專利名稱：Bt發(fā)酵中增效物質(zhì)的離交回收方法
技術領域：
本發(fā)明涉及回收的增效物質(zhì)技術領域，更具體涉及一種Bt發(fā)酵中增效物質(zhì) 的離交回收方法，離子交換法工藝回收上清液中的增效物質(zhì)，可以與高倍離心菌 漿混合加助劑生產(chǎn)出16000 IU/u 1的Bt SC液態(tài)制劑，可以生產(chǎn)出新型的Bt制 劑，豐富劑型品種，滿足特殊市場需求。解吸液噴霧干燥制得上清粉與原粉混合 可以生產(chǎn)出高品質(zhì)的Bt原粉，提高效價回收率，增加經(jīng)濟效益。
背景技術：
隨著人們環(huán)保意識的提高，生態(tài)環(huán)境越來越惡劣的壓力，人們對農(nóng)藥的殘留 要求也越來越高，對綠色食品的渴望和需求也越來越強烈，生物農(nóng)藥作為一種環(huán) 保、無殘留的農(nóng)藥在近幾十來深受各國的關注，也在不斷深入的大力發(fā)展中。Bt 商品化制劑是目前世界上使用最廣泛的生物農(nóng)藥之一，對其進行了很深入的研 究、應用、推廣。近年研究發(fā)現(xiàn)某些蘇云金芽孢桿菌(Bt)或蠟質(zhì)芽孢桿菌發(fā)酵上 清液中含有某種自身無殺蟲活性，但對Bt的晶體和芽孢表現(xiàn)較強增效作用的活 性成分。如蘇云金芽孢桿菌HD-1菌株產(chǎn)生一種非蛋白質(zhì)的小分子可溶性增效因 子，當與晶體混用時有增效作用，KB500菌株(Bt./"/r"sAi.)能產(chǎn)生更多的這 種增效因子，對斜蚊夜蛾(&ofi^^era 的增效作用可達32倍
(Asano, S,, , et al. ， 1994; Asano, S, ， ， et al., 1995)。蘇云金芽孢桿菌GC-91 菌株發(fā)酵上清液有增效作用，上清液中含有某種增效物質(zhì)，離心丟棄上清液是導 致毒力嚴重損失的根本原因，上清液對粉劑的最高增效倍數(shù)可達23.5倍，且上 清液對不同菌粉的增效力不同，對GC-91菌粉增效極為顯著，而對HD-1菌粉較 為緩慢(李青等，1997)。蘇云金芽孢桿菌79007發(fā)酵上清液對蘇云金芽孢桿菌 7216-R和HD-1-580有明顯的增效作用，增加30%上清液,7216-R和HD-1-580的 對棉鈴蟲效價分別提高46%和50%%,增加50%,提高幅度更大，效價增加1倍以上 (吳繼星等，1997)。對蘇云金芽孢桿菌Bta的發(fā)酵液進行生物測定，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵原液(Bta離心沉淀物+上清液)對斜紋夜蛾三齡幼蟲的LC5(1比去掉上清液的沉 淀物降低了 37.2%，說明發(fā)酵上清液能夠顯著提高發(fā)酵沉淀物對斜紋夜蛾的毒力 (余健秀等，2002)。
'蠟狀芽孢桿菌(fecj7J^cere^)菌株UW85是最近發(fā)現(xiàn)的具有生物防治病 毒潛能的菌株。1989年美國威斯康辛大學的Handelsman從苜蓿植物的根部首次 分離到蠟狀芽孢桿菌菌株UW85,通過研究表明菌株UW85的培養(yǎng)液可以抑制苜蓿 猝到病的發(fā)生，其抗病機理是因為該菌株在形成芽孢的同時還產(chǎn)生兩類抗生素， 通過離子交換樹脂和高壓紙相電泳對這兩種抗生素進行純化，一類抗生素命名為 ZwittermicinA，它是一種分子量為396Da的氨基多元醇化合物(aminopolyol)， 另一類抗生素命名為Kanosamine，是一種3_氨基-3_脫氧D-葡萄糖的化合物 (Handlsman, ， et al. ， 1990; Minler, et al.， 1995; Silo-suh et al., 1994)。
