專利名稱：一種用于治療酒精性肝損傷的藥物組合物的制作方法
一種用于治療酒精性肝損傷的藥物組合物技術領域：
本發(fā)明屬于中藥技術領域。更具體地，本發(fā)明涉及一種用于治療酒精性肝損傷的藥物組合物。
背景技術：
在我國，隨著社會經(jīng)濟發(fā)展、人們工作生活節(jié)奏加快和文化風俗的影響，中國酒精消耗量迅速增長，酒精攝入量的激增對我國居民健康狀況的威脅日益嚴峻。早在2006年中國的酒精消耗量已達到180萬噸，我國的烈性酒消費市場已躍居全球首位，其中65%飲酒人群為不健康飲酒，其單次飲酒量是國際安全飲用標準的2倍；并且由酒精引起的死亡率和各種疾病的發(fā)病率均高于吸煙，個人、社會對酒精傷害者的救治成本已經(jīng)遠遠高于釀酒行業(yè)產(chǎn)銷給國家?guī)淼慕?jīng)濟效應。酒精性肝病(Alcoholic liver disease,ALD)是由于長期大量飲酒(飲酒史超過5年，折合乙醇量男性>40g/d，女性>20g/d)所致的肝臟疾病， 初期通常表現(xiàn)為脂肪肝，進而可發(fā)展成酒精性肝炎、酒精性肝纖維化和酒精性肝硬化；該病是我國常見的肝臟疾病之一，又常和肝炎病毒感染混合存在，起到疊加的致病的作用，更易并發(fā)肝硬化及肝癌。目前，我國廣大醫(yī)藥工作者積極挖掘豐富的祖國醫(yī)學資源，為解決醫(yī)治酒精性肝病難題進行了大量研究。例如CN200710025576.公開了野菊花乙醇提取物在制備防治酒精性肝病的藥物中的應用，野菊花乙醇提取物既能治標，又能治本，安全無毒，藥理作用強，預示著很好的藥用前景；CN200910102475涉及一種防治酒精性肝病的中藥保健品制劑，它是由葛花、枳犋子和甘草原料藥制成的。所述的中藥保健品制劑可有效地阻止乙醇導致肝臟GSH耗竭和 MDA升高，減輕肝細胞脂肪變性，具有預防乙醇性肝損傷的功能；CN200910167626涉及一種藏茵陳提取物在制備治療輕型酒精性肝病藥物中的新用途，試驗證明藏茵陳對酒精引起的輕型酒精性肝損傷模型有治療作用，可以促進酒精引起的大鼠輕型酒精性肝損傷的逆轉； CN200810305398涉及趕黃草提取物在制備治療酒精性肝病的藥物中的用途，對酒精性肝病有明確的治療作用。由這些中藥治療酒精性肝病的專利申請文件可以看出，祖國醫(yī)學資源醫(yī)治酒精性肝病方面作用顯著。值得關注的是CN101015642公開了一種降醇護肝復方膠囊。配方是竹節(jié)人參 20% -40% ；絲膠40% -60% ；枳犋子2% -4% ；茯苓:2% -4% ；蘆薈:2% -4% ；橘皮 2% -4% ；維生素 Bl 0. 5% -2. 5% ；維生素 B2 0. 5% -2. 5% ；維生素 C :0. 5% -2. 5%。主要用于抑制酒精在胃腸道的吸收，預防治療因長期或急性、大量飲酒所造成肝損傷的中藥配方。該發(fā)現(xiàn)提示我國西南地區(qū)民族民間常用中草藥-竹節(jié)參作為構成降醇護肝復方膠囊成分之一，通過抑制酒精在胃腸道吸收，發(fā)揮了抗酒精性肝損傷的作用。竹節(jié)參(rhizoma Panax japonicus)又名竹節(jié)三七、竹節(jié)人參、白三七等，系五加科人參屬植物竹節(jié)參Panax japonicus C. A. Meyer的干燥呈竹鞭狀根莖，是我國西南地區(qū)民間常用中草藥，為1977年以后各版《中國藥典》所收載。 氧化損傷被認為是酒精性肝損傷重要發(fā)病機制之一，在酒精性肝損傷的形成和發(fā)展過程中起重要作用。竹節(jié)參的主要有效成分包括皂苷和竹節(jié)參多糖兩類物質，均具有較好的抗氧化損傷活性。但是竹節(jié)參多糖對酒精性肝損傷的保護作用尚未見報道，亦未見到將竹節(jié)參總皂苷和竹節(jié)參多糖兩種有效組分優(yōu)化組合，協(xié)同治療酒精性肝病的技術。為此，本發(fā)明人經(jīng)過長期大量試驗研究，終于完成了本發(fā)明。

發(fā)明內容[要解決的技術問題]本發(fā)明的目的是提供一種用于治療酒精性肝損傷的藥物組合物。[技術方案]本發(fā)明是通過下述技術方案實現(xiàn)的。本發(fā)明涉及一種用于治療酒精性肝損傷的藥物組合物。所述的藥物組合物含有有效成分100-400重量份竹節(jié)參總皂苷和60-250重量份竹節(jié)參多糖。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，所述的藥物組合物含有有效成分竹節(jié)參總皂苷 150-350重量份竹節(jié)參總皂苷和80-200重量份竹節(jié)參多糖。根據(jù)本發(fā)明的一種更優(yōu)選實施方式，所述的藥物組合物含有有效成分竹節(jié)參總皂苷200-300重量份竹節(jié)參總皂苷和100-150重量份竹節(jié)參多糖。