專利名稱：用作腎素抑制劑的n5-(2-乙氧基乙基)-n3-(2-吡啶基)-3,5-哌啶二甲酰胺衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及式I化合物或其鹽
其中 R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代； R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基或C1-C7-烷氧基-C1-C7-烷氧基； R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基； R4為氫或羥基；且 R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式I化合物或其鹽，其中 R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代； R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基或鹵素-C1-C7-烷氧基； R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基； R4為氫或羥基；且 R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基。
本發(fā)明還涉及式II化合物或其鹽
其中 R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代； R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基或C1-C7-烷氧基-C1-C7-烷氧基； R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基； R4為氫或羥基；且 R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式II化合物或其鹽，其中 R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代； R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基或鹵素-C1-C7-烷氧基； R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基； R4為氫或羥基；且 R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基。
所述式II化合物為其中R4為氫的式I的優(yōu)選實(shí)施方案。
本發(fā)明還涉及式III化合物或其鹽，
R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代； R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基或C1-C7-烷氧基-C1-C7-烷氧基； R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基； R4為氫或羥基；且 R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基。
所述式III化合物為其中R4為羥基的式I的優(yōu)選實(shí)施方案。
本發(fā)明化合物顯示對(duì)天然酶腎素的抑制活性。因此，式I化合物可用于治療(該術(shù)語(yǔ)還包括預(yù)防)一種或多種尤其選自下文詳細(xì)列出的疾病的病癥或疾病，尤其是只要可通過腎素抑制而調(diào)節(jié)(更尤其是有益地影響)的這些疾病。
下文列出了用于描述本發(fā)明化合物及其用途和合成、原料和中間體等各種術(shù)語(yǔ)的定義。這些定義，通過替換用于本公開文本的一種、多種或所有通用表達(dá)或符號(hào)并由此獲得優(yōu)選的本發(fā)明實(shí)施方案，優(yōu)選用于整篇說明書中所用的術(shù)語(yǔ)，除非它們?cè)谔囟ㄇ闆r下單獨(dú)或作為更大基團(tuán)的部分另有限定。
烷基為C1-C7-烷基，更優(yōu)選為C1-C4-烷基，其為直鏈或支鏈(一次或酌情多次)。術(shù)語(yǔ)C1-C7烷基定義具有至多并包括最大值7個(gè)碳原子，尤其是至多并包括最大值4個(gè)碳原子的部分，所述部分為支鏈(一次或多次)或直鏈并通過末端或非末端碳連接。例如，C1-C7-烷基為正戊基，正己基或正庚基，或優(yōu)選C1-C4-烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、仲丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。
鹵素或鹵族元素優(yōu)選為氟、氯、溴或碘，最優(yōu)選為氟、氯或溴；當(dāng)提及鹵素時(shí)，這可表示一個(gè)或多個(gè)(例如至多三個(gè))鹵素原子存在于部分如鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基等(例如三氟甲基)中。
C3-C8-環(huán)烷基優(yōu)選為單環(huán)或雙環(huán)、更優(yōu)選單環(huán)環(huán)烷基，其可包括一個(gè)或多個(gè)雙鍵和/或三鍵。優(yōu)選為C3-C6-環(huán)烷基。
例如，C1-C7-烷氧基為C1-C4-烷氧基，可以是直鏈或支鏈。實(shí)例為甲氧基、乙氧基、正丙氧基或異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基、戊氧基和己氧基。優(yōu)選為C1-C4烷氧基。
芳基優(yōu)選為具有6-22個(gè)碳原子的單環(huán)或雙環(huán)芳基，尤其是苯基、茚基、茚滿基或萘基、特別是苯基。
鏈烯基可以是含有雙鍵并優(yōu)選含有2-12個(gè)C原子、尤其優(yōu)選2-8個(gè)C原子的直鏈或支鏈烷基。特別優(yōu)選直鏈C2-4鏈烯基。尤其優(yōu)選烯丙基。
具有星號(hào)(＊)的鍵表示與分子其余部分結(jié)合的點(diǎn)。
在上下文所有的定義中，本領(lǐng)域技術(shù)人員不需過多試驗(yàn)或努力就能辨別哪些是特別相關(guān)的(例如如果存在的話，能夠提供足夠穩(wěn)定的化合物，用于生產(chǎn)例如半衰期超過30秒(優(yōu)選超過一周)的藥物)，并因此優(yōu)選為本權(quán)利要求所涵蓋，且只有化學(xué)上可行的鍵和取代基(例如在雙鍵或三鍵的情況下，可避免攜有氫的氨基或羥基等以避免互變異構(gòu)現(xiàn)象)以及存在時(shí)的互變異構(gòu)形式、尤其是其平衡狀態(tài)被涵蓋。例如，優(yōu)選為了穩(wěn)定性或化學(xué)可行性的原因，鏈中直接相鄰的原子優(yōu)選不選自氧基和氧基、硫代和氧基、氧基或硫代或硫代和硫代，除非存在足夠穩(wěn)定的環(huán)體系等。通過其一部分的O(例如在C1-C7-烷氧基中)或S連接的取代基優(yōu)選不與例如環(huán)中的氮連接。
鹽尤其為式I化合物的可藥用鹽。當(dāng)存在成鹽基團(tuán)如堿性或酸性基團(tuán)時(shí)，則可以形成鹽，它們可以以解離形式存在，至少是部分解離，例如在pH范圍為4-10的水溶液中，或者尤其可以以固體形式、尤其結(jié)晶形式分離。
此類鹽可以例如作為酸加成鹽、優(yōu)選與有機(jī)或無機(jī)酸、由具有堿性氮原子(例如亞氨基或氨基)的式I化合物形成，尤其是可藥用鹽。適當(dāng)?shù)臒o機(jī)酸為例如鹵酸如鹽酸、硫酸或磷酸。適合的有機(jī)酸為例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、乳酸、富馬酸、琥珀酸、檸檬酸、氨基酸如谷氨酸或門冬氨酸、馬來酸、羥基馬來酸、甲基馬來酸、苯甲酸、甲磺酸或乙磺酸、乙基-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘-二磺酸、N-環(huán)己基氨基磺酸、N-甲基-、N-乙基或N-丙基-氨基磺酸或其他有機(jī)質(zhì)子酸如抗壞血酸。
在負(fù)電荷基團(tuán)如羧基或磺酰基存在時(shí)，也可以與堿形成鹽，例如金屬鹽或銨鹽，如堿金屬或堿土金屬鹽，例如鈉、鉀、鎂或鈣鹽，或者與氨或適合的有機(jī)胺形成銨鹽，如叔單胺如三乙胺或三(2-羥基乙基)胺，或者雜環(huán)堿如N-乙基-哌啶或N，N′-二甲基哌嗪。
當(dāng)堿性基團(tuán)或酸性基團(tuán)存在于同一分子中時(shí)，式I化合物還可以形成內(nèi)鹽。
為分離或純化目的，也可能采用不可藥用鹽，例如苦味酸鹽或高鋁酸鹽。當(dāng)用于治療用途時(shí)，只能采用可藥用鹽或游離化合物(酌情包含在藥物制劑中)，所以它們是優(yōu)選的。
