一種甜茶苷的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種甜茶苷的提取方法,步驟包括提取、過(guò)濾、濃縮、離心、脫色除雜和干燥。本方法得到的甜茶苷含量高,無(wú)澀味,本方法操作簡(jiǎn)單,成本低,效率高,是適于甜茶苷的一種高效的提取技術(shù),為工業(yè)化生產(chǎn)甜茶苷提供參考。
【專利說(shuō)明】一種甜茶苷的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于農(nóng)產(chǎn)品加工【技術(shù)領(lǐng)域】,特別是涉及一種甜茶苷的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 甜茶,薔薇科懸鉤子屬、多年生有刺灌木。葉甜可食,主要分布于廣西。甜茶,味甘, 性涼、平,有清熱,潤(rùn)肺,利咽和祛痰止咳的功效。經(jīng)日本研究發(fā)現(xiàn),甜茶對(duì)花粉過(guò)敏及鼻炎、 皮膚炎等有療效。甜茶主要成分有甜茶苷、茶多酚、總黃酮、碳水化合物、蛋白質(zhì)、氨基酸、維 生素和礦物質(zhì)等。其中,含甜茶苷4%?6%,茶多酚8.9%左右,黃酮大約3.2%。甜茶苷, ent-貝殼松烯糖苷,與甜葉菊糖苷結(jié)構(gòu)相似,只是在C13位上少一個(gè)葡萄糖分子。甜茶苷是 一種無(wú)毒、高甜度、低熱值的甜味物質(zhì),具有降血壓、降血糖、促進(jìn)新陳代謝、治療胃酸過(guò)多 的作用,可廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥工業(yè),已經(jīng)出口日本、東南亞等地。
[0003] 目前,人們對(duì)甜茶中有效成分的提取一般采用溶劑法進(jìn)行提取,如申請(qǐng)?zhí)?01107015. 3的《一種甜茶提取物及其制備方法和應(yīng)用》發(fā)明專利,公開(kāi)了一種甜茶提取物及 其制備方法和應(yīng)用,該甜茶有效成分的提取方法為:取粉碎后的甜茶粉末,用乙醇浸提,減 壓濃縮,得到甜茶乙醇提取物;再依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯浸提;將浸提液經(jīng)低溫真 空蒸發(fā)、冷凍干燥,得到甜茶提取物,該方法雖然簡(jiǎn)單,但是提取率很低,成本較大,并且采 用乙醇、石油醚、氯仿等多種有機(jī)溶劑進(jìn)行提取,溶劑難以回收完全,易殘留于甜茶提取物 中,且提取物亦有很大的澀味,因而,研究一種高效、低成本的甜茶苷的提取方法顯得尤為 重要。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種甜茶苷的提取方法,要解決的問(wèn)題是提高提取物甜茶苷 的含量和提取率,除去澀味。本發(fā)明所提供的技術(shù)方案是:
[0005] -種甜茶苷的提取方法,包括以下步驟:
[0006] (1)提?。簩⑻鸩璺鄯鬯?,浸泡,經(jīng)超聲或者微波提取得到甜茶粉粗提液;
[0007] (2)過(guò)濾:將所得甜茶粉粗提液經(jīng)過(guò)濾,然后合并濾液;
[0008] (3)濃縮:將步驟(2)中所得濾液經(jīng)濃縮得到甜茶粉高含量提取液;
[0009] (4)離心:將步驟(3)所得甜茶粉高含量提取液,經(jīng)離心后,取上清液,備用;
[0010] (5)脫色、去澀、除雜:將步驟(4)所得上清液依次經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂 和聚酰胺樹(shù)脂進(jìn)行分離提純,以乙醇-水為洗脫溶劑,然后收集、合并含甜茶苷的洗脫液;
[0011] (6)干燥:將步驟(5)中收集的洗脫液經(jīng)噴霧干燥,即得到得到純化的甜茶苷結(jié)晶 粉末。
[0012] 步驟(1)所述的提取,先加入甜茶粉,再加入表面活性劑或復(fù)合酶,固液比為 1:10?1:30,然后借助超聲或微波進(jìn)行提取,提取時(shí)間為10?60min,提取溫度30?70°C, 超聲或微波工作功率為50?300W,提取1?3次。