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的竹節(jié)參總皂苷是按照下述方式提取的讓竹節(jié)參在溫度60_8(TC進行干燥20-40分鐘，然后將其粉碎至20_40目竹節(jié)參粉；然后得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為5-15用重量百分濃度40-80%乙醇水溶液浸泡l-3h，然后進行加熱回流提取2-4次，每次回流提取 2_4h，分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的竹節(jié)參多糖是按照下述方式提取的讓竹節(jié)參在溫度60_8(TC進行干燥20-40分鐘，然后將其粉碎至20_40目竹節(jié)參粉；然后用乙醇脫去脂肪，干燥后用100-120°C水提取1-3次，每次0. 5-lh，再用重量百分濃度的70-90%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為20-30% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度50-80°C與0. 01-0. IMPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的藥物組合物還含有在藥學上可接受的載體。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在藥學上可接受的載體是一種或多種選自在藥學上通常使用的填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑或矯味劑的載體。
所述的填充劑選自淀粉、蔗糖、乳糖或微晶纖維素；所述的粘合劑選自纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮；所述的潤濕劑選自水、甘油、乙醇、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素或羥丙基甲基纖維素；所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素、瓊脂、碳酸鈣或碳酸氫鈉；所述的吸收促進劑是季銨化合物； 所述的表面活性劑選自十六烷醇或十二烷基硫酸鈉；所述的吸附載體選自高齡土或皂粘土；所述的潤滑劑選自滑石粉、硬脂酸鈣和鎂、微粉硅膠或聚乙二醇。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的藥物組合物是顆粒劑、膠囊劑、片劑、 丸劑或口服液。下面將更詳細地描述本發(fā)明。本發(fā)明涉及一種用于治療酒精性肝損傷的藥物組合物。所述的藥物組合物含有有效成分100-400重量份竹節(jié)參總皂苷和60-250重量份竹節(jié)參多糖。通過小鼠酒精性肝損傷模型發(fā)現(xiàn)，小鼠酒精肝損傷后肝功指標明顯升高；肝臟組織中丙二醛(MDA)含量明顯高于空白組，超氧化物歧化酶(SOD)，還原性谷胱甘肽酶 (GSH-PX)活性明顯降低；病理學檢測發(fā)現(xiàn)肝臟組織出現(xiàn)明顯炎性浸潤和大量脂肪空泡。竹節(jié)參總皂苷、竹節(jié)參多糖與它們的組合均可明顯改善這些現(xiàn)象，表現(xiàn)為肝功能明顯改善；降低肝臟組織中MDA，增強SOD、GSH-PX活性，減少肝臟組織炎性浸潤和脂肪空泡的產(chǎn)生。優(yōu)選地，所述的藥物組合物含有有效成分竹節(jié)參總皂苷150-350重量份竹節(jié)參總皂苷和80-200重量份竹節(jié)參多糖。更優(yōu)選地，所述的藥物組合物含有有效成分竹節(jié)參總皂苷200-300重量份竹節(jié)參總皂苷和100-150重量份竹節(jié)參多糖。根據(jù)本發(fā)明，所述的竹節(jié)參總皂苷是按照下述方式提取的讓竹節(jié)參在溫度60_8(TC進行干燥20-40分鐘，然后將其粉碎至20_40目竹節(jié)參粉；然后得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為5-15用重量百分濃度40-80%乙醇水溶液浸泡l_3h，然后進行加熱回流提取2-4次，每次回流提取 2_4h，分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。優(yōu)選地，所述的竹節(jié)參在溫度65-75 °C下進行干燥25_35分鐘。目前，秋季采收加工后的中藥材，通常將其含水量控制在一定限度內，以保證質量不會發(fā)生異變。因此，從市場上獲得的竹節(jié)參一般并不需要進行干燥。但是，如果竹節(jié)參藥材返潮或從生產(chǎn)地獲得的竹節(jié)參則需要進行干燥，可以采用干燥機烘干法、遠紅外加熱干燥法或微波干燥法等現(xiàn)代方法進行干燥。