由于化合物游離形式及其鹽形式、包括那些可以例如在化合物或其鹽的純化或鑒定中用作中間體的鹽的密切聯(lián)系，如果沒有明確特別說明，在適當(dāng)?shù)那闆r下，當(dāng)在上下文中提及“化合物”、“原料”和“中間體”時(shí)，尤其是式I化合物或其前體時(shí)，可以理解為也指其一種或多種鹽，或者指相應(yīng)的游離化合物及其一種或多種鹽的混合物，它們每一種還應(yīng)包括式I化合物的任何溶劑合物、代謝前體如酯或酰胺，或者它們的任何一種或多種的鹽。可以得到不同的晶型，因此它們也包括在內(nèi)。
當(dāng)復(fù)數(shù)形式用于化合物、原料、中間體、鹽、藥物制劑、疾病、病癥等，則意味著表示一種(優(yōu)選)或多種單一的化合物、鹽、藥物制劑、疾病、病癥等，如果使用單數(shù)或不確定冠詞，則意味著包括復(fù)數(shù)(例如也包括相同化合物的不同構(gòu)型異構(gòu)體，例如外消旋體中的對(duì)映體等)或優(yōu)選單數(shù)(“一個(gè)”)。
根據(jù)取代基的選擇，本發(fā)明化合物可具有兩個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心。優(yōu)選的絕對(duì)構(gòu)型如本文中明確指定。然而，任何可能的分離的或純的非對(duì)映異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或幾何異構(gòu)體及其混合物、例如對(duì)映異構(gòu)體的混合物如外消旋體都包含在本發(fā)明中。
如上所述，本發(fā)明化合物為腎素活性的抑制劑，因此，可以用于治療高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、不穩(wěn)定型冠脈綜合癥、充血性心衰、心臟肥大、心肌纖維化、心肌梗塞后心肌病(cardiomyopathy postinfarction)、不穩(wěn)定型冠脈綜合癥、舒張功能不全、慢性腎病、肝纖維化、糖尿病導(dǎo)致的并發(fā)癥如腎病變、血管病變和神經(jīng)病變、冠狀血管疾病、血管成形術(shù)后再狹窄、眼內(nèi)壓升高、青光眼、血管生長(zhǎng)異常和/或高醛固酮癥(hyperaldosteronism)、和/或認(rèn)知損傷、阿爾茨海默氏病、癡呆、焦慮癥和認(rèn)知障礙等，尤其是需要抑制腎素活性(尤其是不適當(dāng)?shù)幕钚?的疾病。
“不當(dāng)”腎素活性優(yōu)選是指溫血?jiǎng)游?、尤其是人的狀態(tài)，其中腎素顯示了在特定狀態(tài)中過高的腎素活性(例如由于一種或多種調(diào)節(jié)不當(dāng)；過度表達(dá)，例如由于基因擴(kuò)增或染色體重排或微生物感染，如表達(dá)異?；虻牟《?；異?；钚?，例如導(dǎo)致錯(cuò)誤的底物特異性或例如以正常量產(chǎn)生的活性過強(qiáng)的腎素；腎素活性產(chǎn)物除去通路的過低活性、高底物濃度等)，和/或例如通過過高腎素活性導(dǎo)致或維持如上下文中所述的腎素依賴性疾病或病癥。此類不當(dāng)腎素活性可以例如包括高于正常的活性，或者正?；蛏踔恋陀谡７秶鷥?nèi)的活性，然而，由于前面、并行和/或后面的過程、例如對(duì)其他過程的信號(hào)、調(diào)節(jié)作用、較高的底物或產(chǎn)物濃度等而導(dǎo)致直接或間接支持或維持疾病或病癥，和/或以任何其他方式支持疾病或病癥發(fā)作和/或存在的活性。腎素的不當(dāng)活性可能依賴或可能不依賴并行的其他維持病癥或疾病的機(jī)制，和/或除腎素的抑制之外，預(yù)防或治療作用可能包括或不包括其他機(jī)制。因此，“依賴”可以稱為“尤其依賴”(尤其是在當(dāng)疾病或病癥確實(shí)排他性地僅依賴于腎素的情況)，優(yōu)選稱為“主要依賴于”，更優(yōu)選稱為“基本上僅依賴于”。依賴于腎素活性(尤其是不當(dāng)活性)的疾病或病癥還可能是僅響應(yīng)于腎素活性調(diào)節(jié)、尤其是在腎素抑制的情況下以有益方式響應(yīng)(例如血壓降低)的疾病。
當(dāng)提及依賴于腎素活性(尤其是不當(dāng)活性)的疾病或病癥時(shí)，如在下面段落的“使用”的定義中提及時(shí)，尤其是當(dāng)式I化合物被提及用于診斷或治療性治療、優(yōu)選為治療依賴于不當(dāng)腎素活性的疾病或病癥時(shí)，這優(yōu)選是指依賴于天然腎素和/或其一種或多種改變形式或突變形式的不當(dāng)活性的任何一種或多種疾病或病癥。
當(dāng)后面或以上提及術(shù)語(yǔ)“使用(或用途)”(作為動(dòng)詞或名詞)(涉及式I化合物或其可藥用鹽的用途，或其使用方法)時(shí)，它(如果沒有不同指明或在上下文中不同表述)分別(如果沒有另外說明)包括本發(fā)明下列實(shí)施方案的任何一個(gè)或多個(gè)如果沒有另外說明，在適當(dāng)?shù)那闆r下，在治療依賴于腎素活性(尤其是不當(dāng)活性)的疾病或病癥中的用途；在生產(chǎn)用于治療依賴于腎素活性(尤其是不當(dāng)活性)的疾病或病癥的藥物組合物中的用途；一種或多種式I化合物在治療依賴于腎素活性(尤其是不當(dāng)活性)的疾病或病癥中使用的方法；含有一種或多種式I化合物、用于治療依賴于腎素活性(尤其是不當(dāng)活性)的疾病或病癥的藥物制劑；和用于治療溫血?jiǎng)游?、尤其是人的疾病或病癥、優(yōu)選依賴于腎素活性(尤其是不當(dāng)活性)的疾病的一種或多種式I化合物。
術(shù)語(yǔ)“治療”是指對(duì)所述疾病或病癥、尤其上下文所述一種或多種疾病或病癥的預(yù)防性(例如延緩或防止疾病或病癥的發(fā)作)或優(yōu)選治療性(包括但不限于預(yù)防、延遲發(fā)作和/或進(jìn)程、減輕、治愈、癥狀緩解、癥狀減輕、患者狀況改善、腎素調(diào)節(jié)和/或腎素抑制)治療。
本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案 以下所述各組本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案并非是排他的，而是例如為了用更具體的定義代替一般性表達(dá)或符號(hào)，這些各組化合物中的一部分可以酌情采用以上給出的定義互換或交換，或省略，且彼此獨(dú)立的更具體的定義中的每一個(gè)可以獨(dú)立引入或者與用于其他更一般性表達(dá)或符號(hào)的一個(gè)或多個(gè)其他更具體的定義一起引入。
本發(fā)明優(yōu)選涉及式I、式II或式III化合物，其中部分R5以R構(gòu)型連接或者其中這些部分以S構(gòu)型連接。
因此，本發(fā)明更優(yōu)選涉及如上下文中所定義的式I、式II或式III化合物，其具有如下式IIA或IIB或者其(優(yōu)選可藥用)鹽所示的構(gòu)型
或者，如下式IIIA或IIIB或者其(優(yōu)選可藥用)鹽所示的構(gòu)型
其中在式IIA、IIB、IIIA和IIIB中，R1、R2、R3和R5如上下文對(duì)式I化合物所定義。
或者并且也更優(yōu)選，本發(fā)明涉及如上下文中所定義的式I或式III化合物，其具有如下式III’或者其(優(yōu)選可藥用)鹽所示的構(gòu)型
其中在式III’中，R1、R2、R3和R5如上下文中對(duì)式I化合物所定義。
或者并且也更優(yōu)選，本發(fā)明涉及如上下文中所定義的式I或式III化合物，其具有如下式III’A或式III’B或者其(優(yōu)選可藥用)鹽所示的構(gòu)型
其中在式III’A和III’B中，R1、R2、R3和R5如上下文中對(duì)式I化合物所定義。
在第一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R1為C1-7烷基，更優(yōu)選C1-4-烷基，其任選被C1-C7-烷氧基、更優(yōu)選C1-4-烷氧基取代。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1為未被取代的C1-7烷基。R1特別優(yōu)選的實(shí)例選自

和
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R2為氫、C1-C7-烷氧基或C1-C7-烷氧基-C1-C7-烷氧基；更優(yōu)選為氫、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷氧基-C1-C4-烷氧基。R2特別優(yōu)選的實(shí)例選自 氫、

和
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R2為氫或C1-C7-烷氧基；更優(yōu)選為氫或C1-C4-烷氧基。R2特別優(yōu)選的實(shí)例選自 氫、

和
