專利名稱：吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有血管擴(kuò)張作用的新的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物。
作為與本發(fā)明有關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，各種N-氰基羧基亞氨酸酰胺化合物具有降壓和血管擴(kuò)張作用(見特開平3-163061、特開平3-218343)，不過，考慮到各種各樣的病態(tài)、生活質(zhì)量(即患者日常生活的維持)的提高、以及藥物的副作用等因素，需要有更好的新的降血壓藥和治療心絞痛的藥。
本發(fā)明旨在提供具有血管擴(kuò)張作用的新的化合物，具體地說是提供具有降壓作用或抗心絞痛作用的化合物。由于發(fā)現(xiàn)新的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物具有血管擴(kuò)張作用，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺是由下面(Ⅰ)式所表示的化合物。
式中，R1為烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基氨磺?；?、雙烷基磺酰氨基或羥基時(shí)，R2表示氫原子，R3表示硝酰基、2-氯苯基或苯基;R1為氫原子時(shí)，R2表示烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基氨磺?；?、雙烷基磺酰氨基、或羥基，R3表示硝?；?、2-氯苯基或苯基。
本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物是具有很強(qiáng)的血管擴(kuò)張作用的新的化合物，具體地說，這種化合物具有降壓作用、抗心絞痛作用。特別是5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，在測(cè)定其降壓作用隨時(shí)間變化的情況時(shí)發(fā)現(xiàn)，降壓作用非常強(qiáng)并且持久。另外還有5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，通過測(cè)定其降壓作用或冠狀血管擴(kuò)張作用隨時(shí)間變化的情況，證實(shí)該作用非常強(qiáng)而且持久。這種效果是本發(fā)明人事先未曾料到的。
吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物如上所述，本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺是由下面式(Ⅰ)所表示的化合物。
式中，R1為烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基氨磺?；?、雙烷基磺酰氨基或羥基時(shí)，R2表示氫原子，R3表示硝?；?、2-氯苯基或苯基;R1為氫原子時(shí)，R2表示烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基氨磺?；?、雙烷基磺酰氨基或羥基，R3表示硝?；?、2-氯苯基或苯基。
本發(fā)明的化合物具有堿性的氮原子，可以形成酸加成鹽。作為適合于形成酸加成鹽的酸，可以舉出例如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機(jī)酸，或者乙酸、丙酸、馬來酸、油酸、棕櫚酸、檸檬酸、琥珀酸、酒石酸、富馬酸、谷氨酸、泛酸、甲磺酸、甲苯磺酸、十二烷基磺酸等有機(jī)酸。不言而喻，以酸加成鹽作藥用時(shí)，所用的酸必須是藥學(xué)上允許的酸。
下面列舉的是由(Ⅰ)式表示的本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物的有代表性的實(shí)例。
(1)R3是2-氯苯基或苯基時(shí)的情況化合物No 化合物名稱1)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-甲基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺2)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-乙基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺3)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-羥甲基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺4)5-羧基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺5)6-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(2-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)6)5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺
(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)7)5-乙酰氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-[3-(N-乙酰氨基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺)8)5-苯甲酰氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺9)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-二甲氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺10)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺11)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-異丙基氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺12)5-正丁基氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺13)5-芐氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺14)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-甲磺酰基氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-[3-(N-甲磺?；被?吡啶]羧基亞氨酸酰胺)15)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-雙(甲磺酰基氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺
(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-[3-(N，N-雙甲磺?；被?吡啶]羧基亞氨酸酰胺)16)5-氨基-N-氰基-N′-(2-苯乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺17)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-羥基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(2)R3是硝酰基時(shí)的情況化合物No. 化合物名稱18)5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)19)N-氰基-5-乙氨基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-5-[3-(N-乙氨基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺)20)6-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝?；一?-5-(2-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)21)N-氰基-6-二乙氨基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝?；一?-5-[2-(N，N-二乙氨基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺
22)5-正丁基氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-5-[3-(N-正丁基氨基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺)23)N-氰基-N′-(2-硝?；一?-5-異丙基氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝?；一?-5-[3-N-異丙基氨基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺)24)5-乙酰氨基-N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝?；一?-5-[3-(N-乙酰氨基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺)吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物的制備方法本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物可以采用任何適宜的方法制備，例如可以按以下所述的方法制備。
A)(Ⅰ)式中R1是烷基、羥烷基、羧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基或羥基時(shí)R2是氫原子，或者R1是氫原子時(shí)R2是氨基或二烷基氨基的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物及其酸加成鹽的制備如

圖1中所示的本發(fā)明的化合物，由具有上述(Ⅰ)式中的R1和R2的氰基吡啶(Ⅱ)，經(jīng)過吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)，得到N-氰基吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅳ)，再使胺(Ⅴ)或胺(Ⅵ)發(fā)生作用，即可制得(Ⅰ)式中R1為烷基、羥烷基、羧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基或羥基時(shí)R2是氫原子，或者R1是氫原子時(shí)R2是氨基或烷基氨基的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物。但是，在制備R1是羧基的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物時(shí)，使用R1是甲酯基的氰基吡啶(Ⅱ)為原料，經(jīng)吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)和N-氰基吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅳ)，得到吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物后，脫去甲基，即可得到R1是羧基的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物。下面按工藝順序加以說明。
1)氰基吡啶(Ⅱ)前已述及，由(Ⅰ)式所表示的本發(fā)明化合物中，R1是烷基、羥烷基、羧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基或羥基時(shí)R2是氫原子，或者R1是氫原子時(shí)R2是氨基或烷基氨基的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物，可以按圖1中所示，由具有上述R1和R2的氰基吡啶(Ⅱ)合成。這些氰基吡啶可以是本身已經(jīng)公知的化合物或者可以由文獻(xiàn)中已知的方法，例如用Journal of Medicinal Chemistry 10，149-154(1967)，Journal of Heterocyclic Chemistry 11，397-399(1974)，或Heterocycles 22，117-124(1984)等中描述的方法制備。
2)吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)的制備作為由氰基吡啶(Ⅱ)制備吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)的方法之一，可以舉出利用品納(Pinner′s)法來制備吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)。即，使氯化氫在醇中對(duì)氰基吡啶(Ⅱ)發(fā)生作用，就可以得到與所用的醇對(duì)應(yīng)的醇-吡啶羧基亞氨酸酯?？梢杂糜谶@一反應(yīng)的醇例如有甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、異丁醇、叔丁醇等。這些醇可以也作為反應(yīng)溶劑使用，或者在同時(shí)存在其它溶劑的情況下只用來作為反應(yīng)試劑。作為反應(yīng)溶劑使用時(shí)，相對(duì)于1摩爾的氰基吡啶，其使用范圍一般是50-200摩爾，在其它溶劑存在的情況下使用時(shí)，相對(duì)于1摩爾的氰基吡啶，其范圍最好是1-5摩爾。可用于這一反應(yīng)的溶劑例如有非質(zhì)子傳遞溶劑，如己烷、苯、甲苯、乙醚、石油醚等。反應(yīng)溫度在-10-50℃范圍，最好是0℃-室溫。
在上述反應(yīng)條件下，這一反應(yīng)通常在1-24小時(shí)即可結(jié)束。
該反應(yīng)生成的吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)是以鹽酸鹽的形式生成的，可以原封不動(dòng)地以鹽酸鹽形式或者用堿將鹽酸中和后供下一步反應(yīng)使用。另外，這種吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)或其鹽酸鹽還可以分離提純，分離提純時(shí)可以采用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域中公知的提純方法，例如結(jié)晶法、蒸餾法、以硅膠為載體的柱色譜法等。
