guò)可見光的吸收/反射改變所述織物的色彩。熒光增白劑發(fā)射至少一些可見光。相比之下,因?yàn)樗鼈兾罩辽僖徊糠挚梢姽夤庾V,所以織物調(diào)色劑改變表面的色彩。適合的織物調(diào)色劑包括染料和染料-粘土軛合物,并且還可以包括色素。適合的染料包括小分子染料和聚合物染料。適合的小分子染料包括選自下組的小分子染料,該組由落入顏色索引(Colour Index)(C.I.)分類的以下染料組成:直接藍(lán)、直接紅、直接紫、酸性藍(lán)、酸性紅、酸性紫、堿性藍(lán)、堿性紫和堿性紅、或其混合物,例如描述于WO 2005/03274、WO 2005/03275、WO 2005/03276和EP 1876226中(將其通過(guò)引用而特此結(jié)合)。洗滌劑組合物優(yōu)選包括從約0.00003wt%至約0.2wt%、從約0.00008wt%至約0.05wt%、或甚至從約0.0001wt%至約0.04wt%的織物調(diào)色劑。該組合物可以包括從0.0001wt%至0.2wt%的織物調(diào)色劑,當(dāng)該組合物處于單位劑量袋的形式時(shí),這可以是特別優(yōu)選的。適合的調(diào)色劑還披露于例如WO 2007/087257和WO 2007/087243中。

洗滌劑添加劑連同洗滌劑組合物可以包括一種或多種另外的酶,例如蛋白酶、脂肪酶、角質(zhì)酶、淀粉酶、糖酶、纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶,例如漆酶、和/或過(guò)氧化物酶。

一般而言,一種或多種所選酶的特性應(yīng)與選定的洗滌劑相容(即,最適 pH,與其他酶和非酶成分的相容性,等等),并且該一種或多種酶應(yīng)以有效量存在。

纖維素酶:

適合的纖維素酶包括細(xì)菌或真菌來(lái)源的那些。包括化學(xué)修飾的或蛋白質(zhì)工程處理的突變體。適合的纖維素酶包括來(lái)自芽孢桿菌屬、假單胞菌屬、腐質(zhì)霉屬、鐮刀菌屬、梭孢殼菌屬、支頂孢屬的纖維素酶,例如披露于US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US 5,776,757以及WO 89/09259中的由特異腐質(zhì)霉、嗜熱毀絲霉和尖孢鐮刀菌產(chǎn)生的真菌纖維素酶。

特別適合的纖維素酶是具有顏色護(hù)理益處的堿性或中性纖維素酶。此類纖維素酶的實(shí)例是描述于EP 0 495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中的纖維素酶。其他實(shí)例是例如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307以及WO 99/001544中的那些纖維素酶變體。

其他纖維素酶是具有以下序列的內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖酶,該序列與WO 2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97%一致性,或家族44木葡聚糖酶,該木葡聚糖酶具有以下序列,該序列與WO 2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40-559具有至少60%一致性。

可商購(gòu)的纖維素酶包括CelluzymeTM和CarezymeTM(諾維信公司(Novozymes A/S))、Carezyme PremiumTM(諾維信公司)、CellucleanTM(諾維信公司)、Celluclean ClassicTM(諾維信公司)、CellusoftTM(諾維信公司)、WhitezymeTM(諾維信公司)、ClazinaseTM和Puradax HATM(杰能科國(guó)際公司(Genencor International Inc.))以及KAC-500(B)TM(花王株式會(huì)社(Kao Corporation))。

蛋白酶:

適合的蛋白酶包括細(xì)菌、真菌、植物、病毒或動(dòng)物來(lái)源的那些,例如植物或微生物來(lái)源。優(yōu)選微生物來(lái)源。包括化學(xué)修飾的或蛋白質(zhì)工程處理的突變體。它可以是一種堿性蛋白酶,例如絲氨酸蛋白酶或金屬蛋白酶。絲氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草桿菌蛋白酶)。金屬蛋白酶可以例如是來(lái)自例如家族M4的嗜熱菌蛋白酶或其他金屬蛋白酶,例如來(lái)自M5、M7或M8家族的那些。

術(shù)語(yǔ)“枯草桿菌酶“是指根據(jù)斯艾森(Siezen)等人,蛋白質(zhì)工程學(xué)(Protein Engng.)4(1991)719-737和斯艾森等人,蛋白質(zhì)科學(xué)(Protein Science)6(1997)501-523的絲氨酸蛋白酶亞組。絲氨酸蛋白酶是特征為在活性位點(diǎn)具有與底物形成共價(jià)加合物的絲氨酸的蛋白酶的一個(gè)亞組??莶輻U菌酶可以劃分為6個(gè)亞部,即,枯草桿菌蛋白酶家族、嗜熱蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。

枯草桿菌酶的實(shí)例是獲得自芽孢桿菌屬的那些,例如描述于US 7262042和WO 09/021867中的遲緩芽孢桿菌、嗜堿芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、短小芽孢桿菌和吉氏芽孢桿菌;和描述于WO 89/06279中的枯草桿菌蛋白酶遲緩(lentus)、枯草桿菌蛋白酶諾和(Novo)、枯草桿菌蛋白酶嘉士伯(Carlsberg)、地衣芽孢桿菌、枯草桿菌蛋白酶BPN’、枯草桿菌蛋白酶309、枯草桿菌蛋白酶147和枯草桿菌蛋白酶168以及描述于(WO 93/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO 92/175177、WO 01/016285、WO 02/026024以及WO 02/016547中的那些。胰蛋白酶樣蛋白酶的實(shí)例是胰蛋白酶(例如豬或牛來(lái)源的)和鐮孢菌蛋白酶(描述于WO 89/06270、WO 94/25583和WO 05/040372中),以及獲得自纖維單胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO 05/052161和WO 05/052146中)。

進(jìn)一步優(yōu)選的蛋白酶是來(lái)自遲緩芽孢桿菌DSM 5483的堿性蛋白酶(如在例如WO 95/23221中所述)、及其變體(在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP 1921148中描述的)。

金屬蛋白酶的實(shí)例是如描述于WO 07/044993(杰能科國(guó)際公司(Genencor Int.))中的中性金屬蛋白酶,例如獲得自解淀粉芽孢桿菌的那些。

有用的蛋白酶的實(shí)例是于以下各項(xiàng)中的變體:WO 92/19729、WO 96/034946、WO 98/20115、WO 98/20116、WO 99/011768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 04/03186、WO 04/041979、WO 07/006305、WO 11/036263、WO 11/036264,尤其是在以下位置的一個(gè)或多個(gè)中具有取代的變體:3、4、9、15、27、36、57、68、76、87、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、106、118、120、123、128、129、130、160、167、170、194、195、199、205、206、217、218、222、224、232、235、236、245、248、252以及274,使用BPN’編號(hào)。更優(yōu)選地,這些枯草桿菌酶變體可以包含以下突變:S3T、V4I、S9R、A15T、K27R、*36D、V68A、N76D、N87S,R、*97E、A98S、S99G,D,A、S99AD、S101G,M,R S103A、V104I,Y,N、S106A、G118V,R、H120D,N、N123S、S128L、P129Q、S130A、G160D、Y167A、R170S、A194P、G195E、V199M、V205I、L217D、N218D、M222S、A232V、K235L、Q236H、Q245R、N252K、T274A(使用BPN’進(jìn)行編號(hào))。

適合的可商購(gòu)蛋白酶包括以下列商品名出售的那些:DuralaseTm、DurazymTm、Ultra、Ultra、Ultra、 Ultra、以及 (諾維信公司),以下列商品名出售的那些:PurafectPreferenzTm、Purafect PurafectPurafectEffectenzTm、以及(丹尼斯克/杜邦公司(Danisco/DuPont))、AxapemTM(吉斯特布羅卡德斯公司(Gist-Brocases N.V.))、BLAP(序列示于US 5352604的圖29中)及其變體(漢高股份(Henkel AG))以及來(lái)自花王株式會(huì)社(Kao)的KAP(嗜堿芽孢桿菌枯草桿菌蛋白酶)。

脂肪酶和角質(zhì)酶:

適合的脂肪酶和角質(zhì)酶包括細(xì)菌或真菌來(lái)源的那些。包括化學(xué)修飾的或蛋白工程化的突變體酶。實(shí)例包括來(lái)自嗜熱真菌屬的脂肪酶,例如如描述于EP 258068和EP 305216中的來(lái)自疏綿狀嗜熱絲孢菌(早先命名為疏棉狀腐質(zhì)霉);來(lái)自腐質(zhì)霉屬的角質(zhì)酶,例如特異腐質(zhì)霉(WO 96/13580);來(lái)自假單胞菌屬的菌株的脂肪酶(這些中的一些現(xiàn)在改名為伯克霍爾氏菌屬),例如產(chǎn)堿假單胞菌或類產(chǎn)堿假單胞菌(EP 218272)、洋蔥假單胞菌(EP 331376)、假單胞菌屬菌株SD705(WO 95/06720&WO 96/27002)、威斯康星假單胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012);GDSL-型鏈霉菌屬脂肪酶(WO 10/065455);來(lái)自稻瘟病菌的角質(zhì)酶(WO 10/107560);來(lái)自門多薩假單胞菌的角質(zhì)酶(US 5,389,536);來(lái)自褐色嗜熱裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412);嗜熱脂肪土芽孢桿菌脂肪酶(WO 11/084417);來(lái)自枯草芽孢桿菌的脂肪酶(WO 11/084599);以及來(lái)自灰色鏈霉菌(WO 11/150157)和始旋鏈霉菌(S.pristinaespiralis)的脂肪酶(WO 12/137147)。

其他實(shí)例是脂肪酶變體,例如描述于EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO 94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中的那些。

優(yōu)選的商業(yè)化脂肪酶產(chǎn)品包括LipolaseTM、LipexTM;LipolexTM和LipocleanTM(諾維信公司),Lumafast(來(lái)自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(來(lái)自吉斯特布羅卡德斯公司(Gist-Brocades))。

再其他實(shí)例是有時(shí)稱為?;D(zhuǎn)移酶或過(guò)水解酶的脂肪酶,例如與南極假絲酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的?;D(zhuǎn)移酶(WO 10/111143)、來(lái)自恥垢分枝桿菌(Mycobacterium smegmatis)的?;D(zhuǎn)移酶(WO 05/56782)、來(lái)自CE 7家族的過(guò)水解酶(WO 09/67279)以及恥垢分枝桿菌過(guò)水解酶的變體(特別是來(lái)自亨斯邁紡織品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商業(yè)產(chǎn)品Gentle Power Bleach中所用的S54V變體) (WO 10/100028)。

淀粉酶:

可以與DNA酶一起使用的適合的淀粉酶可以是α-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以是細(xì)菌或真菌來(lái)源的。包括化學(xué)修飾的或蛋白質(zhì)工程處理的突變體。淀粉酶包括例如獲得自芽孢桿菌屬的α-淀粉酶,例如GB 1,296,839中更詳細(xì)描述的地衣芽孢桿菌具體株系的α-淀粉酶。

適合的淀粉酶包括具有WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其與SEQ ID NO:3具有90%序列一致性的變體。優(yōu)選的變體描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中,例如在一個(gè)或多個(gè)以下位置中具有取代的變體:15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408以及444。

不同的適合的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其與SEQ ID NO:6具有90%序列一致性的變體。SEQ ID NO:6的優(yōu)選變體是在位置181和182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。

其他適合的淀粉酶是包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的獲得自解淀粉芽孢桿菌的α-淀粉酶的殘基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢桿菌α-淀粉酶的殘基36-483的雜合α-淀粉酶或其具有90%序列一致性的變體。這一雜合α-淀粉酶的優(yōu)選變體是在以下位置中的一個(gè)或多個(gè)中具有取代、缺失或插入的那些:G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209以及Q264。包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的獲得自解淀粉芽孢桿菌的α-淀粉酶的殘基1-33和SEQ ID NO:4的殘基36-483的雜合α-淀粉酶的最優(yōu)選變體是具有以下取代的那些:

M197T;

H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S;或

G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。

適合的另外的淀粉酶是具有WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其與SEQ ID NO:6具有90%序列一致性的變體。SEQ ID NO:6的優(yōu)選變體是在以下位置中的一個(gè)或多個(gè)中具有取代、缺失或插入的那些:R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216以及K269。特別優(yōu)選的淀粉酶是在位置R181和G182或位置H183和G184中具有缺失的那些。

可以使用的另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的那些或其與SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7具有90%序列一致性的變體。使用WO 96/023873的SEQ ID 2用于編號(hào),SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7的優(yōu)選變體是在以下位置中的一個(gè)或多個(gè)中具有取代、缺失 或插入的那些:140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304以及476。更優(yōu)選的變體是在選自181、182、183和184的兩個(gè)位置,例如181和182、182和183、或位置183和184具有缺失的那些。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最優(yōu)選的淀粉酶變體是在位置183和184中具有缺失并且在位置140、195、206、243、260、304以及476的一個(gè)或多個(gè)中具有取代的那些。

可以使用的其他淀粉酶是具有WO 08/153815中的SEQ ID NO:2、WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的淀粉酶或其與WO 08/153815的SEQ ID NO:2具有90%序列一致性或與WO 01/66712中的SEQ ID NO:10具有90%序列一致性的變體。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的優(yōu)選變體是在以下位置中的一個(gè)或多個(gè)中具有取代、缺失或插入的那些:176、177、178、179、190、201、207、211以及264。

另外的適合的淀粉酶是具有WO 09/061380中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其與SEQ ID NO:2具有90%序列一致性的變體。SEQ ID NO:2的優(yōu)選變體是在以下位置中的一個(gè)或多個(gè)中具有C-末端的截短和/或取代、缺失或插入的那些:Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444以及G475。SEQ ID NO:2的更優(yōu)選變體是在一個(gè)或多個(gè)以下位置中具有取代的那些:Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K和/或位置R180和/或S181或T182和/或G183的缺失。SEQ ID NO:2的最優(yōu)選的淀粉酶變體是具有以下取代的那些:

N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;

N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K;

S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;或

S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K,其中這些變體是C-末端截短的并且任選地進(jìn)一步在位置243處包括取代和/或在位置180和/或位置181處包括缺失。

其他適合的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或與SEQ ID NO:12具有至少90%序列一致性的變體。優(yōu)選的淀粉酶變體是在WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的以下位置中的一個(gè)或多個(gè)中具有取代、缺失或插入的那些:R28,R118,N174;R181,G182,D183,G184,G186,W189,N195,M202,Y298,N299,K302,S303,N306,R310,N314;R320,H324,E345,Y396,R400,W439,R444,N445,K446,Q449,R458,N471,N484。特別優(yōu)選的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具 有R118K、N195F、R320K及R458K的取代的變體,以及另外在選自下組的一個(gè)或多個(gè)位置中具有取代的變體:M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345以及A339,最優(yōu)選的是另外在所有這些位置中具有取代的變體。

