本發(fā)明涉及光動(dòng)力治療領(lǐng)域。更具體地，涉及一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑的制備方法及其在光動(dòng)力滅菌中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：抗生素的發(fā)現(xiàn)曾使人類一度認(rèn)為即將告別微生物感染的時(shí)代。但是，隨著抗生素的普遍應(yīng)用和不斷升級(jí)，臨床致病菌感染并未得到完全控制，與之相反，許多致病菌或條件致病菌在生存環(huán)境的壓力下，變異成了擁有有效抵御抗生素殺傷耐藥機(jī)制的多重耐藥菌。多重耐藥菌引起的感染導(dǎo)致的高死亡率和高醫(yī)療費(fèi)使抗微生物感染的工作面臨著嚴(yán)峻的考驗(yàn)。2010年，英國(guó)醫(yī)學(xué)期刊《柳葉刀》公布的攜帶“新德里金屬蛋白酶-1(NDM-1)”基因的“超級(jí)細(xì)菌”幾乎可以耐受所有的抗生素，但是目前臨床上常用的抗感染藥物和方法對(duì)此類感染的療效十分有限。因此，一旦出現(xiàn)具有區(qū)域感染能力的泛耐藥菌感染，后果將十分嚴(yán)重。光動(dòng)力治療(photodynamictherapy，PDT)是一種利用光敏劑在光的作用下可以產(chǎn)生消滅病變細(xì)胞或細(xì)菌的活性物質(zhì)，從而達(dá)到治療目的的治療手段。光動(dòng)力療法抗微生物感染已在研究之中，體外研究已證明此方法可有效對(duì)抗微生物(包括耐藥菌)，且天然和人工合成的光敏劑均可使用。近期，Demidova和Hamblin等人在“PhotodynamicinactivationofBacillussporesmediatedbyphenothiaziniumdyes”,ApplEnvironMicrobiol,2005,vol.71,pp6918-6925的文章中也證實(shí)了，在吩噻嗪類染料存在的溫和條件下，利用紅光照射細(xì)菌芽孢(對(duì)大多數(shù)抗菌劑有耐藥性)培養(yǎng)體系可使芽孢桿菌滅活。JoriG.等人在“Photodynamictherapyinthetreatmentofmicrobialinfections:basicprinciplesandperspectiveapplications”,LasersinSurgeryandMedicine,2006,vol.38,pp468-481的文章中指出在生理pH值下，陽(yáng)離子型光敏劑如吩噻嗪衍生物、酞菁衍生物、卟啉衍生物能夠有效導(dǎo)致革蘭氏陰性和革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的滅活，另外其對(duì)酵母菌、真菌、支原體和致病原蟲也有良好的光動(dòng)力療效。與傳統(tǒng)的抗生素治療相比，光動(dòng)力滅菌具有以下主要優(yōu)勢(shì):(1)、廣 泛的抗菌譜，對(duì)細(xì)菌、真菌、病毒、原蟲等均有效，對(duì)多重耐藥菌株同樣有效；(2)、能夠選擇性的殺傷病原微生物，而不損傷宿主組織；(3)、不會(huì)導(dǎo)致菌株的耐藥性；(4)、光敏劑的毒副作用小，對(duì)肝腎功能的損傷小。實(shí)現(xiàn)病原微生物的有效滅活同時(shí)將PDT對(duì)宿主細(xì)胞和組織的損傷降到最低是光動(dòng)力滅活病原微生物的理想結(jié)果。Friedberg等人在“Antibody-TargetedPhotolysis:BacteriocidalEffectsofSn(IV)Chlorine6-Dextran-MonoclonalAntibodyConjugates”,AnnalsoftheNewYorkAcademyofSciences,1991,vol.66,pp383-393的文章中提出了在抗菌劑上連接靶向菌體的化學(xué)分子的方法，取得了較好的效果。但是，此類方法會(huì)使抗菌劑的廣譜性顯著降低。因此，實(shí)現(xiàn)PDT選擇性的更優(yōu)策略仍需探索。前期研究表明，哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜和微生物的細(xì)胞膜的成分和結(jié)構(gòu)存在顯著差異，其中，微生物細(xì)胞膜外層呈負(fù)電性，而哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜外層近乎電中性?；谝陨咸攸c(diǎn)，設(shè)計(jì)、合成在生理pH值下呈現(xiàn)正電性的光敏劑(陽(yáng)離子光敏劑)對(duì)于實(shí)現(xiàn)光動(dòng)力滅活的選擇性至關(guān)重要。另外，陽(yáng)離子光敏劑除了能夠利用活性氧物質(zhì)滅活病原微生物外，還可以通過擾亂和中斷微生物有序的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)發(fā)揮抗菌效果。由于陽(yáng)離子光敏劑特殊的抗菌機(jī)制，因此，它被認(rèn)為具有抗菌廣譜性。目前已有的臨床光動(dòng)力治療用光敏劑如血卟啉衍生物HpD、photofrin、verteporfin等，這些光敏劑均存在不同程度的有效組份不清，生物體內(nèi)的吸收代謝機(jī)理不明確，代謝較差等問題。而用于臨床實(shí)踐階段的光敏劑吩噻嗪類染料亞甲藍(lán)(methyleneblue,MB)，在細(xì)菌表面極易形成二聚體，嚴(yán)重影響了光動(dòng)力滅活的效率?；谝陨蠁栴}，需要設(shè)計(jì)、合成一些化學(xué)結(jié)構(gòu)明確、溶解性好且對(duì)病原微生物具有有效殺傷作用的新型光敏劑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。