一種促進(jìn)豬血水解的方法
【專利摘要】水解豬血制備多肽的方法有酸法、堿法、酶法及其混合法。本發(fā)明進(jìn)一步用超聲波作用，促進(jìn)了豬血的水解，使其得到更好的利用。
【專利說明】一種促進(jìn)豬血水解的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]水解豬血制備多肽的方法有酸法、堿法、酶法及其混合法。本發(fā)明進(jìn)一步用超聲波作用，促進(jìn)了豬血的水解，使其得到更好的利用于食品、化妝品、醫(yī)藥和保健品等領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]目前在歐美、日本等發(fā)達(dá)國家豬血的利用率已達(dá)50%以上，他們主要是開發(fā)肽類試劑、肽類藥物以及功能食品和食品添加劑，而我國豬血的利用率不超過10%并且利用豬血資源開發(fā)的產(chǎn)品還比較單調(diào)，除了小部分被加工成血粉或發(fā)酵血粉作為飼料添加劑，以及用于生化制藥生產(chǎn)血紅素、超氧化物歧化酶、蛋白胨外相當(dāng)大的一部分都作為廢棄物排出，既浪費(fèi)了寶貴的蛋白質(zhì)資源，又嚴(yán)重污染了周圍的環(huán)境。我國開發(fā)的血液制品種類很少，畜血在食品上的應(yīng)用近于空白。
[0003]豬血是一種高蛋白、低脂肪、低糖，而微量元素含量豐富的食品工業(yè)副產(chǎn)品，其蛋白質(zhì)含量為18%左右,]與豬瘦肉相當(dāng)，故有“液態(tài)肉”之稱。降解豬血可廣生一些具有特殊生理功能的生物活性肽，這些生物活性肽在調(diào)節(jié)胃腸道運(yùn)動(dòng)、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、抗高血壓、抗血栓、抗菌、抗病毒、抗癌、清除自由基和促進(jìn)礦物元素吸收等方面發(fā)揮重要作用。近年來，對(duì)肽在蛋白質(zhì)營養(yǎng)中的作用越來越受到重視，小肽能被完整吸收的觀點(diǎn)也被廣大學(xué)者所接受。
[0004]將豬血蛋白變性并部分水解為氨基酸和小肽可有效提高其利用率，蛋白質(zhì)是人體所需的重要營養(yǎng)素之一，它在人體內(nèi)以氨基酸或肽的形式被消化吸收。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，非單一氨基酸形式的小肽類(27個(gè)氨基酸)在人體的吸收代謝方面具有重要的生理功能，它在體內(nèi)的消化吸收優(yōu)于單一的氨基酸。許多國家近年來開發(fā)出多種用于病人和特殊生理需要人群的肽類保健與功能食品。
[0005]水解豬血制備多肽的方法有很多，如:酸法、堿法、酶法及其混合法。采用的蛋白酶多為堿性蛋白酶中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶及胃蛋白酶等。多數(shù)采用ASl.398中性蛋白酶單一或者混合其它的酶進(jìn)行酶解的復(fù)合酶法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]水解豬血制備多肽的方法有酸法、堿法、酶法及其混合法。本發(fā)明進(jìn)一步用超聲波作用，促進(jìn)了豬血的水解。
【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例一
[0008]對(duì)照組:酶-堿水解法
[0009]I取100ml血漿調(diào)節(jié)ρΗ7.6_ρΗ7.8，加入8000u / g的胰酶(加酶量以蛋白質(zhì)含量計(jì))，55°C水解5h。
[0010]2向上述水 解液中加入8%的NaOH溶液，80°C水解3h。[0011 ] 3水解完成后,用6N鹽酸中和,過濾,噴霧干燥,測(cè)定產(chǎn)品水解度以判斷水解程度。
[0012]超聲波組:酶解過程中，同時(shí)用超聲波發(fā)生器施加20kHz超聲波，其它操作同對(duì)照
組完全一樣。
[0013]結(jié)果:對(duì)照組水解度為55.2 %，而超聲波組為76.1 %，超聲波組取得了更好的提取效果。
[0014]實(shí)施例二
[0015]對(duì)照組:蛋白酶法
[0016]新鮮豬血從屠宰場(chǎng)收集后，按Sg / L血液的用量迅速加入檸檬酸鈉抗凝，然后用干凈紗布過濾除纖，再在4000r / min轉(zhuǎn)速離心20min，棄上清液，加蒸餾水調(diào)血紅蛋白濃度為8%，在一定條件下加酶水解，中性蛋白酶酶濃度6000U / g，水解8h，并用4mol / L氫氧化鈉維持其PH值恒定。水解完畢后，在沸水中滅酶lOmin，經(jīng)離心后加入活性炭進(jìn)行脫色處理，離心可得水解蛋白液。
[0017]超聲波組:酶解過程中，同時(shí)用超聲波發(fā)生器施加20kHz超聲波，水解時(shí)間縮短為4h0
[0018]結(jié)果:對(duì)照組水解度為12.7 %，而超聲波組為19.1 %，超聲波組取得了更好的提取效果，且縮短了水解時(shí)間。
[0019]實(shí)施例三
[0020]對(duì)照組:豬血從屠宰場(chǎng)收集后，紗布過濾除去雜質(zhì)，迅速添加0.6%檸檬酸三鈉抗凝，另取少量血液測(cè)定蛋白質(zhì)含`量，抗凝血充分?jǐn)嚧騃Omin后，加1.2~1.5倍蒸餾水稀釋，通過不斷地?cái)嚧蚝驮诘蜐B情況下使紅細(xì)胞破胞溶血，直接煮沸或加變性劑處理后，純水配制蛋白質(zhì)濃度7%~8%的溶血液，加入復(fù)合蛋白酶(中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)水解，加酶量6000u / ml，溫度為40°C，通過滴加，4mol / L氫氧化鈉來維持其pH值恒定在7.5，水解時(shí)間為10h。最后用6mol / L HCl調(diào)pH至4.0，使酶失活，終止反應(yīng)，測(cè)定氨基酸態(tài)氮并計(jì)算蛋白水解率。
[0021]超聲波組:酶解過程中，同時(shí)用超聲波發(fā)生器施加20kHz超聲波，水解時(shí)間縮短為5h。
[0022]結(jié)果:對(duì)照組水解度為15.8%，而超聲波組為25.3%，超聲波組取得了更好的提取效果，且縮短了水解時(shí)間。
【權(quán)利要求】
1.選擇合適的方法水解豬血。
2.選擇合適的權(quán)利I中的堿水解條件。
3.選擇合適的復(fù)合酶種類。
4.選擇合適權(quán)利3中的酶解條件。
5.在權(quán)利1-4的方法中，同時(shí)用超聲波發(fā)生器施加20kHz超聲波以提高水解豬血程度和縮短水解時(shí)間。
【文檔編號(hào)】C07K1/12GK103602713SQ201310582129
【公開日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月15日
【發(fā)明者】宋健 申請(qǐng)人:江南大學(xué)