一種磁性瓊脂糖微球的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種磁性瓊脂糖微球的制備方法，包括瓊脂糖無磁性微球的制備，瓊脂糖無磁性微球活化交聯(lián)，瓊脂糖無磁性微球鐵離子溶液的制備和化學(xué)共轉(zhuǎn)制備磁性瓊脂糖微球。本發(fā)明對傳統(tǒng)的瓊脂糖包覆磁性粒子的方法進(jìn)行改進(jìn)，由傳統(tǒng)的直接包覆法改進(jìn)為間接包覆法。本發(fā)明的優(yōu)勢在于，制備出的磁性瓊脂糖微球，因內(nèi)部穿插包覆著磁性四氧化三鐵磁芯粒子，極大強(qiáng)度的增加了瓊脂糖的機(jī)械強(qiáng)度，克服了質(zhì)地軟，結(jié)構(gòu)容易破壞，使用壽命短的缺陷，同時(shí)磁性粒子具備超順磁性，磁響應(yīng)性強(qiáng)，外加磁場下可實(shí)現(xiàn)迅速分離；磁球同傳統(tǒng)方法相比，成球性得到改善，球體圓潤，不易團(tuán)聚結(jié)塊，分散性好，粒徑分布均勻，比表面積增大使得分離純化率提高。
【專利說明】一種磁性瓊脂糖微球的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于磁性有機(jī)無機(jī)復(fù)合材料【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是涉及一種磁性瓊脂糖微球的制備方法。
[0002]
【背景技術(shù)】
[0003]目前生物醫(yī)藥領(lǐng)域常用的用來進(jìn)行分離、純化的材料基質(zhì)可以分為無機(jī)和有機(jī)兩大類。無機(jī)基質(zhì)的介質(zhì)主要包括硅膠、多孔玻璃、羥基磷灰石等，多作為高效液相色譜的填充料。有機(jī)基質(zhì)的介質(zhì)通常為天然多糖、合成高聚物等，這些材料制備成的基質(zhì)通常為珠球狀。通常一種母體結(jié)構(gòu)的基球經(jīng)過化學(xué)修飾可以衍生出具有不同功能基團(tuán)、不同結(jié)構(gòu)、不同性能、不同種類的分離介質(zhì)。由此可見，基球是各種分離介質(zhì)最基礎(chǔ)、最重要的“原材料”。由于基球具有多種優(yōu)良性能，不但是分離介質(zhì)的母體，還可以作為固定化酶及催化劑的載體等，在生物工程、醫(yī)藥制備乃至電子信息工業(yè)等領(lǐng)域都獲得了廣泛的應(yīng)用?；蚩勺鳛槎喙δ懿牧?，尤其是微米級的微球受到更廣泛的應(yīng)用。
[0004]瓊脂糖是從海藻中提取的一種線性、水溶性天然多糖，是由1，3_連接的β-D-吡喃半乳糖和1，4-連接的3，6-脫水- a -L吡喃半乳糖殘基交替連接而成的聚合物。球珠狀瓊脂糖凝膠具有理想的分離基質(zhì)特性。瓊脂糖凝膠作為基質(zhì)，有如下優(yōu)點(diǎn):①富含羥基，經(jīng)化學(xué)活化后，可偶聯(lián)各種配基多空網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，利于大分子物質(zhì)在珠體內(nèi)的擴(kuò)散，從而增加配基的有效密度具有較好的親水性，以使生物分子易于靠近并與配體作用，不會(huì)使生物分子失活；④不帶電荷，非特異性吸附能力極小。在緩沖液離子強(qiáng)度> 0.05mol/L時(shí)，對蛋白質(zhì)幾乎沒有非特異性吸附。因此，它是分離介質(zhì)的一種良好的惰性支持物，常被用作親和色譜法、離子交換色譜法、疏水交換色譜法(HIC)、反相色譜法中的基質(zhì)，用于分離、純化等生化領(lǐng)域，例如，Shahab Lahootid 等人(Shahab Lahootid 和 Michael V.Sefton,Effect of an immobilization matrix and capsule permeability on thevariabilityof encapsulated HEK cells, Biomaterials.21 (2000) 987-995)描述了被甲基丙烯酸羥乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物殼所包圍的作為核物質(zhì)的瓊脂糖，其被植入到HEK細(xì)胞中。