本發(fā)明涉及一種適合于注射粉針使用的小粒徑青蒿琥酯的制備方法，屬于化學(xué)制藥技術(shù)鄰域。

背景技術(shù)：

青蒿素又名黃花蒿素，是從植物黃花蒿莖葉中提取的具有過氧基團(tuán)的倍半萜內(nèi)酯藥物，被廣泛用做治療瘧疾藥物，主要用于間日瘧、惡性瘧的癥狀控制，以及耐氯喹蟲株的治療。但青蒿素存在劑量大、復(fù)發(fā)率高、在水、油中溶解度小等缺點(diǎn)。科學(xué)家以及國(guó)內(nèi)制藥企業(yè)對(duì)青蒿素分子結(jié)構(gòu)進(jìn)一步改造，發(fā)現(xiàn)青蒿素系列衍生物比青蒿素抗瘧疾效果更好，毒性更低。其中以桂林南藥股份有限公司開發(fā)上市的青蒿琥酯最為成功，其療效較青蒿素提高約5倍，目前被廣泛應(yīng)用于腦瘧疾及各種危重瘧疾的搶救。

青蒿琥酯為二氫青蒿素-10-α-丁二酸酯，分子式為C19H28O8，分子量為384.42. 結(jié)構(gòu)式如下：

目前國(guó)內(nèi)上市的青蒿琥酯制劑有片劑和粉針型注射劑。其中注射劑由于起效快、生物利用度高，較片劑更適用于腦瘧疾及危重瘧疾的搶救。

青蒿琥酯水溶性較青蒿素好，但在水中溶解度仍然很低，屬于難溶性藥物，藥典及上市的注射用粉針劑說明書中記載的使用方法為：規(guī)格為60mg的注射用青蒿琥酯臨用前加入5%碳酸氫鈉0.6ml，振搖2min，待完全溶解后，加入5%葡萄糖注射液或葡萄糖氯化鈉注射液5.4ml稀釋，使每1ml溶液中含青蒿琥酯10mg，緩慢靜注。

注射用的粉針?biāo)幬?，?duì)藥物的粒度均有一定要求：首先粒徑越小，比表面積越大，與溶劑接觸的表面積越大，越易溶解，即粉針劑在加入溶劑振搖后，應(yīng)無不溶性微粒；其次粒徑的分布范圍要比較窄，才能很好分散在溶劑中；再次粉末的流動(dòng)性要好，才便于裝量準(zhǔn)確。以上要求中顆粒的粒徑是最重要的因素，即決定藥物能否完全溶解的關(guān)鍵因素。對(duì)于難溶性的注射用青蒿琥酯更是如此，但從目前藥典記載注射用青蒿琥酯質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中并未對(duì)其粉末的粒度做作出規(guī)定。本發(fā)明人在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)目前上市的青蒿琥酯粉針劑（60mg）在用5%碳酸氫鈉0.6ml溶解時(shí)，振搖2min后仍然有少數(shù)粉末沒有完全溶解，尤其冬天室溫較低時(shí)更是如此，這使得臨床上使用青蒿琥酯粉針劑十分麻煩，同時(shí)不澄清的靜脈注射劑也存在安全隱患。

常用的減小藥物粒度的方法有氣流粉碎發(fā)和球磨法，但是存在能耗大，效率低，產(chǎn)品粒度分布寬，對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物可能造成結(jié)構(gòu)破壞或降解的缺陷，同時(shí)還會(huì)引起粉塵污染和靜電安全等問題。噴霧干燥法和超臨界流體技術(shù)雖然能制備粒度分布窄的微粉化藥物，但是需要特定的設(shè)備，且設(shè)備造價(jià)高。

CN101390838公開了一種制備微粉化藥物的方法，具體是將原料藥溶于有機(jī)溶劑中制備一定濃度的原料藥溶液（濃度為相同溫度下其飽和溶液溶度的5~98%），然后將原料藥溶液和反溶劑通過平流泵分別經(jīng)過藥物溶液入口和反溶劑入口同時(shí)泵入微反應(yīng)器，在微反應(yīng)器內(nèi)迅速完全混合進(jìn)行反溶劑結(jié)晶，將得到的漿液過濾，洗滌，干燥，即得到微粉化藥物。其中，原料藥溶液和反溶劑進(jìn)入微反應(yīng)器的流速為1~80ml/min，重結(jié)晶溫度為-10~50℃。