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R3為C3-7烷基或C3-6-環(huán)烷基；更優(yōu)選為支鏈C4-6-烷基或環(huán)丙基。
R3特別優(yōu)選的實(shí)例為

和

在一個(gè)實(shí)施方案中，R3為環(huán)丙基。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R5為C1-5-烷基或C3-6-環(huán)烷基，更優(yōu)選為C1-4烷基或環(huán)己基。所述烷基可以是支鏈或通過非末端C連接。R5特別優(yōu)選的實(shí)例為

和
本發(fā)明的具體實(shí)施方案在實(shí)施例中提供，因此，本發(fā)明在非常優(yōu)選的實(shí)施方案中涉及涉及選自實(shí)施例中給出化合物的式I化合物或其鹽以及它們根據(jù)本發(fā)明的用途。
制備方法 式I化合物或其鹽尤其如PCT/EP06/012581中所述或類似于其中所述的方法制備，一般通過包括如下的方法制備 a)使式IV化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物，
其中PG為保護(hù)基團(tuán)且R4和R5如上所定義， 與式V化合物反應(yīng)，
其中R1、R2和R3如上所定義；或 b)使式VI化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物，
其中PG為保護(hù)基團(tuán)且R1、R2、R3和R4如上所定義， 與式VII化合物反應(yīng)，
其中R5如上所定義； 并且如有需要，在上述任何一個(gè)或多個(gè)方法完成后，將可得的式I化合物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為不同的式I化合物，將可得的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物或不同的鹽，將可得的游離式I化合物轉(zhuǎn)化為其鹽，和/或?qū)⒖傻玫氖絀化合物的異構(gòu)體混合物分離成單個(gè)異構(gòu)體； 其中在任何原料中，除所述特定保護(hù)基團(tuán)之外，可存在更多的保護(hù)基團(tuán)，并且在適當(dāng)?shù)碾A段去除任何保護(hù)基團(tuán)或所結(jié)合的樹脂以便獲得相應(yīng)的式I化合物或其鹽。
或者，式I化合物或其鹽一般通過包括以下的方法制備 使式(IXa)化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物，
其中PG為保護(hù)基團(tuán)，R4如上定義且R6為未取代或取代的烷基或鏈烯基，優(yōu)選為C1-C4烷基， 與式V化合物反應(yīng)，
其中R1、R2和R3如上所定義； 以獲得式Xa的酰胺，
將其酯部分水解以獲得式XIa化合物，
所述式XIa化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物又可與式VII化合物反應(yīng)，
其中R5如上所定義， 以獲得式XII化合物，
并且如有需要，在上述任何一個(gè)或多個(gè)方法完成后，將可得的式I化合物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為不同的式I化合物，將可得的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物或不同的鹽，將可得的游離式I化合物轉(zhuǎn)化為其鹽，和/或?qū)⒖傻玫氖絀化合物的異構(gòu)體混合物分離成單個(gè)異構(gòu)體； 其中在任何原料中，除所述特定保護(hù)基團(tuán)之外，可存在更多的保護(hù)基團(tuán)，并且在適當(dāng)?shù)碾A段去除任何保護(hù)基團(tuán)或所結(jié)合的樹脂以便獲得相應(yīng)的式I化合物或其鹽。
此外，式I化合物或其鹽可一般通過包括以下的方法制備 使式(IXb)化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物，
其中PG為保護(hù)基團(tuán)，R4如上定義且R6為未取代或取代的烷基或鏈烯基，優(yōu)選為C1-C4烷基， 與式VII化合物反應(yīng)，
其中R5如上所定義， 以獲得式Xb的酰胺，
將其酯部分水解以獲得式XIb化合物，
所述式XIb化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物又可與式V化合物反應(yīng)，
其中R1、R2和R3如上所定義， 以獲得式XII化合物，
并且如有需要，在上述任何一個(gè)或多個(gè)方法完成后，將可得的式I化合物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為不同的式I化合物，將可得的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物或不同的鹽，將可得的游離式I化合物轉(zhuǎn)化為其鹽，和/或?qū)⒖傻玫氖絀化合物的異構(gòu)體混合物分離成單個(gè)異構(gòu)體； 其中在任何原料中，除所述特定保護(hù)基團(tuán)之外，可存在更多的保護(hù)基團(tuán)，并且在適當(dāng)?shù)碾A段去除任何保護(hù)基團(tuán)或所結(jié)合的樹脂以便獲得相應(yīng)的式I化合物或其鹽。
在式IV、VI、IXa、IXb、XIa或XIb化合物的情況下，其活化衍生物為其中羧基的OH基團(tuán)優(yōu)選被離去基團(tuán)如鹵素、例如氯、溴或碘或有機(jī)磺酰氧基如對(duì)甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基替換的相應(yīng)化合物。然后，其此類活化衍生物與式V或VII化合物的反應(yīng)優(yōu)選在親核取代的標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，活化衍生物包括例如酰鹵、酸酐和活化酯?；罨楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的酯，例如N-琥珀酰亞胺。式IV、VI、IXa或IXb的羧酸的活化衍生物為例如所述酸與EDCI、BopCl或TcBocCl反應(yīng)后形成的相應(yīng)的中間體化合物。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，式IV、VI、IXa、IXb、XIa或XIb的活化衍生物為在Vilsmeier反應(yīng)條件下形成的相應(yīng)衍生物。
而且，用于制備式I化合物或其可藥用鹽的方法可包括 使式VIII化合物
其中PG為保護(hù)基團(tuán)， 與醇R6OH在手性胺催化劑的存在下反應(yīng)，其中R6為未取代或取代的烷基或鏈烯基，優(yōu)選為C1-C4烷基， 以獲得式VIII’a或VIII’b化合物。

胺的性質(zhì)決定酯形成的位置，因此決定立體選擇性。手性胺催化劑的優(yōu)選實(shí)例為手性叔胺，更優(yōu)選為金雞納生物堿類，如奎尼定和奎寧，更優(yōu)選為修飾的金雞納生物堿類。此類修飾的金雞納生物堿類的實(shí)例如下所示。更詳細(xì)的描述參見Tian，S.-K.；Chen，Y.；Hang，J.；Tang，L.；McDiad，P.；Deng，L.；Acc.Chem.Res.2004，37，621-631以及其中所引用的參考文獻(xiàn)。

DHQD(二氫奎尼定基) DHQ(二氫奎寧基)
DHQD-CLBDHQD-MEQ DHQD-PHN 1 23
(DHQD)2PYR(DHQD)2PHAL (DHQD)2AQN 4 56 縮寫 DHQD-CLB氫化奎尼定4-氯苯甲酸酯 DHQ-CLB 氫化奎寧4-氯苯甲酸酯 DHQD-MEQ氫化奎尼定4-甲基-2-喹啉基醚 DHQ-MEQ 氫化奎寧4-甲基-2-喹啉基醚 DHQD-PHN氫化奎尼定9-O-(9’-菲基)醚 DHQ-PHN 氫化奎寧9-O-(9’-菲基)醚 (DHQD)2PYR 氫化奎尼定2，5-二苯基-4，6-嘧啶二基二醚 (DHQ)2PYR 氫化奎寧2，5-二苯基-4，6-嘧啶二基二醚 (DHQD)2PHAL 氫化奎尼定1，4-酞嗪二基二醚 (DHQ)2PHAL 氫化奎寧1，4-酞嗪二基二醚 (DHQD)2AQN 氫化奎尼定蒽醌-1，4-二基二醚 (DHQ)2AQN氫化奎寧蒽醌-1，4-二基二醚 優(yōu)選的胺為DHQ如(DHQ)2AQN)，和DHQD如(DHQD)2AQN。
至于反應(yīng)條件，還可參考Tian，S.-K.等人。具體而言，手性胺催化劑通常采用低于等摩爾量，優(yōu)選低于50mol％，如5-40mol％，更優(yōu)選10-35mol％，最優(yōu)選30mol％。
