專利名稱：一種用于制備單克隆抗體的提取裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于生物工程領(lǐng)域，涉及一種提取裝置，具體涉及一種用于制備單克隆抗體的提取裝置。
背景技術(shù)：
隨著生物類新藥的不斷創(chuàng)新和發(fā)展，單克隆抗體成為醫(yī)療界的又一個(gè)科研重點(diǎn)。單克隆抗體的制備方法總共有兩種—種是體外使用細(xì)胞傳代增殖法大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從細(xì)胞外液中獲取單克隆抗體。但此方法產(chǎn)量低，費(fèi)用較高。另一種是最為常用的方法，即動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)單抗的方法。將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi)，雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)生長，并產(chǎn)生腹水，因而可得到含有大量高濃度單克隆抗體的腹水。該法操作簡便、經(jīng)濟(jì)。腹水的保存和純化也是影響抗體活性個(gè)關(guān)鍵因素?，F(xiàn)有方法為純手工收集一定體積的腹水經(jīng)簡單的離心后直接凍存至冰箱。目前還沒有在線的儀器能實(shí)現(xiàn)抗體的自動(dòng)化提取、分裝。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型的目的在于，提供一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，以克服現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述缺點(diǎn)和不足。本實(shí)用新在線收集、初步純化分離和整個(gè)提取過程中保持低溫穩(wěn)態(tài)環(huán)境，最大限度保護(hù)抗體活性及純度的提取處理裝置。本實(shí)用新型所需要解決的技術(shù)問題，可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，包括引流管、導(dǎo)管、緩沖池、恒流泵、過濾器、純化器、分裝器、分裝出料孔、收集器、恒溫箱，其中，所述導(dǎo)管的一側(cè)與引流管連接，另一側(cè)伸入所述恒溫箱內(nèi)與所述緩沖池連接；所述緩沖池、恒流泵、過濾器、純化器、分裝器、分裝出料孔依次連接，所述分裝出料孔伸出所述恒溫箱；以及所述收集器設(shè)置于所述恒溫箱外，并位于所述分裝出料孔的下方。進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述導(dǎo)管為ICP泵導(dǎo)管，所述ICP泵導(dǎo)管與所述緩沖池、所述恒流泵依次連接。進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述緩沖池與所述導(dǎo)管連接的一側(cè)設(shè)置進(jìn)水孔，與所述恒流泵連接的一側(cè)設(shè)置出水孔。進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述出水孔距離所述緩沖池底部f 2cm。進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述過濾器采用圓柱形濾柱，所述濾柱內(nèi)設(shè)置濾膜。進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述純化器采用層析法純化柱。[0015]進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述純化柱的填充高度控制在Icm以內(nèi)。進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述分裝器在一定時(shí)間內(nèi)流速與體積成正比。便于批量化、標(biāo)準(zhǔn)化分裝。進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述恒溫箱采用圓角結(jié)構(gòu)，所述恒溫箱的工作溫度為3飛。C。進(jìn)一步，本實(shí)用新型的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置還可以具有這樣的特征所述恒溫箱內(nèi)設(shè)置一消毒器。消毒器11為紫外燈，可對恒溫箱中所有裝置消毒滅菌。本實(shí)用新型的有益效果針對現(xiàn)有技術(shù)的空白，本實(shí)用新型提供一種低溫穩(wěn)態(tài)提取裝置，可以在線收集、 初步純化分離單克隆抗體、提取過程中保持低溫穩(wěn)態(tài)，自動(dòng)化操作，保證了提取操作的穩(wěn)定性和高效性。本實(shí)用新型提取裝置均在恒溫箱中，保證了單克隆抗體的活性不因操作環(huán)境而遭到破壞；全過程自動(dòng)化，以恒流泵為動(dòng)力輸送，穩(wěn)定且易控制。本實(shí)用新型的分裝裝置避免了手工分裝，手部溫度對抗體造成不良影響，并且縮短分裝時(shí)間，把分裝過程中抗體活性損失降到最小。本實(shí)用新型具有構(gòu)造簡單、操作方便、自動(dòng)化程度高，產(chǎn)品穩(wěn)定、貯藏性好等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于批量化生產(chǎn)的單克隆抗體的提取工藝。