首次發(fā)現(xiàn)Zwittermicin A對蘇云金芽孢桿菌具有增效作用，但又不同于 一般的化學增效劑，ZwittermicinA是一種殺蟲活性極低的物質(zhì)，其半致死濃 度LCa,為3000Pg/g，但是，他能使微生物殺蟲活性至少增加50%,而其它已知 能增效的殺蟲活性物質(zhì)，如蘇云金素、胰蛋白酶抑制劑等本身都具有殺蟲活性。 ZwitterraiciriA的增效作用涉及三個有關方面(1)增加與殺蟲有關的芽孢桿 菌的殺蟲活性；(2)增強化學殺蟲劑的殺蟲活性；(3)增強具有殺蟲性能病毒的 殺蟲性(Manker，et al. ， 1994)。例如，Zwittermicin A能使蘇云金芽孢桿菌 殺蟲晶體蛋白(ICPs)的殺蟲活性增加1.5-1000倍，這些ICPs包括Cryl(含 CryIA、 CryIB、 CryIC) 、 CryII、 CryIII、 CryIV、 CryV和CryVI蛋白，且對原 毒素和活化毒素都有增效作用。Zwittermicin A —方面可使與殺蟲有關的芽孢 桿菌的殺蟲活性增加，另一方面也降低害蟲對芽孢桿菌的抗藥性,害蟲對生物農(nóng) 藥抗藥性的增加與實用生物農(nóng)藥的劑量成正相關， 一旦加入Zwittermicin A , 就可降低生物農(nóng)藥的用量，即降低了害蟲對生物農(nóng)藥的選擇壓力。例如在 BI0BIT HPWP制劑中加入4. 0g Zwittermicin A /BIU可以使來自美國加州的田 間抗性小菜蛾的LU抗性比率下降10倍。
Zwittermicin A與蘇云金芽孢桿菌制劑組合對鱗翅目，雙翅目，鞘翅目，蜱 螨目等中的一些種類具有增效作用，但對不同的昆蟲,其增效作用不同，即使在同 一目中的昆蟲也是如此。例如對甜菜夜蛾的增效作用最高，對粉紋夜蛾次之。(Chen ， et al. ， 1994)。 Zwittermicin A 對鱗翅目夜蛾科的甜菜夜蛾增效作 用明顯，增效倍數(shù)可達7. 33倍,對鞘翅目的柳藍葉甲和菜蛾科的小菜蛾增效作用 不明顯，增效倍數(shù)僅為0.02, 0.25倍；對雙翅目的致倦庫蛟有拮抗作用(李晗 等，1998)。
Zwittermicin A的增效作用方式是增強晶體毒素對昆蟲中腸細胞結合位點 的親和性。從而提高毒效，其本身并不被昆蟲細胞吸收(Zimanyi et al. ， 1995)。
蘇云金芽孢桿菌增效物質(zhì)可由蘇云金芽孢桿菌自身產(chǎn)生，如蘇云金芽孢桿菌 HD-l、 GC-91、 79007、 MP-342 、 Bta和KN-ll等，(Asano, S. , ， et al. ， 1994; Asano，S., ， et al. ， 1995;李青等，1997;吳繼星等，1997;楊自文等，2001; 余健秀等，2002;陳振民等，2004);還可由蠟狀芽孢桿菌(fe"7A/s carew) 菌株UW85和12 - 14產(chǎn)生(Manker， et al., 1994;陳在佴等，2003)。
研究發(fā)現(xiàn)國際上大多數(shù)蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)品均不同程度地含有 Zwittermicin A (Wu， D， et al.,1995)。 Zwittermicin A最初發(fā)現(xiàn)由蠟狀芽 孢桿菌UW85產(chǎn)生，后又發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌(泡ci7Aw^6ti"、)、蘇云金芽孢 桿菌的某些亞種也產(chǎn)生Zwittermicin A ，它主要存在這些芽孢桿菌發(fā)酵上清液 中(Manker et al. ， 1994;李晗1998)。