干燥機烘干法是使用真空干燥箱、真空回轉干燥器、氣流干燥器、噴霧干燥器、沸騰床、流化床、冷凍干燥機等干燥機進行干燥的方法，例如常州市宙峰化工機械有限公司生產(chǎn)的各種干燥機。遠紅外加熱干燥法是將電能轉變?yōu)檫h紅外輻射，從而被藥材的分子吸收，產(chǎn)生共振，引起分子和原子的振動和轉動，導致物體變熱，經(jīng)過熱擴散、蒸發(fā)和化學變化，最終達到干燥的目的，例如保定市三環(huán)電源設備有限公司生產(chǎn)的遠紅外加熱器。微波干燥法是利用微波進行干燥的方法，微波是波長很短、頻率很高的電磁波，微波主要利用了微波的熱效應。微波所形成的交變電場方向發(fā)生著高速的改變，這種改變使處于微波場中的極性分子也處于高速振蕩狀態(tài)。如果富含水分的藥材處于2450MHz的微波場中，具有很大極性的水分子的振蕩頻率將達到0. 408億次/min，分子的快速運動使水分子間的碰撞和摩擦加劇，產(chǎn)生大量的熱量，從而能把藥材加熱和干燥，可以使用例如廣州科威微波能有限公司銷售的微波干燥設備。在本發(fā)明中，使用在中藥材加工中通常使用的粉碎設備，例如使用山東青州市益康中藥機械制造有限公司生產(chǎn)的粉碎設備將其干燥竹節(jié)參粉碎至20-40目。優(yōu)選地，所述竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為8-12。更優(yōu)選地，所述竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為10。如果所述竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比低于5，則竹節(jié)參粉中的有效成分竹節(jié)參總皂苷提取率明顯降低，但需要增加提取次數(shù)才可改善這種情況。如果所述竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比高于15，則竹節(jié)參粉中的有效成分竹節(jié)參總皂苷提取率變化不大，但乙醇用量將會明顯增加，從而將顯著增加藥物的生產(chǎn)成本。 優(yōu)選地，所述的竹節(jié)參粉使用重量百分濃度50-70%乙醇水溶液浸泡1. 5-2. 5h。更優(yōu)選地，所述的竹節(jié)參粉使用重量百分濃度60%乙醇水溶液浸泡2. Oh。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選地，所述的竹節(jié)參粉使用熱回流抽提濃縮器加熱回流提取3次， 每次回流提取1. 5-2. 5h。更優(yōu)選地，所述的竹節(jié)參粉使用熱回流抽提濃縮器加熱回流提取3次，每次回流提取2. Oh。所述的熱回流抽提濃縮器例如是溫州市森博輕工機械有限公司生產(chǎn)的熱回流抽提濃縮器。所述分離除去提取剩余物是采用通常的固液分離設備除去提取剩余物，即提取后的竹節(jié)參殘渣，例如使用遼陽天翔制藥機械廠生產(chǎn)的各種管式離心機進行分離。根據(jù)本發(fā)明，所述的竹節(jié)參多糖是按照下述方式提取的讓竹節(jié)參在溫度60_8(TC進行干燥20-40分鐘，然后將其粉碎至20_40目竹節(jié)參粉；然后用乙醇脫去脂肪，干燥后用100-120°C水提取1-3次，每次0. 5-lh，再用重量百分濃度的70-90%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為20-30% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度50-80°C與0. 01-0. IMPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。在竹節(jié)參多糖提取步驟中，竹節(jié)參干燥、粉碎及其它處理方式與在前面有關竹節(jié)參總皂苷提取步驟的相同，在此不再贅述。根據(jù)本發(fā)明，所述的乙醇脫去脂肪是一種在本技術領域中普遍采用的脫去脂肪方法，例如在王健，“三七多糖的分離純化及免疫活性的研究”(浙江大學博士學位論文， 2001)，以及季宇彬，“中藥多糖的化學與藥理”(北京人民衛(wèi)生出版社.2005. 5)中描述的乙醇脫去脂肪方法。在本發(fā)明中，所述的Sevag法是一種在本技術領域中普遍采用的有效除去游離蛋白的方法，即在竹節(jié)參水提取液中加入氯仿_正丁醇混合溶液，進行充分攪拌混合，將游離蛋白變性成為不溶性物質，然后采用離心分離除去。