研究表明，瓊脂糖有利于植入細(xì)胞活性和細(xì)胞分裂以及增值。Hiroyuki Hayashi等人(Hiroyuki Hayashij Kazutomo Inouej TunAung 等人,Application of a novel Bcell line MIN6 to amesh -reinforced polyvinyl alcohol hydrogel tube and threelayeragarose microcapsules:An in vitro study，Cell TranspIantation5 (1996)S56-S69)描述了瓊脂糖在制備三層凝膠微球中的用途，所述膠囊被用來植入到B細(xì)胞線MIN6中。該研究表明，植入的B細(xì)胞線MIN6具有比未被植入的MIN6高出兩倍的胰島素分泌速度。
[0005]目前基質(zhì)微球的制備方法有多種，主要有懸浮聚合(包括反相懸浮聚合)、乳液聚合、分散聚合、種子溶脹聚合等不同的制備工藝。近十幾年又出現(xiàn)了膜乳化-懸浮聚合工藝。瓊脂糖作為重要的分離基質(zhì)，目前最常用的制備方法是反相微乳液法即將瓊脂糖熱熔于水相中，以具有一定粘度的有機(jī)相作為油相，在高溫下使熱熔的瓊脂糖水相分散于有機(jī)相中，迅速降溫冷卻，使瓊脂糖凝結(jié)成珠球，中國專利CN 1524878A申請了一種反相微乳法制備的瓊脂糖微球用于純化基因工程重組干擾素的技術(shù)。中國專利號CN 1472002A申請了一種反相微乳液法制備高通量瓊脂糖微球的技術(shù)。另一種近幾年新興起的制備方法是反相微乳法-膜乳化法制備瓊脂糖微球，即在反相微乳法的基礎(chǔ)上，通過壓強(qiáng)變化將瓊脂糖熱熔水相通過特定孔徑膜進(jìn)入有機(jī)相中冷卻成球，從而更好的控制微球粒徑均勻。中國專利號CN 101715364 B申請了反相微乳液-膜乳化法制備瓊脂糖多糖球珠的方法。中國專利CN 20041000087.9描述了傳統(tǒng)多微孔膜化來制備具有可控粒徑的瓊脂糖糖珠。
[0006]上述專利申請制備的瓊脂糖微球，只能夠作為填充料應(yīng)用于各種分離柱中來達(dá)到分離純化目的，只能夠與各 種色譜儀器配合使用，不可以單獨(dú)作為基質(zhì)來達(dá)到分離目的。在色譜分離和生物分子凈化過程中，分離介質(zhì)是否能夠承受住高流速是一個(gè)重要限制，而廣泛應(yīng)用于生物分離領(lǐng)域中的瓊脂糖介質(zhì)相關(guān)的某些問題是已知的，瓊脂糖凝膠結(jié)構(gòu)是通過氫鍵的相互作用而形成的。在凝膠態(tài)，多糖鏈將通過鏈間交錯(cuò)的氫鍵而形成多空網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，這種通過氫鍵的相互作用而形成凝膠具有低的機(jī)械強(qiáng)度，并因此不能經(jīng)受住非常高的流速，因?yàn)轭w粒比較軟，在層析分離時(shí)常常會(huì)出現(xiàn)壓緊或阻塞層析柱的現(xiàn)象，造成流速過慢，使用壽命短等問題。同時(shí)由于儀器使用的限制，增加了操作的復(fù)雜性，在進(jìn)柱前，樣品必須經(jīng)過一系列復(fù)雜的前處理，例如需經(jīng)過細(xì)胞破碎、離心分離、鹽析沉淀、溶解沉淀等操作步驟，大大增加了分離純化的難度與時(shí)間，加上色譜儀器維護(hù)等問題大大提高了操作的成本，并不適合大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。