由于Zwittermicin A增效作用明顯，離心丟棄上清液導致毒力嚴重損失， 而且上清液COD含量很高，污水凈化處理成本也很高，Zwittermicin A回收工 藝得到研究。楊自文研究了蘇云金芽胞桿菌MP-342菌株發(fā)酵上清夜中增效物質(zhì) 的減壓濃縮-噴霧干燥回收工藝，回收原粉制備工藝中的離心廢液，獲得了含固 量為45%的上清濃縮液和上清粉；不同減壓濃縮條件及噴霧干燥對上清濃縮液和 上清粉的增效作用無顯著影響(楊自文等，2001)。陳振民應用膜過濾技術對蘇 云金芽胞桿菌KN-11增效物質(zhì)回收工藝進行了改進，發(fā)現(xiàn)納濾膜(200D)能完全 截留KN-11增效物質(zhì)，通過3種膜過濾(0. 1 u m微濾膜、10, 000D超濾膜和200D 納濾膜)的總回收率達到85.5%;與常規(guī)回收工藝比較，膜過濾回收工藝能顯著 提高濃縮液和粉的增效物質(zhì)含量(分別為99. 35U/ml， 457.70 U/g)，同時除去 了大部分的糖、氮等可溶性雜質(zhì)，使?jié)饪s液和粉保持了較好的理化性狀。(陳振 民等，2005)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在于提供了一種Bt發(fā)酵中增效物質(zhì)的離交回收方法，方法 簡便，操作易行，提高了產(chǎn)品效價收率，降低了生產(chǎn)成本，提升了產(chǎn)品質(zhì)量和市 場竟爭力。
為了實現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明的主要技術方案是
Bt發(fā)酵液經(jīng)蝶片式工業(yè)離心機分離，收集全部上清液加入一定量蛋白質(zhì)絮
凝劑和金屬離子絮凝劑，調(diào)節(jié)pH值進行反應，然后再經(jīng)板框過濾除去其中的固 形物；清液通過離子交換柱進行吸附，吸附完成后經(jīng)過解析，收集洗脫液，得到 含有增效物質(zhì)成分的解析液。解析液的使用第一種方案是按含量以一定比例加 入到菌漿中，配制成高效價的Bt水劑品種；第二種方案是收集的解析液只接進 行噴霧千燥制成白色或灰白色的高含量增效物質(zhì)粉，按含量以一定比例與Bt原 粉混合配制高效價的、物理性狀指標優(yōu)良的Bt原粉第三種方案是對解析液進 行脫鹽處理，脫鹽后的含增效物質(zhì)清液進行噴霧干燥制成超高含量的增效物質(zhì)粉 作為科研樣品用。本發(fā)明采用Bt發(fā)酵液上清液，加入蛋白質(zhì)絮凝劑和重金屬絡 和劑經(jīng)前處理去除固形物和部分水溶性物質(zhì)及離子，再經(jīng)離子交換技術提取增效 物質(zhì)有效成分，所得解析液就可達到有效成分IO倍的濃縮效果，水溶性含固很 低，.解析液經(jīng)噴霧干燥制得高含量的增效物質(zhì)粉，此工藝所制增效物質(zhì)粉性狀良 好，整套工藝合理可行，可大規(guī)?；厥誃t發(fā)酵液中的增效物質(zhì)，設備一次性 投入，運行成本不高、維護簡單，是目前最經(jīng)濟、高效、規(guī)?；幕厥誃t上清 液中的增效物質(zhì)成分生產(chǎn)工藝方案。Bt發(fā)酵液上清液經(jīng)過此工藝之后的廢液 COD含量較初始液大幅下降，降低了污水處理成本。
一種Bt發(fā)酵中增效物質(zhì)的離交回收方法，其歩驟是 (1) BT上清液的預處理，通過添加蛋白質(zhì)絮凝劑硫酸鋅、亞鐵氰化鉀和金 屬離子絡合劑草酸在pH值4.0-4.5的條件的作用下進行沉淀反應，通過板框過濾 除去其中的沉淀物，濾液進柱前調(diào)PH6.5-7.5.