此外，吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)也可以采用別的方法制備。在醇中使催化劑量的金屬醇鹽作用于氰基吡啶(Ⅱ)，即可得到吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)。作為金屬醇鹽，可以舉出醇鈉、醇鉀。適用的醇及其用量與采用上述品納法制備的情況相同。另外，這一反應(yīng)也可以在其它溶劑共存下進(jìn)行，這與上面所述相同，適用的溶劑也與上面所述相同。反應(yīng)溫度在溶劑凝固點(diǎn)至30℃范圍內(nèi)，最好是0～10℃。這一反應(yīng)一般在12～24小時(shí)就可以結(jié)束。
由這一反應(yīng)制備的吡啶羧基亞氨酸酯，其分離提純方法也與上面所述相同。
3)轉(zhuǎn)變成N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅳ)將這樣所得到的吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)或其鹽酸鹽，再利用氨基氰的作用，使之轉(zhuǎn)變成N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅳ)。
氨基氰的用量，相對(duì)于1摩爾吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅲ)，至少是1摩爾以上，最好是2-3摩爾。另外，這個(gè)反應(yīng)還與反應(yīng)液的PH值有關(guān)，適宜的PH范圍是6.0-8.0，最好是6.5-7.5。為了保持上述適宜的PH范圍，該反應(yīng)要在磷酸緩沖液中進(jìn)行，在用鹽酸鹽作為基質(zhì)時(shí)，應(yīng)添加碳酸鈉等堿性物質(zhì)。另外，這一反應(yīng)也可以在其它溶劑共存的情況下進(jìn)行。適宜的溶劑例如有乙腈、二噁烷、四氫呋喃、DMF等。反應(yīng)溫度在0-50℃范圍，最好在室溫附近。
在這樣的反應(yīng)條件下，該反應(yīng)在5-30小時(shí)即可完成。
所得到的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅳ)，其分離提純可以采用與上述相同的方法，如結(jié)晶法、蒸餾法、以硅膠為載體的柱色譜法等。
4)制備N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺使這樣所得到的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酯(Ⅳ)與胺(Ⅴ)或胺(Ⅵ)反應(yīng)，可分別制得(Ⅰ-a)式或(Ⅰ-b)式所示的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺。胺的用量，相對(duì)于1摩爾(Ⅳ)式所示的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酯，至少是1摩爾以上，最好是1-2摩爾。另外，該反應(yīng)一般可在溶劑中進(jìn)行，適用的溶劑例如有甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二噁烷、四氫呋喃等有機(jī)溶劑，或者水。反應(yīng)溫度在0℃-溶劑沸點(diǎn)范圍內(nèi)，最好在室溫附近。在上述反應(yīng)條件下，通常這一反應(yīng)在2-24小時(shí)即可結(jié)束。
由上述反應(yīng)得到的反應(yīng)混合物分離提純(Ⅰ-a)和(Ⅰ-b)所示的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺時(shí)使用的方法，與上面所述(Ⅲ)式所示吡啶羧基亞氨酸酯的分離提純方法相同。
所制得的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺(Ⅰ-a)和(Ⅰ-b))，通過使酸作用可以變成酸加成鹽。適用的酸與前述相同。
B)(Ⅰ)式中R1是酰氨基、烷基氨磺?；螂p烷基磺酰氨基的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物及其酸加成鹽的制備如圖2所示，以由上述方法制得的、(Ⅰ)式中R1是氨基的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺(Ⅰ-C)為原料，分別使與其吡啶鍵合的氨基酰化、烷基磺酰化、或雙烷基磺酰化，即可制成本發(fā)明化合物中(Ⅰ)式的R1是酰氨基、烷基氨磺?；螂p烷基磺酰氨基的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺。下面更具體地說明其制備方法。
使化合物(Ⅰ-C)的氨基進(jìn)行N-?；騈-烷基磺?；?，可以制得由(Ⅰ-d)式所表示的標(biāo)題化合物。N-酰化或N-磺?；姆椒梢圆捎霉母鞣N生成方法，例如可以通過以下所述的方法N-?；騈-烷基磺?；?。
使化合物(Ⅰ-C)的氨基與?；瘎┗蚧酋；瘎┤珲；u、酸酐、活性酯等反應(yīng)，或者加入縮合劑如1，3-二氯己基碳化二亞胺(DCC)、1-乙基-3-(3′-二乙氨基丙基)碳化二亞胺(WSCI)等，使化合物(Ⅰ-C)的氨基與羧酸反應(yīng)，可以得到化合物(Ⅰ-d)。使用?；瘎r(shí)，相對(duì)于1摩爾的原料(Ⅰ-C)，?；瘎┑挠昧恐辽偈?摩爾以上，最好是1-2摩爾。該反應(yīng)通常在溶劑中進(jìn)行，適用的溶劑例如有吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氫呋喃等有機(jī)溶劑。反應(yīng)可以在有吡啶、三乙胺等有機(jī)堿、碳酸鉀、碳酸氫鈉等無機(jī)堿的情況下進(jìn)行。反應(yīng)溫度在0℃至溶劑沸點(diǎn)的范圍內(nèi)，最好是在室溫附近。在使用縮合劑的場(chǎng)合，相對(duì)于1摩爾原料(Ⅰ-C)，羧酸及縮合劑的用量分別在1摩爾以上為宜，最好是用等摩爾量進(jìn)行反應(yīng)。在這一反應(yīng)中，使用N-羥基琥珀酰亞胺或N-羥基苯并三唑等添加劑可使反應(yīng)加速進(jìn)行并可提高收率。這一反應(yīng)通常在溶劑中進(jìn)行，適用的溶劑例如有N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、四氫呋喃等有機(jī)溶劑，在使用WSCI的情況下，可以在水溶液中進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)溫度在0℃至溶劑沸點(diǎn)的范圍內(nèi)，最好是在室溫附近。
在上述的兩個(gè)反應(yīng)條件下，這些反應(yīng)通常在2-24小時(shí)即可結(jié)束。
由上述反應(yīng)得到的反應(yīng)混合物分離提純(Ⅰ-d)式所示的吡啶羧基亞氨酸酰胺的方法，與上述(Ⅲ)式所示吡啶羧基亞氨酸酯的分離提純方法相同。
這樣所得到的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺(Ⅰ-d)，通過酸的作用可以轉(zhuǎn)變成酸加成鹽。適用的酸與上面所述的相同。
吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物的用途(1)當(dāng)(Ⅰ)式中的R3是2-氯苯基或苯基的情況前已述及，本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物具有降壓作用，因此，本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物適合作為降壓藥。
將本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物作為降壓劑給藥時(shí)，可以經(jīng)口或不經(jīng)口給藥(肌肉內(nèi)、皮下、靜脈內(nèi)、經(jīng)皮膚)，或者以含片、栓劑等形式給藥。
本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物的用藥量及給藥方法，依患者的狀況、性別、感受性、給藥時(shí)間、并用的藥劑、患者或其疾病的程度等而有所不同，在一定的條件下，適宜的用藥量及給藥次數(shù)必須根據(jù)上述原則由專門醫(yī)生經(jīng)過試驗(yàn)來確定，通常，成人每人的用藥量約為0.1-200mg，優(yōu)選的是0.3-100mg，最好是0.5-50mg。
將本發(fā)明的化合物作為藥劑經(jīng)口給藥時(shí)，可以按片劑、粒劑、散劑、膠囊的形式給藥，在非經(jīng)口給藥時(shí)，可以按針劑、懸浮劑的形式給藥。在制造這些制劑時(shí)，可以添加賦形劑、粘結(jié)劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、穩(wěn)定劑等。
賦形劑例如有乳糖、淀粉、結(jié)晶纖維素、甘露糖醇、麥芽糖、磷酸氫鈣、輕質(zhì)硅酸酐、碳酸鈣等;粘結(jié)劑例如有淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素、阿拉伯樹膠;崩解劑例如有淀粉、羧甲基纖維素等;潤(rùn)滑劑例如有硬脂酸鎂、滑石、硬化油等;穩(wěn)定劑例如有乳糖、甘露糖醇、麥芽糖、聚山梨酸酯類、聚環(huán)氧乙烷硬化蓖麻油類。
可以用這些成分制成片劑、粒劑、膠囊、針劑等劑型。
(2)當(dāng)(Ⅰ)式中的R3是硝?；那闆r如上所述，本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物具有血管擴(kuò)張作用，具體地說具有降壓作用或抗心絞痛作用，因此本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物可用作降壓藥或治療心絞痛的藥。
將本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物作為降壓藥或治心絞痛藥給藥時(shí)，可以經(jīng)口或不經(jīng)口給藥(肌肉內(nèi)、皮、靜脈內(nèi)、經(jīng)皮)，或者以含片、栓劑形式給藥。
本發(fā)明的吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物的用藥量及給藥方法，依患者狀況、性別、感受性、用藥時(shí)間、并用藥劑、患者或其疾病的程度而有所不同，在一定的條件下，適宜的用藥量和給藥次數(shù)必須按上述方針由專門醫(yī)生經(jīng)試驗(yàn)決定，通常，成人每人的用藥量約為0.1-200mg，優(yōu)選的是0.5-100mg，最好是0.5-50mg。
將本發(fā)明的化合物作為醫(yī)藥經(jīng)口給藥時(shí)，可以按片劑、粒劑、散劑、膠囊的形式給藥，在非經(jīng)口給藥時(shí)，可以按針劑、懸浮劑的形式給藥。在制造這些制劑時(shí)，可以添加賦形劑、粘結(jié)劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、穩(wěn)定劑等。
賦形劑例如有乳糖、淀粉、結(jié)晶纖維素、甘露糖醇、麥芽糖、磷酸氫鈣、輕質(zhì)硅酸酐、碳酸鈣等;粘結(jié)劑例如有淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素、阿拉伯樹膠等;崩解劑例如有淀粉、羧甲基纖維素等;潤(rùn)滑劑例如有硬脂酸鎂、滑石、硬化油等;穩(wěn)定劑例如有乳糖、甘露糖醇、麥芽糖、聚山梨酸酯類、聚環(huán)氧乙烷硬化蓖麻油類。
用這些成分可以制成片劑、粒劑、膠囊、針劑等劑型。
實(shí)驗(yàn)例下面的藥理試驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)例旨在更詳細(xì)地說明本發(fā)明，而不是為了限定本發(fā)明。
(1)當(dāng)(Ⅰ)式中的R3是2-氯苯基或苯基的情況藥理試驗(yàn)1 對(duì)高血壓自然發(fā)癥大鼠的降血壓作用(靜脈內(nèi)給藥)用雄性的高血壓自然發(fā)癥大鼠(SHR)觀察本發(fā)明化合物的降血壓作用。
用氨基甲酸乙酯-α-氯醛糖將大鼠麻醉，在其頸動(dòng)脈中插入插管，通過壓力傳感器測(cè)定其平均血壓。由插入大腿靜脈的插管將試驗(yàn)化合物對(duì)每只大鼠累積給藥30分鐘。以給藥前的血壓為100%，求出血壓的改變(其降低率)，由用藥量-降壓作用曲線計(jì)算出ED20(使血壓下降20%的用藥量)。
結(jié)果本發(fā)明化合物中有代表性的化合物的ED20值示于表1中。
表1化合物No. ED20值(mg/Kg靜脈注射)1 17.12 7.03 8.75 33.36 4.67 12.310 7.916 28.0藥理試驗(yàn)2 5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)(化合物6)對(duì)小獵犬的降血壓作用將本發(fā)明的5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)(化合物6)的降壓作用與被認(rèn)為是與本發(fā)明化合物最接近的公知化合物N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(特開平3-163061)進(jìn)行比較。
使用體重9.2-10.4Kg的小獵犬，按30mg/Kg的用量將戊巴比妥鈉往靜脈內(nèi)給藥，在麻醉下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將插管插入其右大腿動(dòng)脈中，測(cè)定血壓。通過插入右大腿靜脈中的插管將被實(shí)驗(yàn)物質(zhì)給藥。
結(jié)果將5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺往靜脈內(nèi)給藥，給藥量為3～30μg/Kg，觀察血壓下降隨用藥量改變的情況。降壓作用的持續(xù)時(shí)間隨用藥量增加而延長(zhǎng)，在用藥量為3、10或30μg/Kg的情況下，持續(xù)時(shí)間分別為10、45和60分鐘以上。另一方面，將N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺以10和30μg/Kg的用量給藥，證實(shí)血壓確實(shí)下降了，但無論哪一種用藥量均能在給藥10分鐘內(nèi)回復(fù)原狀(如表2所示)。
表2 將5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺按靜脈內(nèi)給藥所產(chǎn)生的降血壓效果降壓作用(%)5-氨基-N-氰基 N-氰基-N′-[2--N′-[2-(2- (2-氯苯基)乙基]-氯苯基)乙基]-3- 3-吡啶羧基亞氨酸酰胺吡啶羧基亞氨酸酰胺給藥后時(shí)間 用藥量(μg/Kg) 用藥量(μg/Kg)(分) 3 10 30 3 10 300 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.01 -3.9 -16 -29.3 0.0 -23.4 -41.72 -12.8 -22.7 -40.0 1.9 -17.7 -39.83 -10.3 -26.7 -42.7 1.9 -13.1 -33.85 -6.4 -26.7 -46.7 -4.7 -16.77.5 -3.9 -26.7 -44.0 -2.810 -3.9 -26.7 -42.7 -0.915 -20.0 -40.020 -16.0 -36.030 -13.3 -33.345 -6.7 -24.060 -16.0