其他實(shí)例是例如描述于WO 2011/098531、WO 2013/001078及WO 2013/001087中的那些淀粉酶變體。

可商購(gòu)的淀粉酶是DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、StainzymeTM、Stainzyme PlusTM、NatalaseTM、Liquozyme X及BANTM(來(lái)自諾維信公司),以及RapidaseTM、PurastarTM/EffectenzTM、Powerase及Preferenz S100(來(lái)自杰能科國(guó)際有限公司/杜邦公司(Genencor International Inc./DuPont))。

過(guò)氧化物酶/氧化酶:

根據(jù)本發(fā)明的過(guò)氧化物酶是由如由國(guó)際生物化學(xué)與分子生物學(xué)聯(lián)合會(huì)命名委員會(huì)(IUBMB)陳述的酶分類EC 1.11.1.7包括的過(guò)氧化物酶,或獲得自其中的展示出過(guò)氧化物酶活性的任何片段。

適合的過(guò)氧化物酶包括植物、細(xì)菌或真菌來(lái)源的那些。包括化學(xué)修飾的或蛋白質(zhì)工程處理的突變體。有用的過(guò)氧化物酶的實(shí)例包括來(lái)自擬鬼傘屬,例如來(lái)自灰蓋擬鬼傘(C.cinerea)的過(guò)氧化物酶(EP 179,486),及其變體,如在WO 93/24618、WO 95/10602以及WO 98/15257中描述的那些。

根據(jù)本發(fā)明的過(guò)氧化物酶還包括鹵代過(guò)氧化物酶,例如氯過(guò)氧化物酶、溴過(guò)氧化物酶以及展示出氯過(guò)氧化物酶或溴過(guò)氧化物酶活性的化合物。根據(jù)其對(duì)鹵素離子的特異性將鹵代過(guò)氧化物酶加以分類。氯過(guò)氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化從氯根離子形成次氯酸鹽。

在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明的鹵代過(guò)氧化物酶是氯過(guò)氧化物酶。優(yōu)選地,該鹵代過(guò)氧化物酶是釩鹵代過(guò)氧化物酶,即含釩酸鹽的鹵代過(guò)氧化物酶。在本發(fā)明的優(yōu)選方法中,將含釩酸鹽的鹵代過(guò)氧化物酶與氯根離子來(lái)源組合。

已經(jīng)從許多不同真菌,特別是從暗色絲孢菌(dematiaceous hyphomycete)真菌組中分離出了鹵代過(guò)氧化物酶,比如卡爾黑霉屬(Caldariomyces)(例如煤卡爾黑霉(C.fumago))、鏈格孢屬、彎孢屬(例如疣枝彎孢(C.verruculosa)和不等彎孢(C.inaequalis))、內(nèi)臍蠕孢屬、細(xì)基格孢屬以及葡萄孢屬。

還已經(jīng)從細(xì)菌,如假單胞菌屬(例如,吡咯假單胞菌(P.pyrrocinia))和鏈霉菌屬(例如,金色鏈霉菌(S.aureofaciens))中分離出了鹵代過(guò)氧化物酶。

在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中,該鹵代過(guò)氧化物酶可源自彎孢屬,特別是疣枝彎孢(Curvularia verruculosa)或不等彎孢,如如描述于WO 95/27046中的不等 彎孢CBS 102.42或描述于WO 97/04102中的疣枝彎孢CBS 147.63或疣枝彎孢CBS 444.70;或可源自如描述于WO 01/79459中的Drechslera hartlebii,如描述于WO 01/79458中的鹽沼小樹狀霉(Dendryphiella salina)、如描述于WO 01/79461中的Phaeotrichoconis crotalarie或如描述于WO 01/79460中的Geniculosporium屬。

根據(jù)本發(fā)明的氧化酶具體包括由酶分類EC 1.10.3.2囊括的任何漆酶或獲得自其中的展示出漆酶活性的片段、或展示出類似活性的化合物,例如兒茶酚氧化酶(EC 1.10.3.1)、鄰氨基苯酚氧化酶(EC 1.10.3.4)或膽紅素氧化酶(EC 1.3.3.5)。

優(yōu)選的漆酶是微生物來(lái)源的酶。這些酶可以獲得自植物、細(xì)菌或真菌(包括絲狀真菌和酵母)。

來(lái)自真菌的適合實(shí)例包括可源自以下項(xiàng)的菌株的漆酶:曲霉屬,脈孢菌屬(例如,粗糙脈孢菌),柄孢殼菌屬,葡萄孢屬,金錢菌屬(Collybia),層孔菌屬(Fomes),香菇屬,側(cè)耳屬,栓菌屬(例如,長(zhǎng)絨毛栓菌和變色栓菌),絲核菌屬(例如,立枯絲核菌(R.solani)),擬鬼傘屬(例如,灰蓋擬鬼傘、毛頭擬鬼傘(C.comatus)、弗瑞氏擬鬼傘(C.friesii)及C.plicatilis),小脆柄菇屬(Psathyrella)(例如,白黃小脆柄菇(P.condelleana)),斑褶菇屬(例如,蝶形斑褶菇(P.papilionaceus)),毀絲霉屬(例如,嗜熱毀絲霉),Schytalidium(例如,S.thermophilum),多孔菌屬(例如,P.pinsitus),射脈菌屬(例如,射脈側(cè)菌(P.radiata))(WO 92/01046)或革蓋菌屬(例如,毛革蓋菌(C.hirsutus))(JP 2238885)。

來(lái)自細(xì)菌的適合實(shí)例包括可源自芽孢桿菌屬的菌株的漆酶。

優(yōu)選的是獲得自擬鬼傘屬或毀絲霉屬的漆酶;特別是獲得自灰蓋擬鬼傘的漆酶,如披露于WO 97/08325中;或來(lái)自嗜熱毀絲霉,如披露于WO 95/33836中。

該一種或多種洗滌劑酶可以通過(guò)添加包含一種或多種酶的單獨(dú)的添加劑,或通過(guò)添加包括所有這些酶的組合添加劑而被包括于洗滌劑組合物中。本發(fā)明的洗滌劑添加劑,即單獨(dú)的或組合的添加劑,可以配制成例如顆粒、液體、漿液等。優(yōu)選的洗滌劑添加劑劑型為顆粒,特別是無(wú)粉塵顆粒;液體,特別是穩(wěn)定化液體;或者漿液。

非塵顆??梢岳缛缭赨S 4,106,991和4,661,452中所披露而產(chǎn)生,并且可以任選地通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行包衣。蠟狀包衣材料的實(shí)例為具有1000至20000的平均摩爾重量的聚(環(huán)氧乙烷)產(chǎn)物(聚乙二醇,PEG);具有從16至50個(gè)環(huán)氧乙烷單元的乙氧化壬基苯酚;乙氧化脂肪醇,其中該醇包含從12至20個(gè)碳原子,并且其中具有15至80個(gè)環(huán)氧乙烷單元;脂肪醇;脂肪酸;以及脂肪酸 的甘油單酯和甘油二酯以及甘油三酯。適用于通過(guò)流化床技術(shù)應(yīng)用的成膜包衣材料的實(shí)例在GB 1483591中給出。液體酶制品可以例如通過(guò)根據(jù)已確立的方法添加多元醇(如丙二醇)、糖或糖醇、乳酸或硼酸而穩(wěn)定化。受保護(hù)的酶可以根據(jù)EP 238,216中披露的方法來(lái)制備。

其他材料

還可以使用本領(lǐng)域中已知用于洗滌劑中的任何洗滌劑組分。其他任選的洗滌劑組分包括防腐劑、防縮劑、抗污垢再沉積劑、抗皺劑、殺細(xì)菌劑、粘合劑、腐蝕抑制劑、崩解劑(disintegrant)/崩解試劑(disintegration agent)、染料、酶穩(wěn)定劑(包括硼酸、硼酸鹽、CMC和/或多元醇如丙二醇)、織物整理劑(包括粘土)、填充劑/加工助劑、熒光增白劑/光學(xué)增亮劑、增泡劑、泡沫(泡)調(diào)節(jié)劑、香料、污垢助懸劑、軟化劑、抑泡劑、晦暗抑制劑以及芯吸劑,單獨(dú)或組合使用。可以使用本領(lǐng)域中已知用于洗滌劑中的任何成分。此類成分的選擇完全在普通技術(shù)人員的技術(shù)內(nèi)。

分散劑

本發(fā)明的洗滌劑組合物還可以包含分散劑。具體地說(shuō),粉狀洗滌劑可以包括分散劑。適合的水溶性有機(jī)材料包括均聚合或共聚合的酸或其鹽,其中聚羧酸包括至少兩個(gè)羧基,這兩個(gè)羧基被不超過(guò)兩個(gè)碳原子彼此分開。適合的分散劑例如描述于粉狀洗滌劑,表面活性劑科學(xué)系列(Surfactant Science Series),第71卷中,馬塞爾·德克爾公司(Marcel Dekker)。

染料轉(zhuǎn)移抑制劑

本發(fā)明的洗滌劑組合物還可以包括一種或多種染料轉(zhuǎn)移抑制劑。適合的聚合物染料轉(zhuǎn)移抑制劑包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯吡咯烷酮與N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯噁唑烷酮以及聚乙烯咪唑或其混合物。當(dāng)存在于主題組合物中時(shí),染料轉(zhuǎn)移抑制劑可以按組合物重量計(jì)的以下水平存在:從約0.0001%至約10%、從約0.01%至約5%或甚至從約0.1%至約3%。

熒光增白劑

本發(fā)明的洗滌劑組合物將優(yōu)選地還包含另外的組分,這些組分可以給正在清潔的物品著色,例如熒光增白劑或光學(xué)增亮劑。其中增亮劑優(yōu)選以約0.01%至約0.5%的水平存在。在本發(fā)明的組合物中可以使用適合用于在衣物洗滌劑組合物中使用的任何熒光增白劑。最常用的熒光增白劑是屬于以下類別的那些:二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和二苯基-聯(lián)苯乙烯基衍生物。二氨基芪-磺酸衍生物類型的熒光增白劑的實(shí)例包括以下的鈉鹽:4,4'-雙-(2-二乙醇氨基-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸鹽、4,4'-雙-(2,4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2.2'-二磺酸鹽、4,4'-雙-(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羥基-乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸鹽、4,4'-雙-(4-苯基-1,2,3-三唑-2- 基)芪-2,2'-二磺酸鹽以及5-(2H-萘并[1,2-d][1,2,3]三唑-2-基)-2-[(E)-2-苯基乙烯基]苯磺酸鈉。優(yōu)選的熒光增白劑是可從汽巴–嘉基股份有限公司(Ciba-Geigy AG)(巴塞爾,瑞士)獲得的天來(lái)寶(Tinopal)DMS和天來(lái)寶CBS。天來(lái)寶DMS是4,4'-雙-(2-嗎啉代-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸鹽的二鈉鹽。天來(lái)寶CBS是2,2'-雙-(苯基-苯乙烯基)-二磺酸鹽的二鈉鹽。還優(yōu)選熒光增白劑,是可商購(gòu)的Parawhite KX,由派拉蒙礦物與化學(xué)(Paramount Minerals and Chemicals),孟買,印度供應(yīng)。適合用于在本發(fā)明中使用的其他熒光劑包括1-3-二芳基吡唑啉和7-烷氨基香豆素。

適合的熒光增亮劑水平包括從約0.01wt%、從0.05wt%、從約0.1wt%或甚至從約0.2wt%的較低水平至0.5wt%或甚至0.75wt%的較高水平。

污物釋放聚合物

本發(fā)明的洗滌劑組合物還可以包括一種或多種污垢釋放聚合物,這些聚合物幫助從織物(如棉布和基于聚酯的織物)移除污物,特別是從基于聚酯的織物移除疏水性污物。污垢釋放聚合物可以例如是非離子型或陰離子型對(duì)苯二甲酸基聚合物、聚乙烯基己內(nèi)酰胺和相關(guān)共聚物、乙烯基接枝共聚物、聚酯聚酰胺,參見例如粉狀洗滌劑,表面活性劑科學(xué)系列第71卷第7章,馬塞爾·德克爾公司(Marcel Dekker,Inc.)。另一種類型的污垢釋放聚合物是包括核心結(jié)構(gòu)和連接至該核心結(jié)構(gòu)的多個(gè)烷氧基化基團(tuán)的兩親性烷氧基化油污清潔聚合物。核心結(jié)構(gòu)可以包括聚烷基亞胺結(jié)構(gòu)或聚烷醇胺結(jié)構(gòu),如WO 2009/087523中詳細(xì)描述的(將其通過(guò)引用而特此結(jié)合)。此外,隨機(jī)接枝共聚物是適合的污垢釋放聚合物。適合的接枝共聚物更詳細(xì)地描述于WO 2007/138054、WO 2006/108856和WO 2006/113314中(將其通過(guò)引用而特此結(jié)合)。其他污垢釋放聚合物是取代的多糖結(jié)構(gòu),尤其是取代的纖維素結(jié)構(gòu),例如改性纖維素衍生物,例如EP 1867808或WO 2003/040279中描述的那些(將二者都通過(guò)引用而特此結(jié)合)。適合的纖維素聚合物包括纖維素、纖維素醚、纖維素酯、纖維素酰胺及其混合物。適合的纖維素聚合物包括陰離子改性的纖維素、非離子改性的纖維素、陽(yáng)離子改性的纖維素、兼性離子改性的纖維素及其混合物。適合的纖維素聚合物包括甲基纖維素、羧甲基纖維素、乙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、酯羧甲基纖維素及其混合物。

抗再沉積劑:

本發(fā)明的洗滌劑組合物還可以包括一種或多種抗再沉積劑,例如羧甲基纖維素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚氧乙烯和/或聚乙二醇(PEG)、丙烯酸的均聚物、丙烯酸和馬來(lái)酸的共聚物、和乙氧基化的聚乙亞胺。以上在污垢釋放聚合物下描述的纖維素基聚合物還可以用作抗再沉積劑。

抗靜電劑

抗靜電劑是一種化合物,該化合物用于處理材料或它們的表面以降低或消除累積的靜電。該抗靜電劑不同于DNA酶。

常用的抗靜電劑基于長(zhǎng)鏈脂族胺(任選乙氧基化的)和酰胺、季銨鹽(例如山?;谆然@或椰油酰胺丙基甜菜堿)、磷酸的酯、聚乙二醇酯或多元醇。氧化銦錫可以用作窗戶的透明抗靜電包衣。還可能使用導(dǎo)電聚合物,像PEDOT:PSS和導(dǎo)電聚合物納米纖維,特別是聚苯胺納米纖維。通常,這些系統(tǒng)對(duì)于包衣不是非常耐用,尤其是氧化銻錫經(jīng)常以其納米形式用于耐用系統(tǒng),然后將其配制成最終包衣。

抗靜電劑也被添加至一些軍事噴氣燃料中,以賦予它們導(dǎo)電性并且避免可能導(dǎo)致點(diǎn)燃燃料蒸汽的火花的靜電荷的積累。Stadis 450是添加至一些餾分燃料、商業(yè)噴氣燃料和軍事JP-8的試劑。Stadis 425是用于在餾分燃料中使用的類似的化合物。Staysafe產(chǎn)品用于非燃料應(yīng)用。

抗靜電化合物中的一組是在氮原子上取代的并具有以下化學(xué)式的甲磺酰胺抗靜電劑:

RNHSO2CH3

其中R是包含至少8個(gè)碳的仲脂肪族烴鏈。

在氮原子上被一個(gè)包含8-22個(gè)碳的二級(jí)長(zhǎng)脂族鏈取代的甲磺酰胺減少或防止在洗衣期間在棉布和合成織物上的靜電的產(chǎn)生。這些抗靜電特性可以通過(guò)在包含所述甲磺酰胺的洗滌劑組合物中洗衣而賦予織物,所述甲磺酰胺與陰離子的、非離子的、陽(yáng)離子的和兩性的洗滌劑是完全相容的。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該相同處理另外賦予棉織物柔軟的手感。這些有益效果在織物沒有變黃或脫色的情況下實(shí)現(xiàn),并且不干擾可以存在于洗滌劑組合物中的熒光增白劑的作用。本發(fā)明的甲磺酰胺可以如US 4260497中所描述的進(jìn)行制備。

抗靜電劑中的另一組是如WO 2008/000333、WO 95/29218、WO 2011/011247或WO 2009/158388中所描述的陽(yáng)離子季銨化合物。

流變改性劑

本發(fā)明的洗滌劑組合物還可以包括一種或多種流變改性劑、結(jié)構(gòu)劑或增稠劑,不同于降粘劑。流變改性劑選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:非聚合物結(jié)晶、羥基功能材料、聚合物流變改性劑,它們?yōu)橐后w洗滌劑組合物的水性液相基質(zhì)賦予剪切稀化特征??梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域已知的方法修飾和調(diào)整洗滌劑的流變學(xué)和粘度,例如如在EP 2169040中所示。

其他適合的輔料包括但不限于防縮劑、抗皺劑、殺細(xì)菌劑、粘合劑、載體、染料、酶穩(wěn)定劑、織物柔軟劑、填充劑、泡沫調(diào)節(jié)劑、助水溶劑、香料、色素、抑泡劑、溶劑以及用于液體洗滌劑的結(jié)構(gòu)劑和/或結(jié)構(gòu)彈性劑。

洗滌劑產(chǎn)品的配制品

本發(fā)明的洗滌劑組合物可以處于任何常規(guī)形式,例如條、均勻的片劑、具有兩個(gè)或更多個(gè)層的片劑、具有一個(gè)或多個(gè)室的袋、規(guī)則的或壓縮的粉、顆粒、膏、凝膠、或規(guī)則的、壓縮的或濃縮的液體,或該組合物被包括在片或擦拭巾上。

可以將小袋配置為單一隔室或多隔室。它可以具有適合容持該組合物的任何形式、形狀和材料,例如在與水接觸之前,不允許該組合物從袋中釋放出來(lái)。袋由封裝內(nèi)體積的水溶性膜制成??梢詫⑺鰞?nèi)體積分為具有袋的室。優(yōu)選的膜是形成膜或片的聚合材料,優(yōu)選是聚合物。優(yōu)選的聚合物、共聚物或其衍生物選自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纖維素、羧甲基纖維素、糊精鈉、乙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、麥芽糊精、聚甲基丙烯酸酯,最優(yōu)選地是聚乙烯醇共聚物以及羥丙基甲基纖維素(HPMC)。優(yōu)選地,在膜中的聚合物(例如PVA)的水平是至少約60%。優(yōu)選的平均分子量將典型地是約20,000至約150,000。膜還可以是共混組合物,該共混組合物包括可水解降解并且水可溶的聚合物共混物,例如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在貿(mào)易參考M8630下,如由美國(guó)印第安納州的MonoSol LLC公司銷售)加增塑劑,像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。這些袋可以包括固體衣物清潔組合物或部分組分和/或液體清潔組合物或由水溶性膜分開的部分組分。用于液體組分的室在組成上可以與包括固體的室不同:US 2009/0011970 A1。

可以由水可溶的袋中或片劑的不同層中的室來(lái)將洗滌劑成分物理地彼此分開。由此可以避免組分之間的負(fù)面的存儲(chǔ)相互作用。在洗滌溶液中,每個(gè)室的不同溶解曲線還可以引起選擇的組分的延遲溶解。

非單位劑量的液體或凝膠洗滌劑可以是水性的,典型地包含按重量計(jì)至少20%并且高達(dá)95%的水,例如高達(dá)約70%的水、高達(dá)約65%的水、高達(dá)約55%的水、高達(dá)約45%的水、高達(dá)約35%的水。包括但不限于鏈烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他類型的液體可以被包括在水性液體或凝膠中。含水液體或凝膠洗滌劑可以包含從0-30%的有機(jī)溶劑。

液體或凝膠洗滌劑可以是非水性的。

洗衣皂?xiàng)l

本發(fā)明的DNA酶可以被添加至洗衣皂?xiàng)l中并且用于手洗洗衣、織物和/或紡織品。術(shù)語(yǔ)洗衣皂?xiàng)l包括洗衣條、皂?xiàng)l、組合條(combo bar)、合成洗滌劑條以及洗滌劑條。條的類型通常區(qū)別在于它們包含的表面活性劑的類型,并且術(shù)語(yǔ)洗衣皂?xiàng)l包括包含來(lái)自脂肪酸的皂和/或合成皂的那些。洗衣皂?xiàng)l具有在室溫下為固體而非液體、凝膠或粉末的物理形式。術(shù)語(yǔ)固體被定義為不隨時(shí)間推移顯著改變的實(shí)體形式,即如果將一個(gè)固體物件(例如洗衣皂?xiàng)l)放置在一種容器內(nèi),那么該固體物件不會(huì)改變以填充放置該固體物件的容器。該條是 典型地呈條形式但是可以呈其他固體形狀、如圓形或卵形的一種固體。

洗衣皂?xiàng)l可以包含一種或多種另外的酶,蛋白酶抑制劑例如肽醛類(或次硫酸鹽加合物或半縮醛加合物),硼酸,硼酸鹽,硼砂和/或苯基硼酸衍生物例如4-甲酰苯基硼酸,一種或多種肥皂或合成表面活性劑,多元醇例如甘油,pH控制化合物例如脂肪酸、檸檬酸、乙酸和/或甲酸,和/或一價(jià)陽(yáng)離子和有機(jī)陰離子的鹽,其中該一價(jià)陽(yáng)離子可以是例如Na+、K+或NH4+并且該有機(jī)陰離子可以是例如甲酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽或乳酸鹽,這樣使得一價(jià)陽(yáng)離子和有機(jī)陰離子的鹽可以是例如甲酸鈉。

洗衣皂?xiàng)l還可以包含絡(luò)合劑像EDTA和HEDP,香料和/或不同類型的填充劑,表面活性劑例如陰離子型合成表面活性劑,助洗劑,聚合的污垢釋放劑,洗滌劑螯合劑,穩(wěn)定劑,填充劑,染料,著色劑,染料轉(zhuǎn)移抑制劑,烷氧基化的聚碳酸酯,抑泡劑,結(jié)構(gòu)劑,粘合劑,浸出劑,漂白活化劑,粘土去污劑,抗再沉積劑,聚合分散劑,增白劑,織物柔軟劑,香料和/或本領(lǐng)域已知的其他化合物。

洗衣皂?xiàng)l可以在常規(guī)的洗衣皂?xiàng)l制造設(shè)備中進(jìn)行加工,例如但不限制于:混合器、壓條機(jī)例如雙級(jí)真空壓條機(jī)、擠出機(jī)、切割機(jī)、標(biāo)識(shí)壓模機(jī)(logo-stamper)、冷卻隧道以及包裝機(jī)。本發(fā)明不局限于通過(guò)任何單一方法制備洗衣皂?xiàng)l。可以在過(guò)程的不同階段向肥皂中添加本發(fā)明的預(yù)混料。例如,可以制備包含肥皂、DNA酶、任選地一種或多種另外的酶、蛋白酶抑制劑以及一價(jià)陽(yáng)離子和有機(jī)陰離子的鹽的預(yù)混料并且然后將該混合物壓條。可以同時(shí)添加作為例如處于液態(tài)的蛋白酶抑制劑的DNA酶以及任選的另外的酶。除了混合步驟和壓條步驟以外,該工藝還可以進(jìn)一步包括研磨、擠出、切割、壓模、冷卻和/或包裝的步驟。

共顆粒中酶的配制品

該DNA酶可以被配制為顆粒,例如,配制為結(jié)合一種或多種酶的共顆粒。然后,每種酶將存在于多種顆粒中,這些顆粒確保酶在洗滌劑中的分布更均勻。這還減少了由于不同的粒度,不同酶的物理隔離。用于生產(chǎn)針對(duì)洗滌劑工業(yè)的多酶共顆粒的方法披露于Ip.com公開內(nèi)容IPCOM000200739D中。

通過(guò)使用共顆粒的酶的配制品的另一個(gè)實(shí)例披露于WO 2013/188331中,其涉及包括以下各項(xiàng)的洗滌劑組合物:(a)多酶共顆粒;(b)少于10wt沸石(無(wú)水基底);和(c)少于10wt磷酸鹽(無(wú)水基底),其中所述酶共顆粒包括從10至98wt%的水分匯組分,并且該組合物另外還包括從20至80wt%的洗滌劑水分匯組分。WO 2013/188331還涉及處理和/或清潔表面的方法,優(yōu)選織物表面,該方法包括以下步驟:(i)使所述表面與在含水洗滌液中如在此要求保護(hù)的并且描述的洗滌劑組合物接觸,(ii)沖洗和/或干燥該表面。

該多酶共顆??梢园―NA酶和(a)選自下組的一種或多種酶,該組由以 下各項(xiàng)組成:首次洗滌脂肪酶、清潔纖維素酶、木葡聚糖酶、過(guò)水解酶、過(guò)氧化酶、脂氧合酶、漆酶及其混合物;和(b)選自下組的一種或多種酶,該組由以下各項(xiàng)組成:半纖維素酶、蛋白酶、護(hù)理纖維素酶、纖維二糖脫氫酶、木聚糖酶、磷脂酶、酯酶、角質(zhì)酶、果膠酶、甘露聚糖酶、果膠酸裂解酶、角蛋白酶、還原酶、氧化酶、酚氧化酶、木質(zhì)酶、普魯蘭酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、地衣聚糖酶、葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、玻璃酸酶、軟骨素酶、淀粉酶、及其混合物。

在以下各段中進(jìn)一步概述本發(fā)明:

1.具有DNA酶活性的多肽用于在物品上和/或從物品防止、減少或去除靜電的用途,在該物品上會(huì)積累靜電。

2.根據(jù)段落1所述的用途,其中該物品是紡織品或硬表面。

3.根據(jù)段落1-2中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該具有DNA酶活性的多肽被噴灑在該物品上。

4.根據(jù)段落1-2中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該物品與包含具有DNA酶活性的多肽的液體溶液進(jìn)行接觸。

5.根據(jù)段落1-4中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該液體溶液是洗滌液。

6.根據(jù)段落1-2和4-5中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該物品用該具有DNA酶活性的多肽進(jìn)行浸漬。

7.根據(jù)前述段落中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該物品用該具有DNA酶活性的多肽進(jìn)行包衣。

8.根據(jù)段落1-3中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該物品用該具有DNA酶活性的多肽進(jìn)行涂覆。

9.根據(jù)前述段落中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該具有DNA酶活性的多肽是動(dòng)物、植物或微生物來(lái)源的。

10.根據(jù)段落9所述的用途,其中該多肽是人類來(lái)源的。

11.根據(jù)段落9所述的用途,其中該多肽獲得自綠豆。

12.根據(jù)段落9所述的用途,其中該多肽是細(xì)菌或真菌來(lái)源的。

13.根據(jù)段落12所述的用途,其中該多肽是真菌來(lái)源的并且該多肽選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:

a.與SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽

b.由如下多核苷酸編碼的多肽,該多核苷酸在低嚴(yán)格條件下與以下各項(xiàng)雜交

i.SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或SEQ ID NO:4的成熟多肽 編碼序列

ii.其cDNA序列,或

iii.(i)或(ii)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體;

c.由與SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽、或由與SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽;

d.在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:5的成熟多肽的變體或在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體;以及

e.具有DNA酶活性的(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的片段。

14.根據(jù)段落12所述的用途,其中該多肽是細(xì)菌來(lái)源的并且該多肽選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:

a.與SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或與SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;

b.在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:6的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:7的成熟多肽的變體;以及

c.具有DNA酶活性的(a)、或(b)的多肽的片段;

15.根據(jù)段落13-14中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該多肽與SEQ ID NO:2的成熟多肽、與SEQ ID NO:3的成熟多肽、與SEQ ID NO:5的成熟多肽、或與SEQ ID NO:6的成熟多肽、與SEQ ID NO:7的成熟多肽、或與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。

16.根據(jù)段落13-15中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該多肽包括SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:2的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:5的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:6的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:7的成熟多肽或由它們組成,或者該多肽包括SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:8的成熟多肽或由它們組成。

17.根據(jù)段落13-16中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,或SEQ ID NO:7的氨基酸1至109 或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。

18.根據(jù)段落13-17中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體,其中該變體在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體,該變體在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入。

19.根據(jù)段落13-17中的任一項(xiàng)所述的用途,其中該多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的片段,其中該片段具有DNA酶活性。

20.一種用于預(yù)防、減少或去除靜電的組合物,其中該組合物包括具有脫氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽。

21.根據(jù)段落20所述的組合物,其中該組合物是洗衣洗滌劑組合物;餐具洗滌劑組合物;用于硬表面清潔的組合物;洗衣柔軟組合物;或用于個(gè)人護(hù)理的組合物。

22.根據(jù)段落20-21中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該組合物是洗衣洗滌劑組合物;餐具洗滌劑組合物;或用于硬表面清潔的組合物。

23.根據(jù)段落20-21中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該組合物是洗衣軟化組合物。

24.根據(jù)段落23所述的組合物,其中該洗衣軟化組合物被摻入片或擦拭巾中。

25.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該組合物進(jìn)一步包括不同于具有DNA酶活性的多肽的抗靜電劑。

26.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該組合物進(jìn)一步包括表面活性劑、助洗劑、絮凝助劑、螯合劑、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、酶、酶穩(wěn)定劑、酶抑制劑、催化材料、漂白活化劑、過(guò)氧化氫、過(guò)氧化氫源、預(yù)形成的過(guò)酸、聚合的分散劑、粘土去污劑/抗再沉淀劑、增白劑、抑泡劑、染料、香料、結(jié)構(gòu)彈力劑、織物柔軟劑、載體、助水溶物、助洗劑和共助洗劑、織物調(diào)色劑、防沫劑、分散劑、加工助劑、殺細(xì)菌劑、殺真菌劑和/或色素。

27.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該組合物進(jìn)一步包括選自下組的一種或多種酶,該組由以下各項(xiàng)組成:蛋白酶、脂肪酶、角質(zhì)酶、淀粉酶、糖酶、纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶和氧化酶。

28.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該具有DNA酶活性的多肽是動(dòng)物、植物或微生物來(lái)源的。