該類光敏劑具有確定的化學(xué)結(jié)構(gòu)且分子結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，在水中溶解度良好，具有合適的脂水分配比，且在350～600nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有較強(qiáng)吸收，在光源照射下能夠快速產(chǎn)生活性氧物質(zhì)，可用于光動(dòng)力滅菌。本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑的制備方法。提供了一種可光動(dòng)力選擇性滅活病原微生物而不損傷宿主細(xì)胞的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑的設(shè)計(jì)思路。該方法操作簡(jiǎn)單、反應(yīng) 條件溫和、純化過程簡(jiǎn)便、產(chǎn)品純度可達(dá)到藥物要求的特點(diǎn)。本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑的用途。為達(dá)到上述第一個(gè)目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，其特征在于，包括具有如下通式C1、C2或C3結(jié)構(gòu)的化合物：其中：R2，R3和R4相同或不同，R2、R3和R4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基或-(CH2)n-R1X；優(yōu)選地，R2，R3和R4選自甲基、乙基或-(CH2)n-R1X；R5和R6相同或不同,R5和R6選自N或P；優(yōu)選地,R5和R6為N；X為負(fù)離子Cl-、Br-或I-；n＝1、2、3或4；優(yōu)選地，n為1或2；n1和n2＝0、1、2、3或4；優(yōu)選地，n1和n2為0、1或2；R1為季銨鹽陽(yáng)離子；優(yōu)選地，R1選自A選自N或P；優(yōu)選地，A為N；A1，A2和A3相同或不同，A1、A2和A3選自甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基或苯基；優(yōu)選地，A1，A2和A3選自甲基、乙基或苯基；選自環(huán)丁酮、環(huán)戊酮、環(huán)己酮、環(huán)庚酮或環(huán)辛酮。為達(dá)到上述第二個(gè)目的，本發(fā)明一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑的制備方法，具有通式C1結(jié)構(gòu)的化合物包括如下合成步驟：1)將五氯化磷與二甲基甲酰胺反應(yīng)后，再與通式Q1化合物反應(yīng)，收集得到通式Q2中間產(chǎn)物2)在乙醇-二氯甲烷溶液的堿性催化劑條件下，將與所得通式Q2中間產(chǎn)物反應(yīng)，收集得到通式Q3中間產(chǎn)物，3)在乙醇-二氯甲烷溶液的堿性催化劑條件下，將所得通式Q3中間產(chǎn)物與通式Q4化合物反應(yīng)；或者，在乙醇-二氯甲烷溶液的堿性催化劑條件下，將與所得通式Q2化合物反應(yīng)；收集得到的通式Q5中間產(chǎn)物4)在溶劑為二甲基甲酰胺(DMF)條件下，將所得通式Q5中間產(chǎn)物與叔胺或氮雜環(huán)化合物反應(yīng)，收集得到通式C1結(jié)構(gòu)的化合物；其中：n3和n4相同或不同，n3、n4＝1、2、3或4；優(yōu)選地，n3、n4為1或2；n5和n6相同或不同，n5、n6＝1、2、3或4；優(yōu)選地，n5和n6為1或2；B1和B2相同或不同，B1和B2選自-H、-OH、-Cl、-Br或-I；B3選自N或P；優(yōu)選地，B3為N；B4、B5選自-H、-Cl、-Br或-I；B4、B5相同或不同，但至少有一個(gè)選自-Cl、-Br或-I；B6選自N或P；優(yōu)選地，B6為N；B7和B8選自-H、-Cl、-Br或-I；B7和B8相同或不同，但至少有一個(gè)選自-Cl、-Br或-I；選自環(huán)丁酮、環(huán)戊酮、環(huán)己酮、環(huán)庚酮或環(huán)辛酮。優(yōu)選地，具有通式C1結(jié)構(gòu)的化合物的合成步驟2)、3)中所述堿性催化劑為氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、無水碳酸鈉、無水碳酸鉀、吡啶或六氫吡啶中的一種或幾種的組合。為達(dá)到上述第二個(gè)目的，本發(fā)明一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏 劑的制備方法，具有通式C2結(jié)構(gòu)的化合物包括如下合成步驟：1)將五氯化磷與二甲基甲酰胺反應(yīng)后，再與通式S1化合物反應(yīng)，收集得到通式S2中間產(chǎn)物2)在乙醇-二氯甲烷溶液的堿性催化劑條件下，將與所得通式S2中間產(chǎn)物反應(yīng)，收集得到通式S3中間產(chǎn)物3)在乙醇-二氯甲烷溶液的堿性催化劑條件下，將所得通式S3中間產(chǎn)物與通式Q2化合物反應(yīng)；或者，在乙醇-二氯甲烷溶液的堿性催化劑條件下，將所得通式S2化合物與通式Q3化合物反應(yīng)，收集得到的通式S4中間產(chǎn)物4)在溶劑為二甲基甲酰胺(DMF)條件下，將所得通式S4中間產(chǎn)物與叔胺或氮雜環(huán)化合物反應(yīng)，收集得到通式C2結(jié)構(gòu)的化合物；其中：n1＝0、1、2、3或4；優(yōu)選地，n1為0、1或2；n3和n4相同或不同，n3、n4＝1、2、3或4；優(yōu)選地，n3、n4為1或2；D1選自-H、-OH、-Cl、-Br或-I；D2選自-H、-Cl、-Br或-I；B3選自N或P；優(yōu)選地，B3為N；B4、B5選自-H、-Cl、-Br或-I；B4、B5相同或不同，但至少有一個(gè)選自-Cl、-Br或-I；選自環(huán)丁酮、環(huán)戊酮、環(huán)己酮、環(huán)庚酮或環(huán)辛酮。