本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，具體涉及一種替諾福韋的制備方法。

背景技術(shù)：

替諾福韋是一種新型核苷酸類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，2001年10月以富馬酸替諾福韋酯的形式在美國上市，2008年FDA又批準(zhǔn)其治療成人慢性乙型肝炎。

現(xiàn)有技術(shù)中涉及替諾福韋的合成路線非常多，如US6653296(替諾福韋的物質(zhì)專利，1993年8月4日申請(qǐng))的實(shí)施例1、4、11和17中公開一種制備替諾福韋的合成路線：由3,4-2H-二氫吡喃與R-乳酸異丁基酯作為起始原料，經(jīng)五步反應(yīng)制備得到關(guān)鍵中間體R-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤，再經(jīng)氨基保護(hù)、縮合反應(yīng)和脫烷基化反應(yīng)制備得到替諾福韋。具體的合成路線如下所示：

如由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院于2012年12月4日申請(qǐng)的專利CN103848869中公開了一種制備替諾福韋的方法：使R-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤與對(duì)氟苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯在烴氧基鎂作用下進(jìn)行縮合，再脫烷基化得到替諾福韋。說明書中還提供了對(duì)氟苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯的合成方法，具體的合成路線如下：

如蘇州明銳醫(yī)藥科技有限公司于2013年7月12日申請(qǐng)的專利CN103396443中提供了一種新的制備替諾福韋的合成路線，具體的合成路線如下所示：

由上海迪賽諾化學(xué)制藥有限公司于2012年12月18日申請(qǐng)的專利CN103864847中公開了一種替諾福韋的制備工藝：將腺嘌呤、R-碳酸丙烯酯和對(duì)甲苯磺酰氧基甲基膦酸二酯為原料，采用“一鍋法”制備中間體，再通過無機(jī)酸脫烷基化得到替諾福韋。具體的合成路線如下所示：

這些合成路線都試圖制備得到收率高、純度高的替諾福韋，以使其能產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明亦是出于這一目的，開發(fā)了一條新的合成路線。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供的合成替諾福韋路線不同于已公開的路線，但是卻能達(dá)到并且超越現(xiàn)有技術(shù)中的效果。

為了達(dá)到本發(fā)明的目的，本發(fā)明的技術(shù)方案具體如下：

本發(fā)明一方面提供了一種替諾福韋的中間體化合物，它并非如現(xiàn)有技術(shù)中以單體的形式存在，而是以鹽的形式存在，名稱為R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤鹽，結(jié)構(gòu)式如下：

R₁為C1-C8的烷基，所述酸為有機(jī)酸。

較優(yōu)選地，為R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤鹽，

其中，所述R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤鹽為R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤 檸檬酸鹽，R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤丁二酸鹽或R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤富馬酸鹽。

更優(yōu)選地，以檸檬酸鹽的形式存在，

本發(fā)明另一方面提供了該中間體化合物鹽的制備方法，由R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤與相應(yīng)的酸反應(yīng)即可，反應(yīng)路線如下：

R₁為C1-C8的烷基，所述酸為有機(jī)酸。

較優(yōu)選地，由R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤與酸反應(yīng)制備，反應(yīng)路線如下：

較優(yōu)選地，其中所述酸為檸檬酸，丁二酸或富馬酸。

其中，所述溶劑可以為酯類溶劑，酮類溶劑或鹵代烴類溶劑。

其中，酯類溶劑可以為乙酸乙酯，乙酸丙酯或醋酸異丙酯；酮類溶劑可以為丙酮或甲基異丁基酮；鹵代烴類溶劑可以為二氯甲烷或氯仿。

成鹽反應(yīng)溫度可以為20～90℃，優(yōu)選地為70～80℃。

更優(yōu)選地，由R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤與檸檬酸反應(yīng)制備，反應(yīng)路線如下：

本發(fā)明再一方面提供了由R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤鹽制備替諾福韋的方法，反應(yīng)路線如下：

具體為由R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤鹽經(jīng)脫烷基化反應(yīng)制備。所述脫烷基化試劑可以為三甲基溴硅烷，氫溴酸等。R₁為C1-C8的烷基，所述酸為有機(jī)酸。較優(yōu)選地，其中所述酸為檸檬酸，丁二酸或富馬酸。

較優(yōu)選地，由R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤鹽經(jīng)脫乙基化反應(yīng)制備，反應(yīng)路線如下：

