梔子提取物中西紅花苷的純化分離技術(shù)的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種梔子提取物中西紅花苷的純化分離技術(shù)，即利用泡沫分離器及不同極性大孔樹脂柱對西紅花苷類成分進行吸附、純化、分離技術(shù)，本發(fā)明依據(jù)西紅花苷中不同組分的親水性及極性差異，先將梔子提取物水溶液置于泡沫分離器中，加入乙酸乙酯進行萃取，下層液濃縮成干膏放入至15%的乙醇中充分溶解，溶解液通入四種大孔樹脂柱進行吸附，并通過不同濃度乙醇進行梯度洗脫，來實現(xiàn)西紅花苷-1，苷-2，苷-3，苷-4的純化分離目的，本發(fā)明選用的原料價廉易得，分離純化工藝操作簡便，純化后的西紅花苷各組分純度高，雜質(zhì)少，質(zhì)量性能指標(biāo)可達到藥品、食品以及化妝品等行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
【專利說明】梔子提取物中西紅花苷的純化分離技術(shù)
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種桅子提取物中西紅花苷的純化分離技術(shù)。
【背景技術(shù)】
[0002]西紅花苷主要分為西紅花苷-1、苷-2、苷-3、苷_4，近年來大量藥理學(xué)研究表明，西紅花苷的藥用價值巨大，目前發(fā)現(xiàn)西紅花苷的主要功效為:(1)西紅花苷能抑制細胞內(nèi)鈣離子的升高，具有明顯的鈣拮抗作用；(2)國內(nèi)外學(xué)者對西紅花苷的降脂作用進行了大量的臨床研究，研究表明西紅花苷能夠顯著改善脂肪肝患者的肝功能及血液環(huán)境，對于脂肪肝有良好的治療效果；(3)西紅花苷能提高細胞內(nèi)NOS的活性及細胞NO的含量，從而保護內(nèi)皮細胞不受損傷，而動脈粥樣硬化與內(nèi)皮細胞功能失調(diào)有直接關(guān)系，因而其能夠很好的抗動脈粥樣硬化；(4)西紅花苷能降低外因引起的ALT、AST及MDA的升高，對肝損傷有一定的保護作用；(5)西紅花苷可阻滯腫瘤細胞于GcZG1期，影響RNA的轉(zhuǎn)錄并調(diào)控相關(guān)蛋白的合成，從而抑制腫瘤細胞的增殖；(6)目前研究顯示西紅花苷對心血瘀阻型冠心病具有較好的治療效果。目前有極少數(shù)技術(shù)是對四種西紅花苷進行分離，要確認(rèn)四種西紅花苷分別具有哪種功效，就需要對每種西紅花苷進行具體的藥理學(xué)研究，能夠提純、分離出四種純凈的西紅花苷具有重大的意義。
[0003]除此之外，西紅花苷還被大量應(yīng)用在作為食品添加劑和化妝品等領(lǐng)域，市場需求量大，目前，市場上的西紅花苷主要是從西紅花以及桅子果實中提取，而西紅花價格昂貴，主要從伊朗進口，提取西紅花苷原料費用巨大，桅子果實中西紅花苷的含量較低，目前工藝只有通過水和醇進行提取，沒有進行深層次分離純化，產(chǎn)品雜質(zhì)多，質(zhì)量達不到所需標(biāo)準(zhǔn)，很難將其應(yīng)用于醫(yī)藥、食品以及化妝品等領(lǐng)域。本發(fā)明以桅子作為原料，來源廣泛，價格便宜，技術(shù)中結(jié)合西紅花苷親水性，采用泡沫分離技術(shù)將西紅花苷與其他成分分離，達到純化目的，根據(jù)四種西紅花苷極性不同，選擇不同的大孔樹脂吸附以及不同濃度的乙醇洗脫，以分離四種西紅花苷，本發(fā)明工藝簡單，條件要求低，很易達到，最終產(chǎn)物純度高，雜質(zhì)少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)中不能得到高純度的西紅花苷等問題而提供了一種新的純化分離技術(shù)，即利用泡沫分離與大孔樹脂吸附技術(shù)，工藝操作簡單，所得西紅花苷類成分純度高，各理化指標(biāo)符合食品、醫(yī)藥、化妝品等行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
[0005]為了實現(xiàn)本發(fā)明目的，采用桅子提取物為原料，按照以下步驟進純化分離西紅花苷:
(1)將一定量的桅子提取物溶解在適量水中，注入至泡沫分離器中，然后再加入相對于桅子提取物2倍量的乙酸乙酯，在一定的溫度和壓力條件下以一定流量向泡沫分離器中通入氮氣，2h-3h后將泡沫分離器中的水層分離出來，乙酸乙酯層以備它用；