每批次發(fā)酵的正常Bt發(fā)酵液經(jīng)工業(yè)離心機離心分離所得全部上清液約20 噸(約20立方)加入一定比例的蛋白質(zhì)絮凝劑0.15% (重量比)的硫酸鋅和0.1% (重量比)的亞鐵氰化鉀，然后用草酸調(diào)節(jié)pH值4.0-4.5反應2 4小時。反應后的料液進入板框過濾機進行過濾，過濾出來的清液調(diào)PH7.0進入離子交換柱進行 吸附。濾渣作為固體廢物收集集中處理。
(2) 選擇吸附容量高，選擇性好，機械強度高，使用壽命長的吸附樹脂ZJ-16 用于吸附Bt增效物質(zhì)。
通過與安徽三星樹脂科技有限公司合作，開發(fā)出一種大孔離子交換樹脂 (ZJ-16,市場上均有購置)，其比表面積大，孔徑大小合適，分布均勻，交換容 量大，對Bt增效物質(zhì)的吸附容量大，選擇性好。由于該樹脂是大孔樹脂，交聯(lián) 度大，機械強度好，抗污染能力強，再生操作方便容易，使用壽命也很經(jīng)濟。在 一個體積為6立方米的離交柱中可以連續(xù)吸附60—80噸濾液達到樹脂飽和。每 次咴附飽和后作為一離交批次，進行解析，收集解析液。離子交換柱通過清洗和 再生，進行下一批次的吸附。根據(jù)Bt發(fā)酵液的生產(chǎn)規(guī)模大小設計制造一根或多 根離子交換柱，進行工業(yè)規(guī)?；腂t增效物質(zhì)回收。
(3) 收集所得解析液根據(jù)需要進行加工處理。其歩驟是
A、精加工生產(chǎn)高效價的Bt水懸液型制劑。目前Bt水懸劑BT8000的效價 做到8000IU/ul已達到極限，加工成本已經(jīng)很高，性價比不高，主要因為在加工 過程中在發(fā)酵液濃縮過程中增效物質(zhì)損失太大，固形物含量增加，劑型化空間很 小，在質(zhì)量控制方面很困難造成成本增加但難以取得理想效果。本發(fā)明通過離交 收集的Zwittermicin A解析液本身就是很高含量的增效物質(zhì)溶液平均濃度達到 50U/ml，用高倍濃縮的Bt菌漿加入增效物質(zhì)解析液可以混制成20000IU/ul的流 動性能良好的Bt懸液，然后加入劑化型助劑4%氯化鈉、0.4%苯甲酸鈉、0.3% 黃原膠(重量比)可以生產(chǎn)出高達16000IU/ul商品化Bt水劑，達到國際先進水 平。
B、加工高效價的Bt原粉。把Zwittermicin A解析液用噴霧干燥塔加工成增 效物質(zhì)粉，可制得400 500U/g的工業(yè)用增效物質(zhì)粉，把此粉按8%~10%的比例 加入到Bt原粉中，通過氣流粉碎和混篩可加工得到高效價的Bt原粉。這種工藝 加工的原粉生物效價高、性狀良好、收率高、可劑型化加工空間大，不但提高了 產(chǎn)品品質(zhì)而且提高了生產(chǎn)收率。此種原粉可用來生產(chǎn)新型的高效價的Bt粉劑類 品種，為Bt粉劑深加工拓寬了空間。C、加工高純度高含量的增效物質(zhì)科研用粉。解析液進行脫鹽處理，脫鹽后 的含增效物質(zhì)清液進行噴霧干燥制成超高含量的增效物質(zhì)粉作為科研樣品用。收 集解析時中部高含量的解析液，然后通過通過離子交換柱(交換柱內(nèi)裝填吸附一 價、二價離子的專用樹脂選擇性吸附鹽類物質(zhì))精制脫鹽，進一步的提純，解析 清液用噴霧干燥塔噴粉，精制得到900-1000U/g白色增效物質(zhì)精粉。增效物質(zhì)精 粉雜質(zhì)少、含量高用來做科研材料。