[0013] 所述甜茶粉細(xì)度在60?200目。
[0014] 所述表面活性劑為十二烷基三甲基氯化銨、十二烷基硫酸鈉、吐溫80和十二烷基 二甲基甜菜堿中的一種或幾種。
[0015] 所述復(fù)合酶為纖維素酶、果膠酶和木瓜蛋白酶的組合,三者的比例為2 :3:1. 5,且 復(fù)合酶與pH = 5. 5的磷酸鹽緩沖液配合使用。
[0016] 步驟(2)中所述過(guò)濾,就是將提取液進(jìn)行抽濾,然后合并濾液。
[0017] 步驟(3)中所述濃縮,就是將濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行蒸發(fā),直至濾液沒(méi)有醇味為 止,然后用60%乙醇液過(guò)夜醇沉。
[0018] 步驟(4)中所述離心,就是將濃縮后的提取液置于離心機(jī)中進(jìn)行離心,離心機(jī)工 作參數(shù)為 4000r/min,20min。
[0019] 步驟(5)中所述脫色、去澀、除雜,就是將離心后的上清液先經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂除雜, 再經(jīng)過(guò)離子交換樹(shù)脂和聚酰胺樹(shù)脂脫色、除澀,均以40%?70%乙醇3?5倍體積為洗脫 溶劑。
[0020] 步驟¢)中所述干燥,就是將所得水洗液和柱流液經(jīng)噴霧干燥,即得到白色極甜 的甜茶苷。
[0021] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,其進(jìn)步和創(chuàng)新之處在于:
[0022] ①本方法采用表面活性劑或復(fù)合酶的輔助超聲或微波進(jìn)行提取的方法能夠有效 的提1?提取物含量和提取效率。
[0023] ②發(fā)明首次采用表面活性劑進(jìn)行輔助提取,縮短提取操作時(shí)間,降低成本,且表面 活性劑大多數(shù)無(wú)毒無(wú)害,對(duì)環(huán)境污染小,因此是安全環(huán)保輔助技術(shù)。
【具體實(shí)施方式】
[0024] 參考下列實(shí)施例將更容易理解本發(fā)明,給出的實(shí)施例不是限制本發(fā)明的范圍。
[0025] 實(shí)施例1
[0026] 采用5g過(guò)60目篩的甜茶粉末,加入15ml 0. 3%的十二烷基二甲基甜菜堿表面活 性劑,冷浸15min后,以固液比1:15,65°C,超聲功率200W,提取35min,重復(fù)2次。抽濾合 并濾液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至無(wú)醇味。60%乙醇過(guò)夜醇沉,400〇1'/111;[11離心2()1]1;[11,收集上清液 過(guò)AB-8樹(shù)脂,用3BV60%乙醇洗脫,洗脫液過(guò)D941進(jìn)一步脫色脫蛋白處理,合并柱流液和 5BV水洗液,合并液過(guò)聚酰胺除去多酚、黃酮和苦味物質(zhì),最后收集柱流液并用水淋洗至無(wú) 甜味,合并柱流液和水洗液噴霧干燥得到白色極甜的甜茶苷。
[0027] 經(jīng)測(cè)定,該方法得到的甜茶苷占甜茶干重5. 91 %,提取率達(dá)到98. 5 %,基本上沒(méi) 有苦潘味。
[0028] 實(shí)施例2
[0029] 用5g過(guò)60目篩的甜茶粉末,加入15ml 0. 3%的十二烷基二甲基甜菜堿表面活性 齊[J,冷浸18min后,固液比1:18,65°C,微波功率280W,提取30min,重復(fù)2次。抽濾合并濾 液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至無(wú)醇味。65%乙醇過(guò)夜醇沉,4000r/min離心20min,收集上清液過(guò) AB-8樹(shù)脂,用4BV60 %乙醇洗脫,洗脫液過(guò)D941進(jìn)一步脫色脫蛋白處理,合并柱流液和5BV 水洗液,合并液過(guò)聚酰胺除去多酚、黃酮和苦味物質(zhì),收集柱流液并用水淋洗至無(wú)甜味,合 并柱流液和水洗液噴霧干燥得到白色極甜的甜茶苷。
