專利名稱：：增強nkt細胞的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及含有下述通式(Ⅰ)所示化合物或其可藥用鹽作為有效成分具有增強NKT細胞作用的自身免疫應答抑制劑和/或正常免疫應答激活劑。另外，本發(fā)明還涉及下述通式(Ⅰ)表示的化合物或可藥用鹽的新型合成方法。
背景技術(shù)：
：本發(fā)明下述通式(Ⅰ)表示的1，2-二氫喹啉化合物中，某種物質(zhì)是在WO95/24395及EP0059698中記載的公知物質(zhì)，例如，已知具有抑制蛋白尿漏出的作用、抑制抗TNPIgM產(chǎn)生的作用，對大鼠的角叉菜膠浮腫有效、對大鼠的佐劑引起的關(guān)節(jié)炎有效。但是，尚不知道這些化合物具有增強NKT細胞的作用。另外，在WO95/24395中作為1，2-二氫喹啉化合物(Ⅰ)的合成方法，以6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-苯基-N-甲基(硫代氨基甲酰基)〕喹啉(Ⅰa)為例公開了以下合成方法。(現(xiàn)有方法)在現(xiàn)有方法中，為了從化合物(Ⅲa)得到目的化合物(Ⅰa)，在回流下使化合物(Ⅲa)和化合物(Ⅸ)反應，以40.8％的收率得到化合物(Ⅹ)。進一步，在氫化鈉等強堿存在下，使化合物(Ⅹ)和化合物(Ⅺ)反應，以17.5％的收率得到目的化合物(Ⅰa)。這時從化合物(Ⅲa)得到目的化合物(Ⅰa)的總體收率為7.1％。如上所述在上述公開公報中公開的通式(Ⅰ)所示1，2-二氫喹啉化合物(Ⅰa)的制備方法存在各步驟收率低等缺點。本發(fā)明涉及的上述1，2-二氫喹啉化合物(Ⅰ)的制備方法如下所述。方法(1)〔式中R1、R2、R3、R4、R5及Z分別表示與上述相同的含義，X1表示離去基團?！吃匣衔?Ⅱ)可以按照下述制備方法制備。方法(A)方法(B)或在其羧基團的反應活性衍生物，或其鹽〔式中R1、R2、R3、R4、R5、X1及Z分別表示與上述相同的含義，X2表示離去基團?！潮菊f明書的上述及后述說明中，如下所述對于包含在本發(fā)明范圍內(nèi)的各種定義的合適實施例乃至具體實例進行詳細說明。化合物(Ⅰ)的合適可藥用鹽是常用的無毒鹽，例如與堿形成的鹽或酸加成鹽，如與無機堿形成的鹽，如堿金屬鹽(如鈉鹽、鉀鹽等)、堿土金屬鹽(如鈣鹽、鎂鹽等)、銨鹽；與有機堿形成的鹽，如有機胺鹽(如三乙胺鹽、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、二環(huán)己基胺鹽、N，N’-二苯甲基乙二胺鹽等)；無機酸加成鹽(如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等)；有機羧酸或磺酸加成鹽(如甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽等)；與堿性或酸性氨基酸(如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)形成的鹽等。只要沒有特別的說明，“低級”用來指具有1～6個，優(yōu)選1～4個碳原子的基團。合適的“低級烷基”例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等直鏈或支鏈狀物質(zhì)。其中更優(yōu)選C1～C4烷基。合適的“低級烷氧基”例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、叔戊氧基、己氧基等，其中更優(yōu)選C1～C4烷氧基。合適的“鹵素”例如氟、氯、溴和碘。合適的“離去基團”例如氟、氯、溴、碘等鹵素，甲氧基、乙氧基、丙氧基等低級烷氧基，甲磺酰氧基、苯磺酰氧基等磺酰氧基等。本發(fā)明化合物(Ⅰ)優(yōu)選的具體實例如下所述。6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-苯基-N-甲基(硫代氨基甲?