專利名稱：5-取代的嘧啶－2－基氧基羧酸衍生物及其制法和作為內(nèi)皮肽拮抗劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型的具有5-取代嘧啶環(huán)的羧酸衍生物，以及其制備方法和用途。
內(nèi)皮肽是一種由21個氨基酸組成的肽，并由血管內(nèi)皮合成與釋放。內(nèi)皮肽以三種異構(gòu)形式存在，即ET-1，ET-2和ET-3。在下文中，“內(nèi)皮肽”或“ET”是指內(nèi)皮肽的一種或所有異構(gòu)體。內(nèi)皮肽是一種強力的血管收縮劑，并對血管張力具有強有效的作用。已知這種血管收縮作用是由內(nèi)皮肽與其受體的結(jié)合而引起的(Nature，332，411-415，1988；FEBS Letters，231，440-444，1988和Biochem．Biophys．Res．Commun．，154．868-875，1988)。
內(nèi)皮肽的釋放增加或非正常釋放將引起外周血管、腎血管和腦血管的持續(xù)收縮，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。文獻中已經(jīng)報道內(nèi)皮肽涉及許多疾病，包括高血壓、急性心肌梗塞、肺動脈高血壓、雷諾氏病、腦血管痙攣、中風(fēng)、良性前列腺肥大、粥樣硬化、哮喘和前列腺癌。(J．Vascular Med．Biology 2．207(1990)，J．Am．Med．Association264，2868(1990)，Nature 344．114(1990)，N．Engl．J．Med．322，205(1989)，N．Engl．J．Med．328，1732(1993)，Nephron 66，373(1994)，Stroke 25，904(1994)，Nature 365，759(1993)，J．Mol.Cell．Cardiol．27，A234(1995)；Cancer Research 56，663(1996)，Nature Medicine 1．944(1995))目前文獻中描述了至少兩種內(nèi)皮肽受體亞型，ETA和ETB受體(Nature 348，730(1990)，Nature 348，732(1990))。結(jié)果，抑制內(nèi)皮肽與一種或兩種受體結(jié)合的物質(zhì)能對抗內(nèi)皮肽的生理作用，因此是有價值的藥劑。
羧酸衍生物及其作為內(nèi)皮肽拮抗劑的用途如WO 95／26716，WO96／11914，WO 97／9294，WO 97／12878，WO 97／38980，WO 97／38981所述。這些化合物在雜環(huán)的5位上帶有一個氮原子或下式所示的基團 與之相反，本發(fā)明的化合物在該位上有下式所示的基團 其中X為鹵素、羥基或C1-C4鹵代烷基。與已知內(nèi)皮肽拮抗劑相比，本發(fā)明的化合物例如在人體內(nèi)代謝更為有利。
本發(fā)明涉及式Ⅰ所示的羧酸衍生物 其中R1為四唑或下式所示的基團 其中R為(a)基團OR7，其中R7為氫、堿金屬陽離子、堿土金屬陽離子、生理可容性有機銨離子諸如叔C1-C4烷基銨或銨離子；C3-C8環(huán)烷基、C1-C8烷基、CH2-苯基，其可被一個或多個下列基團取代鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、羥基、C1-C4烷氧基、巰基、C1-C4烷基硫基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；
C3-C6鏈烯基或C3-C6炔基，這些基團本身可以帶1～5個鹵原子；此外R7可以為帶有1～5個鹵原子和／或1～3個下列基團的苯基硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、羥基、C1-C4烷氧基、巰基、C1-C4烷基硫基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；(b)經(jīng)氮原子連接的諸如吡咯基、吡唑基、咪唑基和三唑基的五元雜芳環(huán)，且該雜芳環(huán)可以帶有1～2個鹵原子、1～2個C1-C4烷基或1～2個C1-C4烷氧基。
(c)下式所示基團 其中k可以為0、1或2，p可以為1、2、3或4，以及R8為C1-C4烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C6鏈烯基、C3-C6炔基或苯基，其可被一個或多個，例如1～3個下列基團所取代鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、羥基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基硫基、巰基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；d)下式所示基團氧基、C1-C4烷基硫基、巰基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2。
