本發(fā)明涉及生物制藥領域,特別涉及一種海參皂甙的提取方法及其應用。
背景技術:
自古以來,海參就是海珍八品之一,其隸屬于棘皮動物門海參綱。在明代《食物本草》中,早已指出海參具有主補元氣、滋益五臟六腑和祛虛損等諸多養(yǎng)生功能。隨著人民生活水平的提高和保健意識的增強,海參的醫(yī)療保健作用得到了越來越廣泛的認同和應用,同時形成了以中國、新加坡、中國香港、日本、韓國、美國、印度尼西亞、菲律賓等國家和地區(qū)為中心的貿(mào)易和消費市場,一些以海參為原材料而開發(fā)出的產(chǎn)品相應而生,如海參口服液、海參肽營養(yǎng)膠囊、海參酒、凍干海參等。
近年來研究發(fā)現(xiàn)海參中的主要活性成分為其次生代謝產(chǎn)物--海參皂甙,海參皂甙在海參體壁真皮結締組織、體腔、內(nèi)腺管及內(nèi)臟中均有分布,具有多種藥理活性活性,如抗腫瘤作用、提高免疫力、抗新血管形成、抗凝血、促進纖維蛋白溶解、抑制栓塞形成、抗炎作用和抗放射活性,以及抑制艾滋病病毒、乙肝病毒、單純疤疹病毒等;另外,研究還發(fā)現(xiàn)海參皂甙具有廣譜的抗真菌功效。目前,已有很多國家的科研機構致力于以海參皂甙為主的產(chǎn)品的研發(fā)。日本在這一領域已走在了世界的前列,并且,日本北川氏利用刺參皂甙開發(fā)出了治療腳氣和抗白癬菌感染的產(chǎn)品。
目前海參皂甙常用的提取方法有:
醇法提?。豪迷磉霸诖贾腥芙舛却蟮男再|(zhì),采用甲醇或乙醇提取、回流或冷浸提取,減壓濃縮為浸膏后,加水溶解,再用乙醚或石油醚脫脂,用三氯甲烷去除蛋白質(zhì),再用水飽和正丁醇萃取提取液,減壓濃縮后得總皂甙。
大孔樹脂吸附法:用甲醇或乙醇提取后,減壓濃縮成浸膏后,加水溶解并上樣于大孔樹脂柱中,依次用去離子水和乙醇溶液進行洗脫,收集乙醇的洗脫組分,減壓濃縮至浸膏狀,加水溶解后,水飽和的正丁醇萃取減壓濃縮,真空冷凍干燥得到海參總皂甙。
以上兩種方法存在同樣的缺點:溶劑使用量大,易產(chǎn)生溶劑殘留,造成污染,萃取時間長,萃取率低,很難應用于大規(guī)模生產(chǎn)。
另外海參皂甙的應用也僅僅應用于抗真菌層面,其他方面的應用也并沒有發(fā)掘。
因此,本發(fā)明提供了一種超臨界流體萃取的方法,主要針對海參體內(nèi)一種有效活性物質(zhì)進行萃取,此種方法曾被應用于植物體內(nèi)有效成分的提取,未見應用于動物體尤其是海參活性物質(zhì)的萃取。
超臨界流體萃取原理:超臨界狀態(tài)是繼固態(tài)、液態(tài)和氣態(tài)之后的第四種狀態(tài)。將處于氣液平衡的物質(zhì)升壓升溫時,熱膨脹會引起液體密度減小,而壓力的升高又使氣相密度變大,當溫度和壓力達到某一點時,氣液兩相的相界面就會消失,成為均相體系。氣體和液體的差別完全消失。超臨界流體溫度和壓力的微小變化,可引起物質(zhì)密度、擴散系數(shù)、粘度、溶解度等物理性質(zhì)的顯著變化,導致溶劑和溶質(zhì)的分離。密度接近于液體,具有很大的溶解性,能溶出很多物質(zhì),其粘度接近于氣體,遠小于液體,具有很強的擴散能力。
技術實現(xiàn)要素:
有鑒于此,本發(fā)明提供一種海參皂甙的提取方法和應用,包括以下步驟:
(1)在超臨界狀態(tài)下,在冷箱中以二氧化碳作為非極性溶劑,控制反應溫度在30-40度之間;
(2)往冷箱中勻速加入夾帶劑;所述反應壓力在20-30MPa之間,二氧化碳流量為20-30kg/h;
(3)二氧化碳與夾帶劑在混合器中充分混合之后,將二氧化碳與夾帶劑的混合物傳送至萃取器;
(4)萃取器中控制反應壓力在24-26MPa之間;溫度控制為35度,萃取出海參皂甙;
(5)進一步在分離器中分離出海參皂甙。
本發(fā)明采用低溫反應,適合熱敏性活性物質(zhì)提取,不會破壞生物活性;無有機溶劑殘留,萃取物純度高。所述海參皂甙應用于廣譜的抗腫瘤,具有增強免疫調(diào)節(jié),緩解放化療的作用,提高癌癥病人對放化療的耐受性等功能。
本發(fā)明通過以下技術手段解決上述問題:
本發(fā)明的一種海參皂甙的提取方法,包括以下步驟:
(1)在超臨界狀態(tài)下,在冷箱中以二氧化碳作為非極性溶劑,控制反應溫度在30-40度之間;
(2)往冷箱中勻速加入夾帶劑;所述反應壓力在20-30MPa之間,二氧化碳流量為20-30kg/h;
(3)二氧化碳與夾帶劑在混合器中充分混合之后,將二氧化碳與夾帶劑的混合物傳送至萃取器;
(4)萃取器中控制反應壓力在24-26MPa之間;溫度控制為35度,萃取出海參皂甙;