(2)將上述步驟中分 離出來的水層減壓蒸干，蒸干后的干膏放入到15%的乙醇中充分溶解；(3 )將四根大孔樹脂柱分別進行串聯(lián)，柱子內(nèi)分別盛有D101，AB-8，HPD500，S-8四種不同的大孔樹脂，編號為1、2、3、4 ;將上述步驟中乙醇溶液以10-15ml/min流速注入至大孔樹脂柱，吸附l_2h后分別用45%-50%的乙醇對I號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-1的洗脫液；用55%-60%的乙醇對2號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-2的洗脫液；用65%-70%的乙醇對3號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-4的洗脫液；用75%-80%的乙醇對4號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-3的洗脫液；
(4)分別將上述四種洗脫液進行濃縮，減壓干燥，得到四種西紅花苷最終產(chǎn)物。
[0006]其中，所述步驟(1)中泡沫分離塔的溫度為40°C -50°C，壓力為0.5Mpa-0.6Mpa，通入氮氣的流速為lL/h-1.5L/h ；
所述步驟(2)中，所用的乙醇濃度為15%;
所述步驟(2)和(4)中，減壓蒸干的溫度為55°C -60°C，壓力為0.06Mpa-0.08Mpa ；
所述步驟(3)中，將四種不同的大孔樹脂柱進行串聯(lián)吸附，然后分別進行洗脫； 所述步驟(3)中，洗脫西紅花苷-1的乙醇濃度為45%-50%，洗脫西紅花苷-2的乙醇濃度為55%-60%，洗脫西紅花苷-4的乙醇濃度為65%-70%，洗脫西紅花苷-3的乙醇濃度為75%-80% ；
所述步驟(4)中，濃縮溫度為80°C，濃縮后溶液相對密度為1.10-1.20，減壓干燥溫度及壓力為 60°C、0.06Mpa-0.08Mpa。
[0007]經(jīng)過對上述所得四種產(chǎn)物用高效液相色譜儀進行檢測分析，分別得到西紅花苷-1的含量為90%-95%，西紅花苷-2的含量為85%-90%，西紅花苷_3的含量為85%_95%，西紅花苷-4的含量為85%-90%。
[0008]本發(fā)明的優(yōu)點在于:
(I)本發(fā)明選用桅子提取物作為原料，價格便宜；(2)通過使用不同極性的大孔樹脂吸附以及不同濃度乙醇梯度洗脫，能夠分別得到高質(zhì)量高純度的西紅花苷-1、苷_2、苷_3、苷-4 ；(3)產(chǎn)物收率高，雜質(zhì)少，質(zhì)量性能指標(biāo)滿足食品、藥品以及化妝品等行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)。
[0009]具體實施方法 實施例1
(1)將5g的桅子提取物溶解在其3倍量的水中，注入到泡沫分離器中，加入相對于桅子提取物2倍量的乙酸乙酯，在45°C，0.5Mpa條件下以1.2L/h的流速向泡沫分離器中通入氮氣，2h-3h后將泡沫分離器中的水層分離出來，乙酸乙酯層以備它用；
(2)將上述步驟中分離出來的水層在58°C、0.07Mpa條件下進行減壓蒸干，蒸干后的干膏放入到15%的乙醇中充分溶解；
(3 )將四根大孔樹脂柱分別進行串聯(lián)，柱子內(nèi)分別盛有D101，AB-8，HPD500，S-8四種不同的大孔樹脂，編號分別為1、2、3、4 ;將上述步驟中的乙醇溶液以10ml/min流速注入串聯(lián)大孔樹脂柱中，吸附1.5h后分別用45%乙醇對I號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-1的洗脫液；用60%乙醇對2號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-2的洗脫液；用70%乙醇對3號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-4的洗脫液；用80%乙醇對4號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-3的洗脫液；
(4)分別將上述四種洗脫液在80°C條件下進行濃縮至相對密度為1.15，濃縮液在60°C、0.06Mpa進行減壓干燥，得到四種西紅花苷最終產(chǎn)物，稱重得苷-1的質(zhì)量為1.22g，苷-2的質(zhì)量為0.53g，苷-3的質(zhì)量為0.42g，苷-4的質(zhì)量為0.46g。
[0010]經(jīng)檢測得到的西紅花苷-1的含量為92.5%，苷-2的含量為89.8%，苷_3的含量為87.9%,苷-4的含量為89.5%。
[0011]實施例2
(1)將5g的桅子提取物溶解在3倍量的水中，注入到泡沫分離器中，然后再加入相對于桅子提取物2倍量的乙酸乙酯，在50°C，0.6Mpa條件下以1.5L/h的流速向泡沫分離器中通入氮氣，2h-3h后將泡沫分離器中的水層分離出來，乙酸乙酯層以備它用；