其它取代基定義如下R2為氫、羥基、NH2、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C1-C4羥基烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或C1-C4烷基硫基、嗎啉；X為鹵素、C1-C4鹵代烷基、羥基；R3為氫、羥基、NH2、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C1-C4羥基烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-NH-O-C1-C4烷基、C1-C4烷基硫基；R4和R5(可以相同或不同)為可被一個或多個下列基團所取代的苯基或萘基鹵素、硝基、氰基、羥基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、苯氧基、巰基、烷基羰基、烷氧基羰基、C1-C4烷基硫基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；或苯基或萘基，其在鄰位經(jīng)直接鍵、亞甲基、亞乙基或亞乙烯基、氧或硫原子或SO2-、NH-或N-烷基互相連接；或含1～3個氮原子和／或一個硫或氧原子的五元或六元雜芳環(huán)，其可帶有1～4個鹵原子和／或1～2個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基硫基、苯基、苯氧基或苯基羰基，其中苯基本身可帶有1～5個鹵原子和／或1～3個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基和／或C1-C4烷基硫基；或C3-C7環(huán)烷基；R6為氫、C1-C8烷基、C3-C6鏈烯基、C3-C6炔基或C3-C8環(huán)烷基，其中這些基團可被下列基團單取代或多取代羥基、巰基、羧基、鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷氧基、C3-C6鏈烯氧基、C3-C6炔氧基、C1-C4烷基硫基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基、C3-C8烷基羰基烷基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、苯氧基或苯基，其中上述芳基可被單或多取代，例如被下列基團1～3取代鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、巰基、羧基、羥基、氨基、R12、C1-C4烷氧基羰基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、二氧代亞甲基、二氧代亞乙基或C1-C4烷基硫基；苯基或萘基，其各自可被一個或多個下列基團所取代鹵素、硝基、氰基、羥基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、苯氧基、C1-C4烷基硫基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2或二氧代亞甲基或二氧代亞乙基；含1～3個氮原子和／或一個硫或氧原子的五元或六元雜芳環(huán)，其可帶有1～4個鹵原子和／或1～2個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基硫基、苯基、苯氧基或苯基羰基，其中苯基本身可帶有1～5個鹵原子和／或1～3個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基和／或C1-C4烷基硫基；條件是當(dāng)Z非單鍵時，R6只能為氫；R12為C1-C4烷基、C1-C4烷基硫基、C1-C4烷氧基，其可帶有一個下列基團羥基、羧基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、甲酰胺或CON(C1-C4烷基)2；Z為硫、氧或單鍵。
在此及其后，采用下列定義堿金屬為，例如鋰、鈉、鉀；堿土金屬為，例如鈣、鎂、鋇；有機銨離子為質(zhì)子化的胺諸如乙醇胺、二乙醇胺、乙二胺、二乙胺或哌嗪；C3-C7環(huán)烷基為，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基；C1-C4鹵代烷基為直鏈或支鏈的，諸如，氟代甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氯二氟甲基、二氯一氟甲基、三氯甲基、1-氟乙基、2-氟乙基、2，2-二氟乙基、2，2，2-三氟乙基、2-氯-2，2-二氟乙基、2，2-二氯-2-氟乙基、2，2，2-三氯乙基或五氟乙基；C1-C4鹵代烷氧基為直鏈或支鏈的，諸如，二氟甲氧基、三氟甲氧基、一氯二氟甲氧基、1-氟乙氧基、2，2-二氟乙氧基、1，1，2，2-四氟乙氧基、2，2，2-三氟乙氧基、2-氯-1，1，2-三氟乙氧基、2-氟乙氧基或五氟乙氧基；C1-C4烷基