圖I為本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。附圖標(biāo)記引流管I、導(dǎo)管2、緩沖池3、恒流泵4、過濾器5、純化器6、分裝器7、分裝出料孔8、收集器9、恒溫箱10、消毒器11。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例，對本實(shí)用新型作進(jìn)一步說明。應(yīng)理解，以下實(shí)施例僅用于說明本實(shí)用新型而非用于限定本實(shí)用新型的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件或廠商提供的條件進(jìn)行。實(shí)施例圖I為本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。如圖I所示，一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，包括引流管I、導(dǎo)管2、緩沖池3、恒流泵4、過濾器5、純化器6腹水過于粘稠時(shí)可加壓、分裝器7、分裝出料孔8、收集器9、恒溫箱10和消毒器11。弓丨流管I導(dǎo)出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腹腔的腹水。導(dǎo)管2為ICP泵導(dǎo)管，導(dǎo)管2的上游與引流管I連接，導(dǎo)管2的下游伸入恒溫箱10內(nèi)與緩沖池3連接。ICP泵導(dǎo)管與緩沖池3、恒流泵4依次連接，用于調(diào)節(jié)過濾器5、純化器6內(nèi)的流速。緩沖池3、恒流泵4、過濾器5、純化器6、分裝器7、分裝出料孔8依次連接，分裝出料孔8伸出恒溫箱10。[0034]收集器9設(shè)置于恒溫箱10外，并位于分裝出料孔8的下方。ICP泵導(dǎo)管與緩沖池3避免了因管路堵塞或系統(tǒng)故障時(shí)液體倒吸對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成的傷害。導(dǎo)管采用生物惰性材料制成ICP泵導(dǎo)管，密封良好，確保不漏夜、無污染。緩沖池3與導(dǎo)管2連接的一側(cè)設(shè)置進(jìn)水孔，與恒流泵4連接的一側(cè)設(shè)置出水孔。全過程流速由恒流泵4控制流速。出水孔距離緩沖池3底部f 2cm，是為了保證溶血性腹水中的血小板和凝血因子充分結(jié)合，形成大分子顆粒，部分可沉淀在緩沖池中，游離部分易于濾除。過濾器5采用圓柱形濾柱，濾柱內(nèi)設(shè)置濾膜過濾。純化器6采用微孔濾膜過濾器或柱層析法純化柱。純化器6可在腹水過于粘稠時(shí)可加壓。柱層析法純化柱的填料種類及柱體積視腹水性質(zhì)和加工要求而定，為減輕恒流泵 壓力，要求選用的純化柱的填充高度控制在Icm以內(nèi)。分裝器7在一定時(shí)間內(nèi)流速與體積成正比，用來控制分裝單克隆抗體的規(guī)格。引流管I連接動(dòng)物腹腔，腹水經(jīng)恒流泵4至過濾器5中過濾，至純化器純化，整個(gè)過程在低溫恒溫箱10中進(jìn)行。再由分裝器7分裝，密封后統(tǒng)一收集，低溫或超低溫儲(chǔ)存；該裝置能夠在低溫穩(wěn)態(tài)下實(shí)現(xiàn)對單克隆抗體的全自動(dòng)提取和純化。分裝采用自動(dòng)加樣裝置，分裝體積為IO-6^r5L每管。將提取過程處于恒溫箱10中，保證了單克隆抗體不因外界環(huán)境而遭到破壞和污染；全過程自動(dòng)化，以恒流泵為動(dòng)力輸送，穩(wěn)定且易控制；分裝器7全自動(dòng)分裝，避免了手工分裝時(shí)手部溫度對抗體造成不良影響，并且縮短分裝時(shí)間，把分裝過程中抗體活性損失降到最小。恒溫箱10采用圓角結(jié)構(gòu)，無死角，不易滋生細(xì)菌。恒溫箱10的工作溫度為T5°C，4°C較佳。恒溫箱10內(nèi)設(shè)置一消毒器11。消毒器11為紫外燈。本實(shí)用新型的使用方法實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備為，紫外滅菌30分鐘、同時(shí)打開恒溫箱調(diào)節(jié)至相應(yīng)溫度預(yù)冷。自實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腹腔取出腹水后，從引流管經(jīng)ICP泵導(dǎo)管進(jìn)入低溫恒溫箱10，依次流經(jīng)緩沖池3、恒流泵4、過濾器5、純化器6、分裝器7，最后密封凍存。體系溫度一般設(shè)定為
