專利名稱：：一種白藜蘆醇的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥有效成分的提取方法，具體涉及從中藥虎杖中提取白藜蘆醇的提取方法。
背景技術(shù)：
：白藜蘆醇，英文名Resveratrol，分子式(:14^203，分子量228.25。在自然界中，白藜蘆醇主要存在于葡萄、虎杖、花生、朝鮮槐等植物中。白藜戶醇是一種天然的抗氧化劑，可降低血液粘稠度，抑制血小板凝結(jié)和血管舒張，保持血液暢通，可預(yù)防癌癥的發(fā)生及發(fā)展，具有抗動脈粥樣硬化和冠心病，缺血性心臟病，高血脂的防治作用。還有抑制腫瘤、抗炎、抗過敏的作用，還具有雌激素樣作用，可用于治療乳腺癌等疾病。白藜戶醇其存在形式主要有4種，分別是順式白藜蘆醇、反式白藜蘆醇以及順式白藜蘆醇糖苷、反式白藜蘆醇糖苷。白藜蘆醇主要以反式形式存在，反式異構(gòu)體的生理活性要強于順式異構(gòu)體，單體強于糖苷。在現(xiàn)有技術(shù)方案中，白藜蘆醇的提取方法有溶劑提取法、堿提酸沉法、超聲波萃取、超臨界C02萃取等多種常用方法。這幾種方法均存在一些缺陷，如溶劑提取法但費時較長，效率不高，產(chǎn)量非常低。堿提取法獲得的白藜蘆醇苷較多，雜質(zhì)較多，白藜蘆醇含量低，并會產(chǎn)生大量的堿水。超聲波提取法和超臨界C02萃取技術(shù)設(shè)備要求高，大批量生產(chǎn)的過程中還有些技術(shù)需要進(jìn)一步完善等問題。申請?zhí)枮?9115156.9的專利公開了一種將粉末狀虎杖原料中加入復(fù)合酶酶解，再經(jīng)萃取濃縮獲得含白藜蘆醇的半成品的提取工藝。但該專利沒有公開復(fù)合酶的任何信息，也沒有給出其他相應(yīng)可以比較參考的數(shù)據(jù)。申請?zhí)枮?00810004142.X的專利公開了一種從花生根、莖、葉中經(jīng)酶解提取白藜蘆醇的方法。但該方法是從花生根、莖、葉提取白藜蘆醇，工藝采用的也還只是小劑量提取，也還不符合工業(yè)化生產(chǎn)的需要。系統(tǒng)的符合工業(yè)化生產(chǎn)工藝要求的采用酶解法從虎杖原材料中提取白藜蘆醇的方法還沒有報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個目的是為解決上述現(xiàn)有技術(shù)提取時間長，轉(zhuǎn)化率低，技術(shù)操作復(fù)雜等問題，提供一種操作便捷、轉(zhuǎn)化的可靠性、產(chǎn)品回收率高，可達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)要求的白藜蘆醇的提取方法。該方法包括如下步驟虎杖原材料經(jīng)前處理，淋洗掉灰塵后，切片或制成粗粉，加入乙醇加熱回流提取，將提取液減壓蒸餾回收乙醇，并濃縮至稠膏狀，用水稀釋5-15倍，并加入酵解液酶解。將酶解好后的酶解液加熱抽濾，并經(jīng)活性炭脫色，再用酒精反復(fù)重結(jié)晶，最后減壓干燥后可得純度在98%以上的白色固體白藜蘆醇。更近一步說，所述工藝如下-將1份原料淋洗掉灰塵后，切成厚度為0.5-3mm的片或制成粗粉，待用；將原材料虎杖切片或制成粗粉用70-80%的乙醇預(yù)先回流提取2次以上，乙醇量分別為原材料1倍以上，優(yōu)選2-3倍，回流時間1-2.5h，合并提取液，再將合并液濃縮至稠膏狀；向稠膏狀提取物加入5-15倍水，并加入0.01-0.05份酶，所述酶為纖維素酶，或復(fù)合酶，所述復(fù)合酶為纖維素酶與酒曲、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、溶菌酶中任意一種或多種的混合物；纖維素酶與酒曲、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、溶菌酶按照質(zhì)量計算，比例為1:0-2:0-0.5:0-1:0-1:0-0.5;酶解時間為2-24小時，酶解溫度為15-70'C;純化將酶解液加熱至8(TC趁熱抽濾，并用活性炭脫色，得粗品；將粗品通過乙醇反復(fù)重結(jié)晶2-5次得精品；精品減壓干燥后得成品。所述復(fù)合酶中，纖維素酶與酒曲、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、溶菌酶按照質(zhì)量計算，優(yōu)選比例為1:h0.3-0.4:0.5-0.6:0,5-0.7:0.2-0.3。