29.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該多肽是人類來(lái)源的。

30.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該多肽獲得自綠豆。

31.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該多肽是細(xì)菌或真菌來(lái)源的。

32.根據(jù)段落31所述的組合物,其中該多肽是真菌來(lái)源的并且該多肽選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:

a.與SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;

b.由如下多核苷酸編碼的多肽,該多核苷酸在低嚴(yán)格條件下與以下各項(xiàng)雜交

i.SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列

ii.其cDNA序列,或

iii.(i)或(ii)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體;

c.由與SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽、或由與SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽;

d.在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:5的成熟多肽的變體或在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體;以及

e.具有DNA酶活性的(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的片段。

33.根據(jù)段落31所述的組合物,其中該多肽是細(xì)菌來(lái)源的并且該多肽選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:

a.與SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或與SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;

b.在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:6的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:7的成熟多肽的變體;以及

c.具有DNA酶活性的(a)、或(b)的多肽的片段;

34.根據(jù)段落32-33中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該多肽與SEQ ID NO:2的成熟多肽、與SEQ ID NO:3的成熟多肽、與SEQ ID NO:5的成熟多肽、或與SEQ ID NO:6的成熟多肽、與SEQ ID NO:7的成熟多肽、或與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。

35.根據(jù)段落32-34中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該多肽包括SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:2的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:5的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:6的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:7的成熟多肽或由它們組成,或者該多肽包括SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:8的成熟多肽或由它們組成。

36.根據(jù)段落32-35中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,或SEQ ID NO:7的氨基酸1至109或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。

37.根據(jù)段落32-36中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體,其中該變體在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體,該變體在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入。

38.根據(jù)段落32-37中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的片段,其中該片段具有DNA酶活性。

39.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,用于從表面去除靜電使用。

40.根據(jù)段落39所述的組合物,其中該表面是紡織品表面或硬表面。

41.根據(jù)段落40所述的組合物,其中該紡織品由合成纖維(如聚酯、聚酰胺、尼龍、彈性纖維(Spandex(氨綸),Lycra)、聚酰胺、起絨布(聚乙烯對(duì)苯二甲酸乙二醇酯(PET)))或其混合物制成。

42.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該組合物是條、均勻的片劑、具有兩個(gè)或更多個(gè)層的片劑、具有一個(gè)或多個(gè)室的袋、規(guī)則的或壓縮的粉、顆粒、膏、凝膠、或規(guī)則的、壓縮的或濃縮的液體,或該組合物被包括在片或擦拭巾上。

43.根據(jù)前述組合物段落中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該組合物是液 體洗滌劑、粉狀洗滌劑或顆粒洗滌劑。

44.一種用于防止、減少或去除物品的靜電的方法,該方法包括以下步驟:

a.使物品與根據(jù)段落20-43和67-81中的任一項(xiàng)所述的組合物、根據(jù)段落82-90中的任一項(xiàng)所述的的擦拭巾或包含具有DNA酶活性的多肽的液體溶液接觸;并且

b.任選地漂洗該物品,

其中該物品是紡織品或硬表面。

45.根據(jù)段落44所述的方法,其中該方法進(jìn)一步包括用所述組合物、擦拭巾或液體溶液洗滌該物品。

46.根據(jù)段落44所述的方法,其中該方法進(jìn)一步包括干燥該物品。

47.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該液體溶液進(jìn)一步包括抗靜電劑、表面活性劑、助洗劑、絮凝助劑、螯合劑、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、酶、酶穩(wěn)定劑、酶抑制劑、催化材料、漂白活化劑、過(guò)氧化氫、過(guò)氧化氫源、預(yù)形成的過(guò)酸、聚合的分散劑、粘土去污劑/抗再沉淀劑、增白劑、抑泡劑、染料、香料、結(jié)構(gòu)彈力劑、織物柔軟劑、載體、助水溶物、助洗劑和共助洗劑、織物調(diào)色劑、防沫劑、分散劑、加工助劑、殺細(xì)菌劑、殺真菌劑和/或色素。

48.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該液體溶液進(jìn)一步包括選自下組的一種或多種酶,該組由以下各項(xiàng)組成:蛋白酶、脂肪酶、角質(zhì)酶、淀粉酶、糖酶、纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶和氧化酶。

49.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該液體溶液的pH在1至11的范圍內(nèi)。

50.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該液體溶液的pH在5.5至11的范圍內(nèi),如在7至9的范圍內(nèi),在7至8的范圍內(nèi)或在7至8.5的范圍內(nèi)。

51.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該液體溶液的溫度在5℃至95℃的范圍內(nèi)、或在10℃至80℃的范圍內(nèi)、在10℃至70℃的范圍內(nèi)、在10℃至60℃的范圍內(nèi)、在10℃至50℃的范圍內(nèi)、在15℃至40℃的范圍內(nèi)或在20℃至30℃的范圍內(nèi)。

52.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該液體溶液的溫度是30℃。

53.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中在與該液體溶液接觸后,漂洗該物品。

54.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中將該物品用水或用 包含調(diào)節(jié)劑的水進(jìn)行漂洗。

55.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該具有DNA酶活性的多肽是動(dòng)物、植物或微生物來(lái)源的。

56.根據(jù)段落55所述的方法,其中該多肽是人類來(lái)源的。

57.根據(jù)段落55所述的方法,其中該多肽獲得自綠豆。

58.根據(jù)段落55所述的方法,其中該多肽是細(xì)菌或真菌來(lái)源的。

59.根據(jù)段落58所述的方法,其中該多肽是真菌來(lái)源的并且該多肽選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:

a.與SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;

b.由如下多核苷酸編碼的多肽,該多核苷酸在低嚴(yán)格條件下與以下各項(xiàng)雜交

i.SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列

ii.其cDNA序列,或

iii.(i)或(ii)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體;

c.由與SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽、或由與SEQ ID NO:4的成熟多肽編碼序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽;

d.在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:5的成熟多肽的變體或在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體;以及

e.具有DNA酶活性的(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的片段。

60.根據(jù)段落58所述的方法,其中該多肽是細(xì)菌來(lái)源的并且該多肽選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:

a.與SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或與SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;

b.在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:6的成熟多肽的變體,在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:7的成熟多肽的變體;以及

c.具有DNA酶活性的(a)、或(b)的多肽的片段;

61.根據(jù)段落59-60中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該多肽與SEQ ID NO: 2的成熟多肽、與SEQ ID NO:3的成熟多肽、與SEQ ID NO:5的成熟多肽、或與SEQ ID NO:6的成熟多肽、與SEQ ID NO:7的成熟多肽、或與SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。

62.根據(jù)段落59-61中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該多肽包括SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:2的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:5的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:6的成熟多肽或由它們組成,該多肽包括SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:7的成熟多肽或由它們組成,或者該多肽包括SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:8的成熟多肽或由它們組成。

63.根據(jù)段落59-62中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,SEQ ID NO:7的氨基酸1至109或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。

64.根據(jù)段落59-63中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體,其中該變體在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的變體,該變體在一個(gè)或多個(gè)位置包括取代、缺失、和/或插入。

65.根據(jù)段落59-64中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的片段,其中該片段具有DNA酶活性。

66.根據(jù)前述方法段落中的任一項(xiàng)所述的方法,其中該多肽的濃度在0.00004-100ppm酶蛋白的范圍內(nèi),如在0.00008-100范圍內(nèi)、在0.0001-100范圍內(nèi)、在0.0002-100范圍內(nèi)、在0.0004-100范圍內(nèi)、在0.0008-100范圍內(nèi)、在0.001-100ppm酶蛋白范圍內(nèi)、在0.01-100ppm酶蛋白范圍內(nèi)、在0.05-50ppm酶蛋白范圍內(nèi)、在0.1-50ppm酶蛋白范圍內(nèi)、在0.1-30ppm酶蛋白范圍內(nèi)、在0.5-20ppm酶蛋白范圍內(nèi)或在0.5-10ppm酶蛋白范圍內(nèi)。

67.根據(jù)段落20-43所述的組合物,其中該組合物是液體洗滌劑組合物,包括總濃度按重量計(jì)是至少3%的表面活性劑和洗滌劑助洗劑,和包含洗滌劑酶的微囊,其中該微囊的膜是通過(guò)具有高于1kDa分子量的多支化的多胺的交聯(lián)而產(chǎn)生。

68.根據(jù)段落67所述的組合物,其中該多支化的多胺的這些反應(yīng)性氨基 構(gòu)成該分子量的至少15%。

69.根據(jù)段落67-68中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中通過(guò)使用酰基氯作為交聯(lián)劑產(chǎn)生該微囊。

70.根據(jù)段落67-69中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該微囊的直徑是至少50微米,或大于50微米。

71.根據(jù)段落67-70中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該微囊包含按重量計(jì)至少1%的活性酶。

72.根據(jù)段落67-71中的任一項(xiàng)所述的組合物,該洗滌劑組合物進(jìn)一步包括醇,例如多元醇。

73.根據(jù)段落67-72中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該表面活性劑是陰離子表面活性劑。

74.根據(jù)段落67-73中的任一項(xiàng)所述的組合物,該組合物是液體洗衣的或自動(dòng)餐具洗滌的洗滌劑組合物。

75.根據(jù)段落67-74中的任一項(xiàng)所述的組合物,該組合物包含按重量計(jì)少于90%的水。

76.根據(jù)段落67-75中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該洗滌劑酶是具有DNA酶活性的多肽、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶、甘露聚糖酶、果膠酶、或氧化還原酶。

77.根據(jù)段落67-76中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該蛋白酶是金屬蛋白酶或堿性絲氨酸蛋白酶,例如枯草桿菌蛋白酶。

78.根據(jù)段落67-77中的任一項(xiàng)所述的組合物,其中該具有DNA酶活性的多肽是與SEQ ID NO:2具有至少60%序列一致性的多肽,與SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,或與SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽。

79.根據(jù)段落79-90中任一項(xiàng)所述的洗滌劑組合物,其中使用?;茸鳛榻宦?lián)劑,通過(guò)界面聚合來(lái)生成該微囊。

80.根據(jù)段落79-91中任一項(xiàng)所述的洗滌劑組合物,其中該多支化的多胺是聚乙亞胺。

81.根據(jù)段落79-92中任一項(xiàng)所述的洗滌劑組合物,其中該微囊包括Mg2+、Ca2+、或Zn2+離子的來(lái)源,如Mg2+、Ca2+、或Zn2+的難溶鹽。

82.一種用于預(yù)防、減少或去除靜電的擦拭巾,該擦拭巾包含水和具有DNA酶活性的多肽。

83.根據(jù)段落82所述的擦拭巾,其中該擦拭巾用該具有DNA酶活性的多肽進(jìn)行浸漬或包衣。

84.根據(jù)段落82-83中的任一項(xiàng)所述的擦拭巾,其中該擦拭巾由紡織品或紙制成。

85.根據(jù)段落84所述的擦拭巾,其中該紡織品選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:棉、亞麻(flax/linen)、黃麻、苧麻、劍麻、椰殼纖維、粘膠纖維/人造纖維、乙酸纖維素纖維(三胞)、萊賽爾纖維(lyocell)、羊毛、駝毛、羊絨、馬海毛、兔毛和絲綢、尼龍、芳香聚酰胺、聚酯、丙烯酸的、聚丙烯、氨綸/彈性纖維、微纖維或其共混物。

86.根據(jù)段落84-85中的任一項(xiàng)所述的擦拭巾,其中該紡織品是非織造紡織品或水刺織物。

87.根據(jù)段落84-86中的任一項(xiàng)所述的擦拭巾,其中該擦拭巾由微纖維制成。

88.根據(jù)段落84所述的擦拭巾,其中該紙是選自下組的薄棉紙,該組由以下各項(xiàng)組成:衛(wèi)生薄紙、面部薄紙、紙巾、濕巾、衛(wèi)生紙、餐巾、廚房卷紙、手帕以及玻璃清潔薄紙。

89.根據(jù)段落82-88中的任一項(xiàng)所述的擦拭巾,其中該擦拭巾是濕擦拭巾。

90.根據(jù)段落89所述的擦拭巾,其中該擦拭巾包含水、異丙醇和月桂醇聚醚硫酸鈉。

91.根據(jù)段落82-88中的任一項(xiàng)所述的擦拭巾,其中該擦拭巾用于從表面防止、減少或去除靜電。

92.根據(jù)段落89所述的擦拭巾,其中該表面存在于屏幕、觸摸屏、電話、平板電腦、照相機(jī)、鏡頭、珠寶、眼鏡、健身器材或CD上。

93.一種用于預(yù)防、減少或去除靜電的物品,該物品包含水和具有DNA酶活性的多肽。

測(cè)定和洗滌劑組合物

洗滌劑組合物

以下提及的洗滌劑組合物可以結(jié)合本發(fā)明的用于防止或減少靜電的多肽而使用。

碧浪靈敏性白色與彩色衣物洗滌劑組合物、液體洗滌劑組合物:

水、酒精乙氧基硫酸鹽、醇乙氧基化物、氨基氧化物、檸檬酸、C12-18拔頂棕櫚仁脂肪酸、蛋白酶、糖苷酶、淀粉酶、乙醇、1,2丙二醇、甲酸鈉、氯化鈣、氫氧化鈉、有機(jī)硅乳液、跨硫酸EHDQ(這些成分以遞減次序列出)。

WFK IEC-A標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑的組合物(粉狀)

成分:直鏈烷基苯磺酸鈉8.8%、乙氧基化的脂肪醇C12-18(7EO)4.7%、鈉皂3.2%、消泡劑DC2-4248S 3.9%、硅酸鋁鈉沸石4A 28.3%、碳酸鈉11.6%、丙烯酸和馬來(lái)酸的共聚物的鈉鹽(Sokalan CP5)2.4%、硅酸鈉3.0%、羧甲基纖維素1.2%、Dequest 2066 2.8%,光學(xué)增白劑0.2%、硫酸鈉 6.5%、蛋白酶0.4%。

標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑A組合物(液體)

成分:12%LAS、11%AEO Biosoft N25-7(NI)、7%AEOS(SLES)、6%MPG(丙二醇)、3%乙醇、3%TEA、2.75%可可皂、2.75%大豆皂、2%甘油、2%氫氧化鈉、2%檸檬酸鈉、1%甲酸鈉、0.2%DTMPA和0.2%PCA(所有的百分?jǐn)?shù)都是w/w)

碧浪Actilift組合物(液體)

成分:5%-15%陰離子表面活性劑;<5%非離子型表面活性劑、磷酸鹽、肥皂;酶、光學(xué)增亮劑、苯并異噻唑啉酮、甲基異噻唑啉酮、香料、α-異甲基紫羅蘭酮、香茅醇、香葉醇、芳樟醇。

碧浪Actilift彩色&風(fēng)格組合物

水、十二烷基苯磺酸鈉、C14-C15 Pareth-7、檸檬酸鈉、丙二醇、棕櫚仁酸鈉、月桂醇醚硫酸鈉、MEA十二烷基苯磺酸鹽、硫酸化乙氧基化六亞甲基二胺季銨化物、枯烯磺酸鈉、香料、PEG/乙酸乙烯酯共聚物、甲酸鈉、氫化蓖麻油、二亞乙基三胺五亞甲基膦酸鈉、PEG/PPG-10/2丙基庚基醚、丁苯基甲基丙醛、聚乙烯基吡啶-N-氧化物、山梨醇、甘油、乙醇胺、氫氧化鈉、α-異甲基紫羅蘭酮、蛋白酶、氯化鈣、香葉醇、芳樟醇、香茅醇、三丙二醇、糖苷酶、苯并異噻唑啉酮、二甲硅油、糖苷酶、乙酸鈉、纖維素酶、著色劑、硬脂酸甘油酯、羥乙基纖維素、二氧化硅。