根據(jù)本發(fā)明，用自來水和蒸餾水透析應該理解是其目的在于除去各種小分子雜質。根據(jù)本發(fā)明，所述的藥物組合物還含有在藥學上可接受的載體。在本發(fā)明中，在藥學上可接受的載體是一種或多種選自在藥學上通常使用的填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑或矯味劑的載體。 根據(jù)本發(fā)明，所述的填充劑應該理解是一種用以增加片劑的重量與體積，利于成型和分劑量的輔料。所述的填充劑選自淀粉、蔗糖、乳糖或微晶纖維素。根據(jù)本發(fā)明，所述的粘合劑應該理解是當藥物原料本身無粘性或粘性不足時，為了藥物制粒而加入的一種粘性物質。粘合劑可以用其溶液，也可以用其細粉。在本發(fā)明中，所述的粘合劑選自纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮。根據(jù)本發(fā)明，所述的潤濕劑應該理解是一種本身無粘性，但可潤濕片劑原輔料并誘發(fā)其粘性而能制成顆粒的液體，即與片劑的藥物及稀釋劑等混勻，加入潤濕劑誘發(fā)粘性。在本發(fā)明中，所述的潤濕劑選自水、甘油、乙醇、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素或羥丙基甲基纖維素；根據(jù)本發(fā)明，所述的崩解劑應該理解是一種加入片劑中能促進片劑在胃腸液中快速崩解成細小粒子的輔料。人們知道，片劑經(jīng)過壓縮，片劑的硬度大，如果其中不含有可以促進崩解作用的輔料，它在胃腸道中崩解很慢，影響療效。在本發(fā)明中，所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素、 瓊脂、碳酸鈣或碳酸氫鈉。根據(jù)本發(fā)明，所述的吸收促進劑是一種能可逆地、特異或非特異地顯著增強藥物經(jīng)胃腸道吸收，進而起到提高血藥濃度和生物利用度作用的一些制劑材料(藥物促吸劑)。在本發(fā)明中，所述的吸收促進劑是季銨化合物；所述的表面活性劑選自十六烷醇或十二烷基硫酸鈉。在本發(fā)明中，所述的吸附載體選自高齡土或皂粘土。所述的潤滑劑選自滑石粉、硬脂酸鈣和鎂、微粉硅膠或聚乙二醇。在本發(fā)明中，在藥學上可接受的載體在所述的藥物組合物中的含量是常規(guī)含量， 即本技術領域的技術人員根據(jù)現(xiàn)有技術很容易確定的含量。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的藥物組合物是顆粒劑、膠囊劑、片劑、 丸劑或口服液。根據(jù)本發(fā)明，這些顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液劑型都是本技術領域的技術人員采用常規(guī)方法可以制備得到的。在本發(fā)明中，采用苯酚濃硫酸法檢測總糖含量。苯酚濃硫酸法測定糖的方法是在濃硫酸作用下，糖脫水生成的糠醛或羥甲基糠醛能與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，它在 485nm波長處有最大的吸收峰，因此可以采用比色法測定其含量。以葡萄糖為標準品，采用苯酚濃硫酸法檢測總糖含量為69. 70%。在本發(fā)明中，采用DNS法檢測還原糖含量。還原糖是指含有自由醛基和酮基的糖類。利用單糖、雙糖與多糖溶解度的不同可以將它們分離。還原糖和堿性二硝基水楊酸試劑一起共熱，產(chǎn)生一種棕紅色的氨基化合物，在一定的濃度范圍內，棕紅色物質顏色的深淺程度與還原糖的量成正比。因此，采用比色法可以測定樣品中還原糖以及總糖的量。在采用DNS法檢測其提取的竹節(jié)參多糖中，還 原糖含量為5.82%，多糖含量為64. 19 %，主鏈結構為β-D-l —3-甘露聚糖和/或α-D-3 —4-甘露聚糖，含半乳聚糖、木聚糖和葡聚糖的雜多糖。[有益效果]本發(fā)明的有益效果如下竹節(jié)參總皂苷、竹節(jié)參多糖與它們的組合均可明顯明顯改善肝功能；降低肝臟組織中MDA，增強SOD、GSH-PX活性，減少肝臟組織炎性浸潤和脂肪空泡的產(chǎn)生。其中竹節(jié)參總皂苷與多糖組合物的效果更佳。

圖1關于對酒精肝損傷小鼠肝臟病理變化影響(HE染色，X 400)圖中A-正常組；B-模型組；C-總皂苷高劑量組；D-總皂苷中劑量組；E-總皂苷低劑量組；F-多糖高劑量組；G-多糖中劑量組；H-多糖低劑量組；I-本發(fā)明組合物高劑量組；J-本發(fā)明組合物中劑量組；K-本發(fā)明組合物低劑量組。
具體實施方式