醇R6OH為用于在式VIII化合物上酯化和在酰胺存在下水解的適合的醇，例如未取代或取代的烷基或鏈烯基，優(yōu)選為C1-C4烷基，其中取代的烷基優(yōu)選選自鹵素、芳基或取代的烷基，特別是氟或苯基。取代的烷基的實(shí)例包括三氟甲基、二氟甲基、二氟乙基、氟甲基、氟乙基或芐基。最優(yōu)選地，R6OH為甲醇。
反應(yīng)溶劑可如下所述選擇，特別優(yōu)選醚溶劑，如乙醚或四氫呋喃(THF)或它們的混合物，例如乙醚∶THF(4∶1)或(3∶1)。可選擇反應(yīng)溫度以使反應(yīng)以有效的方式完成，同時(shí)盡可能防止不需要副產(chǎn)物的形成。通常反應(yīng)溫度為-100～20℃，例如-80～10℃，優(yōu)選-40～0℃。
通過本領(lǐng)域已知的適合的重結(jié)晶技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)物VIII’a或VIII’b的分離。例如，可參考在Park，J.-S.Yeom，C.-E.Choi，S.H.Ahn，Y.S.Ro，S.Jeom，Y.H.Shin，D.-K.Kim，B.M.Tetrahedron Lett.2003，44，1611-1614和其中所引用參考文獻(xiàn)中所采用的重結(jié)晶方法。因此，可以采用手性胺，如α-苯乙胺。
流程1a和1b顯示了用于制備式II化合物的兩種優(yōu)選方法。應(yīng)注意，對(duì)于每種轉(zhuǎn)化的每一個(gè)箭頭的簡(jiǎn)單描述僅僅是用于說明目的，不應(yīng)視為對(duì)順序或每一個(gè)具體步驟的限定。
流程1a
流程1b
酯水解和脫保護(hù)可以根據(jù)本領(lǐng)域熟知的方法進(jìn)行，例如參考書如Richard C.Larock，“有機(jī)轉(zhuǎn)化概述官能團(tuán)制備指南”，第二版，Wiley-VCH Verlag GmbH，2000或T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有機(jī)合成的保護(hù)基團(tuán)”，第三版，Wiley，New York 1999中所述的方法；還可參見下面與保護(hù)和脫保護(hù)方法有關(guān)的文獻(xiàn)。
本發(fā)明包括所有可藥用的同位素標(biāo)記的式(I)化合物，其中一個(gè)或多個(gè)原子被具有相同原子數(shù)但原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同于通常在自然界中發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子取代。
適合于包含于本發(fā)明化合物中的同位素的實(shí)例包括氫如2H和3H、碳如11C、13C和14C、氯如36Cl、氟如18F、碘如123I和125I、氮如13N和15N、氧如15O、17O和18O、磷如32P和硫如35S。
用較重的同位素如氘即2H取代可以提供某些由更大的代謝穩(wěn)定性導(dǎo)致的治療優(yōu)勢(shì)，例如體內(nèi)半衰期增加或劑量需求減少，因此在某些情況中可以是優(yōu)選的。
同位素標(biāo)記的式(I)化合物通常可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)或通過類似于附加實(shí)施例和制備部分中所述的那些方法、使用適合的同位素標(biāo)記的試劑代替先前所用的未標(biāo)記的試劑而制備。
原料 在隨后原料(此術(shù)語(yǔ)也包括中間體)及其合成的描述中，如果沒有另外直接說明或沒有在上下文中說明，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和PG以上或者在各種原料或中間體的實(shí)施例中所述的含義。如果沒有特別指明，保護(hù)基團(tuán)可在適當(dāng)?shù)牟襟E中引入和除去從而防止官能團(tuán)在相應(yīng)的反應(yīng)步驟中發(fā)生不期望的反應(yīng)，保護(hù)基團(tuán)的應(yīng)用、引入和除去它們的方法如上下文中所述。本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地確定是否以及哪一種保護(hù)基團(tuán)是有用或者是需要的。
就任何原料而言，如果存在異構(gòu)體(例如非對(duì)映體、對(duì)映體)，則可以在適當(dāng)?shù)碾A段根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法將它們分離。
其他原料在本領(lǐng)域中是已知的、可得自商業(yè)和/或它們可在實(shí)施例中發(fā)現(xiàn)或者根據(jù)實(shí)施例的相似方法得到。
一般方法條件 以下一般(如果可能的話)適用于所有上下文中提到的方法，但是優(yōu)選上下文具體提及的反應(yīng)條件 在任何上下文中所述的反應(yīng)中，即使沒有特別說明，可以酌情或根據(jù)需要使用保護(hù)基團(tuán)對(duì)不期望參加給定反應(yīng)的官能團(tuán)進(jìn)行保護(hù)，并且它們可在適當(dāng)或需要的階段引入和/或除去。因此，無論何處本說明書中描述未具體提及保護(hù)和/或脫保護(hù)的反應(yīng)，也可能包括包括使用保護(hù)基團(tuán)的反應(yīng)。
在本公開的范圍內(nèi)，除非本文另有說明，只有不是特定所需式I終產(chǎn)物的組分的易于除去的基團(tuán)被稱為“保護(hù)基團(tuán)”或PG。用此類保護(hù)基團(tuán)保護(hù)官能團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)自身和適用于其引入和除去的反應(yīng)被描述于例如標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)中，例如J.F.W.McOmie，“有機(jī)化學(xué)的保護(hù)基團(tuán)”，PlenumPress，London和New York 1973；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有機(jī)合成的保護(hù)基團(tuán)”，第三版，Wiley，New York 1999；“肽化學(xué)”第3卷(編輯E.Gross和J.Meienhofer)，Academic Press，London和NewYork 1981；“有機(jī)化學(xué)方法”，Houben Weyl，第4版，第15/I卷，GeorgThieme Verlag，Stuttgart 1974；H.-D.Jakubke和H.Jeschkeit，“氨基酸、肽和蛋白質(zhì)”，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach和Basel 1982；以及Jochen Lehmann，“碳水化合物單糖及其衍生物”，Georg ThiemeVerlag，Stuttgart 1974。保護(hù)基團(tuán)的特征在于它們可易于除去(即沒有不需要的二級(jí)反應(yīng)發(fā)生)，例如通過溶劑解、還原、光解或者在生理?xiàng)l件(例如通過酶裂解)下。
保護(hù)基團(tuán)或PG、特別是對(duì)氮如本文所述的化合物的哌啶氮的保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例為烷氧基羰基、磺?；王；?。優(yōu)選的保護(hù)基團(tuán)包括例如(i)C1-C2-烷基，它被苯基單-、二-或三取代，如芐基(或)二苯甲基或三苯甲基，其中苯基環(huán)為未取代的或被一個(gè)或多個(gè)、例如2個(gè)或3個(gè)殘基取代，例如選自下組的基團(tuán)C1-C7-烷基、羥基、C1-C7-烷氧基、鹵素、硝基、氰基和CF3；苯基-C1-C2-烷氧基羰基；和烯丙基或肉桂基。尤其優(yōu)選低級(jí)(例如C1-C7)烷氧基羰基，如叔丁氧基羰基或芐氧基羰基；芐氧基羰基(Cbz)、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、芐氧基甲基(BOM)、新戊?；?氧基-甲基(POM)、三氯乙氧基羰基(Troc)、1-金剛烷基氧基羰基(Adoc)，但是也可以為芐基、異丙苯基(cumyl)、二苯甲基、三苯甲基、烯丙基、alloc(烯丙基氧基羰基)。保護(hù)基團(tuán)也可以為甲硅烷基、例如三烷基甲硅烷基，尤其是三甲基甲硅烷基、叔丁基-二甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三異丙基甲硅烷基、三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)，也可以為取代的磺?；蛉〈膩喕酋；?。最優(yōu)選低級(jí)(例如C1-C7)烷氧基羰基，如叔-丁氧基羰基。保護(hù)基團(tuán)也可以為磺?；?，優(yōu)選芳基磺酰基，如取代的或未取代的苯基磺?；?。在此情況下，苯基如果是被取代的，則它可以為單-、二-或三-取代的，優(yōu)選被下列適合的基團(tuán)單-或二-取代如C1-C7-烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基，更優(yōu)選硝基或甲基?；酋；Ｗo(hù)基團(tuán)特別優(yōu)選的實(shí)例為2，4-二硝基苯基磺酰基、4-硝基苯基磺酰基、2-硝基苯基磺酰基和4-甲基苯基磺?；?。
