專利名稱：一種生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種魚皮膠原寡肽的制備方法，尤其涉及一種生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法。
背景技術(shù)：
魚皮膠原寡肽由于其具有的藥用價(jià)值而被人們開始重視，現(xiàn)有的提取方法主要是利用酶水解、活性炭脫色獲得，但所得的魚皮膠原寡肽水解溶液呈黃色，有明顯的魚皮異味，因此，應(yīng)用受到限制。為了滿足市場(chǎng)和消費(fèi)者的需求，獲得無異味、幾乎無色的魚皮膠原寡肽就必須一種新的方法。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決現(xiàn)有技術(shù)中的問題，本發(fā)明的目的是提供一種生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)手段是
一種生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法，其步驟包括
一、預(yù)處理將魚皮刮去皮下脂肪，用清水洗凈，放入絞肉機(jī)中絞成碎塊，稱量后裝入水解罐，向罐內(nèi)加入6 7倍質(zhì)量軟水，密閉后向水解罐夾層通入間接蒸汽，升溫至116 118°C，蒸汽壓力為O. 2 O. 3MPa，處理30min后關(guān)閉蒸汽閥門，向水解罐夾層通人冷卻水，降低水解液溫度至60 65°C，放料，過60目不銹鋼篩網(wǎng)，收集濾液泵入另一水解釜，備用；
二、酶水解向水解罐夾層通入間接蒸汽，在攪拌下將罐內(nèi)液體升溫至60°C 65°C，用質(zhì)量濃度為15%的NaOH溶液調(diào)節(jié) pH值=8.5，保持35min后加入魚皮質(zhì)量O. 8%的堿性蛋白酶，和魚皮質(zhì)量的O. 5%的菠蘿蛋白酶，水解溫度50°C 55°C，攪拌機(jī)轉(zhuǎn)速為130 150r/min,水解時(shí)間3 3. 5h ; 三、脫異味水解完成后，向水解罐夾層通入間接蒸汽，在攪拌下將罐內(nèi)液體升溫至95°C 100°C，保持10 15min滅酶活，然后向水解罐夾層通入冷卻水，降低水解液溫度至30°C 35°C，泵入萃取罐進(jìn)行萃取脫異味處理；將磷酸三丁酯與正己烷按照2 1的體積比例混合均勻，制備成磷酸三丁酯萃取劑備用；向萃取罐中泵入磷酸三丁酯萃取劑，該萃取劑與水解液的體積比為1:2，攪拌處理3 5min后泵入分離器中靜置分層20 25min，然后放出下層脫異味水解液，泵入萃取罐再次進(jìn)行脫異味處理，其條件與第一次脫異味相同；
四、萃取劑再生將萃取有異味物質(zhì)的磷酸三丁酯萃取劑重新泵入萃取罐，加入等體積、溫度為40°C 50°C軟水，攪拌反萃取lOmin，然后保溫30min，放出下層反萃取液后再次加入軟水，同法反萃取2次，獲得再生磷酸三丁酯萃取劑，可再次用于脫異味處理；放出下層第二次脫異味水解液，泵入脫色罐，向脫色罐夾層通入間接蒸汽，使脫異味液升溫至80°C 85°C，加入魚皮質(zhì)量10%的糖用活性炭，進(jìn)行攪拌脫色處理30min ； 五、脫色濃縮處理完成后放料，進(jìn)行真空過濾，收集脫色濾液進(jìn)行真空減壓濃縮，濃縮條件同本節(jié)魚皮水解膠原寡肽制備，直至濃縮液可溶性固形物濃度為10% 15%時(shí)，泵入調(diào)配罐進(jìn)行調(diào)配；
