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表達鴨RIG-I蛋白的轉基因雞培育方法與流程

文檔序號:12483341閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種轉基因雞的培育方法,其特征在于,包括步驟:

(i)提供一載體,并將所述載體包裝成重組慢病毒;

其中,所述載體以pGV205慢病毒載體為骨架,并且所述載體中含有鴨RIG-I基因編碼序列;

(ii)將上一步驟所述的重組慢病毒轉入雞的受精卵中,獲得經(jīng)轉染的受精卵;

(iii)孵化上一步驟獲得的經(jīng)轉染的受精卵,從而獲得所述轉基因雞。

2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法還包括步驟:

(iv)將步驟(iii)中獲得的轉基因雞作為F0代,與野生型雞雜交,繁育F1代,從而獲得F1代轉基因雞。

3.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法還包括步驟:

(v)利用步驟(iv)獲得的F1代轉基因雞繁育獲得F2代轉基因雞。

4.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(ii)采用赤道開窗法,將所述重組慢病毒通過顯微注射針注射到受精卵胚盤下腔,獲得經(jīng)轉染的受精卵。

5.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(i)中所述載體的制備方法包括步驟:

(i-1)以鴨cDNA為模板擴增RIG-I基因,獲得RIG-I基因擴增產(chǎn)物。

6.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(i-1)擴增RIG-I基因的引物對序列如SEQ ID NO.:2和SEQ ID NO.:3所示。

7.一種載體,其特征在于,所述載體以pGV205慢病毒載體為骨架,并且所述載體中含有鴨RIG-I基因編碼序列。

8.如權利要求7所述的載體,其特征在于,所述鴨RIG-I基因編碼序列如SEQ ID NO.:1所示。

9.一種宿主細胞,其特征在于,所述的宿主細胞含有權利要求7所述的載體。

10.權利要求7所述的載體、或權利要求9所述的宿主細胞,在制備試劑或試劑盒中的用途,其特征在于,所述試劑用于制備轉基因雞。

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