更優(yōu)選地，由R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽經(jīng)脫乙基化反應(yīng)制備，反應(yīng)路線如下：

所述脫乙基化試劑可以為三甲基溴硅烷或氫溴酸。

上述R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤可由腺嘌呤、(R)-碳酸丙烯酯為原料，經(jīng)反應(yīng)后與對(duì)甲苯磺酰氧甲基膦酸二酯經(jīng)一鍋法工藝制備得到。

本發(fā)明的技術(shù)方案中優(yōu)選的實(shí)施方式為：R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤與酸成鹽后，進(jìn)一步經(jīng)一鍋法在脫烷基化試劑的存在下經(jīng)脫烷基化反應(yīng)制備得到替諾福韋，

其中，R₁為C1-C8的烷基，所述酸為有機(jī)酸。優(yōu)選地為檸檬酸，丁二酸，富馬酸。

更優(yōu)選地實(shí)施方式為：R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤與檸檬酸成鹽后，進(jìn)一步在脫乙基化試劑的存在下經(jīng)脫乙基化反應(yīng)制備得到替諾福韋，

其中，所述R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤可由腺嘌呤、(R)-碳酸丙烯酯為原料，經(jīng)反應(yīng)后與對(duì)甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯經(jīng)一鍋法工藝制備得到。

本發(fā)明如果采用“一鍋法”操作能更加體現(xiàn)出本發(fā)明的優(yōu)勢。因而，進(jìn)一步地，采用“一鍋法”操作制備本發(fā)明的替諾福韋。具體為：以腺嘌呤、(R)-碳酸丙烯酯為原料，經(jīng)反應(yīng)后與對(duì)甲苯磺酰氧甲基膦酸二酯反應(yīng)，采用一鍋法工藝制備得到R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤，繼而通過與酸成鹽得到R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤鹽，

R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤鹽后經(jīng)脫烷基化反應(yīng)制備得到替諾福韋，

其中所述酸為有機(jī)酸，優(yōu)選地為檸檬酸，丁二酸或富馬酸，R₁為C1-C8的烷基。

較優(yōu)選地，以腺嘌呤、(R)-碳酸丙烯酯為原料，經(jīng)反應(yīng)后與對(duì)甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯反應(yīng)，采用一鍋法工藝制備得到R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤，繼而通過與檸檬酸成鹽得到R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽，

R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽后經(jīng)脫烷基化反應(yīng)制備得到替諾福韋，

雖然上海迪賽諾化學(xué)制藥有限公司于2012年12月18日申請(qǐng)的專利CN103864847中公開了一種替諾福韋的制備工藝：將腺嘌呤、R-碳酸丙烯酯和對(duì)甲苯磺酰氧基甲基膦酸二酯為原料，采用“一鍋法”制備中間體，再通過無機(jī)酸脫烷基化得到替諾福韋。但是本發(fā)明人經(jīng)重復(fù)后,即完全按照其實(shí)施例操作，根本不能得到那么高的收率和純度。這使得本領(lǐng)域技術(shù)人員有必要進(jìn)一步開發(fā)工藝，以獲得較好收率和純度替諾福韋產(chǎn)品的同時(shí)，又能兼顧到工藝的簡單操作性，以使工藝路線能夠產(chǎn)業(yè)化。

本發(fā)明按照上述迪賽諾專利申請(qǐng)的工藝重復(fù)后，有的做到了后處理直到精制操作的過程，有的僅到獲得粗品的過程。若是到后處理直到精制操作，得到的結(jié)果是位置異構(gòu)體雜質(zhì)0.47％、(R)-9-[2-(羥基)丙基]腺嘌呤殘留0.56％、其他未知雜質(zhì)0.10％、收率30％-35％，純度97.9％。具體可參見本發(fā)明實(shí)施例6和附圖中的HPLC圖譜圖7。

若是僅到獲得粗品的過程，得到的結(jié)果是位置異構(gòu)體雜質(zhì)9.13％、(R)-9-[2-(羥基)丙基]腺嘌呤殘留0.74％、其他未知雜質(zhì)3.20％、收率40-45％，純度77.1％。具體可參見本發(fā)明實(shí)施例5和附圖中的HPLC圖譜圖6。