碧浪Actilift彩色&風(fēng)格組合物,新包裝

成分:水、月桂醇聚醚硫酸鈉、丙二醇、C14-C15 Pareth-7、檸檬酸鈉、棕櫚仁酸鈉、醇、甲酸鈉、硫酸化乙氧基化六亞甲基二胺季銨化物、氫氧化鈉、香料、聚乙烯基吡啶-N-氧化物、山梨醇、氯化鈣、蛋白酶、甘油、葡糖苷酶、糖苷酶、乙酸鈉、著色劑、纖維素酶。

碧浪Actilift白色&彩色酷潔組合物,新包裝

成分:水、月桂醇聚醚硫酸鈉、丙二醇、C14-C15 Pareth-7、檸檬酸鈉、棕櫚仁酸鈉、醇、甲酸鈉、硫酸化乙氧基化六亞甲基二胺季銨化物、氫氧化鈉、香料、山梨醇、氯化鈣、蛋白酶、甘油、葡糖苷酶、糖苷酶、乙酸鈉、著色劑、纖維素酶。

碧浪靈敏性白色與彩色衣物洗滌劑組合物

成分:水、月桂醇聚醚硫酸鈉、丙二醇、C14-C15 Pareth-7、檸檬酸鈉、棕櫚仁酸鈉、醇、甲酸鈉、硫酸化乙氧基化六亞甲基二胺季銨化物、氫氧化鈉、山梨醇、氯化鈣、蛋白酶、甘油、糖苷酶、乙酸鈉、著色劑、纖維素酶、二氧化硅。

碧浪Actilift組合物,普通

水、十二烷基苯磺酸鈉、C14-C15 Pareth-7、檸檬酸鈉、丙二醇、棕櫚仁 酸鈉、月桂醇醚硫酸鈉、MEA十二烷基苯磺酸鹽、硫酸化乙氧基化六亞甲基二胺季銨化物、枯烯磺酸鈉、香料、PEG/乙酸乙烯酯共聚物、甲酸鈉、C12-C14 Pareth-7、氫化蓖麻油、二亞乙基三胺五亞甲基膦酸鈉、PEG/PPG-10/2丙基庚基醚、丁苯基甲基丙醛、熒光增亮劑9、山梨醇、甘油、乙醇胺、氫氧化鈉、α-異甲基紫羅蘭酮、蛋白酶、氯化鈣、香葉醇、芳樟醇、香茅醇、三丙二醇、氯化鈉、糖苷酶、苯并異噻唑啉酮、二甲硅油、糖苷酶、乙酸鈉、纖維素酶、著色劑、硬脂酸甘油酯、羥乙基纖維素、二氧化硅。

寶瑩小&強(qiáng)大洗滌劑組合物(液體)

成分:15%-30%陰離子表面活性劑、非離子型表面活性劑、5%-15%皂、<5%聚羧酸酯、香料、磷酸鹽、光學(xué)增亮劑

Fairy非生物制品組合物(液體)

成分:15%-30%陰離子表面活性劑、5%-15%非離子表面活性劑、肥皂、苯并異噻唑啉酮、甲基異噻唑啉酮、香料

標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑T組合物(粉末)

成分:11%LAS、2%AS/AEOS、2%肥皂、3%AEO、15.15%碳酸鈉、3%硅酸鈉、18.75%沸石、0.15%螯合劑、2%檸檬酸鈉、1.65%AA/MA共聚物、2.5%CMC和0.5%SRP(所有的百分?jǐn)?shù)都是w/w)。

標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑X組合物(粉末)

成分:16.5%LAS、15%沸石、12%二硅酸鈉、20%碳酸鈉、1%sokalan、35.5%硫酸鈉(所有的百分?jǐn)?shù)都是w/w)。

碧浪Actilif組合物(粉末)

成分:15%-30%陰離子表面活性劑、<5%非離子表面活性劑、磷酸鹽、聚羧酸鹽、沸石;酶、香料、己基肉桂醛。

寶瑩Megaperls組合物(粉末)

成分:以下的15%-30%:陰離子表面活性劑、基于氧的漂白劑和沸石,以下的少于5%:非離子表面活性劑、磷酸鹽、聚羧酸鹽、肥皂、另外成分:香料、己基肉桂醛、水楊酸芐酯、芳樟醇、光學(xué)增亮劑、酶和香茅醇。

嘉盛液體,原版:

成分:水、醇乙氧基硫酸鹽、二乙二醇、醇乙氧化物、乙醇胺、直鏈烷基苯磺酸鹽、脂肪酸鈉、聚乙烯亞胺乙氧基化物、檸檬酸、硼砂、枯烯磺酸鈉、丙二醇、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、二丙乙基四氨、氫氧化鈉、甲酸鈉、甲酸鈣、二甲硅油、淀粉酶、蛋白酶、LiquitintTM、氫化蓖麻油、香味。

汰漬液體,原版:

成分:線形烷基苯磺酸酯、丙二醇、檸檬酸、氫氧化鈉、硼砂、乙醇胺、乙醇、醇硫酸鹽、聚乙烯亞胺乙氧基化物、脂肪酸鈉、乙氧基硫酸二季 銨鹽、蛋白酶、二乙二醇、月桂醇聚醚-9、烷基二甲胺氧化物、香味、淀粉酶、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、DTPA、甲酸鈉、甲酸鈣、聚乙二醇4000、甘露聚糖酶、LiquitintTM藍(lán)、二甲硅油。

液體汰漬,自由和溫和型:水、醇乙氧基硫酸鈉、丙二醇、硼砂、乙醇、線形烷基苯磺酸鈉、鹽、聚乙烯亞胺乙氧基化物、二乙二醇、反式硫酸化和乙氧基化的六亞甲基二胺、醇乙氧化物、線形烷基苯磺酸酯、MEA鹽、甲酸鈉、烷基硫酸鈉、DTPA、氧化胺、甲酸鈣、二氨基二苯乙烯二鈉、二磺酸鹽、淀粉酶、蛋白酶、二甲硅油、苯并異噻唑啉酮

汰漬冷水液體,清香型:水、醇乙氧基硫酸酯、線形烷基苯磺酸酯、二乙二醇、丙二醇、乙醇胺、檸檬酸、硼砂、醇硫酸鹽、氫氧化鈉、聚乙烯亞胺、乙氧基化物、脂肪酸鈉、乙醇、蛋白酶、月桂醇聚醚-9、乙氧基硫酸二季銨鹽、月桂基胺氧化物、異丙苯鈉、磺酸鹽、香味、DTPA、淀粉酶、二鈉、二氨基二苯乙烯、二磺酸鹽、甲酸鈉、二苯乙烯基聯(lián)苯基二磺酸二鈉、甲酸鈣、聚乙二醇4000、甘露聚糖酶、果膠酶、LiquitintTM藍(lán)、二甲硅油

汰漬TOTALCARETM液體,冷棉:水、醇乙氧基硫酸酯、丙二醇、脂肪酸鈉、月桂基三甲基氯化銨、乙醇、氫氧化鈉、枯烯磺酸鈉、檸檬酸、乙醇胺、二乙二醇、聚醚硅氧烷、硼砂、香味、聚乙烯亞胺乙氧基化物、蛋白酶、月桂醇聚醚-9、

DTPA、聚丙烯酰胺季銨鹽氯化物、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、甲酸鈉、LiquitintTM橙、二丙基乙四胺、二甲硅油、纖維素酶。

液體汰漬加漂白劑AlternativeTM,生動(dòng)白和鮮艷、最初以及清潔微風(fēng):水、醇乙氧基硫酸鈉、烷基硫酸鈉、MEA檸檬酸、線形烷基苯磺酸酯、MEA鹽、丙二醇、二乙二醇、聚乙烯亞胺乙氧基化物、乙醇、脂肪酸鈉、乙醇胺、月桂基胺氧化物、硼砂、月桂醇聚醚-9、DTPA、枯烯磺酸鈉、甲酸鈉、甲酸鈣、線形烷基苯磺酸酯、鈉鹽、醇硫酸鹽、氫氧化鈉、乙氧基硫酸二季銨鹽、香味、淀粉酶、蛋白酶、甘露聚糖酶、果膠酶、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、苯并異噻唑啉酮、LiquitintTM藍(lán)、二甲硅油、二丙基乙四胺。

液體汰漬HE,原味:水、醇乙氧基硫酸鈉、MEA檸檬酸、烷基硫酸鈉、醇乙氧化物、線形烷基苯磺酸酯、MEA鹽、脂肪酸鈉、聚乙烯亞胺乙氧基化物、二乙二醇、丙二醇、乙氧基硫酸二季銨鹽、硼砂、聚乙烯亞胺、乙氧基化物丙氧基化物、乙醇、枯烯磺酸鈉、香味、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、甘露聚糖酶、纖維素酶、淀粉酶、甲酸鈉、甲酸鈣、月桂基胺氧化物、LiquitintTM藍(lán)、二甲硅油/聚二甲基硅酮。

汰漬TOTALCARE HE液體,新生雨潤(rùn)(renewing Rain):水、醇乙氧基硫酸酯、線形烷基苯磺酸酯、醇乙氧化物、檸檬酸、乙醇胺、脂肪酸鈉、二乙二醇、丙二醇、氫氧化鈉、硼砂、聚乙烯亞胺乙氧基化物、聚醚硅氧 烷、乙醇、蛋白酶、枯烯磺酸鈉、乙氧基硫酸二季銨鹽、月桂醇聚醚-9、香味、淀粉酶、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、二苯乙烯基聯(lián)苯基二磺酸二鈉、甲酸鈉、甲酸鈣、甘露聚糖酶、LiquitintTM橙、二甲硅油、聚丙烯酰胺季銨鹽氯化物、纖維素酶、二丙基乙四胺。

汰漬液體HE自由:水、醇乙氧基硫酸酯、二乙二醇、單乙醇胺檸檬酸、甲酸鈉、丙二醇、線形烷基苯磺酸酯、乙醇胺、乙醇、聚乙烯亞胺乙氧基化物、淀粉酶、苯并異噻唑啉、硼砂、甲酸鈣、檸檬酸、乙二烯三胺五乙酸鈉、二甲硅油、乙氧基硫酸二季銨鹽、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、月桂醇聚醚-9、甘露聚糖酶、蛋白酶、枯烯磺酸鈉、脂肪酸鈉。

汰漬冷水HE液體,清香型:水、醇乙氧基硫酸酯、MEA檸檬酸、醇硫酸鹽、醇乙氧化物、線形烷基苯磺酸酯MEA、脂肪酸鈉、聚乙烯亞胺乙氧基化物、二乙二醇、丙二醇、乙氧基硫酸二季銨鹽、硼砂、聚乙烯亞胺乙氧基化物丙氧基化物、乙醇、枯烯磺酸鈉、香味、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、蛋白酶、甘露聚糖酶、纖維素酶、淀粉酶、甲酸鈉、甲酸鈣、月桂基胺氧化物、LiquitintTM藍(lán)、二甲硅油。

汰漬冷水HE自由液體:水、醇乙氧基硫酸鈉、MEA檸檬酸、線形烷基苯磺酸酯:鈉鹽、醇乙氧化物、線形烷基苯磺酸酯:MEA鹽、脂肪酸鈉、聚乙烯亞胺乙氧基化物、二乙二醇、丙二醇、乙氧基硫酸二季銨鹽、硼砂、蛋白酶、聚乙烯亞胺乙氧基化物丙氧基化物、乙醇、枯烯磺酸鈉、淀粉酶、檸檬酸、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、甲酸鈉、甲酸鈣、二甲硅油。

汰漬簡(jiǎn)單潔凈與清新:水、醇乙氧化物硫酸鹽、線形烷基苯磺酸鈉/Mea鹽、丙二醇、二乙二醇、甲酸鈉、乙醇、硼砂、脂肪酸鈉、香味、月桂基胺氧化物、DTPA、聚乙烯胺乙氧基化物、甲酸鈣、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、二甲硅油、四胺、LiquitintTM藍(lán)。

汰漬艙,海霧,神秘森林,春天牧場(chǎng):線形烷基苯磺酸酯、C12-16 Pareth-9、丙二醇、醇乙氧基硫酸酯、水、聚乙烯亞胺乙氧基化物、甘油、脂肪酸鹽、PEG-136聚乙酸乙烯酯、乙二胺琥珀酸鹽、單乙醇胺檸檬酸、亞硫酸氫鈉、乙二烯三胺五乙酸鈉、二苯乙烯基聯(lián)苯基二磺酸二鈉、甲酸鈣、甘露聚糖酶、木葡聚糖酶、甲酸鈉、氫化蓖麻油、natalase、染料、termamyl、枯草桿菌蛋白酶、苯并異噻唑啉、香料。

汰漬去污筆(Tide to Go):去離子水、二丙二醇丁基醚、烷基硫酸鈉、過(guò)氧化氫、乙醇、硫酸鎂、烷基二甲基氧化胺、檸檬酸、氫氧化鈉、三甲氧基苯甲酸、香味。

汰漬污漬釋放液體:水、烷基乙氧基化物、直鏈烷基苯磺酸鹽、過(guò)氧化氫、乙氧基硫酸二季銨鹽、乙醇胺、二苯乙烯基聯(lián)苯基二磺酸二鈉、四丁基乙叉基雙酚、F&DC黃3、香味。

汰漬污漬釋放粉末:過(guò)碳酸鈉、硫酸鈉、碳酸鈉、鋁硅酸鈉、壬酰氧基苯磺酸鹽、聚丙烯酸鈉、水、烷基苯磺酸鈉、DTPA、聚乙二醇、棕櫚酸鈉、淀粉酶、蛋白酶、修飾的淀粉、FD&C藍(lán)1、香味。

汰漬污漬釋放,預(yù)處理器噴霧:

水、烷基乙氧基化物、MEA硼酸鹽、直鏈烷基苯磺酸鹽、丙二醇、乙氧基硫酸二季銨鹽、氯化鈣酶、蛋白酶、乙醇胺、苯并異噻唑啉酮、淀粉酶、檸檬酸鈉、氫氧化鈉、香味。

汰漬去污漬橡皮擦:水、烷基氧化胺、二丙二醇苯基醚、過(guò)氧化氫、檸檬酸、乙二胺二琥珀酸鈉鹽、烷基硫酸鈉、香味。

汰漬氧化加強(qiáng):

碳酸氫鈉、碳酸鈉、過(guò)碳酸鈉、醇乙氧化物、氯化鈉、馬來(lái)酸/丙烯酸共聚物、壬酰氧基苯磺酸鹽、硫酸鈉、著色劑、乙二烯三胺五乙酸鈉鹽、水合硅鋁酸鹽(沸石)、聚乙二醇、烷基苯磺酸鈉、棕櫚酸鈉、淀粉、水、香味。

汰漬污漬釋放加強(qiáng)雙重Pac:

聚乙烯醇袋膜,其中有被包裝的液體部分和粉末部分:

液體成分:二丙二醇、乙氧基硫酸二季銨鹽、水、甘油、LiquitintTM橙,粉末成分:過(guò)碳酸鈉、壬酰氧基苯磺酸鹽、碳酸鈉、硫酸鈉、鋁硅酸鈉、聚丙烯酸鈉、烷基苯磺酸鈉、馬來(lái)酸/丙烯酸共聚物、水、淀粉酶、聚乙二醇、棕櫚酸鈉、修飾的淀粉、蛋白酶、甘油、DTPA、香味。

汰漬超級(jí)污漬釋放:水、醇乙氧基硫酸鈉、直鏈烷基苯磺酸鹽、鈉/MEA鹽、MEA檸檬酸、丙二醇、聚乙烯亞胺乙氧基化物、乙醇、二乙二醇、聚乙烯亞胺丙氧基乙氧基化物、脂肪酸鈉、蛋白酶、硼砂、枯烯磺酸鈉、DTPA、香味、淀粉酶、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、甲酸鈣、甲酸鈉、葡聚糖酶、二甲硅油、LiquitintTM藍(lán)、甘露聚糖酶。

具有少許粉狀洗滌劑的超級(jí)汰漬,四月清新/清潔微風(fēng)/四月精華:碳酸鈉、鋁硅酸鈉、硫酸鈉、線形烷基苯磺酸酯、膨潤(rùn)土、水、過(guò)碳酸鈉、聚丙烯酸鈉、硅酸鹽、烷基硫酸鹽、壬酰氧基苯酚酯磺酸、DTPA、聚乙二醇4000、硅膠、乙氧基化物、香味、聚氧化乙烯、棕櫚酸、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、蛋白酶、LiquitintTM紅、FD&C藍(lán)1、纖維素酶。

具有少許Downy清潔微風(fēng)的超級(jí)汰漬:水、醇乙氧基硫酸鈉、MEA檸檬酸、直鏈烷基苯磺酸鹽:鈉/MEA鹽s、丙二醇、聚乙烯亞胺乙氧基化物、乙醇、二乙二醇、聚乙烯亞胺、丙氧基乙氧基化物、乙氧基硫酸二季銨鹽、醇硫酸鹽、二甲硅油、香味、硼砂、脂肪酸鈉、DTPA、蛋白酶、亞硫酸氫鈉、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、淀粉酶、葡聚糖酶、蓖麻油、甲酸鈣、MEA、苯乙烯丙烯酯共聚物、甲酸鈉、LiquitintTM藍(lán)。

具有Downy陽(yáng)花的超級(jí)汰漬:水、醇乙氧基硫酸鈉、MEA檸檬酸、直鏈烷基苯磺酸鹽:鈉/MEA鹽、丙二醇、乙醇、二乙二醇、聚乙烯亞胺丙氧基乙氧基化物、聚乙烯亞胺乙氧基化物、醇硫酸鹽、二甲硅油、香味、硼砂、脂肪酸鈉、DTPA、蛋白酶、亞硫酸氫鈉、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、淀粉酶、蓖麻油、甲酸鈣、MEA、苯乙烯丙烯酯共聚物、丙銨丙酰胺、葡聚糖酶、甲酸鈉、LiquitintTM藍(lán)。

具有Downy四月清新/甜蜜夢(mèng)境的超級(jí)汰漬:水、醇乙氧基硫酸鈉、MEA檸檬酸、直鏈烷基苯磺酸鹽:鈉/MEA鹽、丙二醇、聚乙烯亞胺乙氧基化物、乙醇、二乙二醇、聚亞乙基亞胺丙氧基乙氧基化物、乙氧基硫酸二季銨鹽、醇硫酸鹽、二甲硅油、香味、硼砂、脂肪酸鈉、DTPA、蛋白酶、亞硫酸氫鈉、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、淀粉酶、葡聚糖酶、蓖麻油、甲酸鈣、MEA、苯乙烯丙烯酯共聚物、丙銨丙酰胺、甲酸鈉、LiquitintTM藍(lán)。

超級(jí)汰漬自由粉狀洗滌劑:碳酸鈉、鋁硅酸鈉、烷基硫酸鹽、硫酸鈉、線形烷基苯磺酸酯、水、聚丙烯酸鈉、硅酸鹽、乙氧基化物、過(guò)碳酸鈉、聚乙二醇4000、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、硅膠、纖維素酶。

超級(jí)汰漬粉狀洗滌劑,清潔微風(fēng)/春日薰衣草/森林泉:碳酸鈉、鋁硅酸鈉、硫酸鈉、線形烷基苯磺酸酯、烷基硫酸鹽、過(guò)碳酸鈉、水、聚丙烯酸鈉、硅酸鹽、壬酰氧基苯酚酯磺酸、乙氧基化物、聚乙二醇4000、香味、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、棕櫚酸、蛋白酶、硅膠、纖維素酶。

超級(jí)汰漬HE(高效率)粉狀洗滌劑,清潔微風(fēng):碳酸鈉、鋁硅酸鈉、硫酸鈉、線形烷基苯磺酸酯、水、壬酰氧基苯酚酯磺酸、烷基硫酸鹽、聚丙烯酸鈉、硅酸鹽、過(guò)碳酸鈉、乙氧基化物、聚乙二醇4000、香味、DTPA、棕櫚酸、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、蛋白酶、硅膠、纖維素酶。

超級(jí)汰漬冷水粉狀洗滌劑,清香型:碳酸鈉、鋁硅酸鈉、硫酸鈉、過(guò)碳酸鈉、烷基硫酸鹽、線形烷基苯磺酸酯、水、壬酰氧基苯酚酯磺酸、聚丙烯酸鈉、硅酸鹽、乙氧基化物、聚乙二醇4000、DTPA、香味、Natalase、棕櫚酸、蛋白酶、二鈉、二氨基二苯乙烯二磺酸鹽、FD&C藍(lán)1、硅膠、纖維素酶、烷基醚硫酸鹽。

具有漂白劑粉狀洗滌劑的超級(jí)汰漬,清潔微風(fēng):碳酸鈉、鋁硅酸鈉、硫酸鈉、線形烷基苯磺酸酯、過(guò)碳酸鈉、壬酰氧基苯酚酯磺酸、烷基硫酸鹽、水、硅酸鹽、聚丙烯酸鈉乙氧基化物、聚乙二醇4000、香味、DTPA、棕櫚酸、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、硅膠、FD&C藍(lán)1、纖維素酶、烷基醚硫酸鹽。

具有Febreeze FreshnessTM粉狀洗滌劑的超級(jí)汰漬,春日新生:

碳酸鈉、鋁硅酸鈉、硫酸鈉、線形烷基苯磺酸酯、過(guò)碳酸鈉、烷基硫酸鹽、水、聚丙烯酸鈉、硅酸鹽、壬酰氧基苯酚酯磺酸、乙氧基化物、聚乙二 醇4000、DTPA、香味、纖維素酶、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、硅膠、FD&C藍(lán)1。

具有Febreeze Freshness的液體汰漬加–運(yùn)動(dòng)HE活躍新鮮:

水、醇乙氧基硫酸鈉、MEA檸檬酸、線形烷基苯磺酸酯、鈉鹽、線形烷基苯磺酸酯:MEA鹽、醇乙氧化物、脂肪酸鈉、丙二醇、二乙二醇、聚乙烯亞胺乙氧基化物丙氧基化物、乙氧基硫酸二季銨鹽、乙醇、枯烯磺酸鈉、硼砂、香味、DTPA、硫酸氫鈉、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、甘露聚糖酶、纖維素酶、淀粉酶、甲酸鈉、甲酸鈣、月桂基胺氧化物、LiquitintTM藍(lán)、二甲硅油/聚二甲基硅酮。

汰漬加Febreeze Freshness春日新生:

水、醇乙氧基硫酸鈉、直鏈烷基苯磺酸鹽:鈉/MEA鹽、MEA檸檬酸、丙二醇、聚乙烯亞胺乙氧基化物、香味、乙醇、二乙二醇、聚乙烯亞胺丙氧基乙氧基化物、蛋白酶、醇硫酸鹽、硼砂、脂肪酸鈉、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、MEA、甘露聚糖酶、葡聚糖酶、甲酸鈉、二甲硅油、LiquitintTM藍(lán)、四胺。

具有Febreeze Freshness的液體汰漬加,運(yùn)動(dòng)HE勝利新鮮:水、醇乙氧基硫酸鈉、MEA檸檬酸、線形烷基苯磺酸酯、鈉鹽、線形烷基苯磺酸酯:MEA鹽、醇乙氧化物、脂肪酸鈉、丙二醇、二乙二醇、聚乙烯亞胺乙氧基化物丙氧基化物、乙氧基硫酸二季銨鹽、乙醇、枯烯磺酸鈉、硼砂、香味、DTPA、硫酸氫鈉、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、甘露聚糖酶、纖維素酶、淀粉酶、甲酸鈉、甲酸鈣、月桂基胺氧化物、LiquitintTM藍(lán)、二甲硅油/聚二甲基硅酮。

汰漬生動(dòng)白+鮮艷,原版:

碳酸鈉、鋁硅酸鈉、硫酸鈉、線形烷基苯磺酸酯、過(guò)碳酸鈉、壬酰氧基苯酚酯磺酸、烷基硫酸鹽、水、硅酸鹽、聚丙烯酸鈉乙氧基化物、聚乙二醇4000、香味、DTPA、棕櫚酸、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸鈉、硅膠、FD&C藍(lán)1、纖維素酶、烷基醚硫酸鹽。

HEY SPORT紡織品洗滌劑

水、十二烷基苯磺酸、月桂醇聚醚-11、peg-75羊毛脂、丙二醇、改性醇、大豆油酸鉀、氫氧化鉀、椰油兩性二乙酸二鈉、乙二胺三乙椰子烷基酰胺、香精、蓖麻醇酸鋅、氯化鈉、苯并異噻唑啉酮、甲基異噻唑啉酮、ci16255、苯甲醇。

命名為汰漬、嘉盛和Fairy的產(chǎn)品是由寶潔公司(Procter&Gamble)提供的可商購(gòu)產(chǎn)品。命名為寶瑩的產(chǎn)品是由聯(lián)合利華和漢高公司(Unilever and Henkel)提供的可商購(gòu)產(chǎn)品。命名為Hey Sport的產(chǎn)品是由Hey Sport提供的可商購(gòu)產(chǎn)品。

所有酶水平表達(dá)為rug活性酶蛋白/100g洗滌劑組合物。表面活性劑成分獲得自巴斯夫公司(BASF)、路德維希港、德國(guó)(Lutensol(R));殼牌化學(xué)公司(Shell Chemicals),倫敦,英國(guó);斯泰潘公司(Stepan),諾思菲爾德,III,美國(guó);亨斯曼公司(Huntsman),鹽湖城,猶他州,美國(guó);科萊恩公司(Clariant),蘇爾茨巴赫市,德國(guó)(Praepagen(R))。三聚磷酸鈉可以獲得自羅地亞公司(Rhodia)、巴黎、法國(guó)。沸石可以獲得自工業(yè)沸石(英國(guó))有限公司,格雷士,艾塞克斯,英國(guó)。檸檬酸和檸檬酸鈉可以獲得自永本茲勞爾公司(Jungbunzlauer),巴塞爾,瑞士。NOBS是壬?;u苯磺酸鈉,由伊士曼公司(Eastman),貝茨維爾,阿肯色州,美國(guó)。

TAED是四乙酰乙二胺,在科萊恩有限公司(Clariant GmbH),祖爾茨巴赫,德國(guó)的Peractive(R)品牌下提供。碳酸鈉和碳酸氫鈉可以獲得自索爾維公司(Solvay),布魯塞爾,比利時(shí)。聚丙烯酸酯、聚丙烯酸酯/馬來(lái)酸酯共聚物可以獲得自巴斯夫公司、路德維希港、德國(guó)。Repel-O-Tex(R)可以獲得自羅地亞公司(Rhodia)、巴黎、法國(guó)。Texcare(R)可以獲得自科萊恩公司,祖爾茨巴赫,德國(guó)。過(guò)碳酸鈉和碳酸鈉可以獲得自索爾維公司,休斯頓,德克薩斯州,美國(guó)。乙二胺-N,N’-二琥珀酸的Na鹽,(S,S)異構(gòu)體(EDDS)是通過(guò)聯(lián)合奧泰公司(Octel),埃爾斯米爾港,英國(guó)提供。羥基乙醇二磷酸鹽(HEDP)是由美國(guó)陶氏化學(xué)公司(Dow Chemical),米德蘭,密歇根州,美國(guó)。酶Savinase(R)、Savinase(R)Ultra、Stainzyme(R)Plus、Lipex(R)、Lipolex(R)、Lipoclean(R)、Celluclean(R)、Carezyme(R)、Natalase(R)、Stainzyme(R)、Stainzyme(R)Plus、Termamyl(R)、Termamyl(R)ultra、和 Mannaway(R)可以獲得自諾維信公司(Novozymes),巴格斯瓦德,丹麥。酶Purafect(R)、FN3、FN4和Optisize可以獲得自杰能科國(guó)際公司(Genencor International Inc.),帕洛阿爾托,加利福尼亞州,美國(guó)。直接紫9和99可以獲得自巴斯夫公司、路德維希港、德國(guó)。溶劑紫13可以獲得自寧波立興化工有限公司(Ningbo Lixing Chemical Co.,Ltd.),寧波,浙江,中國(guó)。增亮劑可以獲得自汽巴精化有限公司,巴塞爾,瑞士。

除非另外指明,所有百分比和比率都是按重量計(jì)計(jì)算。除非另外指明,所有百分比和比率都是基于總組合物計(jì)算。應(yīng)當(dāng)理解的是貫穿本說(shuō)明書給出的每一最大數(shù)值限度包括每一較低的數(shù)值限度,如同此類較低數(shù)值限度在此被明確寫出。貫穿本說(shuō)明書給出的每一最小數(shù)值限度將包括每一較高的數(shù)值限度,如同此類較高數(shù)值限度在此被明確寫出。本說(shuō)明書中所給出的每個(gè)數(shù)值范圍將包括落入在這樣更寬泛數(shù)值范圍內(nèi)的每一狹小的范圍,好像這樣狹小的數(shù)值范圍都在這里被書面表達(dá)了。

洗滌測(cè)定

Launder-O-Meter(LOM)模式洗滌系統(tǒng)

Launder-O-Meter(LOM)是中等規(guī)模標(biāo)準(zhǔn)洗滌系統(tǒng),它可以應(yīng)用于同時(shí)測(cè)試多達(dá)20種不同洗滌條件。LOM基本上是大型的具有20個(gè)封閉金屬燒杯在其中旋轉(zhuǎn)的溫度受控的水浴。每個(gè)燒杯構(gòu)成一個(gè)小的洗衣機(jī)并且在一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,每個(gè)試管將包含一種具有特定的有待測(cè)試的洗滌劑/酶系統(tǒng)連同在關(guān)于其進(jìn)行測(cè)試的弄臟的和未弄臟的織物。機(jī)械壓力由在水浴中旋轉(zhuǎn)的燒杯并且由包括在燒杯中的金屬球?qū)崿F(xiàn)。