[0007]為了克服瓊脂糖凝膠機(jī)械強(qiáng)度低的缺點(diǎn)，近年來，有相關(guān)報(bào)道，在瓊脂糖微球中引入磁性物質(zhì)，以此來作為骨架支撐，增加瓊脂糖的機(jī)械強(qiáng)度，并可以脫離儀器，通過磁性來單獨(dú)使用，以實(shí)現(xiàn)分離目的。例如，董聿生等人(參考Journal ofNorthwestUniversity (NaturalScience Edition, Apr.2001V0.1 31 N0.2)反相微乳法包覆四氧化三鐵制備磁性瓊脂糖微球分離尿激酶。李嘉興等人(參考Chemical Engineering Journal 172 (2011)892 - 897)反相微乳法包覆四氧化三鐵吸附放射性核素等。但該方法制備的磁性的瓊脂糖微球存在包覆不均勻、包覆效率低、呈球形差，比表面積小等缺點(diǎn)，雖然改善了瓊脂糖的機(jī)械性能，但同時(shí)帶來了新的缺陷，如分離純化慮低，磁響應(yīng)性差等。
[0008]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明對傳統(tǒng)的瓊脂糖包覆磁性粒子的方法進(jìn)行改進(jìn)，由傳統(tǒng)的直接包覆法改進(jìn)為間接包覆法。本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
一種磁性瓊脂糖微球的制備方法，包括下述步驟:
①瓊脂糖無磁性微球的制備
(1)提供含有添加劑的瓊脂糖水溶液作為水相W，在一定溫度下加熱使瓊脂糖溶解，其中瓊脂糖在這種溶液中的濃度為0.lwt%-20wt% ；
(2)提供與水相W不相混容的有機(jī)溶劑作為油相0，并在其中溶解乳化劑，其中油相O中的乳化劑濃度為0.1wt%-1.5wt% ；
(3)將油相O加熱至在40°C-90°C并且在200-1000rpm的攪拌速度下攪拌，然后將瓊脂糖水相W加入到油相O中，保持溫度和攪拌速度反應(yīng)一段時(shí)間獲得W/Ο乳液；水相W與油相O的體積比為1:1~1000 ；
(4)5-10min內(nèi)降低步驟(3)得到的W/Ο乳液至15~40°C，以形成瓊脂糖無磁性微球；
②瓊脂糖無磁性微球活化交聯(lián)
(1)配制氫氧化鈉溶液；
(2)按照瓊脂糖無磁性微球與硼氫化鈉質(zhì)量比1000-10:1稱取上述瓊脂糖無磁性微球和硼氫化鈉，然后加入到氫氧化鈉溶液中，瓊脂糖無磁性微球與硼氫化鈉混合物在氫氧化鈉溶液中的濃度0.01~1(^/1111，在20~301:以及30(T600rpm下反應(yīng)l(T45min ；
(3)向步驟(2)的溶液中加入體積比為1:廣100的環(huán)氧氯丙烷和二甲基亞砜交聯(lián)劑混合液，交聯(lián)劑混合液與步驟(2)的溶液體積比為1:1~100，在2(T30°C以及30(T600rpm下反應(yīng)5~20h ；
(4)洗滌，除去未反應(yīng)的試劑，得到活化交聯(lián)的瓊脂糖無磁性微球；
③瓊脂糖無磁性微球鐵離子溶液的制備 (O配制二價(jià)鐵離子與三價(jià)鐵離子混合溶液；
(2)將上述活化交聯(lián)的瓊脂糖無磁性微球加入到步驟(1)的混合溶液中，瓊脂糖無磁性微球的濃度為0.01-2g/ml，在30-60°C以及200_600rpm下浸泡10_120h ；
④化學(xué)共轉(zhuǎn)制備磁性瓊脂糖微球
(1)按照瓊脂糖無磁性微球鐵離子溶液與氨水體積比為1~100:1的比例將氨水加入到瓊脂糖無磁性微球鐵離子溶液中；在40-80°C以及200-1000rpm下通入氮?dú)夥磻?yīng)，制備得到四氧化三鐵磁芯；
(2)在磁場下分離洗滌，保存，得到磁性瓊脂糖微球。
[0010]優(yōu)選的，在步驟①-(I)中，其中水相W的添加劑為氯化鈉、葡萄糖、軟磷脂或甘露醇。
[0011]優(yōu)選的，在步驟①-(2)中，其中油相O為液體石蠟、石油醚、橄欖油、棉籽油、大豆油、向日葵籽油以及一些烷烴類中的一種或幾種；油相O中添加的乳化劑為甘油醚聚合物P0-500、脫水山梨糖醇倍半油酸酯Arlace 183、聚乙二醇?xì)浠吐橛?、脫水山梨糖醇三油酸酯Span 85、脫水山梨糖醇單油酸酯Span 80以及脫水山梨糖醇三硬脂酸酯Span 65中的一種或幾種。
