專利名稱：山麥冬多糖的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一種提取植物多糖的方法，尤其是一種從中藥材山麥冬中提取多糖的方法。
背景技術(shù)：
常規(guī)提取植物多糖的方法是先用95％的乙醇(或甲醇)加熱回流提取以除去單糖、低聚糖、甙類等干擾性成分，然后再加水多次抽提其中的多糖類成分。
浙江中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院的幾位學(xué)者研究(見浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報1999年2月出版的第23卷第1期第59頁至60頁)認(rèn)為由于麥冬多糖主要是由葡萄糖和果糖組成，成分比較簡單，用常規(guī)的提取方法先加醇回流除雜，再以水提取極容易造成其中的多糖類成分解聚，醇沉?xí)r沉淀析出較少甚至沒有。他們提出了一個改進的工藝方法先用90％的乙醇在滲漉裝置中滲漉，然后用常法水提3次，濾液加活性炭凈化后濃縮至1/10，再加95％乙醇醇析，所析出的沉淀用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌5次后于60℃烘干，所得麥冬多糖無定形粉末的收率1％。從其公布的數(shù)據(jù)看，提取物中麥冬多糖的含量為59％-61％。
該院提出的滲漉方法明顯優(yōu)于常規(guī)的加熱回流方法，但他們未找到最佳的工藝條件，其中有些工藝條件設(shè)置不合理，因此所得的麥冬多糖的收率太低(僅1％)，其提取物中多糖的含量也不高(僅為59％-61％，采用常規(guī)方法可以達到50％-70％)，而且醇析后用有機溶劑洗滌沉淀物，對作為藥物使用的麥冬多糖來說是不適宜的。
此外，中藥材的選取一直是一個尚未解決的問題，有一種意見認(rèn)為以化學(xué)分析的方法測定中藥材中的一至兩個有效成分，該有效成分含量高的藥材為優(yōu)等藥材。另一種意見認(rèn)為中藥材的優(yōu)劣應(yīng)綜合分析評定，以人參為例，人工培植的人參中人參皂甙的含量很高，甚至比野生人參的含量還高，但人工種植的人參的藥用價值遠不如野生人參；中藥材中除了已知的有效成分之外，其它的次要成分的存在與否及其含量的多少有時是更重要的因素。因此，一個合理的優(yōu)化的從中藥材中提取化學(xué)物質(zhì)的工藝應(yīng)首先從選取藥材入手，而上述的浙江中醫(yī)院的工藝中不僅沒有選取藥材，而且其進行滲漉時采用的是麥冬的塊根，這對充分提取該藥材中的有效成分是不利的。
在中醫(yī)藥界，傳統(tǒng)的選取藥材的方法是依據(jù)植物分類學(xué)來選取藥材，依據(jù)藥典的要求及人的經(jīng)驗來決定藥材的等級。這種方法隨機性、經(jīng)驗性太強，不定量，可操作性太差。在無專業(yè)藥學(xué)人員的情況下，其它人員如何正確地選取藥材也是一個值得探索的新課題。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，本發(fā)明的目的是提出一種簡單、合理可量化的工藝方法，使用本方法從山麥冬中提取的提取物可占藥材干重的30％，而且提取物的純度也很高，其總糖的含量可達90％，其中多糖的含量一般為73％-87％。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的山麥冬多糖的提取工藝依以下次序的步驟進行A、以國家中國藥品生物制品檢定所的對照藥材為基準(zhǔn)，使用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，依據(jù)藥材指紋圖譜選取與標(biāo)準(zhǔn)藥材成分、含量相近的山麥冬的塊根；B、將選取的山麥冬塊根洗凈、干燥、磨細(xì)制備為山麥冬粗粉，將山麥冬粗粉與5-7倍90％的乙醇在滲漉裝置中滲漉；C、藥渣去醇后用8-12倍水在70-98℃水浴上提取2次，每次20-40分鐘；D、濾液合并后濃縮至原體積的1/10，加95％乙醇，使醇含量為80％時，醇析；E、在50℃真空干燥后打粉，所得到的粉末即為所提取的山麥冬多糖提取物。