(5)進一步在分離器中分離出海參皂甙。
所述以二氧化碳作為非極性溶劑,控制反應溫度在30-40度之間步驟之前,還包括:海參預處理步驟。
所述海參預處理步驟包括:(1)水發(fā)海參;(2)粉碎海參;(3)冷凍干燥;(4)研磨機研磨成粉末狀。
所述夾帶劑為乙醇,所述夾帶劑在二氧化碳與夾帶劑的混合物中所占比例不超過5%。
所述混合物經(jīng)反應完畢之后進入尾氣儲罐,經(jīng)過壓縮機的壓縮作用,多余的二氧化碳重新進入二氧化碳儲罐,進行循環(huán)利用。
所述海參皂甙應用于廣譜的抗腫瘤,具有增強免疫調(diào)節(jié),緩解放化療的作用。
本發(fā)明的一種海參皂甙的提取方法和應用具有以下有益效果:
(1)低溫反應,適合熱敏性活性物質(zhì)提取,不會破壞生物活性。
(2)無有機溶劑殘留,萃取物純度高。
(3)二氧化碳容易取得,無毒,不燃燒,性質(zhì)穩(wěn)定,不污染環(huán)境,易于回收循環(huán)使用,因此大大降低了萃取的成本。
(4)萃取時,目標萃取物通過降低壓力,或者升高溫度即可析出,工藝簡單,方便操作。
附圖說明
下面結合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步描述。
圖1為本發(fā)明的反應流程示意圖。
具體實施方式
以下將結合附圖對本發(fā)明進行詳細說明,如圖1所示:本實施例的本發(fā)明提供.一種海參皂甙的提取方法和應用,包括以下步驟:
(1)在超臨界狀態(tài)下,在冷箱中以二氧化碳作為非極性溶劑,控制反應溫度在30-40度之間;
(2)往冷箱中勻速加入夾帶劑;所述反應壓力在20-30MPa之間,二氧化碳流量為20-30kg/h;
(3)二氧化碳與夾帶劑在混合器中充分混合之后,將二氧化碳與夾帶劑的混合物傳送至萃取器;
(4)萃取器中控制反應壓力在24-26MPa之間;溫度控制為35度,萃取出海參皂甙;
(5)進一步在分離器中分離出海參皂甙。
本發(fā)明的優(yōu)點在于:低溫反應,適合熱敏性活性物質(zhì)提取,不會破壞生物活性;無有機溶劑殘留,萃取物純度高。所述海參皂甙應用于廣譜的抗腫瘤,具有增強免疫調(diào)節(jié),緩解放化療的作用,提高癌癥病人對放化療的耐受性等功能。
作為上述技術方案的進一步改進,海參預處理步驟。
作為上述技術方案的進一步改進,所述海參預處理步驟包括:(1)水發(fā)海參;(2)粉碎海參;(3)冷凍干燥;(4)研磨機研磨成粉末狀。
作為上述技術方案的進一步改進,所述夾帶劑為乙醇,所述夾帶劑在二氧化碳與夾帶劑的混合物中所占比例不超過5%。
作為上述技術方案的進一步改進,所述混合物經(jīng)反應完畢之后進入尾氣儲罐,經(jīng)過壓縮機的壓縮作用,多余的二氧化碳重新進入二氧化碳儲罐,進行循環(huán)利用。
具體的說,本發(fā)明采用超臨界流體萃取的方法,主要針對海參體內(nèi)有效活性物質(zhì)進行萃取,此種方法曾被應用于植物體內(nèi)有效成分的提取,未見應用于動物體尤其是海參活性物質(zhì)的萃取。
二氧化碳作為非極性的溶劑,對于低分子量、低極性、親脂性、低沸點的揮發(fā)油等化合物表現(xiàn)出較高的親和力,但對于多糖和皂甙等大分子極性基團的化合物,萃取率會降低,因此需要在超臨界二氧化碳中加入少量夾帶劑,本發(fā)明中采用乙醇作為夾帶劑。
額外的,二氧化碳還可回收循環(huán)使用,起到節(jié)省資源的作用。
作為上述技術方案的進一步改進,所述海參皂甙應用于廣譜的抗腫瘤,具有增強免疫調(diào)節(jié),緩解放化療的作用。
具體地說,研究表明,海參皂甙類物質(zhì)具有廣泛的生理學和藥理學活性,具有廣譜的抗腫瘤,增強免疫調(diào)節(jié),緩解放化療的副作用,提高癌癥病人對放化療的耐受性等功能。此發(fā)明的意義在于:有效萃取海參皂甙這種抗癌活性物質(zhì),將其應用于醫(yī)藥領域。
最后說明的是,以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案而非限制,盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明,本領域的普通技術人員應當理解,可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換,而不脫離本發(fā)明技術方案的宗旨和范圍,其均應涵蓋在本發(fā)明的權利要求范圍當中。