；?〕喹啉6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-甲基-N-(4-甲氧基苯基)(硫代氨基甲酰基)〕喹啉1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-苯基-N-甲基氨基甲酰基〕喹啉以下詳細說明本發(fā)明化合物(Ⅰ)以及作為中間體有用的化合物(Ⅱ)的制備方法。方法(1)化合物(Ⅰ)或其鹽可以通過使化合物(Ⅱ)或其鹽進行環(huán)化反應制備。該反應通常是在水、醇(例如甲醇、乙醇等)、苯、N，N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃、甲苯、二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、二氧六環(huán)、或乙醚等溶劑或?qū)Ψ磻獩]有不良影響的其它任意溶劑或它們的混合物中實施。反應溫度沒有特別的限定，通常是在冷卻條件下乃至加熱條件下進行反應。反應通常是通過使用無機堿或有機堿，例如堿金屬(例如鈉、鉀等)、堿金屬氫氧化物(例如氫氧化鈉、氫氧化鉀等)、堿金屬碳酸氫鹽(例如碳酸氫鈉、碳酸氫鉀等)、堿金屬碳酸鹽(例如碳酸鈉、碳酸鉀等)、三(低級)烷胺(例如三甲胺、三乙胺、二異丙基乙胺等)、堿金屬氫化物(例如氫化鈉等)、堿金屬(低級)醇化物(例如甲醇鈉、乙醇鈉等)、吡啶、二甲基吡啶、甲基吡啶、二甲氨基吡啶、N-(低級)烷基嗎啉、N，N-二(低級)烷基苯甲胺、N，N-二(低級)烷基苯胺等的方法進行。該堿和/或原料化合物為液態(tài)時，也可以使用它們作為溶劑。方法(A)-(1)化合物(Ⅴ)或其鹽可以通過使化合物(Ⅲ)或其鹽與化合物(Ⅳ)或其鹽反應制備。該反應可以按照下述制備例1-(1)所示方法或與之相似的方法進行。方法(A)-(2)化合物(Ⅵ)或其鹽可以通過使化合物(Ⅴ)或其鹽進行羰基轉(zhuǎn)化為硫羰基反應制備。該反應可以按照制備例1-(2)或2所示方法或者與之相似的方法進行。方法(A)-(3)化合物(Ⅶ)或其鹽可以通過使化合物(Ⅵ)或其鹽進行引入羧基的反應制備。該反應可以按照下述制備例3或4所示方法或與之相似的方法進行。方法(A)-④化合物(Ⅶ)或其鹽可以通過使化合物(Ⅴ)或其鹽進行引入羧基的反應制備。該反應可以按照下述制備例3或4所示方法或者與之相似的方法進行。方法(B)化合物(Ⅱ)或其鹽可以通過化合物(Ⅶ)或其羧基上的反應活性衍生物或它們的鹽與化合物(Ⅷ)或其亞氨基上的反應活性衍生物或它們的鹽反應制備?；衔?Ⅷ)的亞氨基上合適的反應活性衍生物例如化合物(Ⅷ)與N，O-二(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、N-三甲基甲硅烷基乙酰胺等甲硅烷基化合物反應形成的甲硅烷基衍生物；化合物(Ⅷ)與三氯化磷或光氣反應形成的衍生物等。化合物(Ⅶ)的羧基上合適的反應活性衍生物例如酰鹵化物、酸酐、活性酯等。合適的例子有酰氯；酰基疊氮化物；與取代磷酸(例如二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二苯甲基磷酸、鹵代磷酸等)、二烷基亞磷酸、亞硫酸、硫代硫酸、烷基磺酸(例如甲磺酸、乙磺酸等)、硫酸、烷基碳酸、脂肪族羧酸(例如新戊酸、戊酸、異戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等)、芳香族羧酸(例如苯甲酸等)等酸形成的混合酸酐；對稱酸酐；與咪唑、4-取代咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑形成的活性酰胺；活性酯(例如氰基甲酯、甲氧基甲酯、二甲基亞氨基甲基〔(CH3)2N+=CH-〕酯、乙烯基酯、炔丙酯、對硝基苯酯、2，4-二硝基苯酯、三氯苯酯、五氯苯酯、甲磺酰基苯酯、苯偶氮基苯酯、苯基硫代