為直鏈或支鏈的，諸如，甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丙基、1-丁基或2-丁基；C2-C4鏈烯基為直鏈或支鏈的，諸如，乙烯基、1-丙烯-3-基、1-丙烯-2-基、1-丙烯-1-基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基或2-丁烯基；C2-C4炔基為直鏈或支鏈的，諸如，乙炔基、1-丙炔-1-基、1-丙炔-3-基、1-丁炔-4-基或2-丁炔-4-基；C1-C4烷氧基為直鏈或支鏈的，諸如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基、丁氧基、1-甲基丙氧基、2-甲基丙氧基或1，1-二甲基乙氧基；C3-C6鏈烯氧基為直鏈或支鏈的，諸如，烯丙氧基、2-丁烯-1-氧基或3-丁烯-2-氧基；C3-C6炔氧基為直鏈或支鏈的，諸如，2-丙炔-1-氧基2-丁炔-1-氧基或3-丁炔-2-氧基；C1-C4烷基硫基為直鏈或支鏈的，諸如，甲硫基、乙硫基、丙硫基、1-甲基乙硫基、丁硫基、1-甲基丙硫基、2-甲基丙硫基或1，1-二甲基乙硫基；C1-C4烷基羰基為直鏈或支鏈的，諸如，乙?；?、乙基羰基或2-丙基羰基；C1-C4烷氧基羰基為直鏈或支鏈的，諸如，甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、異丙氧基羰基或正丁氧基羰基；C3-C8烷基羰基烷基為直鏈或支鏈的，諸如，2-氧代丙-1-基、3-氧代丁-1-基或3-氧代丁-2-基；C1-C8烷基為直鏈或支鏈的，諸如，C1-C4烷基、戊基、己基、庚及或辛基；鹵素為例如氟、氯、溴、碘。
本發(fā)明進一步涉及那些能釋放式Ⅰ所示化合物的化合物(前藥)。
優(yōu)選的前藥為能在人體某個區(qū)域，例如胃、腸、血流或肝內(nèi)，所常有的條件下進行釋放的化合物。
該化合物以及其制備用的中間體，諸如Ⅱ和Ⅳ，可以有一個或多個不對稱取代碳原子。此類化合物可以純對映體或純非對映體或其混合物存在。優(yōu)選使用對映純化合物為活性化合物。
此外，本發(fā)明涉及上述羧酸衍生物用于制備藥物的用途，特別是用于制備內(nèi)皮肽受體抑制劑的用途。
式Ⅳ所示的化合物，其中Z為硫或氧(Ⅳa)，可如WO 96／11914所述進行制備。 式Ⅲ所示的化合物要么是已知的，要么可通過例如，相應(yīng)的羧酸或其酯的還原，或通過其它已知方法來合成。
式Ⅳa所示的化合物可通過DE 19636046．3所述的酸催化酯交換反應(yīng)，以其對映純的形式得到。
此外，式Ⅳa所示的對映純的化合物可通過使用合適的對映純堿對式Ⅳa所示的外消旋或非對映化合物進行傳統(tǒng)的外消旋拆分而得到。合適的堿為例如4-氯苯基乙胺和在WO 96／11914中所述的堿。
式Ⅳ所示的化合物，其中Z為單鍵(Ⅳb)，可如WO 97／38981所述，以外消旋或?qū)τ丑w純形式獲得。 本發(fā)明的化合物，其中取代基如式Ⅰ中所定義，可通過例如，取代基如上定義的式Ⅳ所示的羧酸衍生物與式Ⅴ所示的化合物反應(yīng)來制備。
在式Ⅴ中，R10為鹵素或R11-SO2-，且R11為C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基或苯基。反應(yīng)優(yōu)選在惰性溶劑或稀釋劑中進行，并加入合適的堿，即能對中間體Ⅳ脫質(zhì)子化的堿，同時溫度為室溫～溶劑沸點。
因此，R1為COOH的類型Ⅰ的化合物可直接獲得，方法是R1為COOH的中間體Ⅳ經(jīng)兩當(dāng)量的合適的堿脫質(zhì)子化后，再與式Ⅴ所示的化合物反應(yīng)。反應(yīng)也在惰性溶劑中進行，溫度為室溫～溶劑沸點。
溶劑或稀釋劑的例子為脂肪烴、脂環(huán)烴和芳香烴，其在任一情況下可以被氯取代，諸如，己烷、環(huán)己烷、石油醚、輕石油、苯、甲苯、二甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、氯乙烷和三氯乙烯；醚，諸如，二異丙基醚、二異丁基醚、甲基叔丁基醚、氧化丙烯、二噁烷和四氫呋喃；腈類，諸如，乙腈、丙腈；酰胺，諸如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮；亞砜和砜，諸如二甲基亞砜和環(huán)丁砜。
式Ⅴ化合物是已知的，其中的一些可從商業(yè)途徑獲得，或以眾所周知的方式制備。
堿金屬或堿土金屬的氫化物，諸如氫化鈉、氫化鉀或氫化鈣；碳酸鹽，諸如堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉或碳酸鉀；堿金屬或堿土金屬氫氧化物，諸如氫氧化鈉或氫氧化鉀；有機金屬化合物，諸如丁基鋰；或堿金屬氨化物，如二異丙基氨化鋰，均可用作堿。
式Ⅰ化合物也可從相應(yīng)的羧酸即其中R1為COOH的式Ⅰ所示的化合物來制備。首先以常用方式將此類化合物轉(zhuǎn)化為活性形式，如酰鹵化物、酸酐或酰咪唑，然后與適當(dāng)?shù)牧u基化合物HOR7反應(yīng)。該反應(yīng)可在常用溶劑中進行，并常要求加入堿諸如，三乙胺、吡啶、咪唑或二氮雜二環(huán)十一烷。這兩步也可簡化成，例如將羧酸在諸如碳化二亞胺脫水試劑的存在下作用于羥基化合物上。