(2)將上述步驟中分離出來的水層在55°C，0.0SMpa條件下進行減壓蒸干，蒸干后的干膏放入到15%的乙醇中充分溶解；
(3 )將四根大孔樹脂柱分別進行串聯(lián)，柱子內(nèi)分別盛有D101，AB-8，HPD500，S-8四種不同的大孔樹脂，編號為1、2、3、4;將上述步驟中的乙醇溶液以15ml/min流速注入大孔樹脂柱中，吸附2h后分別用50%乙醇對I號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-1的洗脫液；用55%乙醇對2號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-2的洗脫液；用65%乙醇對3號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-4的洗脫液；用75%乙醇對4號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-3的洗脫液；
(4)分別將上述四種洗脫液在80°C條件下濃縮至相對密度1.20，濃縮液于601:，
0.07Mpa條件下進行減壓干燥，得到四種西紅花苷最終產(chǎn)物，稱重得苷-1的質(zhì)量為1.24g，苷-2的質(zhì)量為0.49g，苷-3的質(zhì)量為0.44g，苷-4的質(zhì)量為0.47g。
[0012]經(jīng)檢測得到的西紅花苷-1的含量為91.8%，苷-2的含量為89.4%，苷_3的含量為86.6%,苷-4的含量為88.9%。
`[0013]本領(lǐng)域的技術(shù)普通技術(shù)人員都會理解，在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)，對于上述實施例進行修改，添加和替換都是可能的，其都沒有超出本發(fā)明的保護范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種桅子提取物中西紅花苷的純化分離技術(shù)，按以下步驟進行: (1)將一定量的桅子提取物溶解在適量水中，注入至泡沫分離器中，然后再加入相對于桅子提取物2倍量的乙酸乙酯，在一定的溫度和壓力條件下以一定流量向泡沫分離器中通入氮氣，2h-3h后將泡沫分離器中的水層分離出來，乙酸乙酯層以備它用； (2)將上述步驟中分離出來的水層減壓蒸干，蒸干后的干膏放入到15%的乙醇中充分溶解； (3 )將四根大孔樹脂柱分別進行串聯(lián)，柱子內(nèi)分別盛有D101，AB-8，HPD500，S-8四種不同的大孔樹脂，編號為1、2、3、4 ;將上述步驟中乙醇溶液以10-15ml/min流速注入至大孔樹脂柱，吸附l_2h后分別用45%-50%的乙醇對I號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-1的洗脫液；用55%-60%的乙醇對2號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-2的洗脫液；用65%-70%的乙醇對3號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-4的洗脫液；用75%-80%的乙醇對4號柱子進行洗脫，得到西紅花苷-3的洗脫液； (4)分別將上述四種洗脫液進行濃縮，減壓干燥，得到四種西紅花苷類成分。
2.一種如權(quán)利要求1所述，其特征在于: 所述步驟(1)中泡沫分離塔的溫度為40°C -50°C，壓力為0.5Mpa-0.6Mpa，通入氮氣的流速為 lL/h-1.5L/h ； 所述步驟(2)中，所用的乙醇濃度為15% ； 所述步驟(2)和(4)中，減壓蒸干的溫度為55°C -60°C，壓力為0.06Mpa-0.08Mpa ； 所述步驟(3)中，將四種不同的大孔樹脂柱進行串聯(lián)吸附，然后分別進行洗脫； 所述步驟(3)中，洗脫西紅花苷-1的乙醇濃度為45%-50%，洗脫西紅花苷-2的乙醇濃度為55%-60%，洗脫西紅花苷-4的乙醇濃度為65%-70%，洗脫西紅花苷-3的乙醇濃度為75%-80% ； 所述步驟(4)中，濃縮溫度為80°C，濃縮后溶液相對密度為1.10-1.20，減壓干燥溫度及壓力為 60°C、0.06Mpa-0.08Mpa。
【文檔編號】C07H1/08GK103601764SQ201310605793
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月26日
【發(fā)明者】王河?xùn)|, 張慶衛(wèi) 申請人:威海東寶制藥有限公司