[0030] 經(jīng)測(cè)定,該方法得到的甜茶苷占甜茶干重5. 89%,提取率達(dá)到98. 17%,基本上沒(méi) 有苦潘味。
[0031] 實(shí)施例3
[0032] 稱取5g過(guò)60目篩的甜茶粉末,加入0. 13%復(fù)合酶,其中纖維素酶:果膠酶:木瓜 蛋白酶=2:3:1.5,50°C、pH5. 5磷酸鹽緩沖液浸泡20min后,以固液比1:14,50°C,超聲功 率220W,提取25min,重復(fù)2次。立即升溫80°C滅酶,抽濾合并濾液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至無(wú)醇 味。60 %乙醇過(guò)夜醇沉,4000r/min離心20min,收集上清液過(guò)AB-8樹(shù)脂,用4BV65 %乙醇洗 脫,洗脫液過(guò)D941進(jìn)一步脫色脫蛋白處理,合并柱流液和5BV水洗液,合并液過(guò)聚酰胺除去 多酚、黃酮和苦味物質(zhì),最后收集柱流液并用水淋洗至無(wú)甜味,合并柱流液和水洗液噴霧干 燥得到白色極甜的甜茶苷。
[0033] 經(jīng)測(cè)定,該方法得到的甜茶苷占甜茶干重5. 93%,提取率達(dá)到98. 83%,基本上沒(méi) 有苦潘味。
[0034] 實(shí)施例4
[0035] 5g過(guò)60目篩的甜茶粉末,加入0. 13%復(fù)合酶,其中纖維素酶:果膠酶:木瓜蛋白 酶=2:3:1.5,加入5〇1:、??jī)?cè).5磷酸鹽緩沖液浸泡2〇1^11后,以固液比1 :15,5〇1:,微波功 率260W,提取25min,重復(fù)2次。立即升溫80°C滅酶,抽濾合并濾液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至無(wú)醇 味。60 %乙醇過(guò)夜醇沉,4000r/min離心20min,收集上清液過(guò)AB-8樹(shù)脂,用4BV65 %乙醇洗 脫,洗脫液過(guò)D941進(jìn)一步脫色脫蛋白處理,合并柱流液和5BV水洗液,合并液過(guò)聚酰胺除去 多酚、黃酮和苦味物質(zhì),最后收集柱流液并用水淋洗至無(wú)甜味,合并柱流液和水洗液噴霧干 燥得到白色極甜的甜茶苷。
[0036] 經(jīng)測(cè)定,該方法得到的甜茶苷占甜茶干重5. 90 %,提取率達(dá)到98. 3 %,基本上沒(méi) 有苦潘味。
[0037] 上述實(shí)施例中表面活性劑十二烷基二甲基甜菜堿(BS-12),購(gòu)自上海金山經(jīng)緯化 工有限公司;纖維素酶、果膠酶和木瓜蛋白酶,購(gòu)自sigma公司;大孔樹(shù)脂(AB-8),離子交換 樹(shù)脂(D941)和聚酰胺樹(shù)脂,均購(gòu)自鄭州勤實(shí)科技有限公司。
[0038] 前述對(duì)本發(fā)明的具體示例性實(shí)施方案的描述是為了說(shuō)明和例證的目的。這些描述 并非想將本發(fā)明限定為所公開(kāi)的精確形式,并且很顯然,根據(jù)上述教導(dǎo),可以進(jìn)行很多改變 和變化。對(duì)示例性實(shí)施例進(jìn)行選擇和描述的目的在于解釋本發(fā)明的特定原理及其實(shí)際應(yīng) 用,從而使得本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)并利用本發(fā)明的各種不同的示例性實(shí)施方案以及 各種不同的選擇和改變。本發(fā)明的范圍意在由權(quán)利要求書及其等同形式所限定。
【權(quán)利要求】