此外，式Ⅰ所示的化合物也可從相應(yīng)的羧酸鹽即其中R1為COOM的式Ⅰ所示的化合物來制備，其中M可為堿金屬陽離子或等價的堿土金屬陽離子。這類鹽可與式R7-A所示的許多化合物反應(yīng)，A為常用的離核離去基，例如鹵素，諸如氯、溴、碘，或芳基-或烷基磺?；?，例如甲苯磺酰基和甲磺?；淇杀畸u素、烷基或鹵代烷基取代；或其它等價離去基。帶有反應(yīng)性取代基A的式R7-A所示的化合物為已知的或可通過常用的專業(yè)知識獲得。該反應(yīng)可在常用溶劑中進行，并在加堿時有利地進行，此時上述堿是合適的。
在一些情況下，必需采用已知的保護基技術(shù)來制備本發(fā)明的化合物Ⅰ。如果，例如R6為4-羥基苯基，該羥基可首先以芐醚的形式進行保護，然后在反應(yīng)的合適階段切去。
其中R1為四唑的式Ⅰ所示的化合物可如WO 96／11914所述進行制備。
考慮到生物活性，優(yōu)選那些其中取代基如下定義的式Ⅰ所示的羧酸衍生物，其可為純的對映體或純的非對映體或其混合物R2為氫、羥基、N(C1-C4烷基)2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基硫基、鹵素；X為鹵素、三氟甲基；R3為氫、羥基、N(C1-C4烷基)2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基硫基、鹵素；R4和R5為可被一個或多個，例如1-3個下列基團所取代的苯基或萘基鹵素、氰基、羥基、巰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基硫基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基；苯基或萘基，其在鄰位經(jīng)直接鍵、亞甲基、亞乙基或亞乙烯基、氧或硫原子或SO2-、NH或N(C1-C4烷基)互相連接；含1或2個氮原子和／或一個硫或氧原子的五元雜芳環(huán)，其帶有1～2個鹵原子和／或1～2個下列基團C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、苯基，其本身可以帶有1～3個鹵原子和／或1～3個下列基團C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4烷基硫基；或C3-C7環(huán)烷基；R6為C1-C8烷基、C3-C6鏈烯基、C3-C6炔基或C3-C8環(huán)烷基，其中這些基團可被下列基團單取代或多取代鹵素、羥基、氰基、C1-C4烷氧基、C3-C6鏈烯氧基、C3-C6炔氧基、C1-C4烷基硫基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基羰基、羥基羰基、C1-C4烷氧基羰基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、苯氧基或苯基，其中上述芳基可被單或多取代，例如1～3取代，取代基為鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、R12、C1-C4烷氧基羰基、二氧代亞甲基、二氧代亞乙基、C1-C4烷基硫基、苯基或苯氧基；可被一個或多個下列基團所取代的苯基或萘基鹵素、硝基、氰基、羥基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、苯氧基、C1-C4烷基硫基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；含1～3個氮原子和／或一個硫或氧原子的五元或六元雜芳環(huán)，其可帶有1～4個鹵原子和／或1～2個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基硫基、苯基、苯氧基或苯基羰基。其中苯基本身可帶有1～5個鹵原子和／或1～3個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基和／或C1-C4烷基硫基；R12為C1-C4烷基、C1-C4烷氧基，其帶有一個下列基團羥基、甲酰胺或CON(C1-C4烷基)2；Z為硫、氧或單鍵。
特別優(yōu)選取代基如下定義的式Ⅰ所示的化合物，其可為純的對映體或純的非對映體或其混合物。