F、用分光光度法測定提取物中山麥冬多糖的含量。
提取工藝的山麥冬粗粉用乙醇滲漉工序中，乙醇的用量以5.5-6.5倍為佳，最佳為6倍。
提取工藝中的藥渣去醇后加水提取工序中，水的用量以9-11倍為佳，最佳用量是10倍；提取溫度以75-90℃為佳，最佳溫度為85±2℃；最佳提取次數(shù)為2次；每次的提取時間為30min。
所述的真空干燥的最佳溫度為50±2℃。
提取工藝中對原料山麥冬的選取還可以采用液相色譜、紅外光譜等儀器來進行。
本發(fā)明所提出的工藝科學(xué)、合理、具有創(chuàng)新思想、而且成效顯著。眾所周知，判別中藥材的質(zhì)量優(yōu)劣是一項專門的技能，過去主要是由有專門經(jīng)驗的人員來進行，這種“人為的認(rèn)定”往往不易為現(xiàn)代科學(xué)所承認(rèn)，本發(fā)明提出了一個用現(xiàn)代科學(xué)的儀器進行中藥材判別(選取)的技術(shù)措施，它的標(biāo)準(zhǔn)藥材是專業(yè)人員用人工綜合判斷選取的，其它的藥材用儀器測定的方法來與標(biāo)準(zhǔn)藥材比對，這樣的方法既與現(xiàn)代科學(xué)相通，又能反映中藥材的真實情況，是一項不可多得的創(chuàng)新之舉。
本發(fā)明選取了一系列優(yōu)化的工藝條件，山麥冬多糖的收率和含量有明顯提高，本方法從山麥冬中提取的提取物可占藥材干重的30％，而且多糖的含量很高，多糖的含量一般為73％-87％，總糖的含量可達90％。這樣高的提取率和含量證明了本發(fā)明工藝的合理性和先進性。本發(fā)明不采用有機溶劑對醇沉物進行洗滌，減少了人為的污染。
本發(fā)明采用的真空干燥的工藝方法是現(xiàn)有技術(shù)中對難溶化合物通用的較好干燥方法，將此方法用于山麥冬多糖提取物的干燥是一個合理的移植，它能夠保證在較低的溫度下將山麥冬多糖提取物干燥好，由于干燥溫度低不會發(fā)生其它的副反應(yīng)，干燥物的性能也較好。


附圖1是本發(fā)明實施例的工藝流程圖；附圖2是標(biāo)準(zhǔn)山麥冬藥材的高效液相色譜—質(zhì)譜測定圖譜；
附圖3是可選取的山麥冬的高效液相色譜—質(zhì)譜測定圖譜；附圖4是滲漉裝置滲漉示意圖。
具體實施例方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的具體實施方式
作進一步詳細(xì)的描述。以下依工藝過程和步驟的次序進行描述A、首先，用高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀對山麥冬藥材進行選取，本發(fā)明所用藥材為湖北產(chǎn)山麥冬。采用高效液相色譜-質(zhì)譜法，得到總離子流色譜圖，計算圖中各峰的保留時間和峰面積，通過穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、精密度的方法學(xué)考察，選取相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD值)小于5％的17個峰作為特征峰，由此建立山麥冬藥材的特征指紋圖譜。同法，測定待選取藥材的17個峰值的保留時間和面積。采用計算機多元統(tǒng)計軟件進行聚類分析，計算待選取藥材與標(biāo)準(zhǔn)藥材的相似性(距離)作聚類圖，選取與標(biāo)準(zhǔn)藥材距離最近的藥材。圖2為標(biāo)準(zhǔn)藥材的圖譜，圖3為選取藥材的圖譜。
B、用90％的乙醇進行滲漉。如附圖4所示，滲漉裝置是一種傳統(tǒng)的藥材提取設(shè)備，其為一個陶瓷漏斗形裝置，漏斗形的下部有過濾篩和放置于其上的棉花，需滲漉的藥材放置于此過濾篩上。本發(fā)明選擇乙醇為溶劑(因為乙醇無毒，價格便宜)，乙醇不停地從上口往下滴，滲漉液不停地從下口流出，使裝置中存在一個濃度梯度，有利于山麥冬中皂苷等成分的去除。采用6倍量的乙醇進行滲漉，乙醇用量太多會造成糖分的溶解，用量太少又不易將皂甙等提取出來。附圖中標(biāo)記1為滲濾裝置；2為過濾篩；3為棉花；4為山麥冬粗粉；5為乙醇；6為乙醇流入口及控制閥；7為滲漉液流出口。
