一種茯苓多糖的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種茯苓多糖的提取方法，屬于多糖提取【技術領域】，包括以下步驟：（1）將茯苓粉碎后加水浸泡30min；（2）向所述茯苓中加入復合酶；（3）將所述反應液中和后加水升溫至80℃，浸提反應90min；（4）采用乙醇醇沉所述反應液，然后采用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌所述醇沉后的反應液，即得多糖粗品；（5）純化茯苓多糖。本發(fā)明通過提供一種茯苓多糖的提取方法，能顯著提高茯苓多糖的浸出率，不僅提取的茯苓多糖立體結(jié)構(gòu)不易被破壞、生物活性高，而且具有浸提時間縮短，提取條件溫和的優(yōu)點，相對于現(xiàn)有技術，具有優(yōu)異的效果。
【專利說明】一種茯苓多糖的提取方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于多糖提取【技術領域】，具體涉及一種茯苓多糖的提取方法。
【背景技術】
[0002]茯苓(Poria coccus wolf)為多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，是常用的傳統(tǒng)中藥，具有滲濕、健脾、利尿等功能。茯苓多糖(pachyman)具有抑制腫瘤生長，調(diào)節(jié)機體免疫等功能。近年來茯苓多糖的提取一般用熱水浸提法、堿液浸提法、酸液浸提法等先得到茯苓多糖的粗品再通過純化工藝得到茯苓多糖的精品。熱水浸提法時間長且多糖提取率低，而酸堿液浸提法浸提程序較繁瑣，浸提條件較劇烈，極易破壞多糖的立體結(jié)構(gòu)，使其生物活性受到限制。以上傳統(tǒng)的提取方法中，提取時間較長，工藝條件難以控制使得茯苓多糖立體結(jié)構(gòu)易破壞、生物活性較低，提取效果不好。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]發(fā)明目的:針對現(xiàn)有技術中存在的不足，本發(fā)明的目的是提供一種茯苓多糖的提取方法，能顯著提高茯苓多糖的浸出率，不僅提取的茯苓多糖立體結(jié)構(gòu)不易被破壞、生物活性高，而且具有浸提時間縮短，提取條件溫和的優(yōu)點。
[0004]技術方案:為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術方案如下:
采用酶解和熱水浸提法提取茯苓多糖，包括以下步驟:
(1)將茯苓粉碎后加水浸泡30min；
(2)向所述茯苓中加入復合酶；
(3)將所述反應液中和后加水升溫至`80°C，浸提反應90min；
(4)采用乙醇醇沉所述反應液，然后采用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌所述醇沉后的反應液，即得多糖粗品；
(5)純化茯苓多糖。
[0005]所述復合酶先加水在40°C時活化反應10min后再加入所述茯苓中。
[0006]所述復合酶加入獲茶中后保持反應溫度為48°C, pH為5,浸泡反應90min。
[0007]所述茯苓多糖的純化包括以下步驟:
(1)通過去蛋白質(zhì)大孔樹脂吸附純化所述茯苓多糖；
(2)將所述吸附純化后的茯苓多糖洗脫液濃縮后透析；
(3 )冷凍干燥所述透析液的濃縮物。
[0008]本發(fā)明通過設計一系列實驗，對影響酶解過程的因素進行分析，發(fā)現(xiàn)影響酶法提取茯苓多糖的因素主要有:酶加入量、酶解PH值、酶解溫度、酶解時間、固液比等。本發(fā)明設計一系列實驗就酶解過程中不同因素對茯苓多糖提取率的影響做了比較。同時，通過對影響熱水浸提過程的因素設計實驗得出，酶解反應和80°C熱水浸提兩個階段都很重要；對其中酶解后再用熱水浸提的過程中，主要評價了浸提時間、溫度、固液比對茯苓多糖浸出率的影響。通過一系列實驗的設計得出最佳反應時間和工藝條件，從而優(yōu)化了工藝方法。[0009]本發(fā)明采用復合酶和熱水浸提法提取茯苓多糖，使提取時間縮短，多糖提取率提高，同時能保持茯苓多糖的生物活性，適合于茯苓多糖在醫(yī)藥和保健品方面的開發(fā)。
[0010]有益效果:本發(fā)明通過提供一種茯苓多糖的提取方法，能顯著提高茯苓多糖的浸出率，不僅提取的茯苓多糖立體結(jié)構(gòu)不易被破壞、生物活性高，而且具有浸提時間縮短，提取條件溫和的優(yōu)點，相對于現(xiàn)有技術，具有優(yōu)異的效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]圖1酶加入量對茯苓多糖浸出率的影響。