4°C，恒定不變。緩沖池3是為了調(diào)節(jié)管內(nèi)壓力，避免液體倒吸給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成傷害，同時(shí)平衡系統(tǒng)壓力。出水孔距離緩沖池3底部f 2cm，是為了保證溶血性腹水中的血小板和凝血因子充分結(jié)合，形成大分子顆粒，部分可沉淀在緩沖池中，游離部分易于濾除。接著腹水經(jīng)恒流泵4泵入過濾器5，即濾膜系統(tǒng)中，除去破碎細(xì)胞，巨噬細(xì)胞、紅細(xì)胞等大顆粒雜質(zhì)。再通過純化器6，分離掉大部分非目標(biāo)蛋白質(zhì)，即完成了單克隆抗體的初步純化過程。其中注意柱高度應(yīng)盡量控制在Icm以內(nèi)，以免造成局部壓力過大，管路堵塞，影響純化效果。純化后的單克隆抗體溶液流入分裝器7，通過滴加裝置。分裝抗體體積以流速控制。分裝后蓋好蓋子，密封凍存。最大限度的保護(hù)的單克隆抗體的活性。使用完畢后用緩沖液和去離子水多次清洗管路系統(tǒng)，紫外滅菌30分鐘，即可關(guān)閉裝置。[0052]以上對本實(shí)用新型的具體實(shí)施方式
進(jìn)行了說明，但本實(shí)用新型并不以此為限，只要不脫離本實(shí)用新型的宗旨，本實(shí)用新型還可以有各種變化?！?br> 權(quán)利要求1.一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于，包括 引流管(I)、導(dǎo)管(2)、緩沖池(3)、恒流泵(4)、過濾器(5)、純化器(6)、分裝器(7)、分裝出料孔(8)、收集器(9)、恒溫箱(10)， 其中，所述導(dǎo)管(2)的一側(cè)與引流管(I)連接，另一側(cè)伸入所述恒溫箱(10)內(nèi)與所述緩沖池(3)連接； 所述緩沖池(3)、恒流泵(4)、過濾器(5)、純化器(6)、分裝器(7)、分裝出料孔(8)依次連接，所述分裝出料孔(8 )伸出所述恒溫箱(IO );以及 所述收集器(9)設(shè)置于所述恒溫箱(10)外，并位于所述分裝出料孔(8)的下方。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述導(dǎo)管(2)為ICP泵導(dǎo)管，所述ICP泵導(dǎo)管與所述緩沖池(3)、所述恒流泵(4)依次連接。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述緩沖池(3)與所述導(dǎo)管(2)連接的一側(cè)設(shè)置進(jìn)水孔，與所述恒流泵(4)連接的一側(cè)設(shè)置出水孔。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述出水孔距離所述緩沖池(3)底部f2cm。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述過濾器(5 )采用圓柱形濾柱，所述濾柱內(nèi)設(shè)置濾膜。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述純化器(6)采用層析法純化柱。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述純化柱的填充高度控制在Icm以內(nèi)。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述分裝器(7 )在一定時(shí)間內(nèi)流速與體積成正比。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述恒溫箱(10)采用圓角結(jié)構(gòu)，所述恒溫箱(10)的工作溫度為3飛。C。
10.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，其特征在于所述恒溫箱(10)內(nèi)設(shè)置一消毒器(11)。
專利摘要一種用于制備單克隆抗體的提取裝置，包括引流管(1)、導(dǎo)管(2)、緩沖池(3)、恒流泵(4)、過濾器(5)、純化器(6)、分裝器(7)、分裝出料孔(8)、收集器(9)、恒溫箱(10)。導(dǎo)管(2)的一側(cè)與引流管(1)連接，另一側(cè)伸入所述恒溫箱(10)內(nèi)與緩沖池(3)連接。緩沖池(3)、恒流泵(4)、過濾器(5)、純化器(6)、分裝器(7)、分裝出料孔(8)依次連接，所述分裝出料孔(8)伸出恒溫箱(10)。收集器(9)設(shè)置于分裝出料孔(8)的下方。恒溫箱(10)的工作溫度為3~5℃。恒溫箱(10)內(nèi)設(shè)置一消毒器(11)。本實(shí)用新型具有構(gòu)造簡單、操作方便、活性損失小，自動(dòng)化程度高，產(chǎn)品穩(wěn)定、貯藏性好等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號C07K1/16GK202688239SQ201220356029
公開日2013年1月23日 申請日期2012年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月20日
發(fā)明者陳曦, 徐斐, 曹慧, 范國華 申請人:上海理工大學(xué)