藥理試驗(yàn)3 5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-氯苯基)乙基]-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)對(duì)腎性高血壓小獵犬的降壓作用按30mg/Kg的用量將戊巴比妥鈉對(duì)小獵犬(體重9.0-11.0Kg)靜脈給藥，將其麻醉，然后切開其左側(cè)腹部，從后腹膜側(cè)暴露出左腎。小心地剝離左動(dòng)脈后，吊2根絲線，與18G的注射針(外徑1.2mm)一起以5mm間隔使2處狹窄。由大腿動(dòng)脈插入聚乙烯管(IMG、PE-100)用于測(cè)定血壓，管的另一端通過皮下伸出到頸背部。用含有肝素500U/ml的生理食鹽水灌滿該聚乙烯管，在不測(cè)血壓時(shí)用金屬塞子塞住。為防止感染，手術(shù)后3天內(nèi)將抗生素(青霉素和鏈霉素，明治制藥公司產(chǎn)品)按肌肉內(nèi)給藥。
手術(shù)后經(jīng)過1個(gè)月，將平均血壓超過120mmHg的動(dòng)物作為二腎性高血壓犬供實(shí)驗(yàn)使用。
將5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺填充到3號(hào)膠囊中，用100目的乳糖填充空隙，然后經(jīng)口給藥。給藥后24小時(shí)內(nèi)測(cè)定血壓。測(cè)定是在無麻醉、吊鏈懸垂下進(jìn)行。將測(cè)定血壓用的管子接到壓力傳感器(日本光電公司生產(chǎn)，TP-400T)上，測(cè)量血壓，記錄在多種描記器上。
結(jié)果將本發(fā)明的5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺以0.25mg/Kg和0.5mg/Kg的用量經(jīng)口給藥，觀察持續(xù)的血壓下降情況(見表3)。
表3 5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)對(duì)腎性高血壓小獵犬的降血壓作用平均血壓(mmHg)用藥量(mg/Kg,經(jīng)口給藥)給藥后時(shí)間(小時(shí)) 0.25 0.500 122.4±4.4 126.6±0.51 100.9±7.4 68.1±7.42 85.7±0.3 84.8±6.14 102.8±3.9 99.7±12.36 110.1±2.6 106.2±9.58 112.6±3.4 114.4±7.324 118.8±4.8 111.8±3.9藥理試驗(yàn)4 對(duì)于SHR的隨時(shí)間變化的降壓作用調(diào)查5-氨基-N-氰基-N′-(2-苯乙基)-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.16)的降壓作用隨時(shí)間變化的情況。
(1)試驗(yàn)方法對(duì)未麻醉的雄性高血壓自然發(fā)癥大鼠(SHR)觀測(cè)本發(fā)明化合物的降血壓作用。用tail cuff法非觀血地測(cè)定收縮期血壓(SBP)。
將化合物(16)溶解于聚乙二醇200與生理食鹽水的等量混合液中。使用經(jīng)口的探頭，強(qiáng)制經(jīng)口給藥。給藥前及給藥后的1、2、4、6、8、12、24小時(shí)分別測(cè)定SBP。以給藥前的數(shù)據(jù)為100%，所得結(jié)果以其變化率(%)表示。
(2)結(jié)果按3.0mg/Kg的用量將化合物(16)給藥，觀測(cè)血壓降低情況，其持續(xù)時(shí)間為12小時(shí)以上(見表4)。
表4 給與5-氨基-N-氰基-N′-(2-苯乙基)-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.16)時(shí)產(chǎn)生的血壓降低作用(SHR)(以相對(duì)于給藥前的數(shù)值變化率表示)給藥后的時(shí)間(小時(shí))化合物No. 1 2 4 6 8 12 24(16) -45.8 -23.9 -42.3 -27.9 -22.8 -15.1 -8.2藥理試驗(yàn)5 急性毒性使用SD系雄鼠(5周齡)來研究當(dāng)向其經(jīng)口給與本發(fā)明的5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.6)時(shí)所引起的急性毒性。結(jié)果表明，在給藥量為50mg/Kg的一組鼠中沒有發(fā)現(xiàn)死亡。LD50在50mg/Kg以上。
實(shí)施例13-氰基-5-甲基吡啶的制備3-氰基5-甲基吡啶是一種公知的化合物，例如，它可以按歐洲專利申請(qǐng)公開公報(bào)253360號(hào)(1988年)記載的方法，Europian Journal of Biochemistry，118卷，第3期，479-486頁(1981年)記載的方法，或者Chemical and Pharmaceutical Bulletin，22卷，第10期，2402-2406頁(1974年)記載的方法等來制備。
N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-甲基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將3-氰基-5-甲基吡啶(2g，16.9mmol)溶解于1-丙醇(100ml)中，然后加入甲醇鈉(46mg，0.85mmol)，于0℃攪拌20小時(shí)。反應(yīng)后，向反應(yīng)液中加入乙酸(56mg，0.93mmol)，以中和反應(yīng)液，然后減壓濃縮。濃縮后，向殘?jiān)屑尤胍颐?50ml)，濾去不溶的乙酸鈉，將濾液減壓濃縮，獲得5-甲基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯的粗提純物。
接著往該5-甲基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯中加入氨基氰(1.42g，33.8mmol)、Na2HPO4(2.40g，16.9mmol)和NaH2PO4·2H2O(10.56g，67.7mmol)的水溶液(100ml)并在室溫下攪拌5小時(shí)，用氯仿(100ml×3)萃取，氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得N-氰基-5-甲基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯的粗提純物(2.54g)。
IR(neat)cm-12200，1610，1320，730然后，將所獲的N-氰基-5-甲基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(0.77g，3.8mmol)溶解于甲醇(5ml)中，然后加入2-(2-氯苯基)乙胺(0.59g，3.8mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。將反應(yīng)液減壓濃縮后，用硅膠柱色譜法(ヮコ-凝膠(WaKogel)C-200，30g，用氯仿∶甲醇＝100∶1洗脫)提純，再由甲醇/乙醚中結(jié)晶出，獲得無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(0.62g，2.1mmol)。(收率55%)。
IR(KBr)cm-12160，1580，1540，1440，1210，740，720.
1H-NMR(100MHz，CDCl3)δ(ppm)8.98(1H，d.J＝2.7Hz，H-6)，8.67(1H，d，J＝1.8Hz，H-2)，8.27(1H，m，H-4)，7.4-7.2(4H，C6H4Cl)，3.82(2H，dd，J＝6.7，12.8Hz，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.12(2H，t，J＝6.7Hz，NHCH2CH2C6H4Cl)，2.47(3H，s，Pyridine-CH3).
實(shí)施例23-氰基-5-乙基吡啶的制備將5-溴-3-氰基吡啶(6.5g)溶解于三乙胺(15ml)中，然后加入雙(三苯膦)氯化鈀[(Ph3P)2PdCl2](600mg)、碘化銅(CuI)(350mg)和三甲基甲硅烷基乙炔(TMS-CCH)(7.5ml)，然后在密封容器中于100℃攪拌60分鐘。待反應(yīng)冷卻后，向其中加水(50ml)，用乙醚(50ml×3)萃取。乙醚層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得濃縮殘?jiān)?6.87g)。然后將該濃縮殘?jiān)?4g)溶解于四氫呋喃(30ml)中，在5℃下向其中加入氟化四丁銨(Bu4NF)的1N四氫呋喃溶液(20ml)，一邊使其回復(fù)到室溫，一邊攪拌10分鐘。向反應(yīng)液中加入1N氫氧化鈉水溶液(50ml)，用乙醚(50ml×3)萃取。乙醚層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，再將其用硅膠柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，40g，用乙醚∶己烷＝1∶1洗脫)提純，獲得淡黃色的固體物3-氰基-5-乙炔基吡啶(1.84g)。(收率70%)將所獲的3-氰基-5-乙炔基吡啶(1g)溶解于四氫呋喃(30ml)中，向其中加入10%披鈀木炭(100mg)作為催化劑，在氫氣流中進(jìn)行催化還原，在濾去催化劑后，減壓濃縮濾液，獲得3-氰基-5-乙基吡啶(0.87g)。(收率84%)1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.58(1H，H-2)，8.39(1H，H-6)，7.77(1H，H-4)，2.72(2H，q，J＝7.5Hz，吡啶-CH2CH3)，1.26(3H，t，J＝7.5Hz，吡啶-CH2CH3).
N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-乙基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將3-氰基-5-乙基吡啶(2.07g，15.7mmol)溶解于1-丙醇(80ml)中，向其中吹入氯化氫氣體30分鐘，然后用密封塞密封，在室溫下攪拌30小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，用飽和碳酸鈉水溶液中和濃縮殘?jiān)?，用氯?100ml×3)萃取。氯仿層用飽和食鹽水洗凈后，用無水硫酸鈉脫水，減壓濃縮后，獲得5-乙基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(2.94g)的粗提純產(chǎn)物。
然后，將該5-乙基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯溶解于乙腈(5ml)中，向其中加入氨基氰(1.13g，26.9mmol)、Na2HPO4(1.29g，9.1mmol)和NaH2PO4·2H2O(8.45g，54.2mmol)的水溶液(30ml)并在室溫下攪拌19小時(shí)。反應(yīng)后，反應(yīng)液用氯仿(50ml×2)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，然后用硅膠柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，50g，己烷∶乙酸乙酯＝5∶1洗脫)提純，以收率44%獲得N-氰基-5-乙基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(1.51g，7.0mmol)。
接著將N-氰基-5-乙基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(276mg，1.27mmol)溶解于甲醇(2ml)中，向其中加入2-(2-氯苯基)乙胺(238mg，1.53mmol)并在室溫下攪拌1小時(shí)15分鐘。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，使所獲濃縮殘?jiān)杉状?乙醚中結(jié)晶出，以收率55%獲得無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(217g，0.69mmol)。
熔點(diǎn)118℃IR(KBr)cm-13230，2290，1580.
FD-MS m/z 312(M.C17H17N4Cl)1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)8.51(1H，s，H-2)，8.43(1H，s，H-6)，7.77(1H，s，H-4)，7.4-7.2(4H，C6H4Cl)，6.56(1H，brs，NH)，3.81(2H，dd，J＝6.7，12.8Hz，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.15(2H，t，J＝6.7Hz，NHCH2CH2C6H4Cl)，2.70(2H，q，J＝7.6Hz，吡啶-CH2CH3)，1.26(3H，t，J＝7.6Hz，吡啶-CH2CH3).
實(shí)施例33-氰基-5-羥甲基吡啶的制備3-氰基-5-羥甲基吡啶是公知的化合物，例如，可以按照美國(guó)專利US5002949說明書中記載的方法來制備。
N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-羥甲基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將3-氰基-5-羥甲基吡啶(0.79g，5.9mmol)溶解于1-丙醇(30ml)中，在冰冷下吹入氯化氫氣體30分鐘，然后用密封塞密封，在室溫下攪拌20小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，用飽和碳酸鈉水溶液中和后，用氯仿(30ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。將獲得的濃縮殘?jiān)苡谝译?20ml)中，向其中加入氨基氰(0.50g，11.9mmol)、Na2HPO4(0.84g，5.9mmol)和NaH2PO4·2H2O(3.7g，23.7mmol)的水溶液(30ml)，在室溫下攪拌10小時(shí)。反應(yīng)后，反應(yīng)液用氯仿(100ml×3)萃取，氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得N-氰基-5-羥甲基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯的粗提純物。
然后，將該粗提純物溶解于甲醇(10ml)中，向其中加入2-(氯苯基)乙胺(0.5g，3.2mmol)，在室溫下攪拌3小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z薄層色譜法(メルク社，No.5744，用氯仿∶甲醇＝10∶1展開)提純，再由甲醇/乙醚中結(jié)晶出，獲得無色粉末狀的標(biāo)題化合物(0.12g，0.38mmol)。(根據(jù)3-氰基-5-羥甲基吡啶計(jì)的收率是6%)IR(KBr)cm-13350，2200，1580.
FD-MS m/z 314(M，C16H15N4OCl).
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.72(1H，brs，H-6)，8.68(1H，brs，H-2)，7.99(1H，m，H-4)，7.4-7.0(4H，C6H4Cl)，6.82(1H，brs，NH)，4.78(2H，CH2OH)，3.82(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.12(2H，t，NHCH2CH2C6H4Cl).