實施例1 本發(fā)明顆粒劑的制備該實施例按照下述步驟進行竹節(jié)參預處理使用保定市三環(huán)電源設備有限公司生產(chǎn)的遠紅外加熱器，將湖北省恩施自治州出產(chǎn)的竹節(jié)參在溫度60°C進行干燥40分鐘，然后使用使用山東青州市益康中藥機械制造有限公司生產(chǎn)的粉碎設備將其粉碎至40目。然后，得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為10 用重量百分濃度60%乙醇水溶液浸泡2h，然后進行加熱回流提取3次，每次回流提取3h，分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。得到的竹節(jié)參粉用重量百分濃度60%乙醇水溶液脫去脂肪，干燥后用110°C水提取2次，每次0. 6h，再用重量百分濃度的80%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用本申請說明書中描述的Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為25 % H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度60°C與0. 01-0. IMPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。取IOOmg得到的竹節(jié)參總皂苷與60mg得到的竹節(jié)參多糖，混合均勻，再使用75% 乙醇采用常規(guī)方法制成顆粒，在溫度30°C下進行干燥，包裝。實施例2 本發(fā)明顆粒劑的制備該實施例按照下述步驟進行竹節(jié)參預處理使用保定市三環(huán)電源設備有限公司生產(chǎn)的遠紅外加熱器，湖北省恩施自治州出產(chǎn)的竹節(jié)參在溫度75°C進行干燥25分鐘，然后使用使用山東青州市益康中藥機械制造有限公司生產(chǎn)的粉碎設備將其粉碎至25目；然后，得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為5用重量百分濃度40%乙醇水溶液浸泡3h，然后進行加熱回流提取4次，每次回流提取4h，分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。得到的竹節(jié)參粉用重量百分濃度65%用乙醇脫去脂肪，干燥后用100°C水提取1 次，每次0. 5h，再用重量百分濃度的70%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為20% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度50°C與 0. IMPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。取400mg得到的竹節(jié)參總皂苷與250mg得到的竹節(jié)參多糖，混合均勻，再用75%乙醇采用常規(guī)方法制成顆粒，在溫度30°C下進行干燥，包裝。實施例3 本發(fā)明顆粒劑的制備該實施例按照下述步驟進行竹節(jié)參預處理使用保定市三環(huán)電源設備有限公司生產(chǎn)的遠紅外加熱器，湖北省恩施自治州出產(chǎn)的竹節(jié)參在溫度68°C進行干燥32分鐘，然后使用使用山東青州市益康中藥機械制造有限公司生產(chǎn)的粉碎設備將其粉碎至32目；然后，得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為15 用重量百分濃度80%乙醇水溶液浸泡2h，然后進行加熱回流提取3次，每次回流提取3h，分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。得到的竹節(jié)參粉用重量百分濃度80%用乙醇脫去脂肪，干燥后用120°C水提取3 次，每次1. Oh,再用重量百分濃度的80%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為26% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度80°C與 0. 04MPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。取150mg得到的竹節(jié)參總皂苷與80mg得到的竹節(jié)參多糖，混合均勻，再用75%乙醇采用常規(guī)方法制成顆粒，在溫度30°C下進行干燥，包裝。實施例4 本發(fā)明膠囊劑的制備該實施例按照下述步驟進行竹節(jié)參預處理使用保定市三環(huán)電源設備有限公司生產(chǎn)的遠紅外加熱器，湖北省恩施自治州出產(chǎn)的竹節(jié)參在溫度70°C進行干燥30分鐘，然后使用使用山東青州市益康中藥機械制造有限公司生產(chǎn)的粉碎設備將其粉碎至30目；然后，得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為8 用重量百分濃度50%乙醇水溶液浸泡1. 5h，然后進行加熱回流提取2次，每次回流提取3h， 分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。