本發(fā)明與現(xiàn)有增效物質(zhì)回收工藝技術相比，有以下優(yōu)點和效果 A、選擇性好，達到了粗提純的目的。以前報道的增效物質(zhì)回收工藝方法， 主發(fā)原理都是以物理手段為主，通過除水的方式達到增效物質(zhì)在單位體積的濃度 提高，在增效物質(zhì)濃度提高的同時占絕對百分含量的水溶性雜質(zhì)也快速的增加 了，導致回收效率低、收率低、品質(zhì)不好，利用價值低。本發(fā)明有很好的選擇性 提純，絕大多數(shù)水溶性雜質(zhì)被分離開，主要有效成分的回收率很高。
'B、工業(yè)化簡單容易，系統(tǒng)運行成本低。本發(fā)明工藝方案工業(yè)規(guī)模的應用設 備投入不大，主要設備一次投入，整體運行成本不高，操作簡單方便，便于推廣 應用，可以取得很明顯的經(jīng)濟效益。比常規(guī)的增效物質(zhì)回收工藝和膜過濾增效物 質(zhì)回收工藝方案具有明顯的優(yōu)勢。常規(guī)工藝難以有效的回收增效物質(zhì)，膜過濾系 統(tǒng)運行維護成本太高而且效果還略差于本發(fā)明的工藝方案，在工業(yè)規(guī)模的應用中 竟爭力差。
C、 可方便加工制造出高品質(zhì)的增效物質(zhì)粉和精制粉。本發(fā)明工藝方案工作 通量很大，單柱系統(tǒng)就可達到工業(yè)規(guī)模級的需求。
D、 可開發(fā)新的Bt制劑。有了高含量的增效物質(zhì)溶液和粉劑，開發(fā)高效價 的Bt水劑和高效價的Bt粉劑提供了可行方案，提高了市場競爭力。
E、 本發(fā)明工藝方案可簡單、經(jīng)濟的回收Bt發(fā)酵液中的增效物質(zhì)，能取得很 明顯的經(jīng)濟效益。此前由于回收工藝方法回收的增效物質(zhì)可能影響產(chǎn)品品質(zhì)或成 本難以接受導致產(chǎn)品加工過程中產(chǎn)生的Bt發(fā)酵液上清液基本上都直接當廢水處 理掉，造成環(huán)保處理壓力大、成本高，本發(fā)明突破了這個困難，能有效回Bt發(fā) 酵液上清液中的有效成分，還可以降低排放時的COD含量減輕了污水處理的壓 力和成本。
綜上所述，本發(fā)明的方法有很高的實用價值，在Bt發(fā)酵液中的增效物質(zhì)回收方面取得技術方面和經(jīng)濟價值方面都取得很好結果，對于環(huán)境、經(jīng)濟和社會的可持 續(xù)發(fā)展具有重要的意義。是一種新的、高效、經(jīng)濟、工業(yè)化、環(huán)保的Bt發(fā)酵液 中增效物質(zhì)的回收工藝方法?；厥盏脑鲂镔|(zhì)成分可大幅度提高Bt的生物效價 收率，而且采用此工藝回收生產(chǎn)的增效物質(zhì)粉，性狀優(yōu)良，可以開發(fā)新型的Bt 制劑品種和高效的Bt原粉。上清液經(jīng)離交工藝后，其廢水COD含量會下降30%， 使污水處理更加容易。
具體實施例方式
實施例1:
一種Bt發(fā)酵中增效物質(zhì)的離交回收方法，其步驟是
(1) BT上清液的預處理，通過添加蛋白質(zhì)絮凝劑硫酸鋅、亞鐵氰化鉀和金
屬離子絡合劑草酸在pH值4或4.2或4.3或4.5的條件的作用下進行沉淀反應， 通過板框過濾除去其中的沉淀物，濾液進柱前調(diào)PH7.0