六、配料干燥在攪拌下向濃縮液中加入麥芽糊精或阿拉伯樹膠添加劑，使其溶解并混合均勻，添加劑加入質(zhì)量等于濃縮液中可溶性固形物質(zhì)量或?yàn)槠滟|(zhì)量的2倍，最后泵入噴霧干燥機(jī)進(jìn)行噴霧干燥，干燥進(jìn)風(fēng)溫度130°C 150°C，出風(fēng)溫度75°C 80°C，噴霧離心機(jī)轉(zhuǎn)速為12000r/min，獲得無異味水解膠原寡肽。進(jìn)一步的，所述步驟六中所得魚皮膠原寡肽為白色流動(dòng)性粉末，蛋白質(zhì)含量50% 53%，水分5% 5. 5%，短肽平均分子量為250 750道爾頓。本發(fā)明的有益效果在于通過本方法制備魚皮膠原寡肽為白色流動(dòng)性粉末，蛋白質(zhì)含量50% 53%，水分5% 5. 5%，短肽平均分子量為250 750D(道爾頓)；而且無異味、無異色，且制備方法簡(jiǎn)便，利于規(guī)模生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，以助于理解本發(fā)明的內(nèi)容。實(shí)施例1
一種生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法，其步驟包括
一、預(yù)處理將Ikg魚皮刮去皮下脂肪，用清水洗凈，放入絞肉機(jī)中絞成碎塊，稱量后裝入水解罐，向罐內(nèi)加入6倍質(zhì)量軟水，密閉后向水解罐夾層通入間接蒸汽，升溫至116°C，蒸汽壓力為O. 2MPa，處理30min后關(guān)閉蒸汽閥門，向水解罐夾層通人冷卻水，降低水解液溫度至60°C，放料，過60目不銹鋼篩網(wǎng)，收集濾液泵入另一水解釜，備用； 二、酶水解向水解罐夾層通入間接蒸汽，在攪拌下將罐內(nèi)液體升溫至60°C°C，用質(zhì)量濃度為15%的NaOH溶液調(diào)節(jié)PH值=8. 5，保持35min后加入魚皮質(zhì)量0.8%的堿性蛋白酶，和魚皮質(zhì)量的O. 5 %的菠蘿蛋白酶，水 解溫度50°C V，攪拌機(jī)轉(zhuǎn)速為130r/min，水解時(shí)間3h ； 三、脫異味水解完成后，向水解te夾層通入間接蒸汽，在攬祥下將te內(nèi)液體升溫至95 C，保持IOmin滅酶活，然后向水解罐夾層通入冷卻水，降低水解液溫度至30°C，泵入萃取罐進(jìn)行萃取脫異味處理；將磷酸三丁酯與正己烷按照2 1的體積比例混合均勻，制備成磷酸三丁酯萃取劑備用；向萃取罐中泵入磷酸三丁酯萃取劑，該萃取劑與水解液的體積比為1:2，攪拌處理3min后泵入分離器中靜置分層20min，然后放出下層脫異味水解液，泵入萃取罐再次進(jìn)行脫異味處理，其條件與第一次脫異味相同；
四、萃取劑再生將萃取有異味物質(zhì)的磷酸三丁酯萃取劑重新泵入萃取罐，加入等體積、溫度為40°C軟水,攪拌反萃取IOmin,然后保溫30min,放出下層反萃取液后再次加入軟水，同法反萃取2次，獲得再生磷酸三丁酯萃取劑，可再次用于脫異味處理；放出下層第二次脫異味水解液，泵入脫色罐，向脫色罐夾層通入間接蒸汽，使脫異味液升溫至80°C°C，力口入魚皮質(zhì)量10%的糖用活性炭，進(jìn)行攪拌脫色處理30min ； 五、脫色濃縮處理完成后放料，進(jìn)行真空過濾，收集脫色濾液進(jìn)行真空減壓濃縮，濃縮條件同本節(jié)魚皮水解膠原寡肽制備，直至濃縮液可溶性固形物濃度為10%時(shí)，泵入調(diào)配罐進(jìn)行調(diào)配；
六、配料干燥在攪拌下向濃縮液中加入麥芽糊精或阿拉伯樹膠添加劑，使其溶解并混合均勻，添加劑加入質(zhì)量等于濃縮液中可溶性固形物質(zhì)量或?yàn)槠滟|(zhì)量的2倍，最后泵入噴霧干燥機(jī)進(jìn)行噴霧干燥，干燥進(jìn)風(fēng)溫度130°C°C，出風(fēng)溫度75°C，噴霧離心機(jī)轉(zhuǎn)速為12000r/min,獲得無異味水解膠原寡肽。
所得魚皮膠原寡肽為白色流動(dòng)性粉末，蛋白質(zhì)含量50%，水分5. 5%，短肽平均分子量為250 750道爾頓。實(shí)施例2