優(yōu)選地，具有通式C2結(jié)構(gòu)的化合物的合成步驟2)、3)中所述堿性催化劑為氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、無水碳酸鈉、無水碳酸鉀、吡啶或六氫吡啶中的一種或幾種的組合。為達(dá)到上述第二個(gè)目的，本發(fā)明一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑的制備方法，具有通式C3結(jié)構(gòu)的化合物包括如下合成步驟：1)將通式S3化合物與通式S5化合物在乙醇-二氯甲烷溶液的堿性催化劑條件下反應(yīng)；或者，將通式S2與通式在乙醇-二氯甲烷溶液的堿性催化劑條件下反應(yīng)；收集得到通式T1中間產(chǎn)物2)在溶劑為二甲基甲酰胺(DMF)條件下，將所得通式T1中間產(chǎn)物與叔胺或氮雜環(huán)化合物反應(yīng)，收集得到通式C3結(jié)構(gòu)的化合物；其中：n1＝0、1、2、3或4；優(yōu)選地，n1為0、1或2；n2＝0、1、2、3或4；優(yōu)選地，n2為0、1或2；D2選自-H、-Cl、-Br或-I；D3選自-H、-Cl、-Br或-I；D3和D2相同或不同，但至少有一個(gè)選自-Cl、-Br或-I；選自環(huán)丁酮、環(huán)戊酮、環(huán)己酮、環(huán)庚酮或環(huán)辛酮。優(yōu)選地，具有通式C3結(jié)構(gòu)的化合物的合成步驟1)中所述堿性催化劑為氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、無水碳酸鈉、無水碳酸鉀、吡啶或六氫吡啶中的一種或幾種的組合。為達(dá)到上述第三個(gè)目的，本發(fā)明的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑應(yīng)用在光動(dòng)力滅活細(xì)菌、真菌和病毒。優(yōu)選地，所述細(xì)菌包括按照革蘭氏染色分類的革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌；更優(yōu)選地，所述革蘭氏陽(yáng)性菌包括金黃色葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌、炭疽桿菌、白喉?xiàng)U菌或破傷風(fēng)桿菌；所述革蘭氏陰性菌包括大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、變形桿菌或百日咳桿菌。優(yōu)選地，所述真菌包括霉菌、酵母菌、白色念珠菌、啤酒母菌、紅曲霉素、假絲酵母、黃曲霉、白地霉或抗生菌。優(yōu)選地，所述病毒包括按照寄主類型分類的細(xì)菌病毒、植物病毒、動(dòng)物病毒；優(yōu)選地，所述細(xì)菌病毒包括噬菌體；優(yōu)選地，所述植物病毒包括煙草花葉病毒；優(yōu)選地，所述動(dòng)物病毒包括HIV、天花病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒或風(fēng)疹病毒。本發(fā)明的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑應(yīng)用在光動(dòng)力滅活細(xì)菌、真菌和病毒的機(jī)制為陽(yáng)離子抗菌機(jī)制，陽(yáng)離子光敏劑和菌體之間特殊的靜電相互作用，從而中斷和擾亂細(xì)菌膜結(jié)構(gòu)是其抗菌機(jī)制中的重要部分。本發(fā)明的有益效果如下：1.本發(fā)明中的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、分子量小，具有確定的化學(xué)結(jié)構(gòu)，易于制備、純化和進(jìn)一步修飾，滿足臨床用藥的基本要求。2.本發(fā)明中的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑具有脂水雙親的特點(diǎn)，其脂水分配比能夠滿足臨床光動(dòng)力治療的使用要求。3.本發(fā)明中的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑的合成方法具有操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)品產(chǎn)率高、純度高的特點(diǎn)，可以放量合成。4.本發(fā)明中的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑在350～600nm波長(zhǎng)范圍具有較高的生物光動(dòng)力活性，作為光動(dòng)力藥物滅活病原微生物方面具有很好應(yīng)用前景。5.本發(fā)明中的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑能夠?qū)崿F(xiàn)細(xì)菌、真菌和病毒的有效光滅活，具有廣譜抗菌性，補(bǔ)充了亞芐基環(huán)烷烴酮抗菌領(lǐng)域很大的空白。6.本發(fā)明中的水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑能夠選擇性的滅活病原微生物而盡可能的減少對(duì)宿主細(xì)胞的損傷，這一效果強(qiáng)有力的證明了此類陽(yáng)離子光敏劑應(yīng)用于臨床的光明前景。附圖說明下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。圖1示出實(shí)施例1中光敏劑C1-1在二甲基甲酰胺(DMF)和磷酸緩沖鹽溶液(PBS)緩沖液中的吸收光譜。圖2示出實(shí)施例1中光敏劑C1-1存在下，1,3-二甲基異苯并呋喃(DPBF)在DMF中的吸光度隨時(shí)間的下降比例。圖3示出實(shí)施例7中光敏劑C1-2在DMF和PBS緩沖液中的吸收光譜。圖4示出實(shí)施例7中光敏劑C1-2存在下，DPBF在DMF中的吸光度隨時(shí)間的下降比例。圖5示出實(shí)施例12中光敏劑C1-3在DMF和PBS緩沖液中的吸收光譜。