LOM標(biāo)準(zhǔn)洗滌系統(tǒng)主要用于清潔劑和酶的中等規(guī)模測(cè)試,在例如歐洲洗滌條件下。在一個(gè)LOM實(shí)驗(yàn)中,如壓載物與污垢的比率和織物與洗滌液的比率的因素可以變化。因此,LOM提供了在小規(guī)模實(shí)驗(yàn)(如AMSA和微型洗滌)與在前面加載型洗滌機(jī)中的更費(fèi)時(shí)的全規(guī)模實(shí)驗(yàn)之間的聯(lián)系。

迷你Launder-O-Meter(迷你LOM)模式洗滌系統(tǒng)

迷你LOM是Launder-O-Meter(LOM)的修飾的迷你洗滌系統(tǒng),其是中等規(guī)模標(biāo)準(zhǔn)洗滌系統(tǒng),它可以應(yīng)用于同時(shí)測(cè)試多達(dá)20種不同洗滌條件。LOM基本上是大型的具有20個(gè)封閉金屬燒杯在其中旋轉(zhuǎn)的溫度受控的水浴。每個(gè)燒杯構(gòu)成一個(gè)小的洗衣機(jī)并且在一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,每個(gè)試管將包含一種具有特定的有待測(cè)試的洗滌劑/酶系統(tǒng)連同在關(guān)于其進(jìn)行測(cè)試的弄臟的和未弄臟的織物。機(jī)械壓力由在水浴中旋轉(zhuǎn)的燒杯并且由包括在燒杯中的金屬球?qū)崿F(xiàn)。

LOM標(biāo)準(zhǔn)洗滌系統(tǒng)主要用于清潔劑和酶的中等規(guī)模測(cè)試,在例如歐洲洗滌條件下。在一個(gè)LOM實(shí)驗(yàn)中,如壓載物與污垢的比率和織物與洗滌液的比率的因素可以變化。因此,LOM提供了在小規(guī)模實(shí)驗(yàn)(如AMSA和微型洗滌)與在前面加載型洗滌機(jī)中的更費(fèi)時(shí)的全規(guī)模實(shí)驗(yàn)之間的聯(lián)系。

在迷你LOM中,洗滌是在置于斯圖爾特(Stuart)旋轉(zhuǎn)器中的50ml試管中進(jìn)行的。

酶測(cè)定

測(cè)定I

DNA酶活性的檢測(cè)

在具有甲基綠(BD公司,富蘭克林湖,新澤西州,美國(guó))的DNA酶測(cè)試瓊脂上確定DNA酶活性。簡(jiǎn)言之,將21g瓊脂溶于500ml水中,并且然后在121℃下高壓滅菌15分鐘。將高壓蒸汽處理的瓊脂在水浴中溫和至48℃,并且將20ml的瓊脂倒入培養(yǎng)皿并且允許在室溫下通過(guò)孵育來(lái)固化。在固化的瓊脂平板上,添加5μl的酶溶液,并且DNA酶活性被觀察為斑點(diǎn)酶溶液周圍的無(wú)色區(qū)域。

測(cè)定II

使用電子鼻分析紡織品上的E-2-壬烯醛。

測(cè)試紡織品上的惡臭的存在的一種方式是通過(guò)使用作為惡臭的標(biāo)志物的E-2-壬烯醛,因?yàn)榇嘶衔镆鹨挛锷系膼撼簟?/p>

將E-2-壬烯醛的溶液添加至5cm x 5cm紡織品小塊布樣上并且將該小塊布樣放入20mL玻璃小瓶中用于GC分析并且蓋住該小瓶。在40℃下孵育20分鐘后,在來(lái)自法國(guó)阿爾法M.O.S.(Alpha M.O.S.)的Heracles II電子鼻中分析來(lái)自加帽小瓶的5mL頂部空間(具有2個(gè)FID的雙柱氣相色譜儀,柱1:MXT5并且柱2:MXT1701)。

實(shí)例

實(shí)例1

DNA弄臟的紡織品的制備

為了制備DNA弄臟的紡織品小塊布樣(稱作“DNA小塊布樣“),將DNA溶解于無(wú)菌MilliQ水以制成5.0mg/mL溶液并于5℃下放入冰箱中過(guò)夜,以使DNA溶解。在無(wú)菌MilliQ水中將DNA溶液稀釋至例如0.5、1.0或2.5mg/mL。在無(wú)菌皮氏培養(yǎng)皿中放入多達(dá)6個(gè)直徑為2cm的圓的紡織品小塊布樣并且向每個(gè)紡織品小塊布樣上施加選定濃度的100μL DNA溶液并且將它們?cè)诓患由w的情況下留在皮氏培養(yǎng)皿中過(guò)夜或直到干燥。為了向洗滌的DNA小塊布樣上再施加DNA,直到等到洗滌的DNA小塊布樣干燥并且向每個(gè)紡織品小塊布樣上施加選定濃度的100μL DNA溶液并且將它們?cè)诓患由w的情況下留在皮氏培養(yǎng)皿中過(guò)夜或直到干燥。

MiniLOM洗滌:

通過(guò)將3.00mL的0.713mol/L CaCl2、1.50mL的0.357mol/L MgCl2和0.3371g的NaHCO3吸移進(jìn)1L量筒中,用MilliQ水填滿至1L并攪拌以溶解來(lái)制備1L 15°dH水。稱取3.33g的標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑A并溶解于水中。稱取0.70g來(lái)自德 國(guó)wfk Testgewebe有限公司的色素污垢(Pigment Soil)acc.至ILG 09V,并且與洗滌劑一起溶解于水中,以制備臟的洗滌劑溶液。在每個(gè)50mL塑料燒杯(Falcon或NUNC離心管)中放入5個(gè)DNA小塊布樣和5個(gè)干凈的示蹤小塊布樣。向每個(gè)燒杯中添加10mL的臟的洗滌劑溶液。在所有燒杯上都加上蓋子,很好地振蕩它們,以保證小塊布樣良好分布。將燒杯裝在Mini-Laundr-O-Meter(一種斯圖爾特管旋轉(zhuǎn)器SB3)中并且在30℃下于20rpm下洗滌60分鐘。洗滌后,將旋轉(zhuǎn)器放在室溫下,同時(shí)將來(lái)自一個(gè)燒杯的小塊布樣每次用15°dH水沖洗并放回旋轉(zhuǎn)器中。在20mL 15°dH水中將每個(gè)燒杯沖洗2次。最后一次沖洗后,將小塊布樣在濾紙上干燥過(guò)夜或直到干燥(在22℃下的25%相對(duì)濕度)。如果重復(fù)洗滌,那么如上所述將DNA重新應(yīng)用于干DNA小塊布樣上,并重新使用這些DNA小塊布樣和示蹤小塊布樣再次進(jìn)行洗滌。

結(jié)果

此實(shí)例示出,當(dāng)小塊布樣是干燥的時(shí),紡織品上DNA的存在使得紡織品在洗滌后是靜電的。洗滌前置于紡織品上的DNA的濃度越高,洗滌后當(dāng)小塊布樣干燥時(shí)它們帶得靜電越多。在進(jìn)行第二次洗滌之前,將DNA重新應(yīng)用于DNA小塊布樣,以模擬由于洗滌之間的磨損而變臟的小塊布樣。

如以上所述地進(jìn)行DNA小塊布樣的制備和MiniLOM洗滌。將來(lái)自西格瑪奧德里奇公司(Sigma Aldrich)的鮭魚睪丸D1626的脫氧核糖核酸鈉用作DNA來(lái)源。將來(lái)自德國(guó)wfk Testgewebe有限公司的預(yù)洗滌的(以下所述的)聚酯WFK 30A用作紡織品。始終戴著手套或使用鑷子處理所有小塊布樣。如下表1所述地設(shè)置實(shí)驗(yàn)。

在全規(guī)模洗滌中制備預(yù)洗滌的紡織品:首先進(jìn)行紡織品的預(yù)洗以從紡織品中去除淀粉、羧甲基纖維素(CMC)和其它添加劑。將淀粉酶、纖維素酶和蛋白酶添加至預(yù)洗滌中以去除這些添加劑。

將紡織品在來(lái)自德國(guó)wfk Testgewebe有限公司的86.1g/洗滌劑W-ECE-2中洗滌三次,使用具有15°dH水硬度(在1L去離子水中的3.00mL的0.713mol/L CaCl2、1.50mL的0.357mol/L MgCl2和0.3371g的NaHCO3)并包含以下各酶的水:

在Miele Softtronic W2445洗滌機(jī)中,在40℃下,使用標(biāo)準(zhǔn)洗滌程序用13-14升水對(duì)3kg紡織品進(jìn)行洗滌。第三次洗滌后將紡織品在干燥機(jī)中干燥。

表1

在第一次洗滌后,將這些小塊布樣留在濾紙上干燥。當(dāng)干燥時(shí),將這些小塊布樣轉(zhuǎn)移到無(wú)菌的聚苯乙烯培養(yǎng)皿(NuncTM#254925)中并且用蓋子覆蓋。出人意料地注意到,來(lái)自燒杯1至4的在洗滌之前先前已經(jīng)有DNA施加到它們中的小塊布樣由于靜電而粘附到蓋子上。小塊布樣的DNA濃度越高,粘附到蓋子上的5塊小塊布樣中的小塊布樣越多并且小塊布樣粘附到蓋子上越強(qiáng)。不具有DNA(燒杯5)的紡織品一點(diǎn)也不粘附到蓋子上。

使用以上表1中的第二次洗滌下的DNA濃度如以上所述地將DNA重新應(yīng)用至這些DNA小塊布樣上。

在第二次洗滌后,將這些小塊布樣留在濾紙上干燥。當(dāng)干燥時(shí),將這些小塊布樣轉(zhuǎn)移到無(wú)菌的聚苯乙烯培養(yǎng)皿(NuncTM#254925)中并且用蓋子覆蓋。再次注意到,來(lái)自燒杯1至4的在洗滌之前先前已經(jīng)有DNA施加到它們中的小塊布樣由于靜電而粘附到蓋子上。小塊布樣的DNA濃度越高,粘附到蓋子上的5塊小塊布樣中的小塊布樣越多并且小塊布樣粘附到蓋子上越強(qiáng)。再次,不具有DNA(燒杯5)的紡織品一點(diǎn)也不粘附到蓋子上。

實(shí)例2

如下,通過(guò)實(shí)例說(shuō)明本發(fā)明。在下面的實(shí)例中,所有百分含量均以重量給出。在添加和不添加DNA酶的情況下制備織物柔軟組合物A、B和C。以濃度0.0004ppm、0.004ppm、0.04ppm以及0.5ppm添加DNA酶(SEQ ID NO:2)。

稀釋液體形式的織物柔軟組合物A由7%Esterquat溶液、0.5%絲蛋白和1%香料組合物以及0.01%著色劑組成。該組合物還包含以補(bǔ)足100%的量存在 的的具有商品名為Nano-Silver和水的20ppm納米粒子銀制劑。根據(jù)具體制成的香味,香料組合物可以選自與組合物相容的任選的香料產(chǎn)品。而且,所使用的著色劑取決于織物軟化劑的所希望的顏色。

濃縮物形式的織物柔軟組合物B由50%Esterquat溶液、4%羊絨蛋白和5%香料組合物以及0.1%重量著色劑組成。該組合物還包含以補(bǔ)足100%的量存在的具有商品名為Nano-Silver和水的1000ppm納米粒子銀制劑。根據(jù)具體制成的香味,香料組合物可以選自與組合物相容的任選的香料產(chǎn)品。而且,所使用的著色劑取決于織物軟化劑的所希望的顏色。

稀釋液體形式的織物柔軟組合物C由7%Esterquat溶液、0.5%羊毛脂和1%香氣/香料組合物以及0.01%著色劑組成。該組合物還包含以補(bǔ)足100%的量存在的25ppm納米粒子二氧化鈦和水。根據(jù)具體制成的香味,香料組合物可以選自與組合物相容的任選的香料產(chǎn)品。而且,所使用的著色劑取決于織物軟化劑的所希望的顏色。

實(shí)例3

以下是本發(fā)明的織物護(hù)理組合物的非限制性實(shí)例。

在添加和不添加DNA酶的情況下制備織物柔軟組合物I至IX。以濃度0.0004ppm、0.004ppm、0.04ppm以及0.5ppm添加DNA酶(SEQ ID NO:2)。

a)WO 2011/011247的權(quán)利要求1中描述的單烴基酰氨基季銨化合物,其中二烴基酰胺基復(fù)合物具有:C12-C14陰離子組分和具有C16-C18的R1的陽(yáng)離子組分。

b)WO 2011/011247的權(quán)利要求1中描述的單烴基酰氨基季銨化合物,其中二烴基酰胺基復(fù)合物具有:C6-C8陰離子組分和具有C16-C18的R1的陽(yáng)離子組分

c)WO 2011/011247的權(quán)利要求1中描述的單烴基酰氨基季銨化合物,其中二烴基酰胺基復(fù)合物具有:C12-C14陰離子組分和具有C8-C12的R1的陽(yáng)離子組分

d)陽(yáng)離子高直鏈淀粉玉米淀粉,可獲得自National Starch公司,商品名HYLON VII(R)、水解陽(yáng)離子玉米淀粉(Hydrolyzed Cationic Maize Starch)、陽(yáng)離子蠟狀玉米淀粉(Cationic Waxy Maize starch)下,美國(guó)專利公開2007/0219111 A1,第19段。

f)來(lái)自Wacker公司的SE39

g)二亞乙基三胺五乙酸。

h)CG獲得自羅門哈斯公司(Rohm and Haas Co.)。“PPM”是“每百萬(wàn)中的份數(shù)”。

i)甘油醛

j)可獲得自道康寧公司(Dow Corning Corp.),在商品名DC 2310下的硅膠消泡劑。

實(shí)例4

用于擦拭鏡片的預(yù)潤(rùn)濕的擦試巾

制備包含水/異丙醇和月桂醇醚硫酸鈉的溶液。以濃度0.0004ppm、0.004ppm、0.04ppm以及0.5ppm添加DNA酶(SEQ ID NO:2)。將由無(wú)紡紡織品組成的擦拭巾浸入溶液中。

擦拭巾便于清潔污濁和油膩的鏡片。除了清潔鏡片之外,擦拭巾還可以從鏡片去除靜電荷。擦拭巾可以單獨(dú)包裝,從而方便使用。擦拭巾可用于眼鏡、太陽(yáng)鏡、護(hù)目鏡、手機(jī)(cell)/智能手機(jī)屏幕、電腦/筆記本電腦屏幕以及更多。

序列表

<110> 諾維信公司(Novozymes A/S)

<120> 用于減少靜電的具有DNA酶活性的多肽

<130> 12949-WO-PCT

<140> -

<141> 2015-05-28

<160> 8

<170> PatentIn版本3.5

<210> 1

<211> 910

<212> DNA

<213> 米曲霉

<220>

<221> 外顯子

<222> (1)..(242)

<220>

<221> 內(nèi)含子

<222> (243)..(308)