一種生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法，其步驟包括
一、預(yù)處理將魚皮3kg刮去皮下脂肪，用清水洗凈，放入絞肉機(jī)中絞成碎塊，稱量后裝入水解罐，向罐內(nèi)加入7倍質(zhì)量軟水，密閉后向水解罐夾層通入間接蒸汽，升溫至118°C，蒸汽壓力為O. 3MPa，處理30min后關(guān)閉蒸汽閥門，向水解罐夾層通人冷卻水，降低水解液溫度至65°C，放料，過60目不銹鋼篩網(wǎng)，收集濾液泵入另一水解釜，備用； 二、酶水解向水解罐夾層通入間接蒸汽，在攪拌下將罐內(nèi)液體升溫至65°C，用質(zhì)量濃度為15%的NaOH溶液調(diào)節(jié)PH值=8. 5，保持35min后加入魚皮質(zhì)量0.8%的堿性蛋白酶，和魚皮質(zhì)量的O. 5 %的菠蘿蛋白酶，水解溫度55°C，攪拌機(jī)轉(zhuǎn)速為150r/min，水解時(shí)間3. 5h ； 三、脫異味水解完成后，向水解te夾層通入間接蒸汽，在攬祥下將te內(nèi)液體升溫至100 C，保持15min滅酶活，然后向水解罐夾層通入冷卻水，降低水解液溫度至35°C，泵入萃取罐進(jìn)行萃取脫異味處理；將磷酸三丁酯與正己烷按照2 1的體積比例混合均勻，制備成磷酸三丁酯萃取劑備用；向萃取罐中泵入磷酸三丁酯萃取劑，該萃取劑與水解液的體積比為1:2，攪拌處理5min后泵入分離器中靜置分層25min，然后放出下層脫異味水解液，泵入萃取罐再次進(jìn)行脫異味處理，其條件與第一次脫異味相同；
四、萃取劑再生將萃取有異味物質(zhì)的磷酸三丁酯萃取劑重新泵入萃取罐，加入等體積、溫度為50°C軟水,攪拌反萃取IOmin,然后保溫30min,放出下層反萃取液后再次加入軟水，同法反萃取2次，獲得再生磷酸三丁酯萃取劑，可再次用于脫異味處理；放出下層第二次脫異味水解液，泵入脫色罐，向脫色罐夾層通入間接蒸汽，使脫異味液升溫至85°C，加入魚皮質(zhì)量10%的糖用活性炭，進(jìn)行攪拌脫色處理30min ； 五、脫色濃縮處理完成后放料，進(jìn)行真空過濾，收集脫色濾液進(jìn)行真空減壓濃縮，濃縮條件同本節(jié)魚皮水解膠原寡肽制備，直至濃縮液可溶性固形物濃`度為15%時(shí)，泵入調(diào)配罐進(jìn)行調(diào)配；
六、配料干燥在攪拌下向濃縮液中加入麥芽糊精或阿拉伯樹膠添加劑，使其溶解并混合均勻，添加劑加入質(zhì)量等于濃縮液中可溶性固形物質(zhì)量或?yàn)槠滟|(zhì)量的2倍，最后泵入噴霧干燥機(jī)進(jìn)行噴霧干燥，干燥進(jìn)風(fēng)溫度150°C ,出風(fēng)溫度80°C,噴霧離心機(jī)轉(zhuǎn)速為12000r/min,獲得無異味水解膠原寡肽。所得魚皮膠原寡肽為白色流動(dòng)性粉末，蛋白質(zhì)含量53%，水分5%，短肽平均分子量為250 750道爾頓。本發(fā)明的實(shí)施例所表述的，并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法，其特征在于，步驟包括 一、預(yù)處理將魚皮刮去皮下脂肪，用清水洗凈，放入絞肉機(jī)中絞成碎塊，稱量后裝入水解罐，向罐內(nèi)加入6 7倍質(zhì)量軟水，密閉后向水解罐夾層通入間接蒸汽，升溫至116 118°C，蒸汽壓力為O. 