所有上述方法步驟可以在本身已知的反應(yīng)條件下進(jìn)行，優(yōu)選那些特別提及的條件，不存在或通常存在溶劑或稀釋劑，優(yōu)選對(duì)所用試劑惰性并溶解它們的溶劑或稀釋劑，不存在或存在催化劑、縮合劑或中和劑，例如離子交換劑如陽(yáng)離子交換劑，例如H+型的，取決于反應(yīng)和/或反應(yīng)物的性質(zhì)，在降低、正?；蛏邷囟?、例如溫度范圍為約-100℃至約190℃，優(yōu)選為約-80℃至約150℃，例如-80℃至-60℃，于室溫，于-20℃至40℃或于回流溫度，在大氣壓下或在密閉的容器、酌情在壓力下，和/或在惰性氣氛下，例如在氬氣或氮?dú)鈿夥障隆?br> 除非在方法描述中另外說明，否則可以從中選擇那些適用于任意特定反應(yīng)的溶劑的溶劑，包括那些特別提及的溶劑，或者例如水；酯類，如低級(jí)烷基-低級(jí)烷酸酯，如乙酸乙酯；醚類，如脂族醚，如乙醚，或環(huán)醚，例如四氫呋喃或二氧六環(huán)；液體芳族烴類，如苯或甲苯；醇類，如甲醇、乙醇或1-或2-丙醇；腈類，如乙腈；鹵代烴類，如二氯甲烷或氯仿；酰胺類，如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺；堿類，如雜環(huán)氮堿，例如吡啶或N-甲基吡咯烷-2-酮；羧酸酐類，如低級(jí)鏈烷酸酐，例如乙酸酐；環(huán)狀、直鏈或支鏈烴類，如環(huán)己烷、己烷或異戊烷；或者這些溶劑的混合物，例如水溶液。此類溶劑混合物也可以用于例如通過色譜法或分配的處理過程中。
本發(fā)明還涉及這些方法的一些形式，其中在任何方法階段作為中間體獲得的化合物被用作原料，并進(jìn)行其余的方法步驟，或其中起始原料在反應(yīng)條件下形成或以衍生物形式、如被保護(hù)形式或鹽的形式使用，或者根據(jù)本發(fā)明方法可獲得的化合物在一定的方法條件下生成并進(jìn)一步原位加工。在本發(fā)明的方法中，優(yōu)選使用那些能產(chǎn)生所述優(yōu)選式I化合物的原料。特別優(yōu)選那些與實(shí)施例中所述相同或相似的反應(yīng)條件。本發(fā)明還涉及本文中所述的新原始化合物和中間體，尤其是那些能產(chǎn)生新式I化合物或本文中優(yōu)選提及的式I化合物的原始化合物和中間體。
藥物應(yīng)用、藥物制劑和方法 如上所述，式I化合物為腎素活性抑制劑，因而可用于治療高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、不穩(wěn)定型冠脈綜合征、充血性心衰、心肌肥大、心肌纖維化、心肌梗塞后心肌病、不穩(wěn)定型冠脈綜合征、舒張功能不全、慢性腎病、肝纖維化、糖尿病導(dǎo)致的并發(fā)癥如腎病變、血管病變和神經(jīng)病變、冠狀血管疾病、血管成形術(shù)后再狹窄、眼內(nèi)壓升高、青光眼、血管生長(zhǎng)異常和/或高醛固酮癥、和/或認(rèn)知損傷、阿爾茨海默氏病、癡呆、焦慮癥和認(rèn)知障礙等。尤其優(yōu)選高血壓，至少作為待治療疾病的一個(gè)組分，即可以治療(預(yù)防性和/或治療性)單獨(dú)的或與一或多種(尤其是上述)其他疾病組合的高血壓。
本發(fā)明進(jìn)一步提供藥物組合物，包含治療有效量的藥理學(xué)活性的式I化合物單獨(dú)或與一種或多種可藥用載體的組合。
根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物是適用于對(duì)哺乳動(dòng)物、包括人腸內(nèi)如口服或直腸、透皮和胃腸外施用的那些，以抑制腎素活性，用于治療與腎素活性(尤其是不當(dāng)腎素活性)有關(guān)的病癥。此類病癥包括高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、不穩(wěn)定型冠脈綜合征、充血性心衰、心肌肥大、心肌纖維化、心肌梗塞后心肌病、不穩(wěn)定型冠脈綜合征、舒張功能不全、慢性腎病、肝纖維化、糖尿病導(dǎo)致的并發(fā)癥如腎病變、血管病變和神經(jīng)病變)、冠狀血管疾病、血管成形術(shù)后再狹窄、眼內(nèi)壓升高、青光眼、血管生長(zhǎng)異常和/或高醛固酮癥、和/或認(rèn)知損傷、阿爾茨海默氏病、癡呆、焦慮癥和認(rèn)知障礙等。尤其優(yōu)選包含高血壓的疾病，更尤其是高血壓本身，其中采用藥物組合物的治療或式I化合物的使用在預(yù)防上和/或(優(yōu)選)治療上是有用的。
所以，藥理學(xué)活性的式I化合物可用于制備包含其治療有效量連同或混合有適合于腸內(nèi)或胃腸外施用的賦形劑或載體的藥物組合物。優(yōu)選片劑和明膠膠囊，它們含有活性成分以及 a)稀釋劑，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素和/或甘氨酸 b)潤(rùn)滑劑，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、其鎂鹽或鈣鹽和/或聚乙二醇；對(duì)于片劑，還可含有 c)粘合劑，例如硅酸鎂鋁、淀粉糊劑、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯基吡咯烷酮；如有需要，還可以含有 d)崩解劑，例如淀粉、瓊脂、海藻酸或其鈉鹽或泡騰混合物；和/或 e)吸收劑、著色劑、調(diào)味劑和增甜劑。
注射用組合物優(yōu)選等滲水溶液或混懸液，栓劑最好由脂肪乳或混懸液制備。
所述組合物可以是滅菌的和/或含有佐劑，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑或乳化劑、溶液促進(jìn)劑、用于調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑。另外，它們也可以含有其它有治療價(jià)值的物質(zhì)。所述組合物可以分別根據(jù)常規(guī)的混和、制粒或包衣方法制備，且含有約0.1-75％、優(yōu)選約1-50％活性成分。
透皮應(yīng)用的適合制劑包括治療有效量的本發(fā)明化合物和載體。有益的載體包括可吸收的藥理學(xué)上可接受的溶劑，以幫助穿透宿主皮膚。從特性上講，透皮裝置為繃帶的形式，包括被襯(backing member)、含有化合物以及任選載體的儲(chǔ)庫(kù)、任選的在延長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)以受控和預(yù)定的速度將化合物傳遞通過宿主皮膚的控速屏障、將本裝置固定于皮膚的裝置。
因此，本發(fā)明提供如上所述的用于治療由腎素活性介導(dǎo)病癥的藥物組合物，所述病癥優(yōu)選高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、不穩(wěn)定型冠脈綜合征、充血性心衰、心肌肥大、心肌纖維化、心肌梗塞后心肌病、不穩(wěn)定型冠脈綜合征、舒張功能不全、慢性腎病、肝纖維化、糖尿病導(dǎo)致的并發(fā)癥如腎病變、血管病變和神經(jīng)病變、冠狀血管疾病、血管成形術(shù)后再狹窄、眼內(nèi)壓升高、青光眼、血管生長(zhǎng)異常和/或高醛固酮癥、和/或認(rèn)知損傷、阿爾茨海默氏病、癡呆、焦慮癥和認(rèn)知障礙，以及其使用的方法。
