專利名稱：：誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種抗菌肽的誘導(dǎo)方法，尤其是一種家蠶抗菌肽的誘導(dǎo)方法。
背景技術(shù)：
：抗菌肽是生物體免疫防衛(wèi)系統(tǒng)產(chǎn)生的一類對(duì)抗外源性病原體致病作用的防御性多肽活性物質(zhì)，是生物體先天免疫的重要組成成分，具有廣譜抗菌活性。抗菌肽除了抗細(xì)菌外，還具有抗病毒、抗真菌和抗腫瘤作用，是很好的天然抗菌藥物來源，具有相對(duì)分子質(zhì)量小，熱穩(wěn)定性好，無免疫原性,抗菌廣譜等特點(diǎn)?？咕倪€是一種無毒副作用、無殘留、無細(xì)菌耐藥性的環(huán)保型制劑，具有熱穩(wěn)定、水溶性好、廣譜殺菌等優(yōu)點(diǎn)，且對(duì)畜禽具有促生長、保健和治療疾病的功能。因此，抗菌肽的應(yīng)用前景被人們所看好。目前技術(shù)中抗菌肽的誘導(dǎo)，有的使用的材料為家蠅，有的使用的材料為蚯蚓。但所能得到的抗菌肽較少，并且誘導(dǎo)的難度也較大。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，以解決目前抗菌肽誘導(dǎo)難度大，所得到抗菌肽少的問題。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于依次進(jìn)行以下步驟(1)在家蠶的環(huán)節(jié)部位注射微量0.05ul0.5ul的細(xì)菌或病毒；(2)正常詞養(yǎng)12-36小時(shí)后，放到-20-4(TC環(huán)境中冷凍保存；(3)取出剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于所述的方法為使家蠶饑餓，所述方法的步驟為(1)對(duì)家蠶不喂桑葉，讓其饑餓24-48小時(shí)；(2)然后正常飼養(yǎng)12-36小時(shí)后，放到-20-4(TC環(huán)境中冷凍保存；(3)取出剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。所述的誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于正常飼養(yǎng)24小時(shí)后，放到-30'C環(huán)境中冷凍保存。所述的誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于所述的細(xì)菌或病毒是指大腸桿菌、沙門氏菌、NPV病毒。所述的誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于對(duì)家蠶不喂桑葉，讓其饑餓48小時(shí)；然后正常飼養(yǎng)24小時(shí)后，放到-3(TC環(huán)境中冷凍保存。本發(fā)明所涉及的家蠶抗菌肽的誘導(dǎo)方法簡單，易于實(shí)施，并且能產(chǎn)生較多的抗菌肽，大大提高了抗菌肽的提取效率。具體實(shí)施例方式例l一種家蠶抗菌肽的生產(chǎn)方法(1)給家蠶環(huán)節(jié)部位注射微量0.05ul0.5ul的沙門氏菌或NPV病毒；(2)正常飼養(yǎng)24小時(shí)后，放到一3(TC環(huán)境中冷凍保存；(3)取出剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。例2一種家蠶抗菌肽的生產(chǎn)方法(1)對(duì)家蠶不喂桑葉，讓其饑餓48小時(shí)；(2)然后正常飼養(yǎng)24小時(shí)后，放到一30。C環(huán)境中冷凍保存；(3)取出剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽?？咕牡奶崛〔捎靡宜峤岱?。取用不同處理過的五齡家蠶分別稱重、冷凍、剪碎并用組織搗碎機(jī)搗碎、勻漿。然后用等體積5%乙酸混合，4'C條件下攪拌過夜后隔水煮沸15min，迅速冷卻?；旌衔镌?。C條件下8000rpm，離心30min，取上清液，4。C條件下保存。沉淀物用等體積5%的乙酸混合，再次于4。C攪拌、浸提過夜，重復(fù)上述離心過程，取上清,合并兩次上清液，調(diào)整pH值，再次離心，棄沉淀，上清液冷凍干燥即為家蠶抗菌肽類物質(zhì)的粗制品。取上清液于另一具塞塑料離心管內(nèi)于低溫下保存(若不立即進(jìn)行抗菌物質(zhì)的測定，可以在-20。C的冷凍箱內(nèi)保存30d)。用不同方法對(duì)家蠶進(jìn)行誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗菌肽略有差別<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>權(quán)利要求1、一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于依次進(jìn)行以下步驟(1)在家蠶的環(huán)節(jié)部位注射微量0.05ul～0.5ul的細(xì)菌或病毒；(2)正常飼養(yǎng)12-36小時(shí)后，放到-20～-40℃環(huán)境中冷凍保存；(3)取出剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。2、一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于所述的方法為使家蠶饑餓，所述方法的步驟為(1)對(duì)家蠶不喂桑葉，讓其饑餓24-48小時(shí)；(2)然后正常飼養(yǎng)12-36小時(shí)后，放至l卜20-4(TC環(huán)境中冷凍保存；(3)取出剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于正常飼養(yǎng)24小時(shí)后，放到-3(TC環(huán)境中冷凍保存。4、根據(jù)權(quán)利要求l所述的誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于所述的細(xì)菌或病毒是指大腸桿菌、沙門氏菌、NPV病毒。5、根據(jù)權(quán)利要求2所述的誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于對(duì)家蠶不喂桑葉，讓其饑餓48小時(shí)；然后正常飼養(yǎng)24小時(shí)后，放到-30'C環(huán)境中冷凍保存。全文摘要本發(fā)明涉及一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，所述的方法可采用病毒或細(xì)菌注射，或者可以采用使家蠶饑餓的方法。采用病毒或細(xì)菌注射時(shí)，給家蠶注射微量的細(xì)菌或病毒。采用使家蠶饑餓的方法時(shí)，對(duì)家蠶不喂桑葉，讓其饑餓48小時(shí)，再正常飼養(yǎng)24小時(shí)。本發(fā)明所涉及的家蠶抗菌肽的誘導(dǎo)方法，簡單易行，能有效誘導(dǎo)出較多的抗菌肽，使抗菌肽提取效率大為提高。文檔編號(hào)C07K14/435GK101519442SQ20091011646公開日2009年9月2日申請(qǐng)日期2009年3月31日優(yōu)先權(quán)日2009年3月31日發(fā)明者代君君,吳傳華,周業(yè)奉,王儲(chǔ)炎,田善富,肖林珍,濤范,范后文,魏國清申請(qǐng)人:安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所