[0012]優(yōu)選的，步驟②-(I)中的氫氧化鈉濃度為0.lmol/L-2mol/L0
[0013]優(yōu)選的，步驟③-(I)中的鐵離子溶液中的二價(jià)鐵離子與三價(jià)鐵離子的物質(zhì)的量之比為1~10:1 ;配制混合溶液所用的水為去除其中含有的氧氣的水。
[0014]本發(fā)明制備的磁性瓊脂糖微球成球圓滑、分散性好、不產(chǎn)生團(tuán)聚、并且其為磁響應(yīng)性強(qiáng)的超 順磁性納米粒子。本發(fā)明的優(yōu)勢在于，制備出的磁性瓊脂糖微球，因內(nèi)部穿插包覆著磁性四氧化三鐵磁芯粒子，極大強(qiáng)度的增加了瓊脂糖的機(jī)械強(qiáng)度，克服了質(zhì)地軟，結(jié)構(gòu)容易破壞，使用壽命短的缺陷，同時(shí)磁性粒子具備超順磁性，磁響應(yīng)性強(qiáng)，外加磁場下可實(shí)現(xiàn)迅速分離，脫離色譜儀器，獨(dú)立使用以避免復(fù)雜的前處理；磁球同傳統(tǒng)方法相比，成球性得到改善，球體圓潤，不易團(tuán)聚結(jié)塊，分散性好，粒徑分布均勻，比表面積增大使得分離純化率提聞。磁性物質(zhì)包覆率大大得到提聞，可達(dá)90%以上。
[0015]【專利附圖】

【附圖說明】
[0016]圖1為本發(fā)明制備得到的磁性瓊脂糖微球光學(xué)顯微鏡照片；
圖2為本發(fā)明制備得到的無磁性瓊脂糖微球光學(xué)顯微鏡照片；
圖3為本發(fā)明制備得到的的磁性瓊脂糖微球宏觀照片，其中(a)為分散狀態(tài)下照片；(b)為(a)在磁場下的迅速分離照片。
[0017]
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合附圖以及實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0019]1.本發(fā)明的一種瓊脂糖無磁性微球的制備方法，包括下述步驟:
(O提供含有一種或幾種添加劑的瓊脂糖水溶液作為水相W，在一定溫度下加熱使瓊脂糖溶解。
[0020](2)提供與水相不能相混容的一種或幾種有機(jī)溶劑作為油相0，并在其中溶解一種或幾種乳化劑。在恒定溫度、恒定轉(zhuǎn)速下加熱和攪拌油相0，按照一定比例將水相W加入到油相O中，并在一定轉(zhuǎn)速下機(jī)械攪拌反應(yīng)一定時(shí)間來獲得W/Ο乳液。
[0021](3)極速降低W/Ο乳液滴到一定溫度，來形成瓊脂糖微球。
[0022]更明確的說明是，在步驟(1)中，提供的瓊脂糖水溶液具有一個(gè)預(yù)設(shè)濃度，該含有瓊脂糖的水溶液將作為本發(fā)明中的含水相W，該瓊脂糖水溶液，將會(huì)在水不混容的有機(jī)相相中形成含水的小液滴。瓊脂糖在這種溶液中的濃度為0.lwt%-20wt%。其中水相的添加劑可以包括對人體無害的水溶性物質(zhì)，例如，氯化鈉、葡萄糖、軟磷脂、甘露醇等。
[0023]在步驟(2)中提供的油相是于水互不相容的，在室溫下為液體的有機(jī)溶劑，并需具有一定的粘度，優(yōu)選高沸點(diǎn)、低揮發(fā)性的有機(jī)試劑，如，液體石蠟、石油醚、橄欖油、棉籽油、大豆油、向日葵籽油以及一些烷烴類。油相可以是一種也可以是幾種以一定比例的混合物。油相中需添加一種或幾種混合乳化劑，該乳化劑必須溶能夠溶解在該油相中，例如，甘油醚聚合物(P0-500)、脫水山梨糖醇倍半油酸酯(Arlace 183)，聚乙二醇?xì)浠吐橛?、脫水山梨糖醇三油酸?Span 85)、脫水山梨糖醇單油酸酯(Span 80)或脫水山梨糖醇三硬脂酸酯(Span 65)。油相中的乳化劑濃度為0.1wt%-1.5wt%，水相與油相體積比1:1-1:1000。