所述蛋白酶優(yōu)選為酸性蛋白酶。所述復(fù)合酶中包括纖維素酶和酒曲，優(yōu)選質(zhì)量比為i:i。所述復(fù)合酶中包括纖維素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶三種酶，三種酶的比例優(yōu)選1:2:3或2:3:5。所述復(fù)合中包括纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶，五種酶的比例優(yōu)選為3:2:2:2:1。所述酶解時間4-6小時，酶解溫度40-50'C。5本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明在總結(jié)前人的工作和自己探索的基礎(chǔ)上，經(jīng)反復(fù)的研究改進(jìn)，采用酶解法，從虎杖中提取純化白藜蘆醇。整個提取過程都是在乙醇一水系統(tǒng)中完成全部的生產(chǎn)過程，操作程序簡便，溶劑使用安全，生產(chǎn)成本低，并且能夠真正實現(xiàn)了工業(yè)化大生產(chǎn)的目的。通過本發(fā)明的方法極大地地提高了生產(chǎn)效率和轉(zhuǎn)化率，促使原料中的有效物質(zhì)更多的轉(zhuǎn)化為反式白藜蘆醇，使得產(chǎn)品質(zhì)量更進(jìn)一步提高，且產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。具體實施例方式下面結(jié)合實施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不作為對本發(fā)明的限定。實施例1虎杖原材料lkg,經(jīng)前處理，淋洗掉灰塵后，切片，再加入800ml80%的乙醇提取2h，再用500ml80%的乙醇回流提取lh,濃縮，將濃縮液加入100ml水稀釋，加入到含有0.02kg纖維素酶的酶解液的解化池中進(jìn)行酶解5h。將酶解好后的酶解液轉(zhuǎn)入提取罐，加熱100'C30min，趁熱過濾并加活性炭脫色，用酒精反復(fù)重結(jié)晶，再經(jīng)減壓干燥后得98%成品9.2g。實施例2淋洗掉灰塵后，切厚度為2nun的片或制成粗粉，待用；將10kg原材料虎杖切片或制成粗粉用分別用三份每份5000ml的75%的乙醇回流提取3次，每次回流時間1.5h。合并提取液，再將合并液濃縮至稠膏狀，為1000ml;稠膏狀提取物加入IO倍水，其中一部分水中加入0.3kg復(fù)合酶，配制成酶解液，進(jìn)行酶解。所述復(fù)合酶為0.15kg纖維素酶和0.15kg酒曲混合而成的；酶解時間為5小時，溫度為50'C;將酶解液加熱至80'C趁熱抽濾，并用活性炭脫色，得粗品。將粗品通過乙醇反復(fù)重結(jié)晶3次得精品。精品減壓干燥后得成品。實施例3所述酶解液為纖維素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶三種復(fù)合酶，三種酶的比例為l:2:3，其余同實施例2。實施例4所述酶解液為纖維素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶三種復(fù)合酶，三種酶的比例為2:3:5，其余同實施例2。實施例5所述酶解液為纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶的復(fù)合酶，五種酶的比例為3:2:2:2:1。酶解時間為6小時，酶解溫度為4ox:。實施例6-13所述酶解液為纖維素酵、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶的復(fù)合酶以下表比例的組合；酶解溫度，酶解時間也如下表所示，其余同實施例2。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>權(quán)利要求1.一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述工藝如下虎杖原材料經(jīng)前處理，淋洗掉灰塵后，切片或制成粗粉，加入乙醇加熱回流提取，將提取液減壓蒸餾回收乙醇，并濃縮至稠膏狀，用水稀釋5-15倍，并加入酶解液酶解。