實(shí)施例43-甲酯基-5-氨基吡啶的制備將3-氰基-5-乙基吡啶(1.28g)(參照實(shí)施例2)溶解于丙酮(20ml)中，向其中慢慢地滴入高錳酸鉀(350mg)水溶液(40ml)。滴加完畢后，將反應(yīng)液加熱至100℃，然后過濾。減壓濃縮濾液，將所獲得的濃縮殘?jiān)芙庥贒MF(20ml)中，向其中加入碳酸鉀(1.6g)和硫酸二甲酯(1ml)，在室溫下攪拌10分鐘。向反應(yīng)液中加水(10ml)，然后用乙醚(30ml×3)萃取。乙醚層用無水硫酸鈉脫水后再減壓濃縮，用硅膠柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，10g，用己烷∶乙醚＝1∶1洗脫)提純，獲得無色固體狀的3-甲酯基-5-氰基吡啶(670mg，收率41%)。
IR(KBr)cm-12210，1730。
5-羧基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將3-甲酯基-5-氰基吡啶(1.2g，7.4mmol)溶解于1-丙醇(40ml)中，在冰冷下向其中吹入氯化氫氣體20分鐘，將反應(yīng)容器密封并在0℃下攪拌22小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，所獲的濃縮殘?jiān)蔑柡吞妓徕c水溶液中和，用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用飽和食鹽水洗凈后，用無水硫酸鈉脫水并減壓濃縮。將所獲的濃縮物溶解于乙腈(3ml)中，向其中加入氨基氰(682mg，16.2mmol)、Na2HPO4(1.15g，8.1mmol)和NaH2PO4·H2O(5.07g，32.5mmol)的水溶液(16.5ml)，在室溫下攪拌18小時(shí)再用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后再減壓濃縮。所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，40g，己烷∶乙酸乙酯＝3∶1洗脫)提純，獲得N-氰基-5-(3-甲酯基吡啶)羧基亞氨酸丙酯(1.39g，0.56mmol)。(收率76%)。
IR(neat)cm-12960，2180，1730，1610，1280.
FD-MS m/z 247(M.C12H13N3O3).
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)9.41(1H，d，J＝1.8Hz，H-6)，9.39(1H，d，J＝1.8Hz，H-2)，8.94(1H，t，J＝1.8Hz，H-4)，4.48(2H，t，J＝6.4Hz，OCH2CH2CH3)，4.01(3H，s，COOCH3)，1.91(2H，m，OCH2CH2CH3)，1.08(3H，t，J＝7.6Hz，OCH2CH2CH3).
將N-氰基-5-(3-甲酯基吡啶)羧基亞氨酸丙酯(448mg，1.81mmol)溶解于甲醇(10ml)中，向其中加入2-(2-氯苯基)乙胺(340mg，2.19mmol)，在室溫下攪拌1小時(shí)45分鐘。反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)液中加入乙醚(30ml)，濾取析出的白色沉淀。接著將該白色沉淀溶解于甲醇(30ml)中，向其中加入40%的氫氧化鈉水溶液(2ml)，在室溫下攪拌16小時(shí)，反應(yīng)液用酸性離子交換樹脂Dowex 50W×8(H+)中和后，濾出樹脂，減壓濃縮濾液，得到無色粉末狀的標(biāo)題化合物(509mg，收率86%)。
IR(KBr)cm-13220，2160，1590，1435，1380，750.
1H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)9.62(1H，m，NH)，9.16(1H，d，J＝1.76Hz，H-2)，8.75(1H，d，J＝2.19Hz，H-6)，7.40(1H，dd，J＝1.76，2.19Hz，H-4)，7.2-7.2(4H，C6H4Cl)，3.70(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.07(2H，t，J＝6.82Hz，NHCH2CH2C6H4Cl).
實(shí)施例56-氨基-3-氰基吡啶的制備6-氨基-5-氰基吡啶是公知的化合物，例如，可以按照Heterocycles 22卷，第1期，117-124頁，(1984)和Journal of Heterocyclic Chemistry 11卷，第3期，397-399頁，(1974年)中記載的方法來制備。
6-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(2-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)的合成將6-氨基-3-氰基吡啶(1.0g，8.4mmol)溶解于1-丙醇(50ml)中，于0-10℃下向其中吹入氯化氫氣體30分鐘，然后用密封塞密封并在0℃下攪拌21小時(shí)。反應(yīng)后，減壓蒸去溶劑，向濃縮物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)，使其變成堿性，然后用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得6-氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯的粗提純產(chǎn)物(1.56g)。
然后將該粗提純產(chǎn)物溶解于乙腈(6ml)和DMF(2ml)中，向其中加入溶解于水(20ml)中的NaH2PO4·2H2O(5.24g，33.6mmol)、Na2HPO4(1.19g，8.38mmol)和氨基氰(706mg，16.8mmol)，在室溫下攪拌18小時(shí)。反應(yīng)后，過濾析出的無色粉末，水洗后，獲得N-氰基-6-氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(1.45g，收率85%)。
熔點(diǎn)150℃IR(KBr)cm-13380，2180，1650，1580，1295.
1H-NMR(500MHz，DMSO)δ(ppm)8.74(1H，d，J＝2.4Hz，H-6)，8.04(1H，dd，J＝2.4，9.2Hz，H-4)，7.20(1H，br s，NH2)，6.53(1H，d，J＝9.2Hz，H-3)，4.27(2H，t，J＝8.7Hz，OCH2CH2CH3)，1.75(2H，m，OCH2CH2CH3)，0.97(3H，t，J＝7.3Hz，OCH2CH2CH3).
將N-氰基-6-氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(200mg，0.98mmol)和2-(2-氯苯基)乙胺(170mg，1.09mmol)溶解于甲醇(10ml)和DMF(1.5ml)中，在室溫下攪拌2.5小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液后，用硅膠柱色譜法(Wakogel C-200，25g)，使用氯仿∶甲醇(30∶1)洗脫，得到無色粉末狀的標(biāo)題化合物(250mg，收率85%)。
熔點(diǎn)222℃IR(KBr)cm-13220，2160，1570，740.
1H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)8.91(1H，br s，NH)，8.13(1H，d，J＝2.5Hz，H-6)，7.60(1H，dd，J＝2.5，8.6Hz，H-4)，7.45-7.2(4H，C6H4Cl)，6.60(2H，brs，NH2)，6.48(1H，d，J＝8.6Hz，H-3)，3.56(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.02(2H，t，J＝7.0Hz，NHCH2CH2C6H4Cl).
實(shí)施例65-氨基-3-氰基吡啶的制備5-氨基-3-氰基吡啶是公知的化合物，例如，可按照J(rèn)ournalof Medicinal Chemistry，10卷，2期，149-154頁(1967年)記載的方法來制備。
5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)的合成將5-氨基-3-氰基吡啶(380ml，3.19mmol)溶解于1-丙醇(15ml)中，在0～5℃下向其中吹入氯化氫氣體15分鐘，然后用密封塞密封，在室溫下攪拌22小時(shí)。反應(yīng)后減壓蒸去溶劑，向濃縮物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)，使其變成堿性后，用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，然后用硅膠柱色譜法(Wakogel C-200，25g)，使用氯仿∶甲醇(8∶1)洗脫，得到無色油狀的5-氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(526mg，收率92%)。
IR(neat)cm-13330，3200，1630，1590，1080.
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.37(1H，br s，H-2)，8.14(1H，d，J＝2.6Hz，H-6)，7.31(1H，m，H-4)，4.18(2H，t，J＝6.6Hz，OCH2CH2CH3)，1.77(2H，m，OCH2CH2CH3)，1.03(3H，t，J＝7.0Hz，OCH2CH2CH3).
接著將5-氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(110mg，0.6mmol)溶解于乙腈(1ml)中，向其中加入溶解于水(2ml)中的NaH2PO4·2H2O(375mg，2.4mmol)、Na2HPO4(85mg，0.6mmol)、NH2CN(50mg，1.2mmol)，在室溫下攪拌19小時(shí)。反應(yīng)后，反應(yīng)液用氯仿(20ml×3)萃取，氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，得到粗提純的油狀5-氨基-N-氰基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(100mg，收率82%)。
IR(neat)cm-13350，2220，1610，1320，760.
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.51(1H，d，J＝2.0Hz，H-2)，8.27(1H，d，J＝2.8Hz，H-6)，7.72(1H，dd，J＝2.0，2.6Hz，H-4)，4.39(2H，t，J＝6.6Hz，OCH2CH2CH3)，4.12(2H，br s，NH2)，1.83(2H，m，OCH2CH2CH3)，1.05(3H，t，J＝7.7Hz，OCH2CH2CH3).
將5-氨基-N-氰基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(100mg，0.49mmol)溶解于甲醇(1ml)中，向其中加入2-(2-氯苯基)乙胺(155mg，1.0mmol)，在室溫下攪拌20小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，將所獲殘?jiān)梢颐?乙酸乙酯中結(jié)晶出，得到無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(100mg，0.33mmol，收率68%)。熔點(diǎn)184℃IR(neat)cm-13200，2170，1570.
FD-MS m/z 299(M，C15H14N5Cl).
1H-NMR(90MHz，CD3OD)δ(ppm)8.08(1H，d，J＝2.6Hz，H-6)，7.83(1H，br s，H-2)，7.5-7.2(5H，H-4，C6H4Cl)，3.73(2H，t，J＝7.3Hz，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.13(2H，t，J＝7.3Hz，NHCH2CH2C6H4Cl).
實(shí)施例75-乙酰胺基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-[3-(N-乙酰胺基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺的合成將5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(100mg，0.33mmol)溶解于吡啶(1ml)中，向其中加入無水乙酸(20mg，0.34mmol)，在室溫下攪拌5.5小時(shí)。反應(yīng)后，將反應(yīng)液倒入冰水中，過濾所生成的沉淀，用冷水洗凈。將該沉淀由甲醇/乙醚中結(jié)晶出，得到無色粉末狀的標(biāo)題化合物(86mg，收率75%)。
熔點(diǎn)230℃IR(KBr)cm-13230，2160，1700，1580，720.
FD-MS m/z 341(M，C17H16N5OCl).
1H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)10.43(1H，br s，NHCOCH3)，9.41(1H，br s，NH)，8.87(1H，d，J＝2.4Hz，H-6)，8.33(1H，d，J＝2.0Hz，H-2)，8.24(1H，dd，J＝2.0，2.4Hz，H-4)，7.5-7.3(4H，C6H4Cl)，3.63(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.08(2H，t，J＝3.2Hz，NHCH2CH2C6H4Cl)，2.12(3H，s，NHCOCH3).
實(shí)施例85-苯甲酰胺基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺將5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(100mg，0.33mmol)溶解于DMF(3ml)中，向其中加入三乙胺(101mg，1mmol)和芐基氯(94mg，0.67mmol)，在室溫下攪拌3小時(shí)。反應(yīng)后，向反應(yīng)液中加入冰和飽和碳酸鈉水溶液進(jìn)行中和，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗凈，用無水硫酸鈉脫水，然后減壓濃縮。所得的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，30g，用氯仿∶甲醇＝200∶1洗脫)提純，以收率29%得到標(biāo)題化合物(38mg，0.09mmol)。
熔點(diǎn)220℃IR(KBr)cm-13260，2160，1655，1555，1430.
FD-MS m/z 404(M+1，C22H18N5OCl).
1H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)10.71(1H，brs，NHCOPh)，9.46(1H，brs，NHCH2CH2C6H4Cl)，9.11(1H，d，J＝2.2Hz，H-6)，8.5-8.3(2H，H-2，H-4)，8.1-7.3(9H，Ph，C6H4Cl)，3.63(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.08(2H，t，J＝7.2Hz，NHCH2CH2C6H4Cl).
實(shí)施例93-氰基-5-二甲氨基吡啶的制備將5-氨基-3-氰基吡啶(0.50g，4.20mmol)溶解于DMF(5ml)中，在冰冷下向其中加入NaH(60%在油中)(0.37g，9.26mmol)并攪拌20分鐘。然后在冰冷下向其中滴入甲基碘(0.58ml，9.31mmol)的DMF(2ml)溶液。邊使其回復(fù)到室溫，邊攪拌2小時(shí)，向反應(yīng)液中加冰后，用乙醚(30ml×3)萃取。乙醚層用飽和食鹽水洗凈，用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。所得的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，20g，用氯仿∶甲醇＝200∶1洗脫)提純，得到3-氰基-5-二甲氨基吡啶(145mg，收率23%)。
熔點(diǎn)104℃IR(KBr)cm-12230，1595，1450，1375，1235，695.