每批次發(fā)酵的正常Bt發(fā)酵液經(jīng)工業(yè)離心機離心分離所得全部上清液約20噸 (約20立方)加入一定重量比例的蛋白質(zhì)絮凝劑0.15%的硫酸鋅和亞鐵氰化鉀 0.1%的草酸，然后調(diào)節(jié)pH值4或4.1或4.2或4.4或4.5反應2或3或4小時。 反應后的料液進入板框過濾機進行過濾，過濾出來的清液調(diào)PH7.0進入離子交換 柱進行吸附。濾渣作為固體廢物收集集中處理。
(2) 選擇吸附容量高，選擇性好，機械強度高，使用壽命長的吸附樹脂ZJ-16 用于吸附Bt增效物質(zhì)。
通過與安徽三星樹脂科技有限公司合作，開發(fā)出一種大孔離子交換樹脂 (ZJ-16，市場上均有購置)，其比表面積大，孔徑大小合適，分布均勻，交換容 量大，對Bt增效物質(zhì)的吸附容量大，選擇性好。由于該樹脂是大孔樹脂，交聯(lián) 度大，機械強度好，抗污染能力強，再生操作方便容易，使用壽命也很經(jīng)濟。在 一個體積為6立方米的離交柱中可以連續(xù)吸附60-80噸濾液達到樹脂飽和。每次 吸附飽和后作為一離交批次，進行解析，收集解析液。離子交換柱通過清洗和再 生，進行下一批次的吸附。根據(jù)Bt發(fā)酵液的生產(chǎn)規(guī)模大小設計制造一根或多根 離子交換柱，進行工業(yè)規(guī)?；腂t增效物質(zhì)回收。
(3) 收集所得解析液根據(jù)需要進行加工處理。其步驟是A、精加工生產(chǎn)高效價的Bt水懸液型制劑。目前Bt水懸劑BT8000的效價 做到8000IU/ul已達到極限，加工成本己經(jīng)很高，性價比不高，主要因為在加工 過程中在發(fā)酵液濃縮過程中增效物質(zhì)損失太大，固形物含量增加，劑型化空間很 小，在質(zhì)量控制方面很困難造成成本增加但難以取得理想效果。本發(fā)明通過離交 收集的Zwittermicin A解析液本身就是很高含量的增效物質(zhì)溶液平均濃度達到 50U/ml，用高倍濃縮的Bt菌漿加入一定量的增效物質(zhì)解析液可以混制成 20000IU/ul的流動性能良好的Bt懸液，然后加入劑化型助劑4%氯化鈉、0.4%苯 甲酸鈉、0.3%黃原膠(重量比)可以生產(chǎn)出高達16000IU/ul商品化Bt水劑，達 到國際先進水平。
B、 加工高效價的Bt原粉。把ZwittermicinA解析液用噴霧干燥塔加工成增 效物質(zhì)粉，可制得400~500U/g的工業(yè)用增效物質(zhì)粉，把此粉按重量的8%~10% 的比例加入到Bt原粉中，通過氣流粉碎和混篩可加工得到高效價的Bt原粉。這 種工藝加工的原粉生物效價高、性狀良好、收率高、可劑型化加工空間大，不但 提高了產(chǎn)品品質(zhì)而且提高了生產(chǎn)收率。此種原粉可用來生產(chǎn)新型的高效價的Bt 粉劑類品種，為Bt粉劑深加工拓寬了空間。
C、 加工高純度高含量的增效物質(zhì)科研用粉。ZwittermicinA進行脫鹽處理， 脫鹽后的含增效物質(zhì)清液進行噴霧干燥制成超高含量的增效物質(zhì)粉作為科研樣 品用。收集解析時中部高含量的解析液，然后通過通過離子交換柱(交換柱內(nèi)裝 填吸附一價、二價離子的專用樹脂選擇性吸附鹽類物質(zhì))精制脫鹽，進一步的提 純，解析清液用噴霧干燥塔噴粉，精制得到900 1000U/g白色增效物質(zhì)精粉。增 效物質(zhì)精粉雜質(zhì)少、含量高用來做科研材料。
權利要求