<220>

<221> 外顯子

<222> (309)..(494)

<220>

<221> 內(nèi)含子

<222> (495)..(555)

<220>

<221> 外顯子

<222> (556)..(714)

<220>

<221> 內(nèi)含子

<222> (715)..(765)

<220>

<221> 外顯子

<222> (766)..(907)

<220>

<221> 內(nèi)含子

<222> (908)..(910)

<400> 1

atg cag ctt act aag tcc ctc ctg gta ttc gcg ctt tac atg ttt ggc 48

Met Gln Leu Thr Lys Ser Leu Leu Val Phe Ala Leu Tyr Met Phe Gly

1 5 10 15

act cag cac gtt cta gct gtg cct gtc aat ccc gag cct gat gct acg 96

Thr Gln His Val Leu Ala Val Pro Val Asn Pro Glu Pro Asp Ala Thr

20 25 30

agc gtc gaa aat gtt gcc ctt aaa aca ggc agc ggt gat agc cag agc 144

Ser Val Glu Asn Val Ala Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser

35 40 45

gat ccc atc aag gcg gac ttg gag gtc aaa ggc caa agt gct ttg cct 192

Asp Pro Ile Lys Ala Asp Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro

50 55 60

ttc gac gtc gac tgc tgg gct atc ctg tgc aag ggc gcc ccg aat gtc 240

Phe Asp Val Asp Cys Trp Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val

65 70 75 80

ct gtatgtcttc ctttattgaa gctcttgatg tggcttgtat gtttgactaa 292

Leu

tatatcgcac ccttag g cag cgc gtg aat gaa aag acg aaa aat agt aat 342

Gln Arg Val Asn Glu Lys Thr Lys Asn Ser Asn

85 90

cgc gat cgg agc ggt gcg aac aaa ggg cct ttc aaa gat cct cag aaa 390

Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly Pro Phe Lys Asp Pro Gln Lys

95 100 105

tgg ggc atc aaa gcc ctt cca cct aag aat cca tcc tgg agc gca caa 438

Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys Asn Pro Ser Trp Ser Ala Gln

110 115 120

gac ttc aaa tca ccc gaa gaa tac gca ttt gcg tct tcc ctt caa ggc 486

Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala Phe Ala Ser Ser Leu Gln Gly

125 130 135 140

gga acc aa gtatgctaag atcatcactg cttcaatcaa tgtgttgtta 534

Gly Thr Asn

gctgactccg atgtgaccaa g t gcc atc cta gcg ccc gtc aac ctc gct tct 586

Ala Ile Leu Ala Pro Val Asn Leu Ala Ser

145 150

cag aac tcc caa ggc ggc gtc ttg aac ggt ttc tac tcg gcg aac aaa 634

Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr Ser Ala Asn Lys

155 160 165

gta gca caa ttt gat cct agc aag ccc caa cag aca aag gga aca tgg 682

Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr Lys Gly Thr Trp

170 175 180 185

ttt cag atc act aag ttc aca ggt gca gct gg gtaagaactt ccagtaccat 734

Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly

190 195

ggtcatatgc aatttactaa gaaaatacta g t cct tac tgc aag gct ctg ggg 787

Pro Tyr Cys Lys Ala Leu Gly

200

agt aat gat aag agt gtg tgc gat aag aac aag aat att gca ggg gac 835

Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn Lys Asn Ile Ala Gly Asp

205 210 215

tgg ggc ttc gac ccg gcg aaa tgg gca tat cag tat gat gag aag aat 883

Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr Gln Tyr Asp Glu Lys Asn

220 225 230 235

aac aag ttc aac tat gtt ggt aag taa 910

Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys

240

<210> 2

<211> 243

<212> PRT

<213> 米曲霉

<220>

<221> 信號(hào)肽

<222> (1)..(22)

<220>

<221> 前肽

<222> (23)..(37)

<220>

<221> 肽

<222> (38)..(243)

<400> 2

Met Gln Leu Thr Lys Ser Leu Leu Val Phe Ala Leu Tyr Met Phe Gly

1 5 10 15

Thr Gln His Val Leu Ala Val Pro Val Asn Pro Glu Pro Asp Ala Thr

20 25 30

Ser Val Glu Asn Val Ala Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser

35 40 45

Asp Pro Ile Lys Ala Asp Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro

50 55 60

Phe Asp Val Asp Cys Trp Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val

65 70 75 80

Leu Gln Arg Val Asn Glu Lys Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser

85 90 95

Gly Ala Asn Lys Gly Pro Phe Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys

100 105 110

Ala Leu Pro Pro Lys Asn Pro Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser

115 120 125

Pro Glu Glu Tyr Ala Phe Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala

130 135 140

Ile Leu Ala Pro Val Asn Leu Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val

145 150 155 160

Leu Asn Gly Phe Tyr Ser Ala Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser

165 170 175

Lys Pro Gln Gln Thr Lys Gly Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr

180 185 190

Gly Ala Ala Gly Pro Tyr Cys Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser

195 200 205

Val Cys Asp Lys Asn Lys Asn Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro

210 215 220

Ala Lys Trp Ala Tyr Gln Tyr Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr

225 230 235 240

Val Gly Lys

<210> 3

<211> 204

<212> PRT

<213> 米曲霉

<220>

<221> 肽

<222> (1)..(204)

<400> 3

Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser Asp Pro Ile Lys Ala Asp Leu

1 5 10 15

Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro Phe Asp Val Asp Cys Trp Ala

20 25 30

Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val Leu Gln Arg Val Asn Glu Lys

35 40 45

Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly Pro Phe

50 55 60

Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys Asn Pro

65 70 75 80

Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala Phe Ala

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala Ile Leu Ala Pro Val Asn Leu

100 105 110

Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr Ser Ala

115 120 125

Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr Lys Gly

130 135 140

Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly Pro Tyr Cys

145 150 155 160

Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn Lys Asn

165 170 175

Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr Gln Tyr

180 185 190

Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys

195 200

<210> 4

<211> 868

<212> DNA

<213> 哈茨木霉

<220>

<221> 外顯子

<222> (1)..(75)

<220>

<221> 內(nèi)含子

<222> (76)..(154)

<220>

<221> 外顯子

<222> (155)..(288)

<220>

<221> 內(nèi)含子

<222> (289)..(362)

<220>

<221> 外顯子

<222> (363)..(519)

<220>

<221> 內(nèi)含子

<222> (520)..(615)

<220>

<221> 外顯子

<222> (616)..(867)

<400> 4

atg aag ctg tcc atc tct gtc gct ctt act tcg gcc atc gcg gtt ctc 48

Met Lys Leu Ser Ile Ser Val Ala Leu Thr Ser Ala Ile Ala Val Leu

1 5 10 15

gcc gcc ccg gct cct atg cct aca ccg gtatgtagca tcaatgcaac 95

Ala Ala Pro Ala Pro Met Pro Thr Pro

20 25

atgacataac ttgtatctcg actatatatc agactggcta atgcttcaac tcattacag 154

ccc ggt att ccc acg gaa agc agc gcc aga acc caa ctt gcc ggc ctg 202

Pro Gly Ile Pro Thr Glu Ser Ser Ala Arg Thr Gln Leu Ala Gly Leu

30 35 40

act gtt gcc gtt gct ggc tct gga act ggt tac tcc cgc gac ctg ttt 250

Thr Val Ala Val Ala Gly Ser Gly Thr Gly Tyr Ser Arg Asp Leu Phe

45 50 55

ccc act tgg gat gcc atc tct ggt aac tgc aac gct cg gtatgataac 298

Pro Thr Trp Asp Ala Ile Ser Gly Asn Cys Asn Ala Arg

60 65 70

atcctaggac ctttcaagct tcggaaatac aacacaaagg ctaacaaagt ggatgtgcaa 358

atag c gaa tat gtg ttg aag cga gat ggt gaa ggt gtc caa gtc aac 405

Glu Tyr Val Leu Lys Arg Asp Gly Glu Gly Val Gln Val Asn

75 80

aat gct tgt gaa tct cag tcc ggc acc tgg atc aga tcc tta tga caa 453

Asn Ala Cys Glu Ser Gln Ser Gly Thr Trp Ile Arg Ser Leu Gln

85 90 95

cgc cag ttt cac aaa tgc atc cag ctt gga tat tga cca cat ggt gcc 501

Arg Gln Phe His Lys Cys Ile Gln Leu Gly Tyr Pro His Gly Ala

100 105 110

tct aaa gaa tgc ctg gat cgtgagtttt ctcctttttc actgcgtatc 549

Ser Lys Glu Cys Leu Asp

115 120

tccgttccct acctttttgc gatactatat catgccacat cactaatatg gacaaatttc 609

tcgcca gtc cgg tgc ctc aag ctg gac cac agc cca acg tga agc cct 657

Val Arg Cys Leu Lys Leu Asp His Ser Pro Thr Ser Pro

125 130

cgc caa cga cgt ctc ccg tcc cca act ctg ggc cgt ctc cgc aag cgc 705

Arg Gln Arg Arg Leu Pro Ser Pro Thr Leu Gly Arg Leu Arg Lys Arg

135 140 145

aaa ccg ctc caa ggg cga ccg cag ccc aga cca gtg gaa gcc tcc tct 753

Lys Pro Leu Gln Gly Arg Pro Gln Pro Arg Pro Val Glu Ala Ser Ser

150 155 160 165

gac cag ctt cta ctg cac cta cgc caa gtc gtg gat cga tgt caa gag 801

Asp Gln Leu Leu Leu His Leu Arg Gln Val Val Asp Arg Cys Gln Glu

170 175 180

ctt cta taa gct gac aat cac cag tgc cga gaa gac agc tct gag cag 849

Leu Leu Ala Asp Asn His Gln Cys Arg Glu Asp Ser Ser Glu Gln

185 190 195

cat gtt aga tac ttg cta g 868

His Val Arg Tyr Leu Leu

200

<210> 5

<211> 205

<212> PRT

<213> 哈茨木霉

<220>

<221> 信號(hào)肽

<222> (1)..(17)

<220>

<221> 肽

<222> (18)..(205)

<400> 5

Met Lys Leu Ser Ile Ser Val Ala Leu Thr Ser Ala Ile Ala Val Leu

1 5 10 15

Ala Ala Pro Ala Pro Met Pro Thr Pro Pro Gly Ile Pro Thr Glu Ser

20 25 30

Ser Ala Arg Thr Gln Leu Ala Gly Leu Thr Val Ala Val Ala Gly Ser

35 40 45

Gly Thr Gly Tyr Ser Arg Asp Leu Phe Pro Thr Trp Asp Ala Ile Ser

50 55 60

Gly Asn Cys Asn Ala Arg Glu Tyr Val Leu Lys Arg Asp Gly Glu Gly

65 70 75 80

Val Gln Val Asn Asn Ala Cys Glu Ser Gln Ser Gly Thr Trp Ile Ser

85 90 95

Pro Tyr Asp Asn Ala Ser Phe Thr Asn Ala Ser Ser Leu Asp Ile Asp

100 105 110

His Met Val Pro Leu Lys Asn Ala Trp Ile Ser Gly Ala Ser Ser Trp

115 120 125

Thr Thr Ala Gln Arg Glu Ala Leu Ala Asn Asp Val Ser Arg Pro Gln

130 135 140

Leu Trp Ala Val Ser Ala Ser Ala Asn Arg Ser Lys Gly Asp Arg Ser

145 150 155 160

Pro Asp Gln Trp Lys Pro Pro Leu Thr Ser Phe Tyr Cys Thr Tyr Ala

165 170 175

Lys Ser Trp Ile Asp Val Lys Ser Phe Tyr Lys Leu Thr Ile Thr Ser

180 185 190

Ala Glu Lys Thr Ala Leu Ser Ser Met Leu Asp Thr Cys

195 200 205

<210> 6

<211> 136

<212> PRT

<213> 枯草芽孢桿菌

<220>

<221> 信號(hào)肽

<222> (1)..(26)

<220>

<221> 肽

<222> (27)..(136)

<400> 6

Met Lys Lys Trp Met Ala Gly Leu Phe Leu Ala Ala Ala Val Leu Leu

1 5 10 15

Cys Leu Met Val Pro Gln Gln Ile Gln Gly Ala Ser Ser Tyr Asp Lys

20 25 30

Val Leu Tyr Phe Pro Leu Ser Arg Tyr Pro Glu Thr Gly Ser His Ile

35 40 45

Arg Asp Ala Ile Ala Glu Gly His Pro Asp Ile Cys Thr Ile Asp Arg

50 55 60

Asp Gly Ala Asp Lys Arg Arg Glu Glu Ser Leu Lys Gly Ile Pro Thr

65 70 75 80

Lys Pro Gly Tyr Asp Arg Asp Glu Trp Pro Met Ala Val Cys Glu Glu

85 90 95

Gly Gly Ala Gly Ala Asp Val Arg Tyr Val Thr Pro Ser Asp Asn Arg

100 105 110

Gly Ala Gly Ser Trp Val Gly Asn Gln Met Ser Ser Tyr Pro Asp Gly

115 120 125

Thr Arg Val Leu Phe Ile Val Gln

130 135

<210> 7

<211> 142

<212> PRT

<213> 地衣芽孢桿菌

<220>

<221> 信號(hào)肽

<222> (1)..(33)

<220>

<221> 肽

<222> (34)..(136)

<400> 7

Met Ile Lys Lys Trp Ala Val His Leu Leu Phe Ser Ala Leu Val Leu

1 5 10 15

Leu Gly Leu Ser Gly Gly Ala Ala Tyr Ser Pro Gln His Ala Glu Gly

20 25 30

Ala Ala Arg Tyr Asp Asp Ile Leu Tyr Phe Pro Ala Ser Arg Tyr Pro

35 40 45

Glu Thr Gly Ala His Ile Ser Asp Ala Ile Lys Ala Gly His Ser Asp

50 55 60

Val Cys Thr Ile Glu Arg Ser Gly Ala Asp Lys Arg Arg Gln Glu Ser

65 70 75 80

Leu Lys Gly Ile Pro Thr Lys Pro Gly Phe Asp Arg Asp Glu Trp Pro

85 90 95

Met Ala Met Cys Glu Glu Gly Gly Lys Gly Ala Ser Val Arg Tyr Val

100 105 110

Ser Ser Ser Asp Asn Arg Gly Ala Gly Ser Trp Val Gly Asn Arg Leu

115 120 125

Ser Gly Phe Ala Asp Gly Thr Arg Ile Leu Phe Ile Val Gln

130 135 140

<210> 8

<211> 206

<212> PRT

<213> 米曲霉

<400> 8

Ala Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser Asp Pro Ile Lys Ala

1 5 10 15

Asp Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro Phe Asp Val Asp Cys

20 25 30

Trp Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val Leu Gln Arg Val Asn

35 40 45

Glu Lys Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly

50 55 60

Pro Phe Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys

65 70 75 80

Asn Pro Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala

85 90 95

Phe Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala Ile Leu Ala Pro Val

100 105 110

Asn Leu Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr

115 120 125

Ser Ala Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr

130 135 140

Lys Gly Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly Pro

145 150 155 160

Tyr Cys Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn

165 170 175

Lys Asn Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr

180 185 190

Gln Tyr Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys

195 200 205

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