將酶解好后的酶解液加熱抽濾，并經(jīng)活性炭脫色，再用酒精反復(fù)重結(jié)晶，最后減壓干燥后可得純度在98％以上的白色固體白藜蘆醇。2.如權(quán)利要求1所述的一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述工藝如下將1份原料淋洗掉灰塵后，切成厚度為0.5-3mm的片或制成粗粉，待用；將原材料虎杖切片或制成粗粉用70-80%的乙醇預(yù)先回流提取2次以上，乙醇量分別為原材料1倍以上，優(yōu)選2-3倍，回流時間l-2.5h,合并提取液，再將合并液濃縮至稠膏狀；向稠膏狀提取物加入5-15倍水，并加入0.01-0.05份酶，所述酶為纖維素酶，或復(fù)合酶，所述復(fù)合酶為纖維素酶與酒曲、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、溶菌酶中任意一種或多種的混合物；纖維素酶與酒曲、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、溶菌酶按照質(zhì)量計算，比例為1:0-2:0-0.5:0-1:0-1:0-0.5;酶解時間為2-24小時，酶解溫度為15-70°C;純化將酶解液加熱至8(TC趁熱抽濾，并用活性炭脫色，得粗品；將粗品通過乙醇反復(fù)重結(jié)晶2-5次得精品；精品減壓干燥后得成品。3.如權(quán)利要求2所述的一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述復(fù)合酶中，纖維素酶與酒曲、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、溶菌酶按照質(zhì)量計算，比例為1:1:0.3-0.4:0.5-0.6:(K5-0丄0.2-0丄4.如權(quán)利要求2所述的一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述蛋白酶為酸性蛋白酶。5.如權(quán)利要求2所述的一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述復(fù)合酶中包括纖維素酶和酒曲，質(zhì)量比為i:i。6.如權(quán)利要求2所述的一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述復(fù)合酶中包括纖維素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶三種酶，三種酶的比例為1:2:3或2:3:5。7.如權(quán)利要求2所述的一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述復(fù)合中包括纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶，五種酶的比例為3:2:2:2:1。8.如權(quán)利要求2所述的一種白藜蘆醇的提取方法，其特征在于所述酶解時間4-6小時，酶解溫度40-50"。全文摘要本發(fā)明涉及藥物制備領(lǐng)域，是一種白藜蘆醇的制備方法，解決了現(xiàn)有技術(shù)白藜蘆醇的制備轉(zhuǎn)化率低，產(chǎn)量低，產(chǎn)品品質(zhì)不好的問題，工藝如下虎杖原材料經(jīng)前處理，淋洗掉灰塵后，切片或制成粗粉，加入乙醇加熱回流提取，將提取液減壓蒸餾回收乙醇，并濃縮至稠膏狀，用水稀釋10倍，并加入酶解液酶解。將酶解好后的酶解液加熱抽濾，并經(jīng)活性炭脫色，再用酒精反復(fù)重結(jié)晶，最后減壓干燥后可得純度在98％以上的白色固體白藜蘆醇。通過本發(fā)明的方法極大地提高了生產(chǎn)效率和轉(zhuǎn)化率，促使原料中的有效物質(zhì)更多的轉(zhuǎn)化為反式白藜蘆醇，使得產(chǎn)品質(zhì)量更進(jìn)一步提高，且產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。文檔編號C07C39/00GK101628859SQ20091016207公開日2010年1月20日申請日期2009年8月11日優(yōu)先權(quán)日2009年8月11日發(fā)明者張守力申請人:張守力