藥物組合物可以含有治療有效量的如本文所定義的式I化合物，單獨(dú)或者與另一種治療劑組合，例如，各自在本領(lǐng)域報(bào)道的有效治療劑量。此類治療劑包括 a)抗糖尿病藥物，如胰島素、胰島素衍生物和模擬物；胰島素促分泌素，如磺酰脲類，例如格列吡嗪、格列本脲和Amaryl；促胰島素的磺酰脲受體配體，如格列奈類，如那格列奈和瑞格列奈；過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)配體；蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制劑如PTP-112；GSK3(糖原合酶激酶-3)抑制劑如SB-517955、SB-4195052、SB-216763、NN-57-05441和NN-57-05445；RXR配體如GW-0791和AGN-194204；鈉-依賴型葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制劑如T-1095；糖原磷酸化酶A抑制劑如BAYR3401；雙胍類，如二甲雙胍；α-葡糖苷酶抑制劑，如阿卡波糖；GLP-1(胰高血糖素樣肽-1)、GLP-1類似物，如Exendin-4和GLP-1模擬物；和DPPIV(二肽基肽酶IV)抑制劑，如LAF237； b)降血脂藥物，如3-羥基-3-甲基-戊二酰基輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，例如洛伐他汀、匹伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、西立伐他汀、美伐他汀、velostatin、氟伐他汀、達(dá)伐他汀、阿托伐他汀、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)和雷伐他汀(rivastatin)；鯊烯合酶抑制劑；FXR(類法尼醇X受體)和LXR(肝X受體)配體；考來烯胺；貝特類；煙酸和阿司匹林； c)減肥藥，如奧利司他；和 d)抗高血壓藥物，例如，髓袢利尿劑，如依他尼酸、呋塞米和托塞米；血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑，如貝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、莫西普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利和群多普利；Na-K-ATP酶膜泵抑制劑，如地高辛；中性肽鏈內(nèi)切酶(NEP)抑制劑；ACE/NEP抑制劑，如奧馬曲拉(omapatrilat)、山帕曲拉(sampatrilat)和法西多曲；血管緊張素II拮抗劑，如坎地沙坦、依普沙坦(eprosartan)、厄貝沙坦、氯沙坦、替米沙坦和纈沙坦，特別是纈沙坦；β-腎上腺素能受體阻斷劑，如醋丁洛爾、阿替洛爾、倍他洛爾、比索洛爾、美托洛爾、納多洛爾、普萘洛爾、索他洛爾和噻嗎洛爾；影響收縮力的藥物(inotropicagent)，如地高辛、多巴酚丁胺和米力農(nóng)；鈣通道阻滯劑，如氨氯地平、芐普地爾、地爾硫卓、非洛地平、尼卡地平、尼莫地平、硝苯地平、尼索地平和維拉帕米；醛固酮受體拮抗劑；和醛固酮合酶抑制劑。
其它具體的抗糖尿病化合物由Patel Mona描述于Expert Opin InvestigDrugs，2003，12(4)，623-633的附

圖1至7。式I化合物與其它活性成分可以同時(shí)施用或在其之前或之后施用，可以以相同或不同的施用途徑分別施用，或者在相同的藥物制劑中一起施用。
由代碼、通用名或商品名加以識(shí)別的治療劑的結(jié)構(gòu)可以得自現(xiàn)行版的“默克索引”標(biāo)準(zhǔn)目錄，或者得自數(shù)據(jù)庫(kù)，例如Patents International(例如IMS World Publications)。
因此，本發(fā)明提供藥用產(chǎn)品或組合物，包含單獨(dú)的或與治療有效量的另一種治療劑組合的治療有效量的式I化合物，所述另一種治療劑優(yōu)選選自抗糖尿病藥物、降血脂藥物、減肥藥或抗高血壓藥物，最優(yōu)選如上所述的抗糖尿病藥物、抗高血壓藥物和降血脂藥物。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及用作藥物的如上所述的藥物組合物。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及如上所述的藥物組合物或組合在制備用于治療由腎素活性(特別是不當(dāng)腎素活性)介導(dǎo)的病癥的藥物中的用途，所述病癥優(yōu)選高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、不穩(wěn)定型冠脈綜合征、充血性心衰、心肌肥大、心肌纖維化、心肌梗塞后心肌病、不穩(wěn)定型冠脈綜合征、舒張功能不全、慢性腎病、肝纖維化、糖尿病導(dǎo)致的并發(fā)癥如腎病變、血管病變和神經(jīng)病變、冠狀血管疾病、血管成形術(shù)后再狹窄、眼內(nèi)壓升高、青光眼、血管生長(zhǎng)異常和/或高醛固酮癥、和/或認(rèn)知損傷、阿爾茨海默氏病、癡呆、焦慮癥和認(rèn)知障礙等。
所以，本發(fā)明還涉及用作藥物的式I化合物、涉及式I化合物在制備用于預(yù)防和/或治療由腎素活性(特別是不當(dāng)腎素活性)介導(dǎo)的病癥的藥物組合物中的用途、涉及用于由腎素活性(特別是不當(dāng)腎素活性)介導(dǎo)的病癥的藥物組合物，所述組合物包含式I化合物或其可藥用鹽以及可藥用的稀釋劑或載體材料。
本發(fā)明進(jìn)一步提供用于預(yù)防和/或治療由腎素活性(特別是不當(dāng)腎素活性)介導(dǎo)的病癥的方法，它包括對(duì)需要此類治療的溫血?jiǎng)游铩⒂绕涫侨耸┯弥委熡行Я康氖絀化合物。
用于約50-70kg的哺乳動(dòng)物的單位劑量可以含有約1mg至1000mg之間、最好在約5-600mg之間的活性成分?；钚曰衔锏闹委熡行┝咳Q于溫血?jiǎng)游锏姆N類(尤其是哺乳動(dòng)物，更尤其是人類)、體重、年齡和個(gè)體情況，也取決于施用模式以及所涉及的化合物。
根據(jù)前述，本發(fā)明還提供了例如用于本文中所定義的任何方法的、含有治療組合的藥用產(chǎn)品，例如試劑盒、藥盒(kit of parts)，所述產(chǎn)品包含式I化合物或其可藥用鹽，與至少一種包含至少另一種治療劑的藥物組合物并行或順序使用，所述另一種治療劑優(yōu)選選自抗糖尿病藥物、降血脂藥物、減肥藥或抗高血壓藥物。該試劑盒可以含有用于其施用的說明書。
類似地，本發(fā)明提供了藥盒，它包括(i)含有根據(jù)本發(fā)明的式I化合物的藥物組合物；和(ii)含有選自抗糖尿病藥物、降血脂藥物、減肥藥、抗高血壓藥物的化合物或其可藥用鹽的藥物組合物，為組分(i)和(ii)的兩種分立單元形式。
同樣，本發(fā)明提供了如上文所定義的方法，該方法包括共同施用、例如并行或順序施用治療有效量的式I化合物或其可藥用鹽和至少一種第二藥物，所述第二藥物優(yōu)選為抗糖尿病藥物、降血脂藥物、減肥藥或抗高血壓藥物，例如如上所述的那些藥物。
優(yōu)選本發(fā)明化合物施用于有需要的哺乳動(dòng)物。
優(yōu)選本發(fā)明化合物用于治療對(duì)響應(yīng)于腎素活性(特別是不當(dāng)腎素活性)調(diào)節(jié)的疾病，尤其是一種或多種上述特定疾病。
最后，本發(fā)明提供了方法或用途，其包括施用式I化合物與治療有效量的抗糖尿病藥物、降血脂藥物、減肥藥或抗高血壓藥物的組合。
最后，本發(fā)明提供了方法或用途，其包括施用如本文所述藥物組合物形式的式I化合物。
化合物的上述性質(zhì)可通過體外和體內(nèi)試驗(yàn)證明，有利地采用哺乳動(dòng)物，例如小鼠、大鼠、兔、犬、猴，或者分離的器官、組織及其制品。所述化合物可以在體外以溶液的形式、例如優(yōu)選水溶液使用，也可以在體內(nèi)經(jīng)腸內(nèi)、胃腸外、有利地靜脈內(nèi)應(yīng)用，例如以混懸液或水溶液的形式。體外濃度范圍可在約10-3摩爾至10-10摩爾濃度之間。體內(nèi)的治療有效量的范圍取決于施用途徑，在約0.001至500mg/kg之間，優(yōu)選在約0.1至100mg/kg之間。
如上所述，本發(fā)明化合物具有酶抑制性質(zhì)。特別是，它們抑制天然酶腎素的作用。腎素通過腎臟進(jìn)入血液，在血液中它使血管緊張素原裂解，釋放十肽血管緊張素I，然后十肽血管緊張素I在肺、腎和其它器官中裂解為八肽血管緊張素II。該八肽能夠通過動(dòng)脈血管收縮直接升高血壓，并通過自腎上腺釋放鈉離子保留激素醛固酮間接升高血壓，同時(shí)伴隨著細(xì)胞外液體積增加，該增加有助于血管緊張素II的作用。腎素酶活性的抑制劑導(dǎo)致血管緊張素I的形成減少，結(jié)果產(chǎn)生的血管緊張素II的量也較少?；钚噪募に氐臐舛葴p少是腎素抑制劑降低血壓效果的直接原因。
腎素抑制劑的作用可通過體外試驗(yàn)的方法、尤其在實(shí)驗(yàn)上進(jìn)行證明，在各種系統(tǒng)(人血漿、純化的人腎素以及合成或天然的腎素底物)中測(cè)定的血管緊張素I的形成減少。
尤其可以采用下列體外試驗(yàn) 1)在含有0.05M NaCl、0.5mm EDTA和0.05％CHAPS的0.1MTris-HCl緩沖液(pH 7.4)中，將7.5nM濃度的重組人腎素(采用標(biāo)準(zhǔn)方法在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中表達(dá)并純化)與各種濃度的測(cè)試化合物于室溫孵育1小時(shí)。加入合成肽底物Arg-Glu(EDANS)-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile_His_Thr-Lys(DABCYL)-Arg9，使其終濃度為2μM，在微量培養(yǎng)板分光-熒光儀中，記錄350nM的激發(fā)波長(zhǎng)和500nM的發(fā)射波長(zhǎng)時(shí)的熒光增強(qiáng)。以腎素活性的抑制百分率作為測(cè)試化合物濃度的函數(shù)計(jì)算IC50值(熒光共振能量轉(zhuǎn)移分析，F(xiàn)RET測(cè)定法)。在本測(cè)定法中，式I化合物優(yōu)選可顯示范圍在1nM-20μM之間的IC50值。
