專利名稱：一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及巖藻聚糖硫酸酯的提取方法。
背景技術：
巖藻聚糖硫酸酯(fticoidan),又名褐藻多糖硫酸酯，也稱為巖藻糖膠或褐藻糖 膠。巖藻聚糖硫酸酯主要存在于褐藻中，是所有褐藻中所固有的細胞間多糖， 存在于細胞壁基質中。 一般生長于潮間帶的褐藻類中，如多年生的墨角藻類， 其巖藻聚糖硫酸酯的含量可高達20%，生長在較深處的海帶中含量較低，約為 1~2%。 1913年，Kylin首次從褐藻掌狀海帶中提出巖藻聚糖硫酸酯。巖藻聚糖硫 酸酯結構復雜，具有多種生理活性，有明顯的抗凝血和促纖溶的藥理學活性； 包含硫酸基的巖藻糖或其降解物能誘導癌細胞凋亡，可用作凋亡誘導劑和抗癌 藥；有較強的清除活性氧自由基和抑制脂質過氧化的能力，其作用隨多糖濃度 增加而增加；可治療慢性腎衰，改善腎功能；還具有提高免疫力等多種作用。
目前提取巖藻聚糖硫酸酯方法在中間處理階段使用試劑種類多，其中一部 分試劑如甲醛等試劑對人體有害，增加了安全隱患；提取純度不高，有些提取 方法獲得的巖藻聚糖硫酸酯在最終提取物中的含量不到20%;生產(chǎn)工藝復雜， 處理過程分別經(jīng)超聲、減壓濃縮或電滲析等方法，耗能大，成本高，不利于工 廠化生產(chǎn)；生產(chǎn)步驟須經(jīng)反復沉淀、調(diào)pH值、離心沉淀等操作，十分繁瑣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述不足問題，提供一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫
3酸酯的方法，操作簡單、應用安全性高、提取效率高、提取純度高。
本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的所釆用的技術方案是 一種從褐藻中提取巖藻聚糖 硫酸酯的方法，具體工藝為
第一步去鹽將新鮮褐藻或冰凍褐藻解凍后，用純凈水浸泡去鹽分； 第二步酶解在去鹽后的褐藻中加入酶進行酶解，酶解溫度40 60。C，酶解 1~3小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣，加熱至90 10(TC，熱提取1~4
小時，制得巖藻聚糖硫酸酯的提取液。
所述第一步去鹽采用褐藻2 10倍重量的純凈水浸泡褐藻15 60分鐘，除
去水，再重復浸泡除水一次。
所述第二步酶解采用纖維素酶或果膠酶，所述纖維素酶或果膠酶的加入
量是褐藻重量的0.2%~2%。
所述第三步提取酶解液中氯化鈣的加入量是褐藻重量的0.5% 5%。
所述第三步提取后對提取液進行干燥制成干粉。
本發(fā)明與同類方法相比，具有如下優(yōu)點
1. 操作簡單。本發(fā)明操作工藝非常簡單，所用的試劑和設備種類少，便于
組織生產(chǎn)。
2. 藻體未進行勻漿，保持褐藻完整，用酶量少，酶解效率更高，提取巖藻
聚糖硫酸酯雜質更少。
3. 應用安全性高。本發(fā)明所用試劑為生物酶和食品生產(chǎn)常用試劑，對人體
無毒副作用，安全性極高。
4. 提取效率高。本發(fā)明采用酶解工藝，與未采用酶解工藝相比，提取效率提高30%以上。
5. 提取純度高。本發(fā)明釆用氯化鈣做絮凝劑后，極大地降低了提取液中褐 藻膠的含量，提取液經(jīng)干燥成粉后，巖藻聚糖硫酸酯純度較高，達 40~60o/o。
6. 本發(fā)明提出了一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法，初步研究了多 種因素對巖藻聚糖硫酸酯提取的影響，其提取工藝適用于工廠化的大規(guī) 模生產(chǎn)。
具體實施例方式
下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明，但本發(fā)明并不局限于具 體實施例。
實施例1
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加200 公斤純凈水，浸泡15分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入200公斤的純凈水，加入纖維 酶0.5公斤進行酶解，酶解溫度為4(TC，酶解時間為3小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣0.5公斤，加熱至95。C，提取 3.5小時得提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物干粉。制得的干粉中巖藻聚 糖硫酸酯含量42 %。
實施例2
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加200 公斤純凈水，浸泡25分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入350公斤的純凈水，加入纖維酶2公斤進行酶解，酶解溫度為40"C，酶解時間為2.5小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣0.5公斤，加熱至10(TC，提取 2.5小時提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物干粉。制得的干粉中巖藻聚糖 硫酸酯含量46%。
實施例3
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加400 公斤純凈水，浸泡45分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入600公斤的純凈水，加入纖維 酶2公斤進行酶解，酶解溫度為45"C，酶解時間2為小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣1公斤，加熱至96。C，提取4 小時提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物干粉。制得的干粉中巖藻聚糖硫 酸酯含量55%。
實施例4
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加800 公斤純凈水，浸泡20分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入900公斤的純凈水，加入纖維 酶1.5公斤進行酶解，酶解溫度為50°C，酶解時間為1.5小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣1.5公斤，加熱至93。C，提取2 小時提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物干粉。制得的干粉中巖藻聚糖硫 酸酯含量44%。