圖6示出實(shí)施例12中光敏劑C1-3存在下，DPBF在DMF中的吸光度隨時(shí)間的下降比例。圖7示出光動(dòng)力滅活金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的菌板光敏劑濃度示意圖。圖8示出實(shí)施例40的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)施例2中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活金黃色葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)。圖9示出實(shí)施例41的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)施例2中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)。圖10示出實(shí)施例42的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)施例2中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活白色念珠菌的實(shí)驗(yàn)。圖11示出實(shí)施例43的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)施例8中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活金黃色葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)。圖12示出實(shí)施例44的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)施例8中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)。圖13示出實(shí)施例45的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)施例8中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活白念珠菌的實(shí)驗(yàn)。圖14示出實(shí)施例46的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)施例13中制得的光敏劑用于觀察細(xì)胞攝取陽(yáng)離子光敏劑的實(shí)驗(yàn)。具體實(shí)施方式為了更清楚地說明本發(fā)明，下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。附圖中相似的部件以相同的附圖標(biāo)記進(jìn)行表示。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下面所具體描述的內(nèi)容是說明性的而非限制性的，不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。實(shí)施例1一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，其合成方法如下：(I)中間體化合物Q2-1的制備：向冰浴冷卻的150mL的DMF中緩慢加入52.06克(0.25mol)五氯化磷，繼續(xù)冰浴30分鐘后，再室溫?cái)嚢?5分鐘。向上述體系中緩慢加入N-乙基-N-羥乙基苯胺20克(0.12mol)，控溫45℃攪拌12小時(shí)后，恢復(fù)至常溫并用碳酸氫鈉溶液中和反應(yīng)液。反應(yīng)液用二氯甲烷萃取三次，二氯甲烷萃取液用水洗至中性后加入無水硫酸鎂干燥，經(jīng)過濾、旋蒸除去二氯甲烷，得到24.9克相應(yīng)的中間產(chǎn)物Q2-1(產(chǎn)率98％)。(II)中間體化合物Q3-1的制備：向一個(gè)100毫升三口燒瓶中加入10.58克(0.05mol)Q2-1，3.52克(0.05mol)環(huán)丁酮，40毫升二氯甲烷和20毫升乙醇，攪拌使其溶解均勻后一次性加入0.03克氫氧化鈉，20℃下反應(yīng)10小時(shí)，反應(yīng)液經(jīng)旋蒸除去溶劑得到粗產(chǎn)品，用色譜柱分離提純得5.9克(產(chǎn)率44％)橙色固體Q3-1。(III)中間體化合物Q5-1的制備：向一個(gè)100毫升三口燒瓶中加入2.4克(0.01mol)Q3-1，1.8克(0.01mol)商業(yè)可得的4-(N,N-二乙氨基)苯甲醛，40毫升二氯甲烷和10毫升乙醇，攪拌使其溶解均勻后一次性加入0.06克氫氧化鈉，室溫下攪拌12小時(shí)，經(jīng)旋蒸除去溶劑得到粗產(chǎn)品，用色譜柱分離提純得到Q5-1固體1.5克(產(chǎn)率35％)。(IV)目標(biāo)產(chǎn)物C1-1的制備：向一個(gè)100毫升三口燒瓶中加入0.23克(0.5mmol)Q5-1，1.96克吡啶，10毫升DMF，攪拌使其溶解均勻后加熱100℃反應(yīng)12小時(shí)。待反應(yīng)體系冷卻到室溫后，利用甲苯重結(jié)晶得到C1-1固體80毫克(產(chǎn)率30％)。HR-MS(ESI):[M]+:Calcdfor[C31H36N3O]+466.2852；found466.2861。(V)用pH值7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱：PBS緩沖液)檢測(cè)目標(biāo)光敏劑C1-1在水體系中的溶解度，25℃其溶解度大于4mg/mL；將目標(biāo)光敏劑C1-1分別溶于DMF和PBS緩沖液中，測(cè)試其吸收光譜，證明了光敏劑C1-1在350～600nm波長(zhǎng)范圍有較強(qiáng)吸收峰，見圖1。