但是，若是采用本發(fā)明的技術(shù)方案，無需經(jīng)過精制過程，本發(fā)明的替諾福韋產(chǎn)品質(zhì)量將是腺嘌呤殘留0.01％、位置異構(gòu)體雜質(zhì)殘留0.10％、(R)-9-[2-(羥基)丙基]腺嘌呤殘留0.2％、其他未知雜質(zhì)0.10％、收率65％，純度99.4％。具體可參見本發(fā)明實(shí)施例4和附圖中的HPLC圖譜圖5。位置異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)式如下：

進(jìn)一步地，本發(fā)明相比于現(xiàn)有技術(shù)的效果體現(xiàn)在位置異構(gòu)體雜質(zhì)的顯著減少上，能從9.13％顯著地控制至0.10％。

而本發(fā)明的位置異構(gòu)體減少原因在于本發(fā)明技術(shù)方案中的成鹽步驟上。本發(fā)明的上述成鹽步驟中，如下反應(yīng)式：

R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤中所含異構(gòu)體雜質(zhì)含量為4.97％，見本發(fā)明實(shí)施例10中HPLC圖譜8，而經(jīng)過成鹽這一步驟后，所含異構(gòu)體雜質(zhì)含量為0.87％，見本發(fā)明實(shí)施例1中HPLC圖譜2。

由于本發(fā)明的技術(shù)方案即使不經(jīng)過精制過程，相比于已有的合成路線，也能獲得收率高、純度高的替諾福韋產(chǎn)品，因而更加適合替諾福韋的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，具備一定的經(jīng)濟(jì)效益。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1制備得到的R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽PXRD圖譜；

圖2為制備得到的R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽HPLC圖譜；

圖3為實(shí)施例2制備得到的R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤丁二酸鹽PXRD圖譜；

圖4為實(shí)施例3制備得到的R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤富馬酸鹽PXRD圖譜；

圖5為實(shí)施例4制備得到的替諾福韋HPLC圖譜；

圖6為實(shí)施例5中重復(fù)上海迪賽諾化學(xué)制藥有限公司于2012年12月18日申請(qǐng)的專利CN103864847中的實(shí)施例2一鍋法制備替諾福韋粗品的HPLC圖譜；

圖7為實(shí)施例6中重復(fù)上海迪賽諾化學(xué)制藥有限公司于2012年12月18日申請(qǐng)的專利CN103864847中的實(shí)施例2一鍋法制備替諾福韋粗品后精制的HPLC圖譜；

圖8為實(shí)施例10中“一鍋法”制備R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤的HPLC圖譜。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的一種替諾福韋的合成方法進(jìn)行詳細(xì)說明。需要理解的是，這些實(shí)施例描述只是為進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明的特征，而不是對(duì)本發(fā)明范圍或本發(fā)明權(quán)利要求范圍的限制。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：制備R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽

向反應(yīng)瓶中投入70mlDMF，攪拌下加入13.5g腺嘌呤和0.2gNaOH，攪拌10-15min，投入12.2g(R)-碳酸丙烯酯，升溫。取樣HPLC檢測，降溫。投入叔丁醇鎂，升溫。滴加51.5g對(duì)甲苯磺酰氧基磷酸二乙酯和35mlDMF混合液。保溫。用TLC跟蹤反應(yīng)，反應(yīng)完，冷卻，并用冰醋酸調(diào)節(jié)pH。減壓除去DMF，濃縮畢，加入水和二氯甲烷，攪拌，靜置，用二氯甲烷萃取水層兩次，合并有機(jī)相，減壓除去溶劑，得淡黃色油狀液體。投入200ml乙酸乙酯，攪拌升溫。升溫至70-75℃，投入21g檸檬酸，回流保溫1h。降溫析料，緩慢降溫至0-5℃。保溫2-3h。抽濾，淋洗，濕品65-75℃真空度為-0.08KPa～-0.1KPa真空干燥12小時(shí)以上，得到R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽53.5g。HPLC純度98％，其PXRD圖譜見圖1，HPLC圖譜見圖2。

¹H NMR(400MHz，D₂O)：δ8.20(s，1H)，8.13(s，1H)，3.95-3.64(m，9H)，2.59(d，2H)，1.26-1.24(t，3H)，1.17-1.14(t，3H)，1.09-1.05(d，3H)

本發(fā)明實(shí)施例1亦可拿現(xiàn)有技術(shù)中已制備得到的R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤直接來與酸成鹽制備R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽。