R2為C1-C4烷基、C1-C4烷氧基，特別是甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基；X為氟、三氟甲基；R3為C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基硫基，特別是甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基；R4和R5(相同或不同)為可被一個或多個，例如1～3個，下列基團所取代的苯基鹵素、羥基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基硫基或R4和R5為在鄰位經(jīng)直接鍵、亞甲基、亞乙基或亞乙烯基、氧或硫原子或SO2-、NH或N(C1-C4烷基)互相連接的苯基；或噻唑、噁唑、噻吩或呋喃，其中上述雜芳環(huán)可被鹵素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基單取代或二取代；R4和R5為環(huán)己基；R6為C1-C8烷基、C3-C6鏈烯基或C3-C8環(huán)烷基，其中這些基團可被下列基團單取代或多取代鹵素、羥基、氰基、C1-C4烷氧基、C3-C6鏈烯氧基、C1-C4烷基硫基、苯氧基或苯基，其中上述芳基可被單或多取代，例如1～3取代，取代基為C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、二氧代亞甲基、二氧代亞乙基、C1-C4烷基硫基；可被一個或多個下列基團取代的苯基或萘基鹵素、硝基、氰基、羥基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、苯氧基、C1-C4烷基硫基、C1-C4烷基氨基或C1-C4二烷基氨基；含一個氮原子和／或一個硫或氧原子的五元或六元雜芳環(huán)，其可帶有1～4個鹵原子和／或1～2個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基硫基、苯基、苯氧基或苯基羰基，其中苯基本身可帶有1～5個鹵原子和／或1～3個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基和／或C1-C4烷基硫基；Y為硫、氧或單鍵。
本發(fā)明的化合物提供了一種新型醫(yī)療潛在性，可用于治療高血壓、肺動脈高血壓、心肌梗塞、心絞痛、心律失常、急性／慢性腎衰竭、慢性心機能不全、腎機能不全、腦血管痙攣、大腦缺血、膜下出血、偏頭痛、哮喘、粥樣硬化、內(nèi)毒素休克、內(nèi)毒素引發(fā)的機能衰竭、血管內(nèi)凝固、血管成形術(shù)和分流術(shù)后的血管再狹窄、良性前列腺肥大、局部缺血或中毒引起的高血壓或腎衰竭、間質(zhì)瘤的轉(zhuǎn)移和生長、造影劑引發(fā)的腎衰竭、胰腺炎、腸胃潰瘍和勃起障礙。
本發(fā)明進一步涉及式Ⅰ所示的內(nèi)皮肽受體拮抗劑和腎素-血管緊張素系統(tǒng)的抑制劑的組合。腎素-血管緊張素系統(tǒng)的抑制劑為腎素抑制劑、血管緊張素Ⅱ拮抗劑和血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑。優(yōu)選式Ⅰ所示的內(nèi)皮肽受體拮抗劑與ACE抑制劑的組合。
此外，本發(fā)明涉及式Ⅰ所示的內(nèi)皮肽受體拮抗劑與β阻斷劑的組合。
此外，本發(fā)明涉及式Ⅰ所示的內(nèi)皮肽受體拮抗劑與利尿劑的組合。
此外，本發(fā)明涉及式Ⅰ所示的內(nèi)皮肽受體拮抗劑與阻斷VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)作用的物質(zhì)的組合。這種物質(zhì)例如，直接抑制VEGF或特定結(jié)合蛋白的抗體，或者能特定地抑制VEGF釋放或受體結(jié)合的低分子量物質(zhì)。
上述組合可同時服入，或在不同時間依次服入。它們可以單一藥劑形式或分離的制劑形式服用。用法也可不同，例如內(nèi)皮肽受體拮抗劑可以口服，而VEGF抑制劑為腸胃外給藥。
這些組合制劑對于治療和預(yù)防高血壓及其所引發(fā)的疾病是特別合適的，同時也適于治療心機能不全。
本發(fā)明化合物的高活性可通過下列實驗證明受體結(jié)合研究克隆的人體ETA或ETB受體-表達CHO細胞用于結(jié)合研究。
膜制備ETA或ETB受體-表達CHO細胞在DMEM NUT MIX F12培養(yǎng)基中生長(Gibco，No．21331-020)，該培養(yǎng)基中含有10％胎牛血清(PAA實驗室GmbH，Linz，No．A15-022)、1mM谷氨酰胺(Gibco No．25030-024)、100U／ml青霉素和100μg／ml鏈霉素(Gibco，Sigma No．P-0781)。48小時后，細胞用PBS洗滌，并與0．05％含胰蛋白酶的PBS一起在37℃培養(yǎng)5分鐘。然后混合物用培養(yǎng)基中和，細胞以離心(300×g)方式收集。
為制備膜，細胞稀釋成濃度為108細胞／ml的緩沖液(50mMtris．HCl緩沖液，pH7．4)，然后用Branson Sonifier 250的超聲波分解40-70秒／恒定輸出20。
結(jié)合試驗ETA和ETB受體結(jié)合試驗中，將膜懸浮于培養(yǎng)緩沖液中(50mMTris-HCl緩沖液，pH7．4，含有5mM MnCl2、40mg／ml肝菌肽和0．2％BSA)，其濃度為50μg蛋白／測試混合物，并在25℃與25pM[125I]ET1(ETA受體試驗)或25pM[125I]ET3(ETB受體試驗)一起在有或沒有被測物質(zhì)的情況下培養(yǎng)。非特異性結(jié)合用10-7MET1測量。30分鐘后，經(jīng)Skatron細胞收集器(Skatron，Lier，挪威)中的GF／B玻璃纖維濾器過濾所得的濾液，通過分離獲得游離和結(jié)合的放射性配體，濾器用pH為7．4的含0．2％BSA的冰冷的Tris-HCl緩沖液洗滌。收集在濾器中的放射性以Packard 2200 CA液相閃爍計數(shù)器計量。
