本發(fā)明涉及化合物及其應(yīng)用，尤其涉及一種抑制肺癌轉(zhuǎn)移的化合物及其應(yīng)用，屬生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

肺癌是肺部最常見的惡性腫瘤。世界衛(wèi)生組織調(diào)查報(bào)告，許多國家和地區(qū)，肺癌的發(fā)病率占惡性腫瘤的首位。在全球范圍內(nèi)，男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的第一位，女性發(fā)病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌容易發(fā)生擴(kuò)散：1.直接擴(kuò)散，即靠近肺外圍的腫瘤可侵犯臟層胸膜，癌細(xì)胞脫落進(jìn)入胸膜腔，形成種植性轉(zhuǎn)移；2.血行轉(zhuǎn)移，即癌細(xì)胞隨肺靜脈回流到左心后，可轉(zhuǎn)移到體內(nèi)任何部位，常見轉(zhuǎn)移部位為肝、腦、肺、骨骼系統(tǒng)、腎上腺、胰等器官；3.淋巴道轉(zhuǎn)移，即癌細(xì)胞經(jīng)支氣管和肺血管周圍的淋巴管，先侵入鄰近的肺段或葉支氣管周圍淋巴結(jié)，然后到達(dá)肺門或隆突下淋巴結(jié)，再侵入縱隔和氣管旁淋巴結(jié)，最后累及鎖骨上或頸部淋巴結(jié)。

肺癌的治療以外科手術(shù)切除為首選，手術(shù)后5年生存率僅為50％，但局限于尚未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)。目前中國對(duì)于轉(zhuǎn)移性肺癌治療的主要方案以放療輔助化療為主?；熤傅氖沁\(yùn)用藥物治療疾病的方法和手段。手術(shù)和放療殺傷特定部位的癌細(xì)胞，而化療對(duì)人體全身起作用。化療可以消滅已擴(kuò)散到全身各部位的癌細(xì)胞。目前，在研和上市的化療藥物多達(dá)上千中，大約已有100多種被用于各種癌癥的治療。這些化療藥物在化學(xué)成分、使用方法、治療某種癌癥的療效和副作用上都各不相同。目前主要用于臨床的抗肺癌化療藥物在治療過程中出現(xiàn)了各種問題，主要集中為：1.抑制腫瘤的生長但所用劑量大，容易造成機(jī)體的毒副作用；2.對(duì)某些肺癌患者產(chǎn)生耐藥性；3.藥物作用周期長， 短期抑癌效果不佳。研發(fā)抗腫瘤新藥困難重重，其整體發(fā)展面臨著巨大挑戰(zhàn)。高淘汰率和藥物抗性抑制是抗肺癌藥物發(fā)展的限制因素。因此快速尋找一種新的化療藥物非常迫切，將對(duì)肺癌的治療具有重要的實(shí)踐意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，為了解決上述問題，本發(fā)明篩選得到的一種能顯著抑制肺癌體內(nèi)體外轉(zhuǎn)移的有效化合物成分，其名稱為N-(3-formyl-4-((4-methylpiperazin-1-yl)methyl)-5-(trifluoromethyl)phenyl)-2，6-dihydroxy-3-(2-(imidazo[1，2-b]pyridazin-3-yl)ethynyl)-4-methylbenzamide，分子式見下式I。該化合物即能抑制體外培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞株的遷移和浸潤，又能在小鼠體內(nèi)抑制移植瘤的肺遷移，提示其在肺癌臨床治療中具有重要的開發(fā)和應(yīng)用價(jià)值，可嘗試制備為抗肺癌治療的藥物。

附圖說明

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，其中：

圖1.該化合物對(duì)人源肺癌細(xì)胞株遷移和浸潤抑制作用的檢測(cè)。

圖2.該化合物對(duì)小鼠體內(nèi)移植瘤肺轉(zhuǎn)移抑制作用的檢測(cè)。

具體實(shí)施方式

1)化合物抑制肺癌細(xì)胞株遷移和浸潤。

將非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549以1萬個(gè)細(xì)胞每孔的密度分別接種到?jīng)]有包被(用于轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn))或已包被Matrigel(用于浸潤實(shí)驗(yàn))的Transwell小室的聚碳酸酯膜上層(購自BD Biosciences，USA)。該聚碳酸酯膜上室100μl培養(yǎng)基中不含血清但加入不同濃度的化合物(200nM和500nM)，對(duì)照組加入相同體積的DMSO。聚碳酸酯膜下層加入含有600μl含10％血清的培養(yǎng)基。各處理組重復(fù)8個(gè)孔，然后將Transwell置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí)。24小時(shí)后用棉簽擦凈上室細(xì)胞，福爾馬林固定10分鐘和結(jié)晶紫染色1小時(shí)。所得染色結(jié)果然后用顯微鏡拍照和計(jì)數(shù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果表明該化合物在兩個(gè)濃度下均對(duì)用于檢測(cè)的人源肺癌細(xì)胞株A549的轉(zhuǎn)移和浸潤具有顯著的抑制作用(圖1，其中**示為p＜0.05，**表示為p＜0.01，所示結(jié)果為3次獨(dú)立重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果)。

2)化合物抑制移植瘤小鼠體內(nèi)人源肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。

飼養(yǎng)30只6-8周嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)小鼠，體重20±2克。1百萬個(gè)具有高轉(zhuǎn)移潛能的A549肺癌細(xì)胞尾靜脈注射每只小鼠。10天后，隨機(jī)分成2組，即對(duì)照組和化合物治療組，每組15只，雌雄各半。對(duì)照組，每天腹腔注射100μl生理鹽水；化合物治療組，每天腹腔注射100μl濃度為10mg/kg體重的化合物。按該方法連續(xù)注射8周，每天觀察小鼠行為狀態(tài)。注射8周后將實(shí)驗(yàn)用小鼠處死，分離肺組織，用10％的福爾馬林浸泡過夜。制成石蠟切片后進(jìn)行HE染色(即蘇木素和伊紅對(duì)比染色)并顯微鏡觀測(cè)。結(jié)果顯示，該化合物對(duì)小鼠體內(nèi)肺癌細(xì)胞的肝遷移具有顯著的抑制作用(圖2)

在圖2中，A為代表性肝組織HE染色結(jié)果：生理鹽水處理組，癌細(xì)胞浸潤整個(gè)小鼠肺組織；化合物治療組，僅有少數(shù)癌細(xì)胞浸潤到小鼠肺組織。癌細(xì)胞，較正常肺細(xì)胞大，形態(tài)不一致，細(xì)胞質(zhì)比大，核濃染。B為肺組織上癌灶數(shù)目的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，其中**表示為p＜0.01。

以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并不用于限制本發(fā)明，顯然，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種改動(dòng)和變型而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。這樣，倘若本發(fā)明的這些修改和變型屬于本發(fā)明權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi)，則本發(fā)明也意圖包含這些改動(dòng)和變型在內(nèi)。