酯(phenylthioester)、對硝基苯基硫代酯(p-nitrophenylthioester)、對甲苯基硫代酯(p-cresylthioester)、羧甲基硫代酯、吡喃基酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫代酯等)；與N-羥基化合物(例如N，N-二甲基羥胺、1-羥基-2(1H)-吡啶酮、N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基苯并三唑、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、1-羥基-6-氯-1H-苯并三唑等)形成的酯等。這些反應活性衍生物可以根據(jù)所使用的化合物(Ⅶ)的種類，從其中適當選擇。反應通常是在丙酮、二氧六環(huán)、乙腈、氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶等常用溶劑或?qū)Ψ磻獩]有不良影響的其它任意溶劑或它們的混合物中實施。反應優(yōu)選在分子篩3?；?埃等脫水劑的存在下實施。化合物(Ⅶ)以游離酸或其鹽的形式進行反應時，優(yōu)選在N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺；N-環(huán)己基-N’-嗎啉基乙基碳二亞胺；N-環(huán)己基-N’-(4-二乙氨基環(huán)己基)碳二亞胺；N，N’-二異丙基碳二亞胺；N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺；N，N’-羰基二(2-甲基咪唑)；環(huán)戊乙烯酮-N-環(huán)己基亞胺；二苯基乙烯酮-N-環(huán)己基亞胺；乙氧基乙炔；1-烷氧基-1-氯乙烯；亞磷酸三烷基酯；多磷酸異丙酯、磷酰氯(三氯氧化磷)；三氯化磷；亞硫酰氯；草酰氯；三苯基磷化氫；2-乙基-7-羥基苯并異噁唑翁鹽；氫氧化2-乙基-5-(間硫代苯基)異噁唑翁分子內(nèi)鹽；1-(對氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑；N，N-二甲基甲酰胺與亞硫酰氯、光氣、磷酰氯等反應制得的所謂Vilsmeier試劑等常用縮合劑的存在下進行反應。另外，反應也可以在堿金屬碳酸氫鹽類、三(低級)烷胺類、吡啶、N-低級烷基嗎啉類、N，N-二(低級)烷基苯甲胺類等有機堿或無機堿存在下進行。反應溫度沒有特別的限定，通常在冷卻條件下乃至加熱條件下進行反應。另外，下面以6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-苯基-N-甲基(硫代氨基甲?；?〕喹啉(Ⅰa)的合成為例詳細說明本發(fā)明的新型合成方法。在該新型合成方法中，步驟(a)～(e)的收率分別為90.2％、73.2％、66.4％、86.0％、96.9％，能夠以各步驟較高的收率得到目的產(chǎn)物。由化合物(Ⅲa)得到目的化合物(Ⅰa)的總收率為36.5％，與上述公開公報(WO95/24395)中公開的由(Ⅲa)得到(Ⅰa)的收率7.1％相比，在收率方面得到了相當?shù)母纳?。另外，各步驟將在下述制備例和實施例中分別詳細公開(步驟(a)在制備例1-(1)中公開，步驟(b)在制備例1-(2)中公開，步驟(c)在制備例3中公開，步驟(d)在制備例5中公開，步驟(e)在實施例1中公開)。NKT細胞是同時具有T細胞受體和NK細胞受體的獨特細胞，它同時具有T細胞和NK細胞兩種淋巴細胞的特征。