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.28(1H，d，J＝8.1Hz，H-6)，8.18(1H，d，J＝1.5Hz，H-2)，7.09(1H，dd，J＝1.5，3.1Hz，H-4)，3.03(6H，s，N(CH3)2).
N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-二甲氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將3-氰基-5-二甲氨基吡啶(140mg，0.95mmol)溶解于1-丙醇(15ml)中，在冰冷下向其中吹入氯化氫氣體30分鐘，用密封塞密封，在室溫下攪拌20小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，濃縮殘?jiān)锰妓徕c中和后，用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。將濃縮殘?jiān)苡谝译?5ml)中，向其中加入氨基氰(80mg，1.9mmol)、Na2HPO4(135mg，0.95mmol)和NaH2PO4·2H2O(593mg，3.80mmol)的水溶液(10ml)，在室溫下攪拌10小時(shí)。反應(yīng)后，用氯仿(30ml)萃取，氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得淡黃色的漿。
接著，將此漿溶于甲醇(10ml)中，向其中加入2-(2-氯苯基)乙胺(170mg，1.09mmol)并在室溫下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，20g，用氯仿∶甲醇＝100∶1洗脫)提純，再由甲醇/乙醚中結(jié)晶出，以收率70%獲得標(biāo)題化合物(219mg，0.67mmol)。
熔點(diǎn)158℃IR(KBr)cm-13400，2160，1575，1430.
FD-MS m/z 327(M，C17H18N5Cl).
1H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)9.25(1H，brs，NHCH2CH2C6H4Cl)，8.26(1H，d，J＝2.9Hz，H-6)，7.95(1H，d，J＝1.8Hz，H-2)，7.5-7.2(4H，C6H4Cl)，7.11(1H，dd，J＝1.8，2.9Hz，H-4)，3.63(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.05(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，2.98(8H，s，N(CH3)2).
實(shí)施例103-氰基-5-乙氨基吡啶的制備將5-氨基-3-氰基吡啶(300mg，2.52mmol)溶解于甲醇(10ml)中，向其中加入乙醛(1.42ml，25，1mmol)并在室溫下攪拌10分鐘。然后向其中加入氰基氫硼化鈉(950mg，15.1mmol)，再加入乙酸將反應(yīng)液的pH值調(diào)節(jié)至6附近，然后攪拌5小時(shí)。反應(yīng)后，用碳酸鈉水溶液中和反應(yīng)液，用乙醚(30ml×3)萃取。乙醚層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，20g，用氯仿∶甲醇＝200∶1洗脫)提純，獲得3-氰基-5-乙氨基吡啶(200mg，1.36mmol，收率54%)。
熔點(diǎn)110℃IR(neat)cm-12210，1585，1450，1180，690.
1H-NMR(90 MHz，CDCl3)δ(ppm)8.2-8.1(2H，H-2，H-6)，6.99(1H，dd，J＝1.8，2.9Hz，H-4)，4.08(1H，brs，NH)，3.61(2H，m，NHCH2CH3)，1.25(6H，d，J＝6.4Hz，NHCH2CH3).
N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將3-氰基-5-乙氨基吡啶(380mg，2.59mmol)溶于1-丙醇(40ml)中，在冰冷下向其中吹入氯化氫氣體30分鐘，然后將反應(yīng)容器密封并在室溫下攪拌20小時(shí)，減壓濃縮。所獲的濃縮殘?jiān)蔑柡吞妓徕c水溶液中和后，用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得5-乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯的粗提純產(chǎn)物。然后將此粗提純產(chǎn)物溶于乙腈(5ml)中，向其中加入氨基氰(210mg，5.0mmol)、Na2HPO4(355mg，2.5mmol)和NaH2PO4·2H2O(1.56g，10mmol)的水溶液(18ml)，在室溫下攪拌一夜。反應(yīng)后，用氯仿(30ml×3)萃取，氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，30g，用己烷/乙酸乙酯洗脫)提純，獲得無色油狀的N-氰基-5-乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(322mg，1.38mmol)。(收率54%)IR(KBr)cm-12960，2200，1600，1460，1330.
1H-NMR(90 MHz，CDCl3)δ(ppm)8.41(1H，d，J＝2.0Hz，H-6)，8.18(1H，d，J＝2.9Hz，H-2)，7.61(1H，dd，J＝2.0，2.9Hz，H-4)，4.39(2H，t，J＝6.5Hz，OCH2CH2CH3)，3.95(1H，brs，NH)，3.22(2H，m，NHCH2CH3)，1.82(2H，m，OCH2CH2CH3)，1.31(3H，t，J＝7.2Hz，NHCH2CH3)，1.06(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH2CH3).
接著，將N-氰基-5-乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(98mg，0.42mmol)溶于甲醇(3ml)中，向其中加入2-(氯苯基)乙胺(79mg，0.51mmol)并攪拌1小時(shí)45分鐘。減壓濃縮反應(yīng)液，所獲的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，30g，用氯仿∶甲醇＝100∶1洗脫)提純，再由乙醚中結(jié)晶出，獲得無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(110mg，0.34mmol)。(收率80%)
熔點(diǎn)168℃IR(KBr)cm-13230，2170，1560，1445，750.
FD-MS m/z 827(M，C17H18N5Cl).
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)7.95(1H，d，J＝2.6Hz，H-6)，7.79(1H，d，J＝1.8Hz，H-2)，7.4-7.0(5H，H-4，C6H4Cl)，4.35(1H，brs，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.76(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.3-2.9(4H，NHCH2CH2C6H4Cl，NHCH2CH3)，2.88(1H，brs，NHCH2CH3)，1.26(3H，t，J＝7.1Hz，NHCH2CH3).
實(shí)施例113-氰基-5-異丙氨基吡啶的制備按照與制備3-氰基-5-乙氨基吡啶相同的方法制得3-氰基-5-異丙氨基吡啶。
熔點(diǎn)82℃IR(neat)cm-12210，1585，1450，1180，690.
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.2-8.1(2H，H-2，H-6)，6.99(1H，dd，J＝1.8，2.9Hz，H-4)，4.08(1H，brs，NH)，3.61(1H，m，NHCH(CH3)2)，1.25(6H，d，J＝6.4Hz，NHCH(CH3)2).
N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-異丙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺將3-氰基-5-異丙氨基吡啶(118mg，0.73mmol)溶解于1-丙醇(20ml)中，在冰冷下向其中吹入氯化氫氣體30分鐘，用密封塞密封，在室溫下攪拌17小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，所獲的濃縮殘?jiān)蔑柼妓徕c水溶液中和，再用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得黃色的漿。然后向此漿中加入氨基氰(61mg，1.45mmol)、Na2HPO4(104mg，0.73mmol)和NaH2PO4·2H2O(456mg，2.92mmol)的水溶液(6ml)，在室溫下攪拌22小時(shí)。反應(yīng)后，反應(yīng)液用氯仿(30ml×3)萃取，氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得黃色漿狀的N-氰基-5-異丙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(80mg，0.33mmol)。(收率44%)IR(neat)cm-12950，2180，1580，1445，1310.
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)8.38(1H，d，J＝1.8Hz，H-6)，8.16(1H，d，J＝3.1Hz，H-2)，7.58(1H，dd，J＝1.8，3.1Hz，H-4)，4.38(2H，t，J＝6.4Hz，OCH2CH2CH3)，4.09(1H，brs，NH)，3.66(1H，m，NHCH(CH3)2)，1.86(2H，m，OCH2CH2CH3)，1.26(6H，d，J＝6.1Hz，NCH(CH3)2)，1.05(3H，t，J＝7.3Hz，OCH2CH2CH3).
然后，將制得的N-氰基-5-異丙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(98mg，0.42mmol)溶于甲醇(3ml)中，向其中加入2-(2-氯苯基)乙胺(79mg，0.51mmol)，在室溫下攪拌1小時(shí)45分鐘。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，30g，用氯仿∶甲醇＝100∶1洗脫)提純，再由乙醚中結(jié)晶出，獲得無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(110mg，0.34mmol)。(收率80%)IR(KBr)cm-12960，2160，1555，1440.
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)7.98(1H，d，J＝2.6Hz，H-6)，7.78(1H，d，J＝1.8Hz，H-2)，7.5-7.2(4H，C6H4Cl)，7.12(1H，dd，J＝1.8，2.6Hz，H-4)，6.62(1H，brt，NHCH2CH2C6H4Cl)，4.11(1H，NHCH(CH3)2)，3.76(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.46(1H，m，NHCH(CH3)2)，3.14(2H，t，J＝6.6Hz，NHCH2CH2C6H4Cl)，1.24(3H，d，J＝6.4Hz，NHCH(CH3)2).
實(shí)施例125-正丁基-3-氰基吡啶的制備按照與制備3-氰基-5-乙氨基吡啶相同的方法制得5-正丁氨基-3-氰基吡啶。
熔點(diǎn)73℃IR(KBr)cm-1 3270，2240，1590，1440，690。
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.2-8.1(2H，H-2，H-6)，6.99(1H，dd，J＝2.0，2.6Hz，H-4)，3.96(1H，brs，NH)，3.13(2H，m，NHCH2CH2CH2CH3)，1.6-1.3(4H，NHCH2CH2CH2CH3)，0.98(3H，t，J＝6.4Hz，NHCH2CH2CH2CH3).
5-正丁氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將5-正丁氨基-3-氰基吡啶(255mg，1.46mmol)溶于1-丙醇(30ml)中，在冰冷下向其中吹入氯化氫氣體30分鐘，將反應(yīng)容器密封，在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，所獲得的殘?jiān)锰妓徕c水溶液中和，再用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得漿。
然后，將該漿溶于乙腈(3ml)中，向其中加入氨基氰(123mg，2.93mmol)、Na2HPO4(207mg，1.46mmol)和NaH2PO4·2H2O(911mg，5.84mmol)的水溶液(20ml)，在室溫下攪拌22小時(shí)。反應(yīng)液用氯仿(30ml×3)萃取，氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，30g，用己烷∶乙酸乙酯＝4∶1洗脫)提純，獲得黃色漿狀的5-正丁氨基-N-氰基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(252mg，0.97mmol)。
IR(neat)cm-12950，2170，1590，1460，1320.
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.40(1H，d，J＝2.0Hz，H-6)，8.19(1H，d，J＝2.9Hz，H-2)，7.57(1H，dd，J＝2.0，2.9Hz，H-4)，4.39(2H，t，J＝6.6Hz，OCH2CH2CH3)，3.16(2H，m，NHCH2CH2CH2CH3)，2.0-1.2(6H，3 x CH2)，1.1-0.8(6H，2 x CH3).
將5-正丁氨基-N-氰基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(99mg，0.38mmol)溶于甲醇(2ml)中，向其中加入2-(2-氯苯基)乙胺(71mg，0.46mmol)并攪拌2小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，30g，用氯仿∶甲醇＝200∶1洗脫)提純，再由乙醚中結(jié)晶出，獲得無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(90mg，0.25mmol)。(收率67%)熔點(diǎn)122℃IR(KBr)cm-12950，2160，1560，1460，750.