CN103169663A公開了一種超細(xì)青蒿琥酯無菌粉的制備方法，其核心技術(shù)特征即應(yīng)用CN10390838中公開的反溶劑結(jié)晶技術(shù)。將青蒿琥酯原料藥溶于有機(jī)溶劑中制備成1-20%（w/v）原料藥溶液，以1-80%ml/min的流速將原料藥溶液和反溶劑同時(shí)泵入微反應(yīng)器中，10-15℃結(jié)晶，制備微粉化的青蒿琥酯。

我們對(duì)上述公開的超細(xì)青蒿琥酯無菌粉末制備方法進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)該方法需要設(shè)備多、操作復(fù)雜，且原料藥溶液和反溶劑在交叉口混合時(shí)，即析出晶體，易造成管路堵塞；且在交叉口混合時(shí)溫度和攪拌等影響結(jié)晶的關(guān)鍵因素不可控，使得在交叉口析出的晶核大小差異大，最終導(dǎo)致不同批次之間粒徑差異較大，中試生產(chǎn)無法穩(wěn)定重現(xiàn)小試效果。

針對(duì)現(xiàn)有的制備注射用青蒿琥酯原料藥技術(shù)中存在的缺陷，本發(fā)明旨在尋找一種適合于注射粉針使用的、易于工業(yè)化的小粒徑青蒿琥酯粉末制備方法，以解決目前已上市的注射用青蒿琥酯臨床使用時(shí)，加入規(guī)定量注射用碳酸氫鈉水溶液后需振搖長(zhǎng)時(shí)間才能溶解的問題。

目前現(xiàn)有技術(shù)對(duì)青蒿琥酯的精制都是利用良性溶劑溶解后再加入惰性溶劑結(jié)晶的方法，本發(fā)明人在研究青蒿琥酯結(jié)晶條件對(duì)粒徑影響過程中，意外發(fā)現(xiàn)使用適當(dāng)混合溶劑，通過控制反應(yīng)器攪拌速度，可以得到小粒徑的青蒿琥酯，且粒徑分布均勻、流動(dòng)性好、溶解性好，更適用于制備注射用的青蒿琥酯。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種易于工業(yè)化生產(chǎn)、穩(wěn)定性重現(xiàn)性好的、適用于注射用的小粒徑青蒿琥酯的制備方法。

本發(fā)明提供的小粒徑青蒿琥酯制備方法，包括如下步驟：

1) 首先將青蒿琥酯懸浮于良性溶劑/惰性溶劑的混合液之中，加熱該溶液至回流，使青蒿琥酯完全溶解于混合溶劑之中；

2) 停止加熱，提高攪拌速度至1000-2000r/min,冷卻至0-10℃，結(jié)晶1-4h；

3) 抽濾，濾餅用冰石油醚洗滌，濾餅于40～50℃真空干燥得小粒徑青蒿琥酯。

該方法得到的小粒徑青蒿琥酯流動(dòng)性好，經(jīng)過無菌處理后，可直接用于制備注射用青蒿琥酯。

上述步驟1）中，良性溶劑選自乙醇、正丁醇、1-戊醇、2-丁酮、2-戊酮中的一種或任意兩種及以上的混合，當(dāng)良性溶劑為兩種或以上的混合溶劑時(shí)，其比例為任意配比；惰性溶劑選自水、石油醚中的一種或兩種以任意比例的混合；混合溶液中良性溶劑與反溶劑體積比為1:1~1:5。青蒿琥酯原料藥與混合溶劑重量/體積比為1:2~1:5。

上述步驟2）中，攪拌速度是影響結(jié)晶粒度的重要因素之一。加熱混合液至青蒿琥酯溶清之后，停止加熱，迅速提高攪拌速度至1000-2000r/min,優(yōu)選為1200-1300 r/min，用冰水冷卻反應(yīng)液至0-10℃結(jié)晶1-4h。