1. 一種甜茶苷的提取方法,其特征在于,該方法包括以下步驟: (1) 提取:將甜茶粉粉碎,浸泡,然后經(jīng)超聲或者微波提取得到甜茶粉粗提液; (2) 過(guò)濾:將所得甜茶粉粗提液經(jīng)過(guò)濾,然后合并濾液; (3) 濃縮:將步驟(2)中所得濾液經(jīng)濃縮得到甜茶粉高含量提取液; (4) 離心:將步驟(3)所得甜茶粉高含量提取液,經(jīng)離心后,取上清液,備用; (5) 脫色、去澀、除雜:將步驟(4)所得上清液依次經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂和聚 酰胺樹(shù)脂進(jìn)行分離,以乙醇-水為洗脫溶劑,然后收集、合并含甜茶苷的洗脫液; (6) 干燥:將步驟(5)中收集的洗脫液經(jīng)噴霧干燥,即得到得到純化的甜茶苷結(jié)晶粉 末。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述甜茶苷的提取方法,其特征在于:步驟(1)所述的提取,先加入 甜茶粉,再加入表面活性劑或復(fù)合酶,固液比為1:10?1:30,然后借助超聲或微波進(jìn)行提 取,提取時(shí)間為10?60min,提取溫度30?70°C,超聲或微波工作功率為50?300W,提取 1?3次。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的甜茶苷的提取方法,其特征在于:所述甜茶粉細(xì)度在60? 200 目。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的甜茶苷的提取方法,其特征在于:所述表面活性劑為十二烷 基二甲基氣化按、十-燒基硫酸納、吐溫80和十_燒基_甲基甜菜喊中的一種或幾種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述甜茶苷的提取方法,其特征在于:所述復(fù)合酶為纖維素酶、果膠 酶和木瓜蛋白酶的組合,三者的比例為2 :3 :1. 5,且復(fù)合酶與pH = 5. 5的磷酸鹽緩沖液配 合使用。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述甜茶苷的提取方法,其特征在于:步驟(2)中所述過(guò)濾,就是將 提取液進(jìn)行抽濾,然后合并濾液。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述甜茶苷的提取方法,其特征在于:步驟(3)中所述濃縮,就是將 濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行蒸發(fā),直至濾液沒(méi)有醇味為止,然后用60%乙醇液過(guò)夜醇沉。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述甜茶苷的提取方法,其特征在于:步驟(4)中所述離心,就是將 濃縮后的提取液置于離心機(jī)中進(jìn)行離心,離心機(jī)工作參數(shù)為4000r/min,20min。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述甜茶苷的提取方法,其特征在于:步驟(5)中所述脫色、去澀、 除雜,就是將離心后的上清液先經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂除雜,再經(jīng)過(guò)離子交換樹(shù)脂和聚酰胺樹(shù)脂脫 色、除澀,均以40 %?70 %乙醇3-5倍體積為洗脫溶劑。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述甜茶苷的提取方法,其特征在于:步驟¢)中所述干燥,就是 將所得水洗液和柱流液經(jīng)噴霧干燥,即得到白色極甜的甜茶苷。
【文檔編號(hào)】C07H15/256GK104193788SQ201410452231
【公開(kāi)日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年9月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月5日
【發(fā)明者】楊洋, 葉琴, 趙芬芬, 馬萬(wàn)良, 胡振興 申請(qǐng)人:廣西大學(xué)