[0024]步驟(3)和(4)的操作溫度均高于室溫，所需溫度與瓊脂糖材料的熔點(diǎn)以及瓊脂糖水性溶液含量有關(guān)，溫度范圍控制40°C -90°C。機(jī)械攪拌速度與油相組成有關(guān)，控制在200-1000rpmo
[0025]步驟(5)降低溫度與瓊脂糖材料以及含量有關(guān)，需降低至15_40°C.2.瓊脂糖微球活化交聯(lián)，包括以下幾個(gè)步驟。
[0026](I)配制一定濃度的氫氧化鈉溶液
(2)取一定質(zhì)量的上述微球,加入一定質(zhì)量的硼氫化鈉以及一定體積的氫氧化鈉溶液，恒溫恒速反應(yīng)一定時(shí)間。
[0027](3)向上述試劑中加入一定體積的二甲基亞砜和環(huán)氧氯丙烷，恒溫恒速反應(yīng)一定時(shí)間。
[0028]具體體說明，步驟(1)中提供的氫氧化鈉用來活化微球表面基團(tuán)，其濃度在范圍0.lmol/L_2mol/L0
[0029]步驟(2)中瓊脂糖微球與硼氫化鈉質(zhì)量比1000:1-10:1。瓊脂糖微球與硼氫化鈉混合物在氫氧化鈉溶液中的濃度0.01-10g/ml。
[0030]步驟(3)環(huán)氧氯丙烷、二甲基亞砜體積比范圍1:1-1:100。交聯(lián)劑混合液與微球氫氧化鈉混合液體積比范圍，1:1-1:100。
[0031]3.含鐵離子瓊脂糖微球制備
(O配制一定比例的二價(jià)鐵離子與三價(jià)鐵離子溶液。
[0032](2)上述活化交聯(lián)后的微球與鐵離子溶液按一定濃度配制，恒溫、恒速浸泡一定時(shí)間。
[0033]詳細(xì)說明，步驟(1)中的鐵離子溶液中，二價(jià)鐵離子與三價(jià)鐵離子的物質(zhì)量比1:1-10:1，配制溶液所用的水應(yīng)為去氧水，去除其中的氧氣，以免二價(jià)鐵離子氧化。
[0034]步驟(2)中微球鐵離子溶液濃度0.01_2g/ml，溫度與瓊脂糖微球有關(guān)，在30-60°C，速度控制在 200-600rpm，浸泡在 10_120h。
[0035]4.化學(xué)共轉(zhuǎn)制備磁芯
(O 一定質(zhì)量上述制 備的微球鐵離子溶液，按一定比例加入氨水，控制溶液堿性條件。恒溫恒速，通入氮?dú)夥磻?yīng)，制備四氧化三鐵磁芯。
[0036](2)磁場分離洗滌，保存，得到磁性瓊脂糖微球。
[0037]進(jìn)一步闡述，步驟(1)中微球鐵離子溶液與氨水體積比1:1-100:1。溫度、攪拌速度與微球本身有關(guān)，控制在40-80°C，轉(zhuǎn)速200-1000rpm。
[0038]實(shí)施例一:
1.無磁性瓊脂糖微球制備:
(1)2.0g瓊脂糖微球加入100mL超純水，100°C加熱，制備瓊脂糖水相W。
[0039](2)液體石臘180ml、石油醚40ml,加入8.0g乳化劑Span 80,充分分散制備油相O0
[0040](3)油相O恒溫加熱80°C，機(jī)械攪拌400rpm，迅速將水相移入，反應(yīng)3h。
[0041 ] (4)冰水浴迅速降溫至15°C.2.無磁性瓊脂糖微球活化交聯(lián):
(I)取微球 5g，加入 0.8mol/L 的 Na0H7.5ml，硼氫化鈉 0.01g, 25°C，400rpm震蕩 30min。
[0042](2)向上述溶液加入二甲基亞砜7.5ml,環(huán)氧氯丙烷3.75ml。30°C恒溫400rpm反應(yīng) 20h。
[0043](3)洗滌，除去未反應(yīng)的試劑。
[0044]3.瓊脂糖鐵離子溶液制備
(I)取4.32gFeCl3,15.92gFeCl2,溶于200ml去氧水，配制鐵離子溶液。
[0045](2) 30g微球溶于上述鐵離子溶液中，45°C，400rpm震蕩浸泡90h。
[0046]4.四氧化三鐵磁芯制備
(I)15g上述浸泡后的微球加150ml去氧水。60°C下,加入40ml氨水,攪拌通入氮?dú)?，反?yīng)3h。
[0047]( 2 )磁場分離，無水乙醇、水洗滌。
[0048](3)微球保存在20%乙醇溶液中。4°C保存。