2 O. 3MPa，處理30min后關(guān)閉蒸汽閥門，向水解罐夾層通人冷卻水，降低水解液溫度至60 65°C，放料，過60目不銹鋼篩網(wǎng)，收集濾液泵入另一水解釜，備用；二、酶水解向水解罐夾層通入間接蒸汽，在攪拌下將罐內(nèi)液體升溫至60°C 65°C，用質(zhì)量濃度為15%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值=8.5，保持35min后加入魚皮質(zhì)量O. 8%的堿性蛋白酶，和魚皮質(zhì)量的O. 5%的菠蘿蛋白酶，水解溫度50°C 55°C，攪拌機(jī)轉(zhuǎn)速為130 150r/min,水解時(shí)間3 3. 5h ; 三、脫異味水解完成后，向水解罐夾層通入間接蒸汽，在攪拌下將罐內(nèi)液體升溫至95°C 100°C，保持10 15min滅酶活，然后向水解罐夾層通入冷卻水，降低水解液溫度至30°C 35°C，泵入萃取罐進(jìn)行萃取脫異味處理；將磷酸三丁酯與正己烷按照2 1的體積比例混合均勻，制備成磷酸三丁酯萃取劑備用；向萃取罐中泵入磷酸三丁酯萃取劑，該萃取劑與水解液的體積比為1:2，攪拌處理3 5min后泵入分離器中靜置分層20 25min，然后放出下層脫異味水解液，泵入萃取罐再次進(jìn)行脫異味處理，其條件與第一次脫異味相同； 四、萃取劑再生將萃取有異味物質(zhì)的磷酸三丁酯萃取劑重新泵入萃取罐，加入等體積、溫度為40°C 50°C軟水，攪拌反萃取lOmin，然后保溫30min，放出下層反萃取液后再次加入軟水，同法反萃取2次，獲得再生磷酸三丁酯萃取劑，可再次用于脫異味處理；放出下層第二次脫異味水解液，泵入脫色罐，向脫色罐夾層通入間接蒸汽，使脫異味液升溫至80°C 85°C，加入魚皮質(zhì)量10%的糖用活性炭，進(jìn)行攪拌脫色處理30min ； 五、脫色濃縮處理完成后放料，進(jìn)行真空過濾，收集脫色濾液進(jìn)行真空減壓濃縮，濃縮條件同本節(jié)魚皮水解膠原寡肽制備，直至濃縮液可溶性固形物濃度為10% 15%時(shí)，泵入調(diào)配罐進(jìn)行調(diào)配； 六、配料干燥在攪拌下向濃縮液中加入麥芽糊精或阿拉伯樹膠添加劑，使其溶解并混合均勻，添加劑加入質(zhì)量等于濃縮液中可溶性固形物質(zhì)量或?yàn)槠滟|(zhì)量的2倍，最后泵入噴霧干燥機(jī)進(jìn)行噴霧干燥，干燥進(jìn)風(fēng)溫度130°C 150°C，出風(fēng)溫度75°C 80°C，噴霧離心機(jī)轉(zhuǎn)速為12000r/min，獲得無異味水解膠原寡肽。
2.根據(jù)權(quán)力要求I所述的生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法，其特征在于所述步驟六中所得魚皮膠原寡肽為白色流動(dòng)性粉末，蛋白質(zhì)含量50% 53%，水分5% 5. 5%，短肽平均分子量為250 750道爾頓。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種生物酶法制備魚皮膠原寡肽的方法，其步驟包括一、預(yù)處理；二、酶水解；三、脫異味；四、萃取劑再生；五、脫色濃縮；六、配料干燥。通過本方法制備魚皮膠原寡肽為白色流動(dòng)性粉末，蛋白質(zhì)含量50％～53％，水分5％～5.5％，短肽平均分子量為250～750D(道爾頓)；而且無異味、無異色，且制備方法簡(jiǎn)便，利于規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07K1/14GK103060414SQ20131001303
公開日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2013年1月15日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月15日
發(fā)明者曹榮軍, 任憲君, 楊慶利, 孫杰, 武鑫, 劉少芳, 張秋艷, 金海明, 姚秀芬, 臺(tái)文靜 申請(qǐng)人:青島貝爾特生物科技有限公司