得到的竹節(jié)參粉用重量百分濃度70%用乙醇脫去脂肪，干燥后用105°C水提取2 次，每次0. 8h，再用重量百分濃度的70%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采 用Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為28% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度70°C與0. 06MPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。取350mg得到的竹節(jié)參總皂苷與200mg得到的竹節(jié)參多糖，混合均勻，再裝入目前市場上銷售的膠囊，得到本發(fā)明的膠囊劑。實施例5 本發(fā)明片劑的制備該實施例按照下述步驟進行竹節(jié)參預處理使用保定市三環(huán)電源設備有限公司生產(chǎn)的遠紅外加熱器，湖北省恩施自治州出產(chǎn)的竹節(jié)參在溫度72°C進行干燥28分鐘，然后使用使用山東青州市益康中藥機械制造有限公司生產(chǎn)的粉碎設備將其粉碎至30目；然后，得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為10 用重量百分濃度70%乙醇水溶液浸泡2. 5h，然后進行加熱回流提取4次，每次回流提取4h， 分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。得到的竹節(jié)參粉用重量百分濃度70%用乙醇脫去脂肪，干燥后用115°C水提取1 次，每次0. 9h，再用重量百分濃度的75%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為30% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度65°C與 0. OSMPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。取200mg得到的竹節(jié)參總皂苷與IOOmg得到的竹節(jié)參多糖，混合均勻，再采用常規(guī)方法使用制備片劑常用的賦形劑淀粉制成濕顆粒，然后壓片，干燥，包裝，得到本發(fā)明的片劑。實施例6 本發(fā)明丸劑的制備該實施例按照下述步驟進行竹節(jié)參預處理使用保定市三環(huán)電源設備有限公司生產(chǎn)的遠紅外加熱器，湖北省恩施自治州出產(chǎn)的竹節(jié)參在溫度65°C進行干燥35分鐘，然后使用使用山東青州市益康中藥機械制造有限公司生產(chǎn)的粉碎設備將其粉碎至35目；然后，得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為10 用重量百分濃度70%乙醇水溶液浸泡2. 5h，然后進行加熱回流提取4次，每次回流提取4h， 分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。得到的竹節(jié)參粉用重量百分濃度75%用乙醇脫去脂肪，干燥后用115°C水提取3 次，每次0. 7h，再用重量百分濃度的75%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為22% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度75°C與 0. 05MPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。取300mg得到的竹節(jié)參總皂苷與150mg得到的竹節(jié)參多糖，混合均勻，再采用常規(guī)方法加入煉蜜制成本發(fā)明的丸劑。實施例7 本發(fā)明口服液的制備該實施例按照下述步驟進行竹節(jié)參預處理使用保定市三環(huán)電源設備有限公司生產(chǎn)的遠紅外加熱器，湖北省恩施自治州出產(chǎn)的竹節(jié)參在溫度80°C進行干燥20分鐘，然后使用使用山東青州市益康中藥機械制造有限公司生產(chǎn)的粉碎設備將其粉碎至20目；然后，得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為12 用重量百分濃度55%乙醇水溶液浸泡2h，然后進行加熱回流提取3次，每次回流提取3h，分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。 得到的竹節(jié)參粉用重量百分濃度75%用乙醇脫去脂肪，干燥后用110°C水提取3 次，每次0. 7h，再用重量百分濃度的85%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為22% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度75°C與 0. 05MPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。取300mg得到的竹節(jié)參總皂苷與150mg得到的竹節(jié)參多糖，混合均勻，再采用常規(guī)方法加入矯味劑蜂蜜和稀釋劑水制成本發(fā)明的口服液。試驗實施例1 通過本試驗實施例講一步說明本發(fā)明制劑的功效，竹節(jié)參對酒精性肝病的保護作用通過小鼠酒精性肝損傷模型發(fā)現(xiàn)，小鼠酒精肝損傷后肝功指標明顯升高；肝臟組織中丙二醛(MDA)含量明顯高于空白組，超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽過氧化物酶 (GSH-Px)活性明顯降低；病理學檢測發(fā)現(xiàn)肝臟組織出現(xiàn)炎性浸潤和脂肪空泡。竹節(jié)參竹節(jié)參總皂苷和竹節(jié)參多糖可明顯改善這些現(xiàn)象，表現(xiàn)為肝功指標明顯升高；減少肝臟組織中 MDA，增強SOD、GSH-Px活性，減少肝臟組織炎性浸潤和脂肪空泡的產(chǎn)生。實驗內容一、材料與方法1、藥物與試劑本申請說明書實施例4提取的竹節(jié)參總皂苷，深褐色粉末；實施例4提取的竹節(jié)參多糖，褐色半透明晶體狀。國內暢銷的某知名品牌白酒。相關檢測試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，批號分別為丙二醛(MDA， 20100625)、超氧化物歧化酶(S0D，20100324)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH_Px，20100625)。2、動物與主要儀器昆明種雄性小鼠110只，體重18_22g，由湖北省疾控中心提供，動物合格證號 SCXK2008-0005。使用的檢測儀器是由天津市金貝兒科技有限公司銷售的SFY3-400全自動生化檢測儀、上海廷正儀器科技有限公司銷售的721可見分光光度計等。3、動物分組及給藥昆明種小鼠110只，隨機分為空白組、模型組、竹節(jié)參總皂苷組(下面簡稱總皂苷組)、竹節(jié)參多糖組(下面簡稱多糖組)、竹節(jié)參總皂苷與多糖組合物高中低劑量組(下面簡稱本發(fā)明組合物組)，其分組分別為竹節(jié)參總皂苷組(400mg，200mg，IOOmg)，竹節(jié)參多糖組(250mg，125mg，62. 5mg)，竹節(jié)參總皂苷與多糖組(400+250mg，200+125mg，100+62. 5mg)?？傇碥战M、多糖組、本發(fā)明組合物組各給一定劑量的藥，每日給藥兩次，連續(xù)3天，在最后一次給藥后lh，再分別給予模型組、總皂苷組、多糖組和本發(fā)明組合物組的小鼠某知名品牌白酒3-9g/kg，每日一次，連續(xù)2天，空白組給予等劑量的生理鹽水。4 、組織樣采集最后1次給酒后12h，摘小鼠眼球取血，離心分離血清，利用本技術領域普遍采用的常規(guī)方法，使用SFY3-400全自動生化儀檢測肝功指標，即丙氨酸氨基轉移酶(ALT)與谷草轉氨酶(AST)。摘取肝臟，稱重切取適量肝臟至于生理鹽水中，制成10%勻漿，再以3000r/min 離心10分鐘，然后取上清液，采用本技術領域普遍采用的比色法檢測MDA含量以及SOD、 GSH-Px 活性。取剩余肝臟的同一部分肝組織，用10%甲醛固定，逐級酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，常規(guī)制備石蠟切片待用，進行組織病理學觀察。5、統(tǒng)計學處理(ALT/AST)轉氨酶降低率=模型組轉氨酶-藥物組轉氨酶/模型組轉氨酶按照下述公式計算q值，可以判斷兩種藥物活性組分的組合是否具有增效作用q = EabZEa+(I-Ea)^Eb式中=Eab為組合物轉氨酶降低率或MDA降低率或SOD活性升高率或GSH-Px活性升高率，Ea為A藥轉氨酶抑制率或MDA降低率或SOD活性升高率或GSH-Px活性升高率，Ea 為B藥轉氨酶抑制率或MDA降低率或SOD活性升高率或GSH-Px活性升高率。當時，表明兩種藥物活性組分的作用為簡單相加。當q > 1. 15時，表明兩種藥物活性組分具有協(xié)同增效作用。q < 0. 85，表明兩種藥物活性組分具有拮抗作用。實驗數(shù)據(jù)用SPSS13. 0軟件處理。以均數(shù)士標準差表示，組間比較采用t檢驗。二、實驗結果1、竹節(jié)參對酒精性肝損傷小鼠肝功能指標的影響其實驗結果列于表1。酒精性肝損傷小鼠ALT、AST明顯升高(P < 0. 05)，揭示肝細胞受損。表1列出的竹節(jié)參總皂苷組、竹節(jié)參多糖組、本發(fā)明組合物組各組數(shù)據(jù)，說明竹節(jié)參總皂苷和竹節(jié)參多糖均具有降低肝臟ALT、AST，保護肝細胞的作用，采用上述公式計算， 本發(fā)明組合物組各組q值均大于1. 15，說明竹節(jié)參總皂苷和竹節(jié)參多糖有良好的協(xié)同增效作用，兩者組合的效果優(yōu)于單一組分的效果。表1 關于對酒精性肝損傷小鼠肝功指標的影響( 士s，n = 10)