(VI)將上述目標(biāo)光敏劑C1-1溶于DMF中，使其在473nm的吸光度為0.1，以酞菁鋅(單線態(tài)氧量子產(chǎn)率ΦΔ＝0.56)為參比，利用DPBF為活性氧 的捕獲劑，在空氣飽和的條件下完成活性氧量子產(chǎn)率的測(cè)定，結(jié)果如圖2所示。說明光敏劑C1-1在473nm激光激發(fā)條件下產(chǎn)生了活性氧物質(zhì)。實(shí)施例2重復(fù)實(shí)施例1，其不同在于，為環(huán)辛酮，催化劑為無水碳酸鈉，以(2,2-聯(lián)吡啶)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率34％。實(shí)施例3重復(fù)實(shí)施例1，其不同在于，為環(huán)庚酮，催化劑為無水碳酸鉀，以(2-芐基吡啶)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率45％。實(shí)施例4重復(fù)實(shí)施例1，其不同在于，為環(huán)己酮，催化劑為氫氧化鉀，以(二吡啶基乙烷)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率24％。實(shí)施例5重復(fù)實(shí)施例1，其不同在于，以(7,8-苯并喹啉)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率55％。實(shí)施例6重復(fù)實(shí)施例1，其不同在于，以(4,7-二氮雜菲)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率33％。實(shí)施例7一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，其合成方法如下：(I)中間體化合物Q2-2的制備：參照實(shí)施例1中(I)的操作，用摩爾量1：3的N,N-二羥乙基苯胺和vilsmeier試劑反應(yīng)，得到中間產(chǎn)物Q2-2(產(chǎn)率97％)。(II)中間體化合物Q3-2的制備：參照實(shí)施例1中(II)的操作，用摩爾量為1：1的Q2-2與環(huán)丁酮反應(yīng)，催化劑為氫氧化鉀，得到中間產(chǎn)物Q3-2(產(chǎn)率：39％)。(III)中間體化合物Q5-2的制備：參照實(shí)施例1中(III)的操作，用摩爾量1:1的Q3-2和4-(N,N-二乙氨基)苯甲醛反應(yīng)，催化劑為氫氧化鉀，得到中間產(chǎn)物Q5-2(產(chǎn)率62％)。(IV)目標(biāo)產(chǎn)物C1-2的制備：參照實(shí)施例1中(IV)的操作，用質(zhì)量比為1：10的Q5-2與吡啶反應(yīng)，得到目標(biāo)光敏劑C1-2(產(chǎn)率：90％)。HR-MS(ESI):[M]+:Calcdfor[C36H40ClN4O]+579.2885；found579.2889。(IV)參照實(shí)施例1中(V)的操作，證明C1-2溶解度大于5mg/mL；且在350～600nm波長(zhǎng)范圍有較強(qiáng)吸收峰，見圖3。(V)參照實(shí)施例1(VI)的操作，結(jié)果同樣證明了目標(biāo)光敏劑C1-2在473nm激光照射下能產(chǎn)生活性氧物質(zhì)，見圖4。實(shí)施例8重復(fù)實(shí)施例7，其不同在于，為環(huán)己酮，催化劑為無水碳酸鈉，以(喹啉)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率88％。實(shí)施例9重復(fù)實(shí)施例7，其不同在于，為環(huán)庚酮，催化劑為無水碳酸鈉，以(二苯基-2-吡啶甲烷)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率77％。實(shí)施例10重復(fù)實(shí)施例7，其不同在于，以(2，2-聯(lián)喹啉)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率47％。實(shí)施例11重復(fù)實(shí)施例7，其不同在于，以三乙胺代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率87％。實(shí)施例12一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，其合成方法如下：(I)中間產(chǎn)物Q5-3的制備：參照實(shí)施例1中(III)的操作，用摩爾量為1：2的環(huán)丁酮與Q2-1反應(yīng)，催化劑為吡啶，得到中間產(chǎn)物Q5-3(產(chǎn)率：85％)。(II)目標(biāo)產(chǎn)物C1-3的制備：參照實(shí)施例1中(IV)的操作，用質(zhì)量比為1：10的Q5-3與吡啶反應(yīng)，得到目標(biāo)光敏劑C1-3(產(chǎn)率：50％)。HR-MS(ESI):[M]+:Calcdfor[C36H40ClN4O]+579.2885；found579.2886。(III)參照實(shí)施例1中(V)的操作，證明C1-3溶解度大于5mg/mL；且在350～600nm波長(zhǎng)范圍有較強(qiáng)吸收峰，見圖5。(IV)參照實(shí)施例1(VI)的操作，結(jié)果同樣證明了目標(biāo)光敏劑C1-3在473nm激光照射下能產(chǎn)生活性氧物質(zhì)，見圖6。實(shí)施例13重復(fù)實(shí)施例12，其不同在于，為環(huán)庚酮，催化劑為無水碳酸鉀，以(2-吡啶基苯甲酮)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率44％。實(shí)施例14重復(fù)實(shí)施例12，其不同在于，為環(huán)辛酮，催化劑為六氫吡啶，以(吖啶)代替吡啶作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率29％。