FD-MS m/z 355(M，C19H22N5Cl).
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)7.92(1H，d，J＝2.6Hz，H-6)，7.77(1H，d，J＝1.8Hz，H-2)，7.5-7.1(4H，C6H4Cl)，7.07(1H，dd，J＝1.8，2.6Hz，H-4)，4.46(1H，brt，NH)，8.75(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.2-2.8(4H，2 x CH2)，1.7-1.2(4H，2 x CH2)，0.95(3H，t，J＝6.8Hz，CH3).
實(shí)施例135-芐氨基-3-氰基吡啶的制備按照與制備3-氰基-5-乙氨基吡啶相同的方法制備5-芐氨基-3-氰基吡啶。
熔點(diǎn)131℃IR(KBr)cm-1 3220，2220，1610，1580，700.
1H-NMR(90MHz，CD3OD)δ(ppm)8.36(1H，d，J＝1.5Hz，H-2)，8.23(1H，d，J＝2.9Hz，H-6)，7.91(1H，dd，J＝1.5，2.9Hz，H-4)，7.5-7.2(5H，CH2Ph)，4.48(2H，s，CH2Ph).
5-芐氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將5-芐氨基-3-氰基吡啶(250mg，1.19mmol)溶于1-丙醇(30ml)中，在冰冷下向其中吹入氯化氫氣體30分鐘，將反應(yīng)容器密封并在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，所獲的殘?jiān)锰妓徕c水溶液中和，用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。
然后，將所獲濃縮殘?jiān)苡谝译?2ml)中，向其中加入氨基氰(100mg，2.38mmol)、Na2HPO4(170mg，1.20mmol)和NaH2PO4·2H2O(743mg，4.76mmol)的水溶液(20ml)，在室溫下攪拌24小時(shí)。反應(yīng)液用氯仿(50ml×3)萃取，氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，30g，用己烷∶乙酸乙酯＝4∶1洗脫)提純，獲得漿狀的5-芐氨基-N-氰基-5-吡啶羧基亞氨酸丙酯(206mg，0.7mmol)。
將5-芐氨基-N-氰基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(14mg，0.38mmol)溶于甲醇(2ml)中，向其中加入2-(氯苯基)乙胺(72mg，0.46mmol)，在室溫下攪拌1小時(shí)45分鐘。反應(yīng)后，反應(yīng)液減壓濃縮，所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，20g，用氯仿∶甲醇＝200∶1洗脫)提純，再由乙醚中結(jié)晶出，獲得無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(126mg，0.32mmol)。(收率85%)熔點(diǎn)146℃IR(KBr)cm-12180，1560，1445，750.
FD-MS m/z 389(M，C22H20N5Cl).
1H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)7.94(1H，d，J＝2.6Hz，H-6)，7.82(1H，d，J＝1.8Hz，H-2)，7.4-7.0(10H)，4.92(1H，brs，NH)，4.29(2H，brd，J＝5.5Hz，NHCH2Ph)，3.8-3.6(3H，NH，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.09(2H，t，J＝6.6Hz，NHCH2CH2C6H4Cl).
實(shí)施例14N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-甲磺酰氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-[3-(N-甲磺酰氨基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺)的合成將5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(110mg，0.37mmol)溶于吡啶(2ml)中，向其中加入無水甲磺酸(65mg，0.37mmol)，在室溫下攪拌5小時(shí)。反應(yīng)后，向反應(yīng)液中加冰和飽和碳酸鈉水溶液(20ml)，用乙酸乙酯(30ml×3)萃取。乙酸乙酯層用食鹽水洗凈，用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。所獲的濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，20g)，使用氯仿∶甲醇＝(50∶1)洗脫，獲得無色粉末狀的標(biāo)題化合物(45mg，收率32%)熔點(diǎn)205℃IR(KBr)cm-13400，2150，1590，1555，1150.
FD-MS m/z 378(M+1，C16H16N5O2SCl).
1H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)10.42(1H，br s，NHSO2CH3)，9.46(1H，br s，NH)，8.87(1H，d，J＝2.4Hz，H-6)，8.39(1H，d，J＝2.0Hz，H-2)，7.76(1H，dd，J＝2.0，2.4Hz，H-4)，7.5-7.8(4H，Ph)，3.66(5H，NHCH2CH2Ph，NHSO2CH3)，3.16(2H，NHCH2CH2Ph).
實(shí)施例15N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-雙(甲磺酰氨基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-[3-(N，N-雙甲磺酰氨基)吡啶]羧基亞氨酸酰胺)的合成將5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(108mg，0.36mmol)溶于乙腈(1ml)、DMF(1ml)中，向其中加入三乙胺(144mg，1.43mmol)和甲磺酰氯(88mg，0.77mmol)，在室溫下攪拌2.5小時(shí)。反應(yīng)后，向反應(yīng)液中注入冰和食鹽水，用乙酸乙酯(30ml×3)萃取。乙酸乙酯層用食鹽水洗凈，用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200，20g)，使用氯仿∶甲醇＝(100∶1)洗脫，獲得無色粉末狀的標(biāo)題化合物(89mg，收率54%)。
熔點(diǎn)210℃IR(KBr)cm-13230，2160，1580.
1H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)9.60(1H，br s，NH)，8.94(1H，d，J＝2.4Hz，H-6)，8.83(1H，d，J＝1.8Hz，H-2)，8.23(1H，dd，J＝1.8，2.4Hz，H-4)，7.4-7.2(4H，Ph)，3.83(8H，2 x NHSO2CH3，NHCH2CH2Ph)，3.08(2H，t，J＝7.8Hz，NHCH2CH2Ph).
實(shí)施例165-氨基-N-氰基-N′-(2-苯乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將5-氨基-N-氰基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(310mg，1.51mmol)溶于甲醇(5ml)中，向其中加入苯乙胺(230mg，1.90mmol)，在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)后，反應(yīng)液減壓濃縮，再由甲醇/乙醚中結(jié)晶出，獲得淡黃色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(222mg，0.84mmol)。(收率56%)熔點(diǎn)158℃IR(KBr)cm-13200，2160，1580，1550，1430.
1H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)9.21(1H，brd，NH)，8.07(1H，d，J＝2.6Hz，H-6)，7.76(1H，d，J＝2.0Hz，H-2)，7.4-7.2(5H，Ph)，7.00(1H，dd，J＝2.0，2.6Hz，H-4)，5.70(2H，brs，NH2)，3.58(2H，m，NHCH2CH2Ph)，2.88(2H，t，J＝6.9Hz，NHCH2CH2Ph).
實(shí)施例173-氰基-5-羥基吡啶的制備將按照國(guó)際專利申請(qǐng)公開WO8606628號(hào)說明書記載的方法制備的5-羥基煙酰胺(0.69g，5mmol)懸浮于吡啶(50ml)中，向其中加入無水三氟乙酸(2.52g，12mmol)，在0℃下攪拌20小時(shí)。向反應(yīng)液中加水(20ml)后，減壓濃縮，再用氯仿(50ml×3)萃取。氯仿層用水(50ml)洗凈，用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮，獲得濃縮殘?jiān)＿@種濃縮殘?jiān)霉枘z柱色譜法(ヮコ-凝膠(Wakogel)C-200 20g、用氯仿∶甲醇＝100∶1洗提)進(jìn)行提純，得到3-氰基-5-羥基吡啶(0.42g，3.5mmol)。(收率70%)IR(neat)cm-13250，2920，2180.
1H-NMR(90MHz，CDCl3-CD3OD)δ(ppm)8.86(1H，d，J＝1.9Hz，H-2)，8.40(1H，d，J＝2.5Hz，H-6)，7.42(1H，dd，J＝1.9，2.5Hz，H-4).
N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-羥基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的合成將3-氰基-5-羥基吡啶(0.42g、3.50mmol)溶解在1-丙醇(40ml)中，在冰冷卻下，吹入氯化氫氣體30分鐘，然后用塞子密封并在室溫下攪拌20小時(shí)。反應(yīng)后減壓濃縮反應(yīng)液。接著將該濃縮物溶解在乙腈(20ml)中，加入氨基氰(0.88g、20.9mmol)、Na2HPO4(1.5g、10.6mmol)和NaH2PO4·2H2O(3.27g、21.0mmol)的水溶液(30ml)，在室溫下攪拌6小時(shí)，用飽和碳酸氫鈉將反應(yīng)液調(diào)節(jié)至PH7.0后，用氯仿(50ml×3)進(jìn)行萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后進(jìn)行減壓濃縮，得到N-氰基-5-羥基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯的粗提純物(0.26g)。
接著將N-氰基-5-羥基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯的粗提純物(0.26g)溶解在甲醇(5ml)中，然后添加2-(2-氯苯基)乙胺(0.22g、1.4mmol)，在室溫下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，用氯仿(50ml×3)萃取所得的濃縮殘?jiān)?。用?100ml)洗滌氯仿層后，用無水硫酸鈉脫水，然后進(jìn)行減壓濃縮。用硅膠柱色譜法(ヮコ-凝膠C-200、30g，氯仿∶甲醇＝50∶1洗提)提純濃縮物，由二乙醚結(jié)晶化得到無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(0.16g、0.53mmol)。(按3-氰基-5-羥基吡啶，收率15%)IR(KBr)cm-13250，2200，1590.
FD-MS m/z 300(M，C15H13N4OCl).
1H-NMR(90MHz，CD3OD)δ(ppm)8.35(1H，d，J＝1.8Hz，H-6)，8.22(1H，J＝2.6Hz，H-2)，7.54(1H，dd，J＝1.8，2.6Hz，H-4)，7.4-7.1(4H，C6H4Cl)，3.70(2H，m，NHCH2CH2C6H4Cl)，3.08(2H，t，J＝7.3Hz，NHCH2CH2C6H4Cl).