C、滲漉后的濾渣用10倍量的水在85℃水浴提取2次，每次30min。提取的次數(shù)對山麥冬多糖提取率有較大影響，所以最少應(yīng)重復(fù)提取一次。提取次數(shù)過多也不經(jīng)濟，所以選定為2次。
D、濾液合并后濃縮至原體積的1/10，再加95％乙醇，使乙醇最終濃度為80％時，醇析；保證醇沉的最終濃度為80％很重要，濃度過高單糖等易析出，濃度過低則多糖析出不全。
E、醇析后的沉淀在50±2℃真空干燥后，打粉，所得到的粉沫即為所提取的山麥冬多糖提取物。
F、用分光光度法測定提取物中山麥冬多糖的含量。這是一種傳統(tǒng)的測定多糖的方法，還可以用其它的分析方法測定多糖。根據(jù)本發(fā)明人的測定數(shù)據(jù)，山麥冬多糖提取物可達原料藥材干重的30％，提取物中多糖的含量一般為73-87％，最高可達90％。
權(quán)利要求
1.一種山麥冬多糖的提取工藝，其特征在于山麥冬多糖的提取工藝依以下次序的步驟進行A、以國家中國藥品生物制品檢定所的對照藥材為基準(zhǔn)，使用高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀，依據(jù)藥材指紋圖譜選取與標(biāo)準(zhǔn)藥材成分、含量相近的山麥冬的塊根；B、將選取的山麥冬塊根洗凈、制備為麥冬粗粉，將山麥冬粗粉用5-7倍90％的乙醇在滲漉裝置中滲漉；C、藥渣去醇后用8-12倍水在70-98℃水浴上提取2-3次，每次20-40分鐘；D、濾液合并后在60℃減壓濃縮至體積的1/10，加95％乙醇，使醇含量為80％時，醇析；E、將醇析沉淀在45-55℃真空干燥后，打粉，所得到的粉末即為所提取的山麥冬多糖提取物。F、用分光光度法測定提取物中山麥冬多糖的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取工藝，其特征在于山麥冬粗粉用乙醇滲漉工序中，乙醇的用量以5.5-6.5倍為佳，最佳為6倍；
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的提取工藝，其特征在于所述的藥渣去醇后加水提取工序中，水的用量以9-11倍為佳，最佳用量是10倍；提取溫度以75-90℃為佳，最佳溫度為85±2℃；最佳提取次數(shù)為2次；每次的提取時間為30min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取工藝，其特征在于所述的真空干燥的最佳溫度為50±2℃。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一權(quán)利要求所述的提取工藝，其特征在于對原料山麥冬的選取還可以采用其它的液相色譜、紅外光譜等儀器來進行。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種山麥冬多糖的提取工藝，屬于一種提取植物多糖的方法，尤其是一種從中藥材山麥冬中提取多糖的方法。山麥冬多糖的提取工藝依以下次序的步驟進行A.用液相色譜—質(zhì)譜儀，選取與標(biāo)準(zhǔn)藥材成分、含量相近的山麥冬藥材的塊根；B.將選取的塊根制成粗粉，將粗粉用乙醇在滲漉裝置中滲漉；C.藥渣去醇后在水浴上提?。籇.濾液合并后濃縮，醇析；E.將醇析沉淀真空干燥后，打粉，得到粉末狀的山麥冬多糖提取物。F.用分光光度法測定提取物中山麥冬多糖的含量。本發(fā)明所提出的工藝科學(xué)、合理、具有創(chuàng)新思想、而且成效顯著。山麥冬多糖提取物可達原料藥材干重的30％，提取物中多糖的含量一般為73－87％，最高可達90％。
文檔編號C08B37/00GK1504486SQ02147758
公開日2004年6月16日 申請日期2002年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2002年11月29日
發(fā)明者陳勇, 李紫, 蔡敏, 陳 勇 申請人:湖北大學(xué)