本發(fā)明的化合物(Ⅰ)及其可藥用鹽具有激活乃至增強NKT細胞的作用，因此作為增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑和/或正常免疫應答激活劑是特別有效的，例如可以有效治療和/或預防人和動物的炎癥狀態(tài)、各種疼痛、膠原病、自身免疫疾病、各種免疫疾病等，特別是可以有效治療和/或預防關(guān)節(jié)和肌肉的炎癥和疼痛〔例如慢性關(guān)節(jié)風濕、風濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)病、尿酸性關(guān)節(jié)炎等〕、皮膚的炎癥狀態(tài)〔例如曬傷、濕疹等〕、眼的炎癥狀態(tài)〔例如結(jié)膜炎等〕、伴有炎癥的肺部疾病〔例如哮喘、支氣管炎、鴿子飼養(yǎng)者病、農(nóng)夫肺等〕、伴有炎癥的消化器官疾病〔例如口瘡性潰瘍、克羅恩氏病、萎縮性胃炎、疣狀胃炎、潰瘍性大腸炎、脂肪便、局部性回腸炎、過敏性腸綜合癥等〕、牙齦炎、(手術(shù)或損傷后的炎癥、疼痛、腫脹)、與炎癥有關(guān)的發(fā)熱、疼痛、其它癥狀、移植引起的排斥、全身性紅斑狼瘡、硬皮病、多發(fā)性肌炎、多發(fā)性軟骨炎、結(jié)節(jié)性動脈周炎、強直性脊椎炎、炎癥性慢性腎病〔例如腎小球性腎炎、狼瘡腎炎、膜性腎炎等〕、風濕熱、斯耶格倫氏綜合征、貝切特氏病、甲狀腺炎、Ⅰ型糖尿病、皮膚肌炎、慢性活動性肝炎、重癥肌無力、特發(fā)性口炎性腹瀉、Grave氏病、多發(fā)性硬化癥、原發(fā)性膽汁性肝硬化、萊特爾氏綜合癥、自身免疫性血液疾病〔例如溶血性貧血、純紅細胞性貧血、特發(fā)性血小板減少、再生障礙性貧血等〕、葡萄膜炎、接觸性皮炎、牛皮癬、川崎病、與Ⅰ型過敏反應有關(guān)的疾病(例如過敏性哮喘、特應性皮炎、尋麻疹、過敏性結(jié)膜炎、花粉病等)、休克(例如膿毒性休克、過敏性休克、成人型呼吸窘迫綜合癥等)、肉狀瘤病、韋格內(nèi)氏肉芽腫病、何杰金氏病、癌〔例如肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌等〕、病毒引起的疾病〔例如肝炎、慢性疲勞性綜合癥等〕等。本發(fā)明的有效成分化合物(Ⅰ)或其可藥用鹽可以直接給藥，一般是作為可藥用的各種制劑組合物給藥。制劑組合物的劑型例如溶液、乳濁液、懸濁液、膠囊劑、顆粒劑、散劑、片劑、糖漿劑等口服制劑、軟膏劑、滴眼劑、滴鼻劑等外用或局部給藥制劑、注射劑、栓劑等。這些制劑組合物可以使用蔗糖、淀粉、甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、纖維素、滑石粉、磷酸鈣、碳酸鈣等賦形劑，纖維素、甲基纖維素、羥丙基纖維素、聚丙基吡咯烷酮、明膠、阿拉伯膠、聚乙二醇、蔗糖、淀粉等粘合劑，淀粉、羧甲基纖維素、羥丙基淀粉、碳酸氫鈉、磷酸鈣、羧甲基纖維素鈣、枸櫞酸鈣等崩解劑，硬脂酸鎂、滑石粉、月桂基硫酸鈉等潤滑劑，枸櫞酸、薄荷醇、甘氨酸、山梨醇、橙粉等矯味劑，苯甲酸鈉、亞硫酸氫鈉、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯等保存劑，枸櫞酸、枸櫞酸鈉、乙二胺四乙酸鈉、醋酸等穩(wěn)定劑，甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸鋁等懸濁劑，羥丙基甲基纖維素等分散劑，水等溶劑，鹽酸等溶解劑，單硬脂酸鈉等乳化劑，檸檬香精等香料，苯扎氯銨等防腐劑，可可脂、聚乙二醇、微晶蠟、白蜂蠟、液體石蠟、白凡士林等基質(zhì)等，按照常規(guī)方法制成制劑。本發(fā)明制劑組合物的給藥量根據(jù)患者的年齡、體重、癥狀、給藥方法等有所不同，通常作為其有效成分的化合物(Ⅰ)或其可藥用鹽在1次0.001～300mg/kg的范圍內(nèi)，優(yōu)選在0.32～32mg/kg的范圍內(nèi)口服給藥或非口服給藥。其次，通過實驗例證明本發(fā)明的化合物或其可藥用鹽對NKT細胞的增強具有優(yōu)良作用，對于自身免疫疾病的一種——狼瘡腎炎具有優(yōu)良的治療效果。實驗例1NKT細胞的增強作用1、試驗方法對于狼瘡腎炎自然發(fā)病的W/BF1小鼠，在6～16周齡期間，使之連續(xù)每日口服試驗化合物(10mg/kg)。