2)或者，在含有0.05M NaCl、0.5mm EDTA和0.05％CHAPS的0.1MTris-HCl緩沖液(pH 7.4)中，將0.5nM濃度的重組人腎素(采用標(biāo)準(zhǔn)方法在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中表達(dá)并純化)與各種濃度的測(cè)試化合物于37℃孵育2小時(shí)。加入合成肽底物Arg-Glu(EDANS)-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile_His_Thr-Lys(DABCYL)-Arg9，使其終濃度為4μM，在微量培養(yǎng)板分光-熒光儀中，記錄340nM的激發(fā)波長(zhǎng)和485nM的發(fā)射波長(zhǎng)時(shí)的熒光增強(qiáng)。以腎素活性的抑制百分率作為測(cè)試化合物濃度的函數(shù)計(jì)算IC50值(熒光共振能量轉(zhuǎn)移分析，F(xiàn)RET測(cè)定法)。在本測(cè)定法中，式I化合物優(yōu)選可顯示范圍在1nM-20μM之間的IC50值。
3)在另一種測(cè)定法中，在含有0.05M NaCI、0.5mm EDTA和0.025％(w/v)CHAPS的0.1M Tris-HCI緩沖液(pH 7.4)中，將加入0.8nM濃度的重組人腎素(采用標(biāo)準(zhǔn)方法在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中表達(dá)并純化)的人血漿與各種濃度的測(cè)試化合物于37℃孵育2小時(shí)。加入合成肽底物Ac-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile-His-Asn-Lys-[DY-505-X5]，使其終濃度為2.5μM。加入過量的阻斷抑制劑終止酶反應(yīng)。通過毛細(xì)管電泳分離反應(yīng)產(chǎn)物，通過分光光度法于505nM波長(zhǎng)處定量。以腎素活性的抑制百分率作為測(cè)試化合物濃度的函數(shù)計(jì)算IC50值。在本測(cè)定法中，式I化合物優(yōu)選可顯示范圍在1nM-20μM之間的IC50值。
4)在另一種測(cè)定法中，在含有0.05M NaCI、0.5mm EDTA和0.025％(w/v)CHAPS的0.1M Tris-HCI緩沖液(pH 7.4)中，將0.8nM濃度的重組人腎素(采用標(biāo)準(zhǔn)方法在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中表達(dá)并純化)與各種濃度的測(cè)試化合物于37℃孵育2小時(shí)。加入合成肽底物Ac-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile-His-Asn-Lys-[DY-505-X5]，使其終濃度為2.5μM。加入過量的阻斷抑制劑終止酶反應(yīng)。通過毛細(xì)管電泳分離反應(yīng)產(chǎn)物，通過分光光度法于505nM波長(zhǎng)處定量。以腎素活性的抑制百分率作為測(cè)試化合物濃度的函數(shù)計(jì)算IC50值。在本測(cè)定法中，式I化合物優(yōu)選可顯示范圍在1nM-20μM之間的IC50值。
在缺乏鹽的動(dòng)物中，腎素抑制劑能夠使得血壓降低。人腎素可能與其它物種的腎素不同。為了測(cè)試人類腎素抑制劑，可以采用靈長(zhǎng)類、例如絨猴(絨毛猴(Callithrix jacchus))，因?yàn)槿祟惸I素與靈長(zhǎng)類腎素的酶活性域基本同源。尤其可以采用下列體內(nèi)試驗(yàn) 式I化合物可以如文獻(xiàn)中所述在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中體內(nèi)試驗(yàn)(參見例如Schnell CR等人，“采用遙測(cè)術(shù)測(cè)定清醒、未受限絨猴的血壓和心率”，Am J Physiol 264(Heart Circ Physiol 33).19931509-1516；或Schnell CR等人，“采用遙測(cè)術(shù)測(cè)定清醒、不受限絨猴的血壓、心率、體溫、ECG和活動(dòng)”，第五屆FELASA研討會(huì)文集Welfare and Science.編輯BRIGHTON.1993)。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，新化合物除了是有效的腎素抑制劑之外，還顯示改善的生物利用度。生物利用度優(yōu)選等于或高于20％，更優(yōu)選等于或高于30％。生物利用度可如下測(cè)定。
在埋植有頸靜脈插管的雄性Sprague-Dawley大鼠中研究化合物的藥動(dòng)學(xué)特征?；衔镆?.5％甲基纖維水溶液口服施用或以N-甲基吡咯烷酮-PEG200(10∶90，v/v)靜脈內(nèi)施用。代表性劑量分別為6mg/kg p.o.和2mg/kgi.v.。在不同時(shí)間點(diǎn)通過靜脈插管連續(xù)采集血樣到肝素化管，直到給藥后32小時(shí)，然后離心分離血漿。在用乙腈萃取后，通過液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定本發(fā)明所述化合物的血漿濃度。
采用非室模型方法計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
縮寫 Boc 叔-丁氧基羰基 BopCl雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酸氯 CAN 硝酸鈰銨(IV) DMF N，N-二甲基甲酰胺 DMSO 二甲亞砜 EDCI.HCl 1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 Et 乙基 EtOAc乙酸乙酯 h小時(shí) HOAT 1-羥基-7-氮雜苯并三唑 mL 毫升 Me 甲基 MS 質(zhì)譜法 NMP N-甲基吡咯烷酮 Ph 苯基 i-Pr 異丙基 RT 室溫 TcBocCl 氯甲酸2，2，2-三氯-1，1-二甲基乙酯 TFA 三氟乙酸 THF 四氫呋喃 TLC 薄層色譜法 tR 保留時(shí)間 溫度以攝氏度測(cè)定。除非另有說明，反應(yīng)于RT進(jìn)行。除非另有說明，H2存在下的氫化反應(yīng)在大氣壓下進(jìn)行。使用“Biotage Initiator 60”設(shè)備進(jìn)行微波照射。
HPLC條件-A 柱CombiScreen ODS-AM，50×4.6mm。
流速2.0mL/min 流動(dòng)相A)TFA/水(0.1/100，v/v)，B)TFA/乙腈(0.1/100，v/v) 梯度線性梯度，5％B至100％B 5min，然后100％B 2min 檢測(cè)于215nm UV檢測(cè) HPLC條件-B 柱ACQUITY UPLCTM BEH C181.7μm，50×2.1mm。
流速0.5mL/min 流動(dòng)相A)TFA/水(0.1/100，v/v)，B)TFA/乙腈(0.1/100，v/v) 梯度5％B 0.5min，然后線性梯度5％B至100％B 1.5min，然后100％B1.0min 檢測(cè)于215nm UV檢測(cè) HPLC條件-C 柱ACQUITY UPLCTM BEH C181.7μm，50×2.1mm. 流速0.5mL/min 流動(dòng)相A)TFA/水(0.1/100，v/v)，B)TFA/乙腈(0.1/100，v/v) 梯度5％B 0.5min，然后線性梯度5％B至100％B 5.0min，然后100％B1.5min 檢測(cè)于215nm UV檢測(cè) TLC條件測(cè)量TLC的Rf值，5×10cm TLC板，硅膠F254，Merck，Darmstadt，德國(guó)。
以下詳細(xì)描述用于制備式I化合物的方法。應(yīng)注意，對(duì)于每種轉(zhuǎn)化的每一個(gè)箭頭上的簡(jiǎn)單描述僅僅用于說明目的，不應(yīng)理解為是對(duì)順序或每個(gè)單獨(dú)步驟的限定。
流程1a
流程1b
流程2
流程3(在流程圖1a和1b中作為原料所示的環(huán)酐的制備)
A吡啶-3，5-二甲酸二甲酯