【權(quán)利要求】
1.一種磁性瓊脂糖微球的制備方法，包括下述步驟: ①瓊脂糖無磁性微球的制備 (1)提供含有添加劑的瓊脂糖水溶液作為水相W，在一定溫度下加熱使瓊脂糖溶解，其中瓊脂糖在這種溶液中的濃度為0.1wt°r20wt% ； (2)提供與水相W不相混容的有機(jī)溶劑作為油相O，并在其中溶解乳化劑，其中油相O中的乳化劑濃度為0.1wt0^l.5wt% ； (3)將油相O加熱至在40°C~90°C并且在20(T1000rpm的攪拌速度下攪拌，然后將瓊脂糖水相W加入到油相O中，保持溫度和攪拌速度反應(yīng)一段時(shí)間獲得W/0乳液；水相W與油相O的體積比為1:1~1000 ； (4)5^10min內(nèi)降低步驟(3)得到的W/Ο乳液至15~40°C，以形成瓊脂糖無磁性微球； ②瓊脂糖無磁性微球活化交聯(lián) (1)配制氫氧化鈉溶液； (2)按照瓊脂糖無磁性微球與硼氫化鈉質(zhì)量比1000-10:1稱取上述瓊脂糖無磁性微球和硼氫化鈉，然后加入到氫氧化鈉溶液中，瓊脂糖無磁性微球與硼氫化鈉混合物在氫氧化鈉溶液中的濃度0.01~10g/ml，在20~30°C以及30(T600rpm下反應(yīng)l(T45min ； (3)向步驟(2)的溶液中加入體積比為1:廣100的環(huán)氧氯丙烷和二甲基亞砜交聯(lián)劑混合液，交聯(lián)劑混合液與 步驟(2)的溶液體積比為1:1~100，在2(T30°C以及30(T600rpm下反應(yīng)5~20h ； (4)洗滌，除去未反應(yīng)的試劑，得到活化交聯(lián)的瓊脂糖無磁性微球； ③瓊脂糖無磁性微球鐵離子溶液的制備 (O配制二價(jià)鐵離子與三價(jià)鐵離子混合溶液； (2)將上述活化交聯(lián)的瓊脂糖無磁性微球加入到步驟(1)的混合溶液中，瓊脂糖無磁性微球的濃度為0.01~28/1111，在30~601:以及20(T600rpm下浸泡10~120h ； ④化學(xué)共轉(zhuǎn)制備磁性瓊脂糖微球 (1)按照瓊脂糖無磁性微球鐵離子溶液與氨水體積比為廣100:1的比例將氨水加入到瓊脂糖無磁性微球鐵離子溶液中；在4(T80°C以及20(T1000rpm下通入氮?dú)夥磻?yīng)，制備得到四氧化三鐵磁芯； (2)在磁場下分離洗滌，保存，得到磁性瓊脂糖微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性瓊脂糖微球的制備方法，其特征在于:在步驟①-(I)中，其中水相W的添加劑為氯化鈉、葡萄糖、軟磷脂或甘露醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性瓊脂糖微球的制備方法，其特征在于:在步驟①-(2)中，其中油相O為液體石蠟、石油醚、橄欖油、棉籽油、大豆油、向日葵籽油以及一些烷烴類中的一種或幾種；油相O中添加的乳化劑為甘油醚聚合物P0-500、脫水山梨糖醇倍半油酸酯Arlace 183、聚乙二醇?xì)浠吐橛?、脫水山梨糖醇三油酸酯Span 85、脫水山梨糖醇單油酸酯Span 80以及脫水山梨糖醇三硬脂酸酯Span 65以及中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性瓊脂糖微球的制備方法，其特征在于:步驟②-(I)中的氫氧化鈉濃度為0.lmol/L-2mol/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性瓊脂糖微球的制備方法，其特征在于:步驟③-(I)中的鐵離子溶液中的二價(jià)鐵離子與三價(jià)鐵離子的物質(zhì)的量之比為fl0:l ;配制混合溶液所用的水為去除其中 含有的氧氣的水。
【文檔編號】C08L5/12GK103980519SQ201410226620
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月27日
【發(fā)明者】趙九蓬, 馬麗華, 李垚 申請人:哈爾濱工業(yè)大學(xué)