在16周齡時摘出脾臟，溶血除去紅細胞，測定總脾細胞中的NKT細胞比例。NKT細胞的檢測是使用抗TCR抗體和抗NK1.1抗體進行二重染色后，通過流式細胞術(shù)進行解析。2、試驗化合物6-氯-1，2-二氫-4-羥基-3-〔N-甲基-N-(4-甲氧基苯基)(硫代氨基甲酰基)〕-1-甲基-2-羰基喹啉3、試驗結(jié)果<tablesid="table1"num="001"><table>總脾細胞中NKT細胞的比例(％)對照組0.48±0.08試驗化合物給藥組1.19*±0.05</table></tables>*P＜0.01與對照組相比有顯著差異實驗例2對狼瘡腎炎的治療效果1、試驗方法對于狼瘡腎炎自然發(fā)病的雄性W/BF1小鼠，在6～16周齡期間，使之連續(xù)每日口服試驗化合物(10mg/kg)。摘出腎臟，用福爾馬林固定后，制成病理標本，進行腎炎病理組織判定。2、試驗化合物6-氯-1，2-二氫-4-羥基-3-〔N-甲基-N-(4-甲氧基苯基)(硫代氨基甲?；?〕-1-甲基-2-羰基喹啉3、試驗結(jié)果*P＜0.01與對照組相比有顯著差異實驗例3毒性試驗將試驗化合物(10mg/kg)1日1次，每周7日，連續(xù)2周投給大鼠(1組雌雄各5只)，確認在這個過程中沒有出現(xiàn)死亡例。以下，結(jié)合制備例和實施例進一步說明本發(fā)明。制備例1-(1)在0℃下，向N-甲基苯胺(27ml)和吡啶(40.3ml)的二氯甲烷(270ml)溶液中滴加乙酰氯23.0ml，在相同溫度下攪拌該混合物15分鐘。加入水(300ml)，分層，用1N鹽酸(300ml)洗滌有機層2次。再依次用碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌后，用硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑。將殘渣用異丙基醚重結(jié)晶，得到N-苯基-N-甲基乙酰胺(33.5g；收率90.2％)的無色晶體。熔點97～98℃制備例1-(2)將甲苯中的N-苯基-N-甲基乙酰胺(13.9g)與五硫化磷(4.2g)的混合物在110℃下攪拌3小時。將反應混合物注入到碳酸鈉、水和二氯甲烷的混合物中。用硅藻土過濾反應混合物，將濾液分層。用無水硫酸鎂干燥有機層，蒸發(fā)。將殘渣用硅膠(250g)柱色譜法(正己烷∶乙酸乙酯=10∶1)處理，得到N-苯基-N-甲基(硫代乙酰胺)(11.3g；收率73.2％)。熔點53～54℃制備例2將甲苯中的N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基乙酰胺(96.9g)和五硫化磷(31.3g)的混合物在110℃下攪拌3小時。將反應混合物注入到碳酸鈉、水和二氯甲烷的混合物中。用硅藻土過濾反應混合物，將濾液分層。用無水硫酸鎂干燥有機層，蒸發(fā)。將殘渣用硅膠(620g)柱色譜法(正己烷∶乙酸乙酯=10∶1)處理，得到N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基(硫代乙酰胺)(103g；)。核磁(CDCl3，δ)2.40(3H，s)，3.72(3H，s)，3.84(3H，s)，6.9-7.2(4H，m)。質(zhì)譜(m/z)196(M+1)+。制備例3在氮氣環(huán)境中，在0℃下，將丁基鋰(己烷中1.53M溶液)(11.4ml)滴加到二異丙胺(2.8ml)的四氫呋喃(50ml)溶液中。將該混合物攪拌10分鐘，冷卻到-20℃。加入N-苯基-N-甲基(硫代乙酰胺)(2.0g)，在-20℃下將其攪拌80分鐘。加入干冰(3g)，在-20℃下攪拌生成的混合物40分鐘。將異丙基醚(50ml)和水(50ml)加入到反應混合物中。在水層中混入二氯甲烷(50ml)，在5℃下用4N鹽酸(10ml)酸化。分離出有機層，干燥，蒸發(fā)。