內(nèi)皮肽受體拮抗劑對血管的官能性測試兔子主動脈切片初始張力為2g，在37℃、pH7．3-7．4的Krebs-Henseleit溶液中弛豫1小時后，以K+引發(fā)收縮。洗凈之后，可繪出上至最大的內(nèi)皮肽劑量-效果圖。
在開始繪制內(nèi)皮肽劑量-效果圖之前15分鐘，于同一血管標本的其它制備物中加入潛在的內(nèi)皮肽拮抗劑。內(nèi)皮肽的效果以K+-引發(fā)的收縮的百分比來計算。有效的內(nèi)皮肽拮抗劑使內(nèi)皮肽劑量-效果圖向右方移動。
活體內(nèi)ET拮抗劑的測試重量為250～300g的雄性SD大鼠以異戊巴比妥麻醉，人工換氣，切斷其迷走神經(jīng)并刺毀腦脊髓。在其頸動脈和頸靜脈插入導(dǎo)管。
在對照動物中，靜脈注射1μg／kg ET1導(dǎo)致血壓明顯上升，并保持相當(dāng)長的時間。
被測試動物在注射ET1之前三十分鐘，接受靜脈注射被測試化合物(1ml／kg)。為測定ET-拮抗性，對比測試動物與對照動物的血壓變化。
混合ETA和ETB拮抗劑的口服測試重量為250～350g的正常雄鼠(Sprague Dawley，Janvier)預(yù)先口服被測試物質(zhì)。80分鐘后，該動物用尿烷麻醉，并在頸動脈(測定血壓)和頸靜脈(服入大內(nèi)皮肽／內(nèi)皮肽1)處插入導(dǎo)管。
一段穩(wěn)定期后，靜脈注射大內(nèi)皮肽(20μg／kg，Appl．Vol.0．5ml／kg)或ET1(0．3μg／kg，Appl. Vol. 0．5ml／kg)。在30分鐘內(nèi)連續(xù)測量血壓和心率。血壓的顯著性和持續(xù)性變化以曲線下面積(AUC)計算。為測定被測試物質(zhì)的拮抗效用，對比該物質(zhì)處理過的動物的AUC和對照動物的AUC。
本發(fā)明的化合物可以常用方式口服或腸胃外給藥(皮下、靜脈、肌內(nèi)、腹膜內(nèi))。服用方式也可經(jīng)鼻咽空間以氣體或噴劑吸入。
施用量取決于病人的年齡、身體狀況和體重以及服用方式?；钚晕镔|(zhì)的日劑量為口服為約0．5～50mg／kg體重，腸胃外給藥為約0．1～10mg／kg體重。
這種新型化合物可以傳統(tǒng)的固體或液體藥用形式使用，例如不包衣或包衣片劑、膠囊、粉劑、粒劑、栓劑、溶液、軟膏、乳膏或噴劑。這些均以常規(guī)方法生產(chǎn)。用于此目的的活性物質(zhì)可與傳統(tǒng)的藥物輔劑一起加工，諸如片劑粘合劑、填充劑、防腐劑、片劑用崩解劑、流動調(diào)節(jié)劑、增塑劑、濕潤劑、分散劑、乳化劑、溶劑、緩釋劑、抗氧劑和／或拋射氣體(參見H．Sucker et al.PharmazeutischeTechnologie，Thieme-Verlag，斯圖加特，1991)。這種方法獲得的劑型通常含0．1～90％重量的活性物質(zhì)。
合成實施例實施例12-(4，6-二甲氧基-5-氟嘧啶-2-基氧基)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯將1. 0g(3．5mmol)2-羥基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯溶解于DMF中，滴加至0．18gNaH(4．2mmol，55％于白色礦物油中)在10mlDMF的懸浮液中。室溫下攪拌混合物30分鐘，然后混入10ml DMF中的830mg(4．8mmol)的4，6-二甲氧基-5-氟-2-甲磺?；奏?，室溫下攪拌2小時。反應(yīng)混合物傾于冰-水上，并用乙醚萃取三次。醚相經(jīng)硫酸鎂干燥后過濾，然后于減壓下除去溶劑。棕色殘余物(1. 7g)經(jīng)MPLC純化，得到1．3g所需產(chǎn)物，其可直接進一步反應(yīng)。
實施例22-(4，6-二甲氧基-5-氟嘧啶-2-基氧基)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸(A)和2-(4-甲氧基-5-氟-6-羥基嘧啶-2-基氧基)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸(B)將1．3g(2．9mmol)2-(4，6-二甲氧基-5-氟嘧啶-2-基氧基)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯溶于10ml二噁烷中，并混入5．9ml的1NKOH溶液。混合物在回流下攪拌4小時。加入水后，水相用醚萃取兩次。水相經(jīng)1N HCl水溶液酸化后用醚萃取，有機相經(jīng)硫酸鎂干燥后蒸餾除去溶劑。殘余物收集于醚中，并結(jié)晶得到100mg產(chǎn)物B。母液混入正己烷后得到400mg固體產(chǎn)物A。