實(shí)施例15一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，其合成方法如下：(I)中間體化合物S2-1的制備：參照實(shí)施例1中(I)的操作，用摩爾量1：2的商業(yè)可得的氯苯和vilsmeier 試劑反應(yīng)，得到中間產(chǎn)物S2-1(產(chǎn)率96％)。(II)中間體化合物Q2-3的制備：參照實(shí)施例1中(I)的操作，用摩爾量1：3的商業(yè)可得的N，N-二(2-溴乙基)苯胺和vilsmeier試劑反應(yīng)，得到中間產(chǎn)物Q2-3(產(chǎn)率98％)。(III)中間體化合物S3-1的制備：參照實(shí)施例1中(II)的操作，用摩爾量為1：1的S2-1與環(huán)己酮反應(yīng)，催化劑為氫氧化鈉，得到中間產(chǎn)物S3-1(產(chǎn)率：50％)。(IV)中間體化合物S4-1的制備：參照實(shí)施例1中(III)的操作，用摩爾量1:1的S3-1和Q2-3反應(yīng)，催化劑為氫氧化鈉，得到中間產(chǎn)物S4-1(產(chǎn)率88％)。(V)目標(biāo)產(chǎn)物C2-1的制備：參照實(shí)施例1中(IV)的操作，用質(zhì)量比為1：30的S4-1與商業(yè)可得的三乙胺反應(yīng)，得到目標(biāo)光敏劑C2-1(產(chǎn)率：50％)。HR-MS(ESI):[M]+:Calcdfor[C42H69Br2N4O]+803.3833；found803.3847。實(shí)施例16重復(fù)實(shí)施例15，其不同在于，為環(huán)戊酮，催化劑為氫氧化鉀，以(2-芐基吡啶)代替三乙胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率45％。實(shí)施例17重復(fù)實(shí)施例15，其不同在于，以(吡啶)代替三乙胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率78％。實(shí)施例18重復(fù)實(shí)施例15，其不同在于，以(2,2-聯(lián)吡啶)代替三乙胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率38％。實(shí)施例19重復(fù)實(shí)施例15，其不同在于，為環(huán)庚酮，催化劑為無水碳酸鈉，以(喹啉)代替三乙胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率65％。實(shí)施例20重復(fù)實(shí)施例15，其不同在于，為環(huán)丁酮，催化劑為無水碳酸鈉，以(2-吡啶基苯甲酮)代替三乙胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率67％。實(shí)施例21一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，其合成方法如下：(I)中間體化合物Q2-4的制備：參照實(shí)施例1中(I)的操作，用摩爾量1：2的商業(yè)可得的N-(2-溴乙 基)-N-甲基苯胺和vilsmeier試劑反應(yīng)，得到中間產(chǎn)物Q2-4(產(chǎn)率98％)。(II)中間體化合物S2-2的制備：參照實(shí)施例1中(I)的操作，用摩爾量1：2的商業(yè)可得的2-(氯乙基)苯和vilsmeier試劑反應(yīng)，得到中間產(chǎn)物S2-2(產(chǎn)率98％)。(III)中間體化合物S3-2的制備：參照實(shí)施例1中(II)的操作，用摩爾量為1：1的Q2-4與環(huán)己酮反應(yīng)，催化劑為六氫吡啶，得到中間產(chǎn)物S3-2(產(chǎn)率：45％)。(IV)中間體化合物S4-2的制備：參照實(shí)施例1中(III)的操作，用摩爾量1:1的S2-2和S3-2反應(yīng)，催化劑為六氫吡啶，得到中間產(chǎn)物S4-2(產(chǎn)率60％)。(V)目標(biāo)產(chǎn)物C2-2的制備：參照實(shí)施例1中(IV)的操作，用質(zhì)量比為1：40的S4-2與商業(yè)可得的三苯胺反應(yīng)，得到目標(biāo)光敏劑C2-2(產(chǎn)率：50％)。HR-MS(ESI):[M]+:Calcdfor[C61H57BrN3O]+926.3680；found926.3677。實(shí)施例22重復(fù)實(shí)施例21，其不同在于，為環(huán)丁酮，催化劑為氫氧化鉀，以(二吡啶基乙烷)代替三苯胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率35％。實(shí)施例23重復(fù)實(shí)施例21，其不同在于，為環(huán)戊酮，催化劑為無水碳酸鉀，以(2，2-聯(lián)喹啉)代替三苯胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率57％。實(shí)施例24重復(fù)實(shí)施例21，其不同在于，為環(huán)丁酮，催化劑為無水碳酸鈉，以(吖啶)代替三苯胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率67％。實(shí)施例25重復(fù)實(shí)施例21，其不同在于，為環(huán)庚酮，催化劑為無水碳酸鉀，以(7,8-苯并喹啉)代替三苯胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率77％。實(shí)施例26重復(fù)實(shí)施例21，其不同在于，為環(huán)戊酮，催化劑為氫氧化鉀，以(4,7-二氮雜菲)代替三苯胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到 產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率47％。