實施例5
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加600公斤純凈水，浸泡45分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入800公斤的純凈水，加入纖維 酶0.2公斤進行酶解，酶解溫度為45'C，酶解時間為2小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣1公斤，加熱至93。C，提取3 小時提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物千粉。制得的干粉中巖藻聚糖硫 酸酯含量40%。
實施例6
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加400 公斤純凈水，浸泡50分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入400公斤的純凈水，加入纖維 酶0.3公斤進行酶解，酶解溫度為5(TC，酶解時間為3小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣2公斤，加熱至9(TC，提取2 小時提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物千粉。制得的干粉中巖藻聚糖硫 酸酯含量41%。
實施例7
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加300 公斤純凈水，浸泡60分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入300公斤的純凈水，加入纖維 酶l公斤進行酶解，酶解溫度為55'C，酶解時間為l小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣3公斤，加熱至95。C，提取1
小時提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物干粉。制得的干粉中巖藻聚糖硫
酸酯含量48%。實施例8
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加500 公斤純凈水，浸泡30分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入200公斤的純凈水，加入纖維 酶l公斤進行酶解，酶解溫度為55"C，酶解時間為2小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣4公斤，加熱至95。C,提取2 小時提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物干粉。制得的干粉中巖藻聚糖硫 酸酯含量53%。
實施例9
第一步去鹽取新鮮或冰凍裙帶菜孢子葉，室溫解凍后，取100公斤加500 公斤純凈水，浸泡55分鐘，除去水，重復浸泡、除水一次，除去鹽分；
第二步酶解去鹽后的裙帶菜孢子葉中加入400公斤的純凈水，加入纖維 酶1.5公斤進行酶解，酶解溫度為6(TC，酶解時間為1.5小時；
第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣4公斤，加熱至100。C，提取4 小時提取液，提取液經(jīng)濃縮干燥后得到粗提物干粉。制得的干粉中巖藻聚糖硫 酸酯含量61%。
8
權利要求
1、一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法，其特征是具體工藝為第一步去鹽將新鮮褐藻或冰凍褐藻解凍后，用純凈水浸泡去鹽分；第二步酶解在去鹽后的褐藻中加入酶進行酶解，酶解溫度40～60℃，酶解1～3小時；第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣，加熱至90～100℃，熱提取1～4小時，制得巖藻聚糖硫酸酯的提取液。
2、 根據(jù)權利要求1所述一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法，其特征是第一步去鹽采用褐藻2 10倍重量的純凈水浸泡褐藻15 60分鐘，除去水， 再重復浸泡除水一次。
3、 根據(jù)權利要求1所述一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法，其特征 是第二步酶解采用纖維素酶或果膠酶。
4、 根據(jù)權利要求3所述一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法，其特征 是纖維素酶或果膠酶的加入量是褐藻重量的0.2%~2%。
5、 根據(jù)權利要求1所述一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法，其特征 是第三步提取酶解液中氯化鈣的加入量是褐藻重量的0.5% 5%。
6、 根據(jù)權利要求1-5任一所述一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法，其特征是第三步提取后對提取液進行干燥制成干粉。
全文摘要
本發(fā)明巖藻聚糖硫酸酯的提取方法。一種從褐藻中提取巖藻聚糖硫酸酯的方法，具體工藝為第一步去鹽將新鮮褐藻或冰凍褐藻解凍后，用純凈水浸泡去鹽分；第二步酶解在去鹽后的褐藻中加入酶進行酶解，酶解溫度40～60℃，酶解1～3小時；第三步提取酶解后的酶解液中加入氯化鈣，加熱至90～100℃，熱提取1～4小時，制得巖藻聚糖硫酸酯的提取液。本發(fā)明具有操作簡單、應用安全性高、提取效率高、提取純度高等特點，其提取工藝適用于工廠化的大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號C08B37/00GK101619104SQ20091001301
公開日2010年1月6日 申請日期2009年8月7日 優(yōu)先權日2009年8月7日
發(fā)明者潘雪琴, 奇 王, 胡紹民, 許淑芬, 隋國斌 申請人:大連太平洋海龍科技有限公司