[0012]圖2酶解時間對茯苓多糖浸出率的影響。
[0013]圖3酶解溫度對茯苓多糖浸出率的影響。
[0014]圖4酶解液pH對茯苓多糖浸出率的影響。
[0015]圖5固液比對茯苓多糖浸出率的影響。
[0016]圖6酶解后熱水浸提溫度的影響。
[0017]圖7酶解后熱水浸提時間的影響。
[0018]圖8酶解后熱水浸提加水量的影響。
【具體實施方式】
[0019]下面結(jié)合具體實施例，進一步闡明本發(fā)明，本發(fā)明在以本發(fā)明技術方案為前提下進行實施，應理解這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。
`[0020]本發(fā)明結(jié)合附圖，說明如下。
[0021]從圖1中可以看出，隨著酶加入量的增大，多糖的浸出率也在上升，當酶的加入量達到1%時，浸出率達到最大值，酶加入量過大，會導致提出的多糖的降解，反而使多糖浸出率降低。所以確定最佳酶加入量為1%。
[0022]從圖2中可以看出，隨著酶解時間的增長多糖的浸出率不斷上升，當達到90min時，浸出率已接近最大值，再延長酶解時間，提取率變化不大，而且酶解時間過長會導致多糖降解、雜質(zhì)大量溶出。所以酶解時間定為90min。
[0023]從圖3中可以看出，48°C是最佳酶解溫度，有利于酶效的充分發(fā)揮。
[0024]從圖4中可以看出，酶解液最佳pH值為5.0，此時酶解可以達到最佳效果。
[0025]從圖5中可以看出，當固液比達到1::1時，多糖浸出率的上升趨于平緩，為了減少后繼濃縮過程的工作量，在不明顯影響多糖浸出率的情況下，浸出液體體積越少越好，所以確定酶解過程的固液比為1:10。
[0026]從圖6中可以看出，多糖浸出率隨溫度的上升而增加，80°C浸出率上升趨于平緩，考慮到溫度過高易造成多糖的降解，故酶解后熱水浸提溫度確定為80°C。
[0027]從圖7可以看出，當熱水浸提時間達到90min時，多糖浸出率不隨時間的顯著增加，考慮到提前過程溫度較高，時間太久會影響所提多糖的活性和增加多糖中雜質(zhì)的溶出，所以確定酶解后熱水浸提餓時間為90min。
[0028]從圖8中可以看出，多糖浸出率隨加水倍數(shù)的上升而增加，當固液比達到1:40時，浸出率上升趨于平緩，考慮到濃縮過程的工作量，在不明顯影響多糖浸出率的情況下，浸出液體體積越少越好，所以確定酶解后熱水浸提時固液比為1:40。[0029]為了比較不同提取方法對茯苓多糖得率的影響，由實驗知道:酶解和熱水浸提法提取茯苓多糖，浸提時間縮短近一半，提取率是熱水浸提法的2.32倍。另外，酶解和熱水浸提法全過程為酶解反應和80°C熱水浸提兩個階段。第一階段主要作用是酶解細胞表面結(jié)構(gòu)及胞間連接物，并伴有部分糖類物質(zhì)溶出。第二階段通過提高溫度后，既有滅酶作用，同時使得溶于熱水的胞內(nèi)多糖浸出率增 加，兩個階段都很重要。
【權利要求】
1.一種茯苓多糖的提取方法，采用酶解和熱水浸提法提取茯苓多糖，其特征在于包括以下步驟: (1)將茯苓粉碎后加水浸泡30min； (2)向所述茯苓中加入復合酶； (3)將所述反應液中和后加水升溫至80°C，浸提反應90min； (4)采用乙醇醇沉所述反應液，然后采用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌所述醇沉后的反應液，即得多糖粗品； (5)純化茯苓多糖。
2.根據(jù)權利要求1所述的茯苓多糖的提取方法，其特征在于:所述復合酶先加水在40°C時活化反應10min后再加入所述獲茶中。
3.根據(jù)權利要求1所述的茯苓多糖的提取方法，其特征在于:所述復合酶加入茯苓中后保持反應溫度為48°C, pH為5,浸泡反應90min。
4.根據(jù)權利要求1所述的茯苓多糖的提取方法，其特征在于:所述茯苓多糖的純化包括以下步驟: (6)通過去蛋白質(zhì)大孔樹脂吸附純化所述茯苓多糖； (7)將所述吸附純化后的 茯苓多糖洗脫液濃縮后透析； (8)冷凍干燥所述透析液的濃縮物。
【文檔編號】C08B37/00GK103804502SQ201210449563
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月12日 優(yōu)先權日:2012年11月12日
【發(fā)明者】王慧 申請人:王慧