在-15℃下在甲苯(10ml)和己烷(8ml)中攪拌殘渣1小時，收集沉淀，用己烷和甲苯(1∶1)的冷混合溶液洗滌，得到3-(N-苯基-N-甲氨基)-3-硫代丙酸(1.68g；收率66.4％)的白色晶體。紅外(石蠟糊)3450，1715，1590cm-1。核磁(CDCl3，δ)3.70(2H，s)，3.77(3H，s)，7.1-7.6(5H，m)。制備例4在氮氣環(huán)境中，在0℃下，將丁基鋰(己烷中1.53M溶液)(506ml)滴加到二異丙胺(124ml)的四氫呋喃(1.01)溶液中。將該混合物攪拌10分鐘，冷卻到-20℃。然后加入N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基(硫代乙酰胺)(105g)，在-20℃下將其攪拌80分鐘。加入干冰(132g)，在-20℃下攪拌生成的混合物40分鐘。將異丙基醚(400ml)和水(11)加入到該反應混合物中。在水層中混入二氯甲烷(1.31)，在5℃下用濃鹽酸(157ml)酸化。分離出有機層，干燥，蒸發(fā)。在-15℃下在甲苯(307ml)和己烷(244ml)中攪拌殘渣1小時，收集沉淀，用己烷和甲苯(1∶1)的冷混合溶液洗滌，得到3-〔N-(4-甲氧基苯基)-N-甲氨基〕-3-硫代丙酸(81.2)的淡茶色晶體。核磁(CDCl3，δ)3.70(2H，s)，3.74(3H，s)，3.85(3H，s)，6.9-7.2(4H，m)。制備例5在氮氣環(huán)境中室溫下，在二氯甲烷(250ml)中將3-(N-苯基-N-甲氨基)-3-硫代丙酸(25.3g)、粉末分子篩(4埃，活性型，Aldrich公司生產(chǎn)，12.7g)以及吡啶(19.5ml)的混合物攪拌30分鐘，冷卻到-20℃。滴加新戊酰氯(14.9ml)，在-20℃下將混合物攪拌30分鐘。再加入5-氯-2-(甲氨基)苯甲酸乙酯(21.6g)，在-20℃下攪拌1分鐘，在0℃下攪拌1小時，在室溫下攪拌過夜。將該混合物注入到乙酸乙酯(11)和食鹽水(600ml)的混合物中，全部用硅藻土過濾。分離有機層，依次用稀鹽酸、鹽水和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥，蒸發(fā)。將殘渣用硅膠(500g)柱色譜法(己烷∶乙醚=1∶2)處理，得到5-氯-2-〔N-〔3-(N’-苯基-N’-甲氨基)-3-硫代丙酰基〕-N-甲氨基〕苯甲酸乙酯(35.2g；收率86.0％)。核磁(CDCl3，δ)1.20(3H，t，J=7Hz)，3.12(3H，s)，3.35(2H，s)，3.71(3H，s)，4.20(2H，q，J=7Hz)，7.1-7.5(7H，m)，7.87(1H，d，J=2.6Hz)。質(zhì)譜(m/z)405(M+1)+。制備例6在氮氣環(huán)境中室溫下，在二氯甲烷(234ml)中將3-〔N’-(4-甲氧基苯基)-N’-甲氨基〕-3-硫代丙酸(30.8g)、粉末分子篩(4埃，活性型，Aldrich公司生產(chǎn))以及吡啶(18.1ml)的混合物攪拌30分鐘，冷卻到-20℃。滴加新戊酰氯(13.8ml)，在-20℃下將混合物攪拌30分鐘。再加入5-氯-2-(甲氨基)苯甲酸乙酯(20g)，在-20℃下攪拌1分鐘，在0℃下攪拌1小時，在室溫下攪拌過夜。將混合物注入到乙酸乙酯(11)和鹽水(600ml)的混合物中，全部用硅藻土過濾。分離有機層，依次用稀鹽酸、鹽水和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥，蒸發(fā)。將殘渣(64g)用硅膠(480g)柱色譜法(己烷∶乙醚=1∶2)處理，得到5-氯-2-〔N-〔3-〔N’-(4-甲氧基苯基)-N’-甲氨基〕-3-硫代丙?；?N-甲氨基〕苯甲酸乙酯(33.7g)。核磁(CDCl3，δ)1.22(3H，t，J=7Hz)，3.14(3H，s)，3.36(2H，s)，3.68(3H，s)，3.83(3H，s)，4.20(2H，q，J=7Hz)，6.9-7.6(6H，m)，7.88(1H，d，J=2.5Hz)。