實(shí)施例18(片劑/1片中)5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺) 2mg乳糖 75.5mg玉米淀粉 18mg滑石 4mg硬脂酸鈉 0.5mg計(jì) 100(mg)混合上述成份，加壓制成片劑。
實(shí)施例19(膠囊劑/1個(gè)膠囊中)5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺) 5mg乳糖 94mg硬脂酸鈉 1mg計(jì) 100(mg)混合上述成分，填充在膠囊中制成膠囊劑。
(2)式(Ⅰ)中的R3是硝酰基的場(chǎng)合藥理試驗(yàn)1 對(duì)鼠大動(dòng)脈標(biāo)本的血管的松馳作用(1)試驗(yàn)方法使用摘出的大鼠大動(dòng)脈，進(jìn)行本發(fā)明化合物的生理活性試驗(yàn)。
由放血致死的體重250-350g的Whist系雄性鼠迅速摘出胸部大動(dòng)脈，作成寬3mm的切成圓片的標(biāo)本。將標(biāo)本懸垂在通入95%O2-5%CO2的混合氣的裝滿37℃的克富布斯林-林格氏(Krebs-Ringer)溶液的器官浴中。使負(fù)荷1g靜止張力，待標(biāo)本的引力穩(wěn)定后，將器官浴內(nèi)交換成含40mM KCl的滲壓營(yíng)養(yǎng)液，使標(biāo)本的張力增加。在由KCl產(chǎn)生的張力恒定后，將試驗(yàn)化合物累積地加入器官浴中，使標(biāo)本松馳。以KCl產(chǎn)生的張力作為100%，求出作為其抑制率的松馳反應(yīng)，IC50值(使由KCl產(chǎn)生的張力為50%的濃度)由平均用量-作用曲線，按照普羅比特疲勞強(qiáng)度推算法計(jì)算出。
(2)結(jié)果在本發(fā)明化合物中，代表性的化合物的IC50值示于表1中。
表1化合物No IC50值(M)(18) 2.2×10-5(19) 1.0×10-5(20) 2.7×10-6(21) 4.6×10-6藥理試驗(yàn)2 對(duì)SHR的降低血壓作用將本發(fā)明的5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-5-(3-氨基吡啶)羧基亞氨酸酰胺)(化合物No.18)、N-氰基-5-乙氨基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(N-氰基-N′-(2-硝?；一?-5-[3-(N-乙氨基吡啶)]羧基亞氨酸酰胺)(化合物No.19)的降壓作用與認(rèn)為最接近本發(fā)明化合物的公知化合物N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的甲磺酸鹽(特開平3-163061的化合物)作為對(duì)比化合物進(jìn)行比較研究。
(1)試驗(yàn)方法在無麻醉的雄性高血壓自然發(fā)病的鼠(SHR)上觀察本發(fā)明化合物的降低血壓作用。用tail cuff法、非觀血地測(cè)量收縮期血壓(SBP)。
化合物(18)、化合物(19)溶解在聚乙二醇200和生理食鹽水的等量混合液中，對(duì)比化合物溶解在生理食鹽水中。以使用經(jīng)口給藥導(dǎo)管的強(qiáng)制給藥進(jìn)行給藥。給藥前和給藥1、2、4、6、8、12、24小時(shí)后測(cè)量SBP。以給藥前作為100%、用其變化率(%)表示結(jié)果。
(2)結(jié)果投給3.0mg/Kg的化合物(18)、化合物(19)、觀測(cè)血壓降低，其持續(xù)時(shí)間在12小時(shí)以上。另一方面，對(duì)比化合物也以3.0mg/Kg給藥，雖然觀察到血壓降低，但其持續(xù)時(shí)間約6小時(shí)。(表2中所示)
表2 由5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.18)、和N-氰基-5-乙氨基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.19)和N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的甲磺酸鹽(對(duì)比化合物)的給藥產(chǎn)生的血壓降低作用(SHR大鼠)(該值以相對(duì)于給藥前值的變化率表示)給藥后時(shí)間(小時(shí))化合物No 1 2 4 6 8 12 14對(duì)比化合物 -55.9 -41.5 -10.6 -6.8(18) -56.9 -49.2 -42.6 -17.9 -20.5 -22.2 -3.7(19) -60.2 -47.2 -24.3 -23.9 -25.9 -27.7 -9.8藥理試驗(yàn)3 5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺)(化合物No.18)對(duì)小獵犬冠狀血管的擴(kuò)張作用將本發(fā)明的5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.18)的冠狀血管擴(kuò)張作用與被認(rèn)為與本發(fā)明的化合物最近似的公知化合物N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的甲磺酸鹽(特開平3-163061的化合物)作為對(duì)比化合物進(jìn)行比較研究。
(1)試驗(yàn)方法以30mg/Kg戊巴比妥鈉靜脈內(nèi)給藥使犬(體重8.3Kg)麻醉后，插入氣管導(dǎo)管進(jìn)行人工呼吸。由大腿靜脈投給藥物，在左冠狀動(dòng)脈回旋支路上安裝非觀血型血流探測(cè)器測(cè)量冠血流量。
(2)結(jié)果以10mg/Kg在靜脈內(nèi)投給5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.18)，觀察到冠血流量增加，其持續(xù)時(shí)間在15分鐘以上。另一方面，也以10mg/Kg投給N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的甲磺酸鹽(對(duì)比化合物)，雖然觀察到冠血流量增加，但其持續(xù)時(shí)間在10分鐘以下。(表3中所示)表3 以10mg/Kg在靜脈內(nèi)投給5-氨基-N-氰基-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.18)和N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的甲磺酸鹽(對(duì)比化合物)對(duì)冠血流量產(chǎn)生的影響(麻醉犬)(該值以相對(duì)于投藥前的變化率表示)給藥后時(shí)間(分鐘)化合物No. 1 3 5 10 15 20(18) 200.0 123.8 71.4 19.0 19.0 0.0對(duì)比化合物 219.0 42.9 14.9 0.0藥理試驗(yàn)4 急性毒性使用SD系雄性鼠(5周齡)，檢驗(yàn)經(jīng)口投給本發(fā)明的5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(化合物No.18)時(shí)的急性毒性。其結(jié)果，LD50是約600mg/Kg。
實(shí)驗(yàn)例1 5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的制造用DMF(1ml)溶解2-硝?；野贰}酸鹽(140mg、0.98mmol)，然后添加甲醇鈉(42mg、0.78mmol)。接著添加實(shí)驗(yàn)例1的實(shí)施例6中記載的5-氨基-N-氰基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(100mg、0.49mmol)的甲醇溶液(1ml)，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，減壓干固反應(yīng)液。殘?jiān)鼞腋∮谒校寐确鲁樘?。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。利用以甲醇和氯仿的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱色譜法提純所得的殘?jiān)?，得到作為無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(77mg、收率63%)。
熔點(diǎn)121℃IR(KBr disk)cm-13230，2160，1640，1570，12801H-NMR(90MHz，CD3OD)δ(ppm)8.12(1H，d，J＝2.6Hz)，7.93(1H，d，J＝2.0Hz)，7.24(1H，dd，J＝2.6，2.0Hz)，4.74(2H，t，J＝5.2Hz)，3.80(1H，t，J＝5.2Hz)MS 250(M+)，188[(M-ONO2)+]實(shí)施例2 N-氰基-5-乙氨基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的制造用DMF(1ml)溶解2-硝?；野贰}酸鹽(659mg、4.62mmol)，然后添加甲醇鈉(227mg、4.20mmol)。接著添加實(shí)驗(yàn)例1的實(shí)施例10中記載的N-氰基-5-乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(195mg、0.84mmol)的DMF(1ml)溶液，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，減壓干固反應(yīng)液。殘?jiān)鼞腋∮谒?，用氯仿抽提。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。利用以甲醇和氯仿的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱色譜法提純所得的殘?jiān)玫阶鳛闊o色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(208mg、收率89%)。
熔點(diǎn)100℃IR(KBr disk)cm-13230，2170，1630，1550，12751H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.28(1H，brt)，7.97(1H，d，J＝2.6Hz)，7.89(1H，d，J＝1.8Hz)，7.12(1H，dd，J＝2.6，1.8Hz)，4.70(2H，t，J＝5.0Hz)，3.83(2H，m)，3.15(2H，m)，1.25(3H，t，J＝7.2Hz)MS 278(M+)，216[(M-ONO2)+]實(shí)施例3 6-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的制造用DMF(3.5ml)溶解2-硝?；野贰}酸鹽(1.36mg、9.54mmol)，然后添加甲醇鈉(470mg、8.7mmol)。接著添加實(shí)驗(yàn)例1的實(shí)施例5中記載的N-氰基-6-氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(355mg、1.74mmol)的DMF(2ml)溶液，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，減壓干固反應(yīng)液。殘?jiān)鼞腋∮谒校寐确鲁樘?。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。利用以甲醇和氯仿的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱色譜法提純所得的殘?jiān)玫阶鳛闊o色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(284mg、收率74%)。
熔點(diǎn)108℃
IR(KBr disk)cm-13230，2160，1640，1570，12801H-NMR(90MHz，DMSO)δ(ppm)9.00(1H，brt)，8.23(1H，dd，J＝2.42，0.66Hz)，7.66(1H，dd，J＝8.79，2.64Hz)，6.72(2H，brs)，6.50(1H，dd，J＝8.79，0.88Hz)，4.70(2H，t，J＝5.27Hz)，3.68(2H，m)MS 250(M+)，188[(M-ONO2)+]實(shí)施例4 N-氰基-6-二乙氨基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的制造a)6-二乙氨基-3-氰基吡啶的制備向6-氯-3-氰基吡啶(500mg、3.60mmol)的DMF(5ml)溶液中加入碳酸鉀(500mg、3.62mmol)、碘化鈉(催化量)和二乙胺(400mg、5.50mmol)，在120℃攪拌3小時(shí)。向反應(yīng)液中加入水(5ml)后，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉脫水，然后減壓濃縮。利用以乙酸乙酯和己烷的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱法提純所得的殘?jiān)?，得到作為白色結(jié)晶的6-乙氨基-3-氰基吡啶(560mg、收率89%)。
IR(neat)cm-12200、1600、1540、15101H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.39(1H，d，J＝2.44Hz)，7.55(1H，dd，J＝9.16，2.44Hz)，6.45(1H，d，J＝9.16Hz)，3.55(4H，q，J＝7.30Hz)，1.20(6H，t，J＝7.30Hz)b)在0-5℃，向6-二乙氧基-3-氰基吡啶(460mg、2.63mmol)的1-丙醇(15ml)溶液中吹入氯化氫氣體30分鐘后，將反應(yīng)容器密封并在0℃攪拌1夜。反應(yīng)后，減壓濃縮反應(yīng)液，將所得的殘?jiān)尤霛馓妓徕c溶液中。確認(rèn)溶液的PH是堿性(PH＝9以上)后，用氯仿進(jìn)行萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，利用減壓濃縮得到的油狀的粗6-二乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯。將所得的油溶解在乙腈(2ml)中，加入磷酸二氫鈉二水合物(1.62mg、10.4mmol)、磷酸二鈉(370mg、2.61mmol)和氨基氰(220mg、5.24mmol)的水(5ml)溶液，在室溫?cái)嚢?夜。反應(yīng)后，用氯仿萃取。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。利用以甲醇和氯仿的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱色譜法提純所得的殘?jiān)玫阶鳛闊o色油的N-氰基-6-乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(630mg、收率92%)。
IR(neat)cm-12960，2180，1580，12801H-NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)8.90(1H，d，J＝2.45Hz)，8.38(1H，d，J＝2.44Hz)，7.55(1H，dd，J＝9.16，2.44Hz)，6.47(1H，d，J＝9.16Hz)，4.31(2H，t，J＝6.41Hz)，3.59(4H，q，J＝7.33Hz)，1.81(2H，m)，1.22(6H，t，J＝7.33Hz)，1.03(3H，t，J＝7.21Hz)c)用甲醇(3ml)溶解2-硝?；野贰}酸鹽(314mg、2.20mmol)，加入甲醇鈉(115mg、2.13mmol)。接著添加N-氰基-6-二乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(370mg、1.42mmol)的甲醇(2ml)溶液，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液減壓干固。殘?jiān)鼞腋∮谒?，用乙酸乙酯抽提。乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉脫水，然后減壓濃縮。利用以乙酸乙酯和己烷的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱色譜法提純所得的殘?jiān)?，得到作為無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(183mg、收率42%)。
熔點(diǎn)119℃
IR(KBr disk)cm-12160，1635，1565，12751H-NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)8.41(1H，d，J＝3.05Hz)，7.84(1H，dd，J＝9.15，3.05Hz)，8.52(1H，brs)，6.50(1H，d，J＝9.15Hz)，4.68(2H，t，J＝5.18Hz)，3.82(2H，m)，3.55(4H，q，J＝7.32Hz)，1.20(6H，t，J＝7.33Hz)MS 306(M+)，244[(M-ONO2)+]實(shí)施例5 5-正丁氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的制造用DMF(2ml)溶解2-硝?；野贰}酸鹽(443mg、3.11mmol)，然后添加甲醇鈉(153mg、2.83mmol)。接著添加實(shí)驗(yàn)例1的實(shí)施例12中記載的5-正丁氨基-N-氰基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(147mg、0.56mmol)的DMF(1ml)溶液，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液減壓干固。殘?jiān)鼞腋∮谒校寐确鲁樘?。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。利用以甲醇和氯仿的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱色譜法提純所得的殘?jiān)玫阶鳛闊o色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(145mg、收率83%)。
熔點(diǎn)103.5℃IR(KBr disk)cm-13230，2170，1630，1580，1555，12751H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)8.01(1H，d，J＝2.6Hz)，7.91(1H，d，J＝1.8Hz)，7.80(1H，brt)，7.15(1H，dd，J＝2.6，1.8Hz)，4.71(2H，t，J＝5.1Hz)，4.49(1H，brs)，3.82(2H，m)，3.12(2H，m)，1.8-1.2(4H，m)，0.96(3H，t，J＝6.36)MS 306(M+)，244[(M-ONO2)+]