A1H-NMR(CDCl3，500MHz)7．2-7．45(m，10H)；6．05(s，1H)；3．95(s，6H)；3．3(s，3H)m．p．168～170℃B1H-NMR(DMSO，250MHz)7．1-7．4(m，10H)；6．05(s，1H)；3．9(s，3H)；3．3(s，3H)m．p．115～117℃
實施例32-(4-嗎啉代-5-氟嘧啶-2-基氧基)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸芐酯將3．3g(9mmol)2-羥基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸芐酯和4-嗎啉代-5-氟-2-氯嘧啶溶解于DMF中，滴加至9．96g K2CO3(72mmol)在40ml DMF中的懸浮液中?；旌衔锵仍?0℃攪拌3小時，隨后在130℃攪拌3小時。反應(yīng)混合物傾于冰-水上，并用乙酸乙酯萃取三次。酯相用硫酸鎂干燥并過濾，然后于減壓下除去溶劑。棕色殘余物(5．72g)經(jīng)MPLC純化，可直接進一步反應(yīng)。
實施例42-(4-嗎啉代-5-氟嘧啶-2-基氧基)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸通過300mg活性碳上的鈀(10％)，將0．9g2-(4-嗎啉代-5-氟嘧啶-2-基氧基)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸芐酯于30ml乙酸乙酯中的溶液在室溫、常壓下以氫氣氫化3小時。反應(yīng)混合物經(jīng)過濾、濃縮后，所得殘余物(900mg)以MPLC純化。
1H NMR(CDCl3，500MHz)8．95(d，1H)；7．2-7．5(m，10H)；6．05(s，1H)；3．8(s，8H)；3．3(s，3H)m．p．174～175℃表Ⅰ列出的化合物可以相同方法制備。
表Ⅰ

表Ⅱ
實施例5采用上述結(jié)合試驗，對下列化合物測定了其受體結(jié)合數(shù)據(jù)。
結(jié)果編于表3中。
表3受體結(jié)合數(shù)據(jù)(Ki值)
權(quán)利要求
1. 式Ⅰ所示的羧酸衍生物 其中R1為四唑或下式所示的基團 R為a)基團OR7，其中R7為氫、堿金屬陽離子、堿土金屬陽離子、生理可容性有機銨離子或銨離子；C3-C8環(huán)烷基、C1-C8烷基、CH2-苯基，其可被一個或多個下列基團取代鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、羥基、C1-C4烷氧基、巰基、C1-C4烷基硫基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；C3-C6鏈烯基或C3-C6炔基，這些基團本身可帶有1～5個鹵原子；此外，R7可以為苯基，其可帶有1～5個鹵原子和／或1～3個下列基團硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、羥基、C1-C4烷氧基、巰基、C1-C4烷基硫基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；b)通過氮原子連接的諸如吡咯基、吡唑基、咪唑基和三唑基的五元雜芳環(huán)，且該芳環(huán)可以帶有1～2個鹵原子、1～2個C1-C4烷基或1～2個C1-C4烷氧基；c)下式所示基團 其中k可以為0、1或2，p可以為1、2、3或4，以及R8為C1-C4烷基，C3-C8環(huán)烷基，C3-C6鏈烯基、C3-C6炔基或苯基，其可被一個或多個，例如1～3個下列基團所取代鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、羥基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基硫基、巰基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；d)下式所示基團 其中R9為C1-C4烷基、C3-C6鏈烯基、C3-C6炔基、C3-C8環(huán)烷基，其中這些基團可以帶有一個C1-C4烷氧基、C1-C4烷基硫基和／或一個c)中所提及的苯基；可被1～3個下列基團所取代的苯基鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、羥基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基硫基、巰基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2，R2為氫、羥基、NH2、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C1-C4羥基烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或C1-C4烷基硫基、嗎啉；X為鹵素、C1-C4鹵