專利名稱：一種酒餅簕寧的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥有效成分提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及ー種酒餅簕寧的制備方法，具體的說，是ー種從單葉酒餅簕的根中提取純化酒餅簕寧的方法。
背景技術(shù)：
單葉酒餅簕(Atalantia monophylla)以根入藥,具有祛風(fēng)解表,化痰止咳,理氣止痛的功效，主治感冒，頭痛，咳嗽，支氣管炎等癥，主要有效成分為生物堿、黃酮苷類。酒餅簕寧，分子式=C23H23NO4,分子量377. 44，為無色柱狀結(jié)晶，熔點205 207°C。酒餅簕寧具有抗拒活性，體外10yg/ml時，對約爾痕原蟲(Plasmodium yoelii)的抑 制率為94±4% (同氯喹ニ磷酸鹽)；小鼠腹腔注射50mg/kg時，對瘧原蟲(P. berghei和P. vinckei)有明顯預(yù)防作用。酒餅簕寧還具有抗癌作用，能抑制白血病細(xì)胞L1210生長，ED50 為 I. O μ g/ml ο在國家知識產(chǎn)權(quán)局相關(guān)檢索和中國期刊網(wǎng)的檢索中，未發(fā)現(xiàn)提取、分離純化酒餅簕寧的エ藝研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供ー種酒餅簕寧的制備方法。本發(fā)明的目的通過下述方案實現(xiàn)
ー種酒餅簕寧的制備方法，其特征在于エ藝步驟為取頭花千金藤塊根，粉碎，加入醇浸潤1-2小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集酒餅簕寧萃取物，用酸水溶解，濾去不溶物，濾液加堿調(diào)PH8-10，加入氯仿萃取，萃取液濃縮至浸膏，加入氧化鋁拌樣上柱，用氯仿-甲醇(49:1-1:1)混合溶液梯度洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮干燥，得到酒餅簕寧粗品，再采用高速逆流色譜法進(jìn)行分離純化，流分濃縮，放置結(jié)晶，即得純度大于98%的酒餅簕寧。所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為40-55°C，萃取壓カ為30_45MPa，CO2流量為20-50L/h，萃取時間為l-2h，分離釜I溫度為35-50°C，壓カ為8_9MPa，分離釜II溫度為30-45°C，壓カ為 6_8MPa。所述的酸水為3%的鹽酸或硫酸水溶液，堿為氨水溶液。所述的氧化鋁為中性氧化鋁。所述的氯仿-甲醇-0. IMHCl比例為4-6 :4_6 :2. 5-3. 5，上相為固定相，下相為流動相。本發(fā)明具有如下的優(yōu)點和有益效果
1)本發(fā)明可得到高濃度的酒餅簕寧，可為含有酒餅簕寧藥材的質(zhì)量評價提供基礎(chǔ)，對該藥材資源的開發(fā)及其制劑的質(zhì)量控制具有重要的意義；
2)本發(fā)明的提取方法簡單易行、污染少、效率高、樣品損失少、產(chǎn)品純度高，并可保護(hù)藥物的穩(wěn)定性。
具體實施例方式 下面是本發(fā)明的實施例，但本發(fā)明不僅限于所述實施例。實施例I :
取單葉酒餅簕干燥根500g，加入350ml95%こ醇浸潤I. 5小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，開啟設(shè)備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為45°C，萃取壓カ為30MPa，C02流量為30L/h，萃取時間為I. 5h，分離釜I溫度為35°C，壓カ為9MPa，分離釜II溫度為30°C，壓カ為6MPa，收集酒餅簕寧萃取物，用3%的鹽酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)pH8，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層濃縮至浸膏，加入中性氧化鋁拌勻，烘干，再上短粗柱(徑高比1:3)，用氯仿-甲醇(49:1-1:1)混合溶液梯度洗脫，收集含有酒餅簕寧的流分，減壓濃縮干燥，得到酒餅簕寧粗品；以體積比為4 4 3的氯仿-甲醇-O. IMHCl為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當(dāng)溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設(shè)定流動相流速為4ml/min，同時開啟主機(jī)同時 調(diào)節(jié)分離柱轉(zhuǎn)速為IOOOrpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動態(tài)平衡，用下相溶解粗品，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含酒餅簕寧收集液合并，真空濃縮，放置結(jié)晶，即得純度為98. 4%的酒餅簕寧。實施例2
取單葉酒餅簕干燥根500g，加入300ml95%こ醇浸潤I. 5小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，開啟設(shè)備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為55°C，萃取壓カ為40MPa，C02流量為20L/h，萃取時間為I. 5h，分離釜I溫度為50°C，壓カ為9MPa，分離釜II溫度為45°C，壓カ為lOMPa，收集酒餅簕寧萃取物，用3%的鹽酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)pH8，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層濃縮至浸膏，加入中性氧化鋁拌勻，烘干，再上短粗柱(徑高比1:3)，用氯仿-甲醇(49:1-1:1)混合溶液梯度洗脫，收集含有酒餅簕寧的流分，減壓濃縮干燥，得到酒餅簕寧粗品；以體積比為4 5 :2. 5的氯仿-甲醇-O. IMHCl為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當(dāng)溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設(shè)定流動相流速為4ml/min，同時開啟主機(jī)同時調(diào)節(jié)分離柱轉(zhuǎn)速為IOOOrpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動態(tài)平衡，用下相溶解粗品，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含酒餅簕寧收集液合并，真空濃縮，放置結(jié)晶，即得純度為98. 5%的酒餅簕寧。實施例3:
取單葉酒餅簕干燥根1kg，加入650ml95%こ醇浸潤I. 5小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，開啟設(shè)備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為40°C，萃取壓カ為45MPa，C02流量為40L/h，萃取時間為lh，分離釜I溫度為35°C，壓カ為8MPa，分離釜II溫度為30°C，壓カ為7MPa，收集酒餅簕寧萃取物，用3%的鹽酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)pH9，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層濃縮至浸膏，加入中性氧化鋁拌勻，烘干，再上短粗柱(徑高比1:5)，用氯仿-甲醇(49:1-1:1)混合溶液梯度洗脫，收集含有酒餅簕寧的流分，減壓濃縮干燥，得到酒餅簕寧粗品；以體積比為6 6 :2. 5的氯仿-甲醇-O. IMHCl為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當(dāng)溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設(shè)定流動相流速為4ml/min，同時開啟主機(jī)同時調(diào)節(jié)分離柱轉(zhuǎn)速為IOOOrpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動態(tài)平衡，用下相溶解粗品，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含酒餅簕寧收集液合并，真空濃縮，放置結(jié)晶，即得純度為98. 3%的酒餅簕寧。實施例4:
取單葉酒餅簕干燥根1kg，加入700ml95%こ醇浸潤I. 5小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，開啟設(shè)備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為45°C，萃取壓カ為30MPa，C02流量為30L/h，萃取時間為2h，分離釜I溫度為35°C，壓カ為8. 5MPa，分離釜II溫度為30°C，壓カ為6. 5MPa，收集酒餅簕寧萃取物，用3%的硫酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)pH8. 5，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層濃縮至浸膏，加入中性氧化鋁拌勻，烘干，再上短粗柱(徑高比1:5)，用氯仿-甲醇(49:1-1:1)混合溶液梯度洗脫，收集含有酒餅簕寧的流分，減壓濃縮干燥，得到酒餅簕寧粗品；以體積比為5 :5 :3.5的氯仿-甲醇-O. IMHCl為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當(dāng)溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設(shè)定流動相流速為4ml/min，同時開啟主機(jī)同時調(diào)節(jié)分離柱轉(zhuǎn)速為IOOOrpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動態(tài)平衡，用下相溶解粗品，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含酒餅簕寧收集液合并，真空濃縮， 放置結(jié)晶，即得純度為99. 0%的酒餅簕寧。實施例5:
取單葉酒餅簕干燥根2kg，加入1500ml95%こ醇浸潤I. 5小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，開啟設(shè)備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為45°C，萃取壓カ為35MPa，CO2流量為50L/h，萃取時間為2h，分離釜I溫度為35°C，壓カ為9MPa，分離釜II溫度為30°C，壓カ為8MPa，收集酒餅簕寧萃取物，用3%的鹽酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)pH8，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層濃縮至浸膏，加入中性氧化鋁拌勻，烘干，再上短粗柱(徑高比1:3)，用氯仿-甲醇(49:1-1:1)混合溶液梯度洗脫，收集含有酒餅簕寧的流分，減壓濃縮干燥，得到酒餅簕寧粗品；以體積比為5 6 3的氯仿-甲醇-O. IMHCl為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當(dāng)溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設(shè)定流動相流速為4ml/min，同時開啟主機(jī)同時調(diào)節(jié)分離柱轉(zhuǎn)速為IOOOrpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動態(tài)平衡，用下相溶解粗品，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含酒餅簕寧收集液合并，真空濃縮，放置結(jié)晶，即得純度為98. 2%的酒餅簕寧。
權(quán)利要求
1.一種酒餅簕寧的制備方法，其特征在于工藝步驟為取頭花千金藤塊根，粉碎，加入醇浸潤1-2小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集酒餅簕寧萃取物，用酸水溶解，濾去不溶物，濾液加堿調(diào)PH8-10，加入氯仿萃取，萃取液濃縮至浸膏，加入氧化鋁拌樣上柱，用氯仿-甲醇(49:1-1:1)混合溶液梯度洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮干燥，得到酒餅簕寧粗品，再采用高速逆流色譜法進(jìn)行分離純化，流分濃縮，放置結(jié)晶，即得純度大于98%的酒餅簕寧。
2.如權(quán)利要求I所述的酒餅簕寧的制備方法，其特征在于所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為40-55°C，萃取壓力為30-4510^，0)2流量為20_50L/h，萃取時間為l_2h，分離釜I溫度為35-50°C，壓力為8-9MPa，分離釜II溫度為30_45°C，壓力為6_8MPa。
3.如權(quán)利要求I所述的酒餅簕寧的制備方法，其特征在于所述的酸水為3%的鹽酸或硫酸水溶液，堿為氨水溶液。
4.如權(quán)利要求I所述的酒餅簕寧的制備方法，其特征在于所述的氧化鋁為中性氧化招。
5.如權(quán)利要求I所述的酒餅簕寧的制備方法，其特征在于所述的氯仿-甲醇-O.IMHCl比例為4-6 :4-6 :2. 5-3. 5，上相為固定相，下相為流動相。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酒餅簕寧的制備方法，工藝步驟為取頭花千金藤塊根，粉碎，加入醇浸潤1-2小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集酒餅簕寧萃取物，用酸水溶解，濾去不溶物，濾液加堿調(diào)pH8-10，加入氯仿萃取，萃取液濃縮至浸膏，加入氧化鋁拌樣上柱，用氯仿-甲醇混合溶液梯度洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮干燥，得到酒餅簕寧粗品，再采用高速逆流色譜法進(jìn)行分離純化，流分濃縮，放置結(jié)晶，即得純度大于98%的酒餅簕寧。該方法所得酒餅簕寧純度高、品質(zhì)好，制備過程簡單可行，成本低，易于批量制備。
文檔編號C07D491/052GK102827171SQ20121035055
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月20日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司