實(shí)施例6 N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-5-異丙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的制造用DMF(1ml)溶解2-硝?；野贰}酸鹽(95mg、0.67mmol)，然后添加甲醇鈉(25mg、0.46mmol)。接著添加實(shí)驗(yàn)例1的實(shí)驗(yàn)例11中記載的N-氰基-5-異丙基氨基-3-吡啶羧基亞氨酸丙酯(80mg、0.33mmol)的DMF(1ml)溶液，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液減壓干固。殘?jiān)鼞腋∮谒?，用氯仿抽提。氯仿層用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。利用甲醇和氯仿的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱色譜法提純所得的殘?jiān)?，得到作為無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(26mg、收率27%)。
熔點(diǎn)123℃IR(KBr disk)cm-13220、2200、1640、1590、1560、1280、1000、8451H-NMR(90MHz，CDCl3-CD3OD)δ(ppm)7.97(1H，d，J＝3.9Hz)，7.86(1H，d，J＝1.5Hz)，7.03(1H，dd，J＝3.9，1.5Hz)，4.62(2H，t，J＝5.0Hz)，3.80(1H，m)，3.57(1H，m)，1.25(6H，d，J＝6.4Hz)MS 292(M+)，230[(M-ONO2)+]實(shí)施例7 5-乙酰氨基-N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺的制造向5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(參照實(shí)施例1)(105mg、0.42mmol)的吡啶(1ml)溶液中加入乙酰氯(45μl，0.63mmol)，在室溫下反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)后，加入冷碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉脫水后，減壓濃縮。利用以甲醇和氯仿的混合溶劑作為洗提溶劑的硅膠柱色譜法提純所得的殘?jiān)?，得到作為吸濕性粉體的5-乙酰氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺(116mg、收率95%)。
IR(KBr disk)cm-12180，1680，1635，1565，1450，12801H-NMR(90MHz，CDCl3)δ(ppm)10.5(1H，brs)，9.54(1H，brt)，8.90(1H，d，J＝2.4Hz)，8.42(1H，d，J＝2.0Hz)，8.27(1H，dd，J＝2.4，2.0Hz)，4.75(2H，t，J＝5.1Hz)，3.73(2H，m)，3.31(3H，s)MS 292(M+)，230[(M-ONO2)+]實(shí)施例8(片劑/1片中)本發(fā)明的化合物 2mg乳糖 75.5mg玉米淀粉 18mg滑石 4mg硬脂酸鎂 0.5mg合計(jì) 100mg混合上述成分，加壓制成片劑。
實(shí)施例9(膠囊劑/1個(gè)膠囊中)本發(fā)明的化合物 5mg乳糖 94mg硬脂酸鎂 1mg合計(jì) 100mg混合上述成分，填充到膠囊中制成膠囊劑。
實(shí)施例10(注射劑/1管形瓶中)本發(fā)明的化合物 1mg麥芽糖 25mg注射用蒸餾水 適量合計(jì) 2ml混合上述成分，過濾后裝入管形瓶中。用常規(guī)方法凍干后密封而形成注射劑。
附圖的簡(jiǎn)單說明圖1是為了制造(Ⅰ)式所示的本發(fā)明化合物的反應(yīng)路線圖，即表示(Ⅰ)式中的R1是烷基、羥烷基、羧基、氨基、烷氨基、二烷氨基、芳烷基氨基或羥基時(shí)，R2是氫原子，或者R1是氫原子時(shí)，R2是氨基或二烷基氨基的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物及其酸加成鹽的制造。
圖2是為了制造(Ⅰ)式所示的本發(fā)明化合物的反應(yīng)路線圖，即表示(Ⅰ)式的R1是酰氨基、烷基磺酰氨基或雙烷基磺酰氨基的N-氰基-吡啶羧基亞氨酸酰胺化合物及其酸加成鹽的制造。
權(quán)利要求
1.以下面的(Ⅰ)式表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺及其酸加成鹽，
式中，R1為烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基磺酰氨基、雙烷基磺酰氨基或羥基時(shí)，R2表示氫原子，R3表示硝?；?-氯苯基或苯基，R1是氫原子時(shí)，R2表示烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基磺酰氨基、雙烷基磺酰氨基或羥基，R3表示硝?；?、2-氯苯基或苯基。
2.下式(Ⅰ-a)表示的、權(quán)利要求1所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺及其酸加成鹽，
式中，R1是烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基磺酰氨基、雙烷基磺酰氨基或羥基時(shí)，R2表示氫原子，R4表示氫原子或氯原子，R1是氫原子時(shí)，R2表示烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基磺酰氨基、雙烷基磺酰氨基或羥基，R4表示氫原子或氯原子。
3.以下式(Ⅰ-b)表示的、權(quán)利要求1所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺及其酸加成鹽，
式中，R1是烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基磺酰氨基、雙烷基磺酰氨基或羥基時(shí)，R2表示氫原子，R1是氫原子時(shí)，R2表示烷基、羥烷基、羧基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷基氨基、烷基磺酰氨基、雙烷基磺酰氨基或羥。
4.權(quán)利要求1所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽，在(Ⅰ)式中的R1和R2中，烷基的碳原子數(shù)是1-5，羥烷基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5，酰氨基中的?；且阴；?、丙?；虮郊柞；榛被械耐榛奶荚訑?shù)是1-5，二烷基氨基中的烷基碳原子數(shù)是1-5，芳烷基氨基是芐氨基，烷基磺酰氨基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5，雙烷基磺酰氨基中的烷基碳原子數(shù)是1-5。
5.權(quán)利要求2所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽，在式(Ⅰ-a)中的R1和R2中，烷基的碳原子數(shù)是1-5，羥烷基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5，酰氨基的?；且阴；?、丙酰基或苯甲?；?，烷基氨基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5，二烷基氨基中的烷基碳原子數(shù)是1-5，芳烷基氨基是芐氨基，烷基磺酰氨基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5，雙烷基磺酰氨基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5。
6.權(quán)利要求3所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽，在式(Ⅰ-b)中的R1和R2中，烷基的碳原子數(shù)是1-5，羥烷基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5，酰氨基的?；且阴；?、丙酰基或苯甲?；榛被械耐榛奶荚訑?shù)是1-5，二烷基氨基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5，芳烷基氨基是芐氨基，烷基磺酰氨基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5，雙烷基磺酰氨基中的烷基的碳原子數(shù)是1-5。
7.權(quán)利要求5所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽，選自下述化合物組1)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-甲基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，2)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-乙基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，3)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-羥甲基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，4)5-羧基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，5)6-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，6)5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，7)5-乙酰氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，8)5-苯甲酰氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，9)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-二甲氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，10)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-乙氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，11)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-異丙基氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，12)5-正丁基氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，13)5-芐氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，14)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-甲磺酰氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，15)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-雙(甲磺酰氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，16)5-氨基-N-氰基-N′-(2-苯乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，17)N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-羥基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，
8.權(quán)利要求6所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽，選自下述化合物組1)5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，2)N-氰基-5-乙氨基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，3)6-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，4)N-氰基-6-二乙氨基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，5)5-正丁基氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，6)N-氰基-N′-(2-硝?；一?-5-異丙基氨基-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，7)5-乙酰氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺，
9.權(quán)利要求5所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺或者其酸加成鹽，是下述的化合物或者其酸加成鹽5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
10.權(quán)利要求6所述的吡啶羧基亞氨酸酰胺或者其酸加成鹽，是下述化合物或者其酸加成鹽5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
11.含有權(quán)利要求2、5和7中任一項(xiàng)所述的以式(Ⅰ-a)表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽作為有效成分的降壓劑。
12.所述權(quán)利要求11所述的降壓劑，其中吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽是下述化合物5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
13.含有權(quán)利要求3、6和8中任一項(xiàng)所述的以式(Ⅰ-b)表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽作為有效成分的降壓劑。
14.權(quán)利要求13所述的降壓劑，其中吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽是下述化合物5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
15.含有權(quán)利要求3、6和8中任一項(xiàng)所述的以式(Ⅰ-b)表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽作為有效成分的心絞痛治療藥。
16.權(quán)利要求15所述的心絞痛治療藥，其中吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽是下述化合物5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
17.降壓方法，其特征在于，對(duì)必須降壓的患者施用權(quán)利要求2、5和7中任一項(xiàng)所述的以式(Ⅰ-a)表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽。
18.權(quán)利要求17所述的降壓方法，其中吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽是下述化合物5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
19.降壓方法，其特征在于，對(duì)必須降壓的患者施用權(quán)利要求3、6和8中任一項(xiàng)所述的以式(Ⅰ-b)表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺。
20.權(quán)利要求19所述的降壓方法，其中吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽是下述化合物5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝?；一?-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
21.心絞痛治療方法，其特征在于，對(duì)心絞痛患者施用權(quán)利要求3、6和8中任一項(xiàng)所述的以式(Ⅰ-b)表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽。
22.權(quán)利要求21所述的心絞痛治療方法，其中吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽是下述化合物5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
23.含有權(quán)利要求2、5和7中的任一項(xiàng)所述的以式(Ⅰ-a)表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽作為有效成分的醫(yī)藥劑。
24.權(quán)利要求23所述的醫(yī)藥劑，其中吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽是下述化合物5-氨基-N-氰基-N′-[2-(2-氯苯基)乙基]-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
25.含有權(quán)利要求3、6和8中任一項(xiàng)所述的以式(Ⅰ-b)表示的吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽作為有效成分的醫(yī)藥劑。
26.權(quán)利要求25所述的醫(yī)藥劑，其中吡啶羧基亞氨酸酰胺或其酸加成鹽是下述化合物5-氨基-N-氰基-N′-(2-硝酰基乙基)-3-吡啶羧基亞氨酸酰胺。
全文摘要
公開了具有擴(kuò)張血管作用(降血壓作用或者抗心絞痛作用)的吡啶羧基亞氨酸酰胺或基酸加成鹽。式中，RR另外，公開了式(I)表示的上述化合物用于降壓或抗心絞痛的用途。
文檔編號(hào)C07D213/82GK1077949SQ93102390
公開日1993年11月3日 申請(qǐng)日期1993年1月28日 優(yōu)先權(quán)日1992年1月28日
發(fā)明者大河原秀樹, 中島達(dá)雄, 尾川信之, 柏原智子, 金田宗一郎 申請(qǐng)人:麒麟麥酒株式會(huì)社