質(zhì)譜(m/z)435(M+1)+，222。實施例1在5-氯-2-〔N-〔3-(N’-苯基-N’-甲氨基)-3-硫代丙酰基〕-N-甲氨基〕苯甲酸乙酯(35.2g)的乙醇(434ml)冰冷懸濁液中加入甲醇鈉(7.70g)。在5℃下將混合物攪拌40分鐘，注入到冰水(2.21)中。加入3N鹽酸(43ml)，收集生成的沉淀，用水洗滌，得到6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-3-〔N-苯基-N-甲基(硫代氨基甲酰基)〕-2-羰基喹啉(30.2g；收率96.9％)。mp218℃(分解)紅外(石蠟糊)3150，1625，1590，1570，1495cm-1。核磁(DMSO-d6，δ)3.42(3H，s)，3.74(3H，s)，7.1-7.7(7H，m)，7.81(1H，d，J=2Hz)，11.15(1H，s)。實施例2在5-氯-2-〔N-〔3-〔N，-(4-甲氧基苯基)-N，-甲氨基〕-3-硫代丙?；?N-甲氨基〕苯甲酸乙酯(33.7g)的乙醇(390ml)冰冷懸濁液中加入甲醇鈉(6.87g)。在5℃下將混合物攪拌40分鐘，注入到冰水(1.81)中。加入3N鹽酸(36ml)，收集生成的沉淀，用水洗滌，得到6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-3-〔N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基(硫代氨基甲?；?〕-2-羰基喹啉(32.4g)。mp195℃(分解)紅外(KBr)1629，1606，1571，1508cm-1。核磁(DMSO-d6，δ)3.43(3H，s)，3.63(3H，s)，3.69(3H，s)，6.79(2H，d，J=9Hz)，7.2-7.6(4H，m)，7.82(1H，d，J=2Hz)，11.12(1H，s)。質(zhì)譜(m/z)389(M+1)+。實施例3將下述制劑中的成分按照常規(guī)方法混合，壓縮得到片劑。片劑的配方內(nèi)容主藥試驗化合物32mg崩解劑羧甲基纖維素鈣6mg粘合劑羥丙基纖維素2mg賦形劑結(jié)晶纖維素適量潤滑劑硬脂酸鎂5mg總量90mg實施例4將下述制劑中的成分按照常規(guī)方法混合，制成軟膏劑。軟膏劑的配方內(nèi)容主藥試驗化合物5g基質(zhì)白蜂蠟5g基質(zhì)液體石蠟24g基質(zhì)白凡士林40g基質(zhì)微晶蠟2g乳化劑單硬脂酸甘油酯2g溶劑蒸餾水適量總量100g權(quán)利要求1.增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑和/或正常免疫應答激活劑，其特征在于含有以下通式所示化合物或其可藥用鹽作為有效成分〔式中，R1表示氫或鹵素，R2表示羥基，R3表示低級烷基，R4表示低級烷基，R5表示氫或低級烷氧基，和Z表示O或S〕。2.增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑，其特征在于含有權(quán)利要求1所述的化合物或其可藥用鹽作為有效成分。3.如權(quán)利要求2所述的增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑，包括化合物是R1為鹵素，R2為羥基，R3為低級烷基，R4為低級烷基，R5為氫或低級烷氧基，Z為S的化合物或其可藥用鹽。4.如權(quán)利要求2所述的增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑，包括化合物是R1為氫，R2為羥基，R3為低級烷基，R4為低級烷基，R5為氫，Z為O的化合物或其可藥用鹽。5.如權(quán)利要求3所述的增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑，其中化合物是選自(1)6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-苯基-N-甲基(硫代氨基甲?