實(shí)施例2：制備R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤丁二酸鹽

按照實(shí)施例1的操作，將21g檸檬酸替換為11.8g丁二酸，獲得R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤丁二酸鹽34.7g。HPLC純度98.4％，其PXRD圖譜見圖3。

¹H NMR(400MHz，D₂O)：δ8.37(s，1H)，8.29(s，1H)，4.04-3.70(m，9H)，2.95-2.91(d，2H)，2.81-2.77(d，2H)，1.29-1.28(t，3H)，1.22-1.19(t，3H)，1.16-1.12(d，3H)

實(shí)施例3：制備R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤富馬酸鹽

按照實(shí)施例1的操作，將21g檸檬酸替換為11.6g富馬酸，獲得R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤富馬酸酸鹽35.5g，HPLC純度93.5％，其PXRD圖譜見圖4。

¹H NMR(400MHz，D₂O)：δ8.39-8.38(s，1H)，8.30(s，1H)，6.71-6.70(d，2H)，4.79-3.70(m，9H)，1.29-1.27(t，2H)，1.22-1.19(t，3H)，1.16(d，3H)

實(shí)施例4：制備替諾福韋

向反應(yīng)瓶中投入200ml乙腈，攪拌下加入實(shí)施例1制備得到的53.5g R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤檸檬酸鹽，攪拌。于20-25℃滴加60.4g三甲基溴硅烷，約0.5-1h滴畢。滴畢，升溫至70-75℃保溫2-3h。TLC跟蹤反應(yīng)，(展開劑：二氯甲烷：甲醇＝5:1)反應(yīng)畢，減壓除去乙腈。濃縮畢，加入180ml水和200ml二氯甲烷，攪拌，靜置，分層，水層再用二氯甲烷萃取。水層冷卻至0-5℃，在0-5℃下用30％液堿調(diào)節(jié)pH至2.5～3.0，析出大量白色固體。在0-5℃攪拌3-4h，抽濾，用50ml丙酮淋洗，濾餅在65-75℃真空度為-0.08KPa～-0.1KPa真空干燥12小時(shí)以上，得替諾福韋19.8g，收率65％，HPLC純度99.4％，位置異構(gòu)體雜質(zhì)殘留0.10％、(R)-9-[2-(羥基)丙基]腺嘌呤殘留0.2％、其他未知雜質(zhì)0.10％。其HPLC圖譜見圖5。

實(shí)施例5：重復(fù)上海迪賽諾化學(xué)制藥有限公司于2012年12月18日申請(qǐng)的專利CN103864847中的實(shí)施例2一鍋法制備替諾福韋粗品

位置異構(gòu)體雜質(zhì)9.13％、(R)-9-[2-(羥基)丙基]腺嘌呤殘留0.74％、其他未知雜質(zhì)3.20％、收率40-45％，純度77.1％。HPLC圖譜見圖6。

實(shí)施例6：重復(fù)上海迪賽諾化學(xué)制藥有限公司于2012年12月18日申請(qǐng)的專利CN103864847中的實(shí)施例2一鍋法制備替諾福韋粗品后精制

位置異構(gòu)體雜質(zhì)0.47％、(R)-9-[2-(羥基)丙基]腺嘌呤殘留0.56％、其他未知雜質(zhì)0.10％、收率30-35％，純度97.9％，HPLC圖譜見圖7。

實(shí)施例7:“一鍋法”制備R-9-[2-(二乙基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤

向反應(yīng)瓶中投入70mlDMF，攪拌下加入13.5g腺嘌呤和0.2gNaOH，攪拌，投入12.2g(R)-碳酸丙烯酯，升溫至140℃，在140℃保溫。取樣HPLC檢測。降溫。投入叔丁醇鎂，攪拌升溫。滴加51.5g對(duì)甲苯磺酰氧基磷酸二乙酯和35mlDMF混合液。滴完后，保溫。用TLC跟蹤反應(yīng)，反應(yīng)完，冷卻，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH。減壓除去DMF。濃縮畢，加入水和二氯甲烷，攪拌，靜置，用二氯甲烷萃取水層兩次，合并有機(jī)相，減壓除去溶劑，得R-9-[2-(二烷基膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤淡黃色油狀液體。HPLC85.6％，HPLC圖譜見圖8。