1、一種Bt發(fā)酵中增效物質(zhì)的離交回收方法，其步驟是(1)BT上清液的預處理，通過添加蛋白質(zhì)絮凝劑硫酸鋅、亞鐵氰化鉀和金屬離子絡合劑草酸在pH值4.0-4.5的條件下進行沉淀反應，通過板框過濾除去其中的沉淀物，濾液進柱前調(diào)PH6.5-7.5，每批次發(fā)酵的正常Bt發(fā)酵液經(jīng)工業(yè)離心機離心分離所得上清液，加入蛋白質(zhì)絮凝劑0.15％的硫酸鋅和0.1％的亞鐵氰化鉀，然后用草酸調(diào)節(jié)pH值4.0-4.5反應2～4小時，反應后的料液進入板框過濾機進行過濾，過濾出來的清液調(diào)PH7.0進入離子交換柱進行吸附；(2)選擇吸附容量高，選擇性好，機械強度高，使用壽命長的吸附樹脂ZJ-16用于吸附Bt增效物質(zhì)，其比表面積大，孔徑大小合適，分布均勻，交換容量大，對Bt增效物質(zhì)的吸附容量大，在離交柱中連續(xù)吸附濾液達到樹脂飽和，每次吸附飽和后作為一離交批次，進行解析，收集解析液，離子交換柱通過清洗和再生，進行下一批次的吸附；(3)收集所得解析液根據(jù)需要進行加工處理，其步驟是A、加工生產(chǎn)高效價的Bt水懸液型制劑，通過離交收集的解析液，含量的增效物質(zhì)溶液平均濃度達到50U/ml，用高倍濃縮的Bt菌漿加入增效物質(zhì)解析液混制成20000IU/ul的Bt懸液，然后加入劑化型助劑氯化鈉、苯甲酸鈉、黃原膠生產(chǎn)出Bt水劑；B、加工高效價的Bt原粉，把解析液用噴霧干燥塔加工成增效物質(zhì)粉，制得400～500U/g的工業(yè)用增效物質(zhì)粉，把此粉按8％～10％的比例加入到Bt原粉中，通過氣流粉碎和混篩加工得到Bt原粉；C、加工高純度高含量的增效物質(zhì)科研用粉，解析液進行脫鹽處理，脫鹽后的含增效物質(zhì)清液進行噴霧干燥制成超高含量的增效物質(zhì)粉，收集解析時中部高含量的解析液，然后通過通過離子交換柱脫鹽，進一步的提純，解析清液用噴霧干燥塔噴粉，制得到白色增效物質(zhì)粉。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種Bt發(fā)酵中增效物質(zhì)的離交回收方法，其步驟(1)Bt上清液的預處理，通過添加蛋白質(zhì)絮凝劑硫酸鋅、亞鐵氰化鉀和金屬離子絡合劑草酸在pH值條件下進行沉淀反應，通過板框過濾除去其中的沉淀物，濾液進柱前調(diào)pH6；(2)選擇吸附容量高，選擇性好，機械強度高，使用壽命長的吸附樹脂ZJ-16用于吸附Bt增效物質(zhì)；(3)收集所得解析液根據(jù)需要進行加工處理，其步驟是A.加工生產(chǎn)高效價的Bt水懸液型制劑，通過離交收集的解析液，加入劑化型助劑氯化鈉、苯甲酸鈉、黃原膠生產(chǎn)出Bt水劑；B.加工高效價的Bt原粉；C.加工高純度高含量的增效物質(zhì)科研用粉。本發(fā)明方法簡便，操作易行，提高了產(chǎn)品效價收率，降低了生產(chǎn)成本，提升了產(chǎn)品質(zhì)量。
文檔編號C07C237/00GK101508656SQ200910061189
公開日2009年8月19日 申請日期2009年3月20日 優(yōu)先權日2009年3月20日
發(fā)明者劉華梅, 青 李, 楊克華, 程治國, 翔 謝, 陳振民, 黃志遠, 龔永華 申請人:武漢科諾生物科技股份有限公司