；?〕喹啉或其可藥用鹽，或(2)6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-(4-甲氧基)苯基-N-甲基(硫代氨基甲?；?〕喹啉或其可藥用鹽。6.如權(quán)利要求4所述的增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑，化合物是1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-苯基-N-甲基(氨基甲酰基)喹啉或其可藥用鹽。7.增強NKT細胞的正常免疫應答激活劑，其特征在于含有權(quán)利要求1所述的化合物或其可藥用鹽作為有效成分。8.如權(quán)利要求7所述的增強NKT細胞的正常免疫應答激活劑，包括化合物是R1為鹵素，R2為羥基，R3為低級烷基，R4為低級烷基，R5為氫或低級烷氧基，Z為S的化合物或其可藥用鹽。9.如權(quán)利要求7所述的增強NKT細胞的正常免疫應答激活劑，包括化合物是R1為氫，R2為羥基，R3為低級烷基，R4為低級烷基，R5為氫，Z為O的化合物或其可藥用鹽。10.如權(quán)利要求8所述的增強NKT細胞的正常免疫應答激活劑，其中化合物是選自(1)6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-苯基-N-甲基(硫代氨基甲酰基)〕喹啉或其可藥用鹽，和(2)6-氯-1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基(硫代氨基甲?；?〕喹啉或其可藥用鹽。11.如權(quán)利要求9所述的增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑，其中化合物是1，2-二氫-4-羥基-1-甲基-2-羰基-3-〔N-苯基-N-甲基(氨基甲?；?喹啉或其可藥用鹽。12.下述通式所示化合物或其鹽的制備方法，〔式中R1表示氫或鹵素、R2表示羥基、R3表示低級烷基、R4表示低級烷基、R5表示氫或低級烷氧基及Z表示氧或硫，其中包括下述通式所示化合物或其鹽進行環(huán)化反應[其中R1，R3，R4，R5和Z分別表示上述定義，X’表示離去基團]。13.下述通式所示化合物或其鹽?！彩街?，R1表示氫或鹵素，R3表示低級烷基，R4表示低級烷基，R5表示氫或低級烷氧基，X1表示離去基團，和Z表示O或S〕。14.權(quán)利要求13的化合物，其中R1為鹵素，R5為氫或低級烷氧基，Z為S。15.權(quán)利要求14的化合物，其中化合物選自(1)5-氯-2-〔N-〔3-(N-苯基-N-甲氨基)-3-硫代丙?；?N-甲氨基〕苯甲酸乙酯(2)5-氯-2-〔N-〔3-〔N-(4-甲氧基苯基)-N-甲氨基〕-3-硫代丙酰基〕-N-甲氨基〕苯甲酸乙酯。16.下述通式所示化合物或其鹽的制備方法，其中R1表示氫或鹵素R3表示低級烷基，R4表示低級烷基，R5表示氫或低級烷氧基，x1表示離去基團，z表示O或S其中包括下述通式所示化合物或其羧基上的反應活性衍生物或它們的鹽[其中，R4，R5和Z分別同上定義]與下述通式所示化合物或其亞氨基上的反應活性衍生物或它們的鹽反應[其中R1，R3和X1分別同上定義]。全文摘要本發(fā)明提供增強NKT細胞的自身免疫應答抑制劑和/或正常免疫應答激活劑,其特征在于含有通式(Ⅰ)所示化合物或其可藥用鹽作為有效成分,同時還提供上述化合物的新型合成方法,式中,R文檔編號C07D215/56GK1284878SQ98813633公開日2001年2月21日申請日期1998年12月11日優(yōu)先權(quán)日1997年12月15日發(fā)明者增永太郎,笹川由香,關(guān)信男,辻喜良,G·W·斯皮爾斯,東條隆申請人:藤澤藥品工業(yè)株式會社