相比于目前報(bào)道的大多數(shù)青蒿琥酯結(jié)晶方法（常規(guī)反溶劑結(jié)晶法，即良性溶劑溶解，再滴加入惰性溶劑的結(jié)晶方法。），本發(fā)明得到了意料不到的技術(shù)效果，本發(fā)明制備的青蒿琥酯，經(jīng)真空干燥后，測(cè)試其粒徑分布為1.6-60μm（D90=25~28μm），其松密度為0.32-0.39g/ml，緊密度為0.51-0.57g/ml。

而利用目前報(bào)道的常規(guī)反溶劑結(jié)晶法（參見實(shí)施例8），得到的青蒿琥酯粉末, 測(cè)試其粒徑分布為1.6-290μm （D90=158.8μm），松密度為0.49-0.52g/ml,緊密度為0.8-0.85g/ml。

本發(fā)明提供了一種操作簡(jiǎn)便、易于工業(yè)化生產(chǎn)、穩(wěn)定性重現(xiàn)性好的小粒徑青蒿琥酯制備方法，本發(fā)明所制備的小粒徑青蒿琥酯更適用于制備注射用青蒿琥酯。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)勢(shì)：

1，相比于CN103169663A公開的超細(xì)青蒿琥酯無菌粉末制備方法，本發(fā)明所需設(shè)備簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好、顆粒分布更窄、更適用于工業(yè)生產(chǎn)；

2，相比于常規(guī)反溶劑結(jié)晶法，本發(fā)明得到的青蒿琥酯粒徑明顯更小、粒徑分布窄、流動(dòng)相更好，更適用于制備注射用青蒿琥酯；

3，相比于已上市的注射用青蒿琥酯，本發(fā)明制備的青蒿琥酯粉末溶解性更好、溶解更快、振搖20s即澄清（已上市的注射用青蒿琥酯需振搖2min才能溶解），臨床使用更方便。

附圖說明

圖1：實(shí)施例1制得青蒿琥酯粉末粒度分布圖

圖2：實(shí)施例8制得青蒿琥酯粉末粒度分布圖。

具體實(shí)施方式

以下具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。

本發(fā)明所用青蒿琥酯粗品按照CN85100781公開方法制備。

實(shí)施例1

將青蒿琥酯20g置于三口瓶中，加入乙醇/水（50ml/50ml）混合液中，加熱回流至青蒿琥酯溶清，提高攪拌速度至1200r/min,冰水冷卻反應(yīng)液至5±2℃，析晶4h，抽濾，濾餅用冰石油醚30ml洗滌，于40～50℃，真空干燥7h，得到小粒徑青蒿琥酯粉末18.7g，收率93.5%，粒徑分布為1.6-60μm（D90=27.4μm），松密度為 0.38g/ml,緊密度為0.53g/ml（密度測(cè)試為5次平行試驗(yàn)，取平均值）。

實(shí)施例2-7

按照實(shí)施例1所述的通用方法，制備實(shí)施例2-7

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實(shí)施例8 常規(guī)反溶劑結(jié)晶法精制青蒿琥酯

參照CN103374016公開精制方法，青蒿琥酯粗品20g溶于20ml甲醇中，室溫?cái)嚢柚寥芮?，滴加入純凈水，攪拌析晶，抽濾，于50℃烘干得到青蒿琥酯18.9g，收率94.5%，粒徑分布為1.6-290μm （D90=158.8μm），松密度0.508g/ml，緊密度0.812g/ml。

實(shí)施例9 實(shí)施例1-8制備的青蒿琥酯溶解性考察

分別取實(shí)施例1-8制備的青蒿琥酯60mg置于8個(gè)干凈的西林瓶中，依次加入5%碳酸氫鈉水溶液0.6ml，由同一個(gè)實(shí)驗(yàn)人員振搖至溶清，同時(shí)取購買的注射用青蒿琥酯粉針（桂林南藥股份有限公司）做平行試驗(yàn)，觀察實(shí)施例1-8制備的青蒿琥酯以及購買的注射用青蒿琥酯溶清所需要振搖的時(shí)間，以及振搖相同時(shí)間溶液的澄清度，結(jié)果如下所示:

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