權利要求
1.一種用于治療酒精性肝損傷的藥物組合物，其特征在于它含有有效成分100-400重量份竹節(jié)參總皂苷和60-250重量份竹節(jié)參多糖。
2.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于它含有有效成分竹節(jié)參總皂苷 150-350重量份竹節(jié)參總皂苷和80-200重量份竹節(jié)參多糖。
3.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于它含有有效成分竹節(jié)參總皂苷 200-300重量份竹節(jié)參總皂苷和100-150重量份竹節(jié)參多糖。
4.根據(jù)權利要求1-3中任一項權利要求所述的藥物組合物，其特征在于所述的竹節(jié)參總皂苷是按照下述方式提取的讓竹節(jié)參在溫度60-8(TC進行干燥20-40分鐘，然后將其粉碎至20-40目竹節(jié)參粉；然后得到的竹節(jié)參粉按照竹節(jié)參粉重量克與所述乙醇水溶液體積毫升之比為5-15用重量百分濃度40-80%乙醇水溶液浸泡l_3h，然后進行加熱回流提取2-4次，每次回流提取2-4h， 分離除去提取剩余物，得到提取液；使用液體干燥設備將得到的提取液進行蒸發(fā)干燥，得到所述的竹節(jié)參總皂苷。
5.根據(jù)權利要求1-3中任一項權利要求所述的藥物組合物，其特征在于所述的竹節(jié)參多糖是按照下述方式提取的讓竹節(jié)參在溫度60-8(TC進行干燥20-40分鐘，然后將其粉碎至20-40目竹節(jié)參粉； 然后用乙醇脫去脂肪，干燥后用100-120°C水提取1-3次，每次0. 5-lh，再用重量百分濃度的70-90%乙醇溶液進行醇沉一夜，抽濾得到含有多糖的沉淀物，然后用蒸餾水溶解，采用 Sevag法除去其中存在的蛋白，再加入體積百分濃度為20-30% H2O2水溶液進行脫色，再用自來水和蒸餾水進行透析72h，經(jīng)透析得到的溶液在溫度50-80°C與0. 01-0. IMPa真空下干燥得到所述的竹節(jié)參多糖。
6.根據(jù)權利要求1-3中任一項權利要求所述的藥物組合物，其特征在于它還含有在藥學上可接受的載體。
7.根據(jù)權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于在于在藥學上可接受的載體是一種或多種選自在藥學上通常使用的填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑或矯味劑的載體。
8.根據(jù)權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于所述的填充劑選自淀粉、蔗糖、乳糖或微晶纖維素；所述的粘合劑選自纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮；所述的潤濕劑選自水、甘油、乙醇、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素或羥丙基甲基纖維素；所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素、瓊脂、碳酸鈣或碳酸氫鈉；所述的吸收促進劑是季銨化合物；所述的表面活性劑選自十六烷醇或十二烷基硫酸鈉；所述的吸附載體選自高齡土或皂粘土 ；所述的潤滑劑選自滑石粉、硬脂酸鈣和鎂、微粉硅膠或聚乙二醇。
9.根據(jù)權利要求1-5中任一項權利要求所述的藥物組合物，其特征在于它是顆粒劑、 膠囊劑、片劑、丸劑或口服液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療酒精性肝損傷的藥物組合物。它含有有效成分竹節(jié)參總皂苷和竹節(jié)參多糖以及在藥學上可接受的載體。本發(fā)明竹節(jié)參總皂苷與多糖組合物可明顯改善這些現(xiàn)象，可以非常明顯地降低肝功指標；減少肝臟組織中MDA，增強SOD、GSH-Px活性，減少肝臟組織炎性浸潤和脂肪空泡的產(chǎn)生。
文檔編號C08B37/00GK102266367SQ20111020104
公開日2011年12月7日 申請日期2011年7月19日 優(yōu)先權日2011年7月19日
發(fā)明者代艷文, 何毓敏, 余楓華, 關喬中, 張海濱, 張長城, 曾曉, 李守超, 狄國杰, 王洪武, 羅春華, 袁丁, 賀海波 申請人:三峽大學