實(shí)施例27重復(fù)實(shí)施例21，其不同在于，為環(huán)辛酮，催化劑為氫氧化鈉，以(二苯基-2-吡啶甲烷)代替三苯胺作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率55％。實(shí)施例28一種水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，其合成方法如下：(I)中間體化合物S2-3的制備：參照實(shí)施例1中(I)的操作，用摩爾量1：2的商業(yè)可得的2-碘代乙基苯和vilsmeier試劑反應(yīng)，得到中間產(chǎn)物S2-3(產(chǎn)率96％)。(II)中間體化合物S3-3的制備：參照實(shí)施例1中(II)的操作，用摩爾量為1：1的S2-3與環(huán)庚酮反應(yīng)，催化劑為碳酸鉀，得到中間產(chǎn)物S3-3(產(chǎn)率：40％)。(III)中間體化合物T1-1的制備：參照實(shí)施例1中(III)的操作，用摩爾量1:1的S3-3和S2-1反應(yīng)，催化劑為碳酸鉀，得到中間產(chǎn)物T1-1(產(chǎn)率78％)。(IV)目標(biāo)產(chǎn)物C3-1的制備：參照實(shí)施例1中(IV)的操作，用質(zhì)量比為1：30的T1-1與商業(yè)可得的三苯基膦反應(yīng)，得到目標(biāo)光敏劑C3-1(產(chǎn)率：50％)。HR-MS(ESI):[M]+:Calcdfor[C59H52IOP2]+965.2533；found965.2539。實(shí)施例29重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，為環(huán)戊酮，催化劑為氫氧化鈉，以(7,8-苯并喹啉)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率56％。實(shí)施例30重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，為環(huán)丁酮，催化劑為氫氧化鈉，以(4,7-二氮雜菲)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率44％。實(shí)施例31重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，為環(huán)己酮，催化劑為碳酸鈉，以(二苯基-2-吡啶甲烷)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變。得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑，產(chǎn)率28％。實(shí)施例32重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，以(吡啶)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變，得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。實(shí)施例33重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，以(聯(lián)吡啶)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變，得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。實(shí)施例34重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，以(喹啉)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變，得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。實(shí)施例35重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，以(2-吡啶基苯甲酮)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變，得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。實(shí)施例36重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，以(吖啶)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變，得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。實(shí)施例37重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，以(2-芐基吡啶)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變，得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。實(shí)施例38重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，以(二吡啶基乙烷)代替三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變，得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。實(shí)施例39重復(fù)實(shí)施例28，其不同在于，以(2，2-聯(lián)喹啉)代替 三苯基膦作為反應(yīng)原料，其它條件不變，得到產(chǎn)物水溶性陽(yáng)離子亞芐基環(huán)烷烴酮光敏劑。實(shí)施例40將實(shí)施例2中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活金黃色葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)(I)將細(xì)菌在肉湯培養(yǎng)基中復(fù)蘇，通過測(cè)定600nm的吸光度值來確定細(xì)菌的濃度。