代烷基、羥基；R3為氫、羥基、NH2、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C1-C4羥基烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-NH-O-C1-C4烷基、C1-C4烷基硫基；R4和R5(可以相同或不同)為可被一個或多個下列基團所取代的苯基或萘基鹵素、硝基、氰基、羥基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、苯氧基、巰基、烷基羰基、烷氧基羰基、C1-C4烷基硫基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2；或苯基或萘基，其在鄰位由直接鍵、亞甲基、亞乙基或亞乙烯基、氧或硫原子或SO2-、NH-或N-烷基相互連接；或含1～3個氮原子和／或一個硫或氧原子的五元或六元雜芳環(huán)，其可帶有1～4個鹵原子和／或1～2個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基硫基、苯基、苯氧基或苯基羰基，其中苯基本身可帶有1～5個鹵原子和／或1～3個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基和／或C1-C4烷基硫基；或C3-C7環(huán)烷基；R6為氫、C1-C8烷基、C3-C6鏈烯基、C3-C6炔基或C3-C8環(huán)烷基，其中這些基團可被下列基團單取代或多取代羥基、巰基、羧基、鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷氧基、C3-C6鏈烯氧基、C3-C6炔氧基、C1-C4烷基硫基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基、C3-C8烷基羰基烷基、氨基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、可被單或多取代的苯基，例如被鹵素、硝基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或C1-C4烷基硫基1～3取代的苯基或苯氧基；各自可被一個或多個下列基團所取代的苯基或萘基鹵素、硝基、氰基、羥基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、苯氧基、C1-C4烷基硫基、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2或二氧代亞甲基或二氧代亞乙基；含1～3個氮原子和／或一個硫或氧原子的五元或六元雜芳環(huán)，其可帶有1～4個鹵原子和／或1～2個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷基硫基、苯基、苯氧基或苯基羰基，其中苯基本身可帶有1～5個鹵原子和／或1～3個下列基團C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基和／或C1-C4烷基硫基；條件是當(dāng)Z非單鍵時，R6只能為氫；Z為硫、氧或單鍵，以及其生理上可容性鹽，和對映純及非對映純形式。
2．權(quán)利要求1所述的羧酸衍生物Ⅰ在治療疾病中的用途。
3．權(quán)利要求1所述的化合物Ⅰ作為內(nèi)皮肽受體拮抗劑的用途。
4．權(quán)利要求1所述的羧酸衍生物Ⅰ用于制備治療與內(nèi)皮肽水平升高有關(guān)的疾病的藥物的用途。
5．權(quán)利要求1所述的羧酸衍生物Ⅰ用于制備治療由內(nèi)皮肽控制發(fā)展和／或進展的疾病的藥物的用途。
6．權(quán)利要求1所述的羧酸衍生物Ⅰ用于治療慢性心機能不全、再狹窄、高血壓、肺動脈高血壓、急性／慢性腎機能不全、腦部缺血、哮喘、良性前列腺肥大和前列腺癌的用途。
7．權(quán)利要求1所述的羧酸衍生物Ⅰ與一種或多種活性化合物的組合，其中所述活性化合物選自諸如腎素抑制劑、血管緊張素Ⅱ拮抗劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑之類的腎素-血管緊張素系統(tǒng)的抑制劑、混合ACE／中性內(nèi)肽酶(NEP)抑制劑、β-阻斷劑、利尿劑、鈣拮抗劑和VEGF-阻斷物質(zhì)。
8．供口服、腸胃外給藥和腸胃內(nèi)給藥的藥物制劑，其在各個劑量中，除含常用藥劑輔劑之外，還包含至少一種權(quán)利要求1所述的羧酸衍生物Ⅰ。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)所示的羧酸衍生物,其中取代基具有下述定義:R
文檔編號C07D401/12GK1291190SQ99803037
公開日2001年4月11日 申請日期1999年2月5日 優(yōu)先權(quán)日1998年2月17日
發(fā)明者W·安伯格, R·揚森, A·克林, D·克林格, H·里舍爾斯, S·赫爾根勒德爾, M·拉沙克, L·翁格爾 申請人:Basf公司