(II)利用無菌的96孔板進(jìn)行最小抑菌濃度(minimuminhibitoryconcentration,MIC)的測(cè)定。見示意圖7，96孔板中每相鄰的四個(gè)孔，例如C1，C2，D1和D2所加光敏劑濃度是相同的。按照示意圖所示濃度，每孔加入100微升不同光敏劑濃度的肉湯溶液。其中，陰性對(duì)照組為B+B組(100微升肉湯中加入10微升的細(xì)菌)，陽(yáng)性對(duì)照組為GM組(100微升肉湯加入1％的慶大霉素)，空白對(duì)照組為Broth組(100微升肉湯中加入10微升PBS)。上述96孔板中的細(xì)菌濃度約為5×105CFU每毫升。(III)利用532nm的激光(30Jcm-2,10min)照射上述96孔板后，放入細(xì)菌培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)18小時(shí)。然后利用0.0675％的刃天青鈉鹽溶液進(jìn)行顯色。(IV)經(jīng)過4小時(shí)的顯色反應(yīng)，96孔板中框出濃度所對(duì)應(yīng)的光敏劑濃度為最低抑菌濃度。見圖8。實(shí)施例41參照實(shí)施例40中的操作，將實(shí)施例2中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)，見圖9。實(shí)施例42將實(shí)施例2中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活白念珠菌的實(shí)驗(yàn)。(I)取適量菌液接種到沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基中，培養(yǎng)48～72小時(shí)。(II)取適合濃度的真菌溶液中加入不同濃度的光敏劑，使光敏劑的最終濃度為25微摩爾、50微摩爾和100微摩爾。攝取1小時(shí)后，利用532nm的激光對(duì)上述混合液進(jìn)行光照(30Jcm-2,10min)。并于暗處培養(yǎng)24小時(shí)。(III)利用涂布菌板法，觀察不同濃度下的菌落數(shù)目，測(cè)定光敏劑的抗菌活性。見圖10。實(shí)施例43將實(shí)施例8中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活金黃色葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)，見圖11。實(shí)施例44將實(shí)施例8中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)，見圖12。實(shí)施例45將實(shí)施例8中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活白念珠菌的實(shí)驗(yàn)，見圖13。實(shí)施例46將實(shí)施例13中制得的光敏劑用于觀察細(xì)胞攝取此類光敏劑的實(shí)驗(yàn)。(I)將細(xì)胞以105每孔植入玻璃底培養(yǎng)皿中(直徑35毫米)，24小時(shí)后換成含10微摩爾光敏劑的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)；(II)向培養(yǎng)液中加入100納摩爾熒光探針繼續(xù)培養(yǎng)20分鐘，以PBS清洗去除游離探針；(III)加入1毫升PBS溶液，用熒光共聚焦顯微鏡觀察光敏劑于細(xì)胞的定位圖。見圖14。實(shí)施例47將實(shí)施例15中制得的光敏劑用于脂水分配比的測(cè)定實(shí)驗(yàn)將一定量的光敏劑溶于2mLPBS中，然后加入2mL正辛醇，將混合溶液震搖3min，再置于超聲波中振蕩5min，然后在每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度下離心5分鐘，使兩相分離。測(cè)定兩相中的光敏劑的吸收光譜圖，通過Lambert-beer定律計(jì)算得到光敏劑在兩相中的濃度，脂水分配比(LogPC)即為光敏劑在兩相中的濃度比值。見表1。實(shí)施例48將實(shí)施例21中制得的光敏劑用于脂水分配比的測(cè)定實(shí)驗(yàn)，見表1。實(shí)施例49將實(shí)施例28中制得的光敏劑用于脂水分配比的測(cè)定實(shí)驗(yàn)，見表1。實(shí)施例50將實(shí)施例31中制得的光敏劑用于光動(dòng)力滅活煙草花葉病毒。向96孔板中的100μL不同濃度(0.125、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0和64.0μM)的光敏劑溶液中加入適量的煙草花葉病毒并保證病毒的終濃度為2x1011pfu/mL，在黑暗中震蕩培養(yǎng)30分鐘，用波長(zhǎng)為550nm左右的Oriel91192太陽(yáng)能模擬器(5mW/cm2,50min)照射后，將96孔板中的混合溶液轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的瓊脂盤上，用菌落計(jì)數(shù)法計(jì)算煙草花葉病毒的成活率。其中，不含光敏劑的同濃度的菌懸液用作對(duì)照組。表1光敏劑名稱LogPCC2-1-2.66C2-25.72C3-14.58顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定，對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)，這里無法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉，凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3