將含3，5-吡啶二甲酸(1.5g，63mmol)和濃H2SO4(0.9mL)的MeOH(15mL)在微波爐中于120℃加熱2小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，得到殘?jiān)?，將其在乙酸乙酯和碳酸氫鈉飽和水溶液之間分配。有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到淺黃色固體。
MS(LC-MS)196[M+H]+·TLC，Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)＝0.56。
B哌啶-3，5-二甲酸二甲酯
將含吡啶-3，5-二甲酸二甲酯(5.3g，27mmol)和Rh/PtO2(0.5g)的MeOH(200mL)在氫氣下攪拌過夜。將所得混合物過濾，蒸發(fā)溶劑，得到棕色油。MS(LC-MS)202[M+H]+。
C哌啶-1，3，5-三甲酸1-叔丁酯3，5-二甲酯
將哌啶-3，5-二甲酸二甲酯(5.4g，26.8mmol)在CH2Cl2(55mL)中的溶液用Boc2O(6.4g，29.5mmol)處理，于室溫將反應(yīng)物攪拌過夜。將反應(yīng)用0.1NHCl水溶液淬滅，有機(jī)相用0.1N HCl水溶液洗滌。合并的有機(jī)相用CH2Cl2/MeOH(9/1)萃取2次，然后將合并的有機(jī)相通過Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)。所得的殘?jiān)?jīng)硅膠快速色譜法(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 95∶5)純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體。MS(LC-MS)302[M+H]+。TLC，Rf(CH2Cl2/MeOH 95∶5)＝0.5。
D哌啶-1，3，5-三甲酸1-叔丁酯
向哌啶-1，3，5-三甲酸1-叔丁酯3，5-二甲酯(6.8g，22.5mmol)在MeOH/水(4∶1，120mL)中的溶液加入K2CO3(9.4g，68mmol)。將反應(yīng)混合物在回流下攪拌過夜。蒸發(fā)MeOH，殘?jiān)枚燃淄楹?N HCl水溶液萃取。有機(jī)相通過Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到淺黃色固體。MS(LC-MS)274[M+H]+。
E2，4-二氧代-3-氧雜-7-氮雜-雙環(huán)[3.3.1]壬烷-7-甲酸叔丁酯
將哌啶-1，3，5-三甲酸1-叔丁酯(1g，3.6mmol)在乙酸酐(20mL)中的懸浮液于回流下加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物與甲苯一起蒸發(fā)三次，然后將其于室溫、高真空干燥過夜，得到黃色固體。MS(LC-MS)278[M+Na]+。
(3S，5R)-原料-F
于80℃向(3S，5R)-原料-F(67％ee)(47g，162mmol)在熱EtOH(162mL)中的溶液加入(S)-(-)-1-苯乙胺(20.6mL，162mmol)。將溶液冷卻至室溫，將其放置過夜，得到鹽的沉淀。過濾收集該鹽。在EtOH中的相同重結(jié)晶過程重復(fù)三次后，將所得的鹽溶于水，用5N和1N HCl酸化，用AcOEt萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在減壓下濃縮，得到(3S，5R)-原料-F無色晶體；ES-MSM+H＝288BtRet＝2.67min。手性HPLC(柱CHIRALPAH AD-H(0.46cm×25cm)，洗脫劑己烷/i-PrOH/0.1％TFA＝95/5，流速0.5mL/min，檢測(cè)UV 210nM，溫度rt)tR＝37min。
(3S，5R)-原料-F(98％ee)
于-40℃，向N2下的原料-E(401.5mg，1.57mmol)和商業(yè)可得的(DHQD)2AQN(423.6mg，0.47mmol，95％純度)a在Et2O(60mL)和THF(20mL)中的溶液加入MeOH(0.64mL，15.67mmol)。于此溫度下攪拌24小時(shí)后，加入檸檬酸飽和水溶液。將反應(yīng)混合物用EA萃取。有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，經(jīng)硅膠色譜法，得到(3S，5R)-原料-F(98％ee)，為白色無定形物。ES-MSM+H-tBu＝232HPLCCtRet＝2.73min。手性HPLC(柱CHIRALPAH AD-H(0.46cm×25cm)，洗脫劑己烷/i-PrOH＝95/5，流速0.5mL/min，檢測(cè)UV 210nM，溫度室溫)(3R，5S)-原料-F的tR＝33.25min，(3S，5R)-原料-F為35.56min。
aChen，Y.Tian，S-K.Deng，Li.J.Am.Chem.Soc.2000，122，9542-9543。
(3R，5S)-原料-F
于70℃、向(3R，5S)-原料-F(72％ee)(4.2g，14.6mmol)在熱EtOH(20mL)中的溶液加入(R)-1-苯乙胺(1.79g，14.76mmol)。將溶液冷卻至室溫，將其放置1小時(shí)，得到鹽的沉淀。過濾收集該鹽。相同的重結(jié)晶過程重復(fù)三次后，將所得鹽溶于水，用1M HCl水溶液酸化，用乙醚萃取五次。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在減壓下濃縮，得到(3R，5S)-原料-F無色晶體；ES-MSM+H＝288BtRet＝2.67min。手性HPLCAD-H，5％i-PrOH/己烷，流速0.5mL/min，210nM，tRet＝33(主要成分)，36(次要成分)。
(3R，5S)-原料-F(72％ee)
于0℃、N2下向原料-E(200mg，0.78mmol)在THF(10mL)和乙醚(30mL)中的溶液加入(DHQ)2AQN(67mg，0.08mmol)和MeOH(0.32mL)。將所得混合物于0℃攪拌5小時(shí)。加入1M HCl水溶液后，用EtOAc萃取混合物。有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在減壓下濃縮，硅膠快速色譜法得到(3R，5S)-原料-FES-MSM+H＝288CtRet＝2.67min。手性HPLC72％ee，AD-H，5％i-PrOH/己烷，流速0.5mL/min，210nM，tRet＝33(主要成分)，36(次要成分)。
(3R，4S，5S)-原料-G((3R，4S，5S)-N-叔丁氧基羰基-4-羥基-哌啶-3，5-二甲酸3-甲酯)
將(3R，4S，5S)，和(3S，4R，5R)，-N-叔丁氧基羰基-4-羥基-哌啶-3，5-二甲酸3-甲酯(96％ee)(78g，0.26mol)的混合物溶于MeOH(500mL)，于室溫加入(S)-(-)1-苯乙胺(33mL，0.26mol)。將混合物于室溫?cái)嚢?0min，在減壓下濃縮，得到鹽，為無色無定形物。于70℃將所得殘?jiān)苡贑H3CN(1.3L)，于室溫劇烈攪拌20小時(shí)。過濾收集白色結(jié)晶鹽，用Et2O洗滌。重復(fù)相同的重結(jié)晶過程(溶于CH3CN并于室溫?cái)嚢?兩次或三次后，將所得鹽溶于水，用5N和1N HCl酸化至pH 3，用AcOEt萃取。合并的有機(jī)相通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到對(duì)映體純(3R，4S，5S)-原料-G，為白色固體；ES-MSM+H＝304CtRet＝2.37min。手性HPLC＞99.9％ee，AD-H，7.5％i-PrOH/己烷/0.1％TFA，流速0.75mL/min，210nM，tRet＝24min。
(3R，4S，5S)-原料-G(96％ee)
于室溫向(3，4-cis-4，5-cis)-N-叔丁氧基羰基-4-羥基-哌啶-3，5-二甲酸二甲酯(18g，Liang，X.Lohse，A.Bols，M.J.Org.Chem.2000，65，7432)在磷酸鹽緩沖液(0.2M，pH7.5，540mL)中的溶液加入脂肪酶M(Mucorjavanicus)(5.4g)。將反應(yīng)混合物于35℃攪拌6天，然后用5N和1N HCl酸化至pH 3。用EtOAc萃取混合物，有機(jī)相用Na2SO4干燥，在減壓下濃縮，得到(3R，4S，5S)-原料-G，為白色固體；ES-MSM+H＝304CtRet＝2.37min。手性HPLC95.8％ee，AD-H，7.5％i-PrOH/己烷/0.1％TFA，流速0.75mL/min，210nM，tRet＝24min(3R，4S，5S)，26min(3S，4R，5R)。
實(shí)施例1
將中間體1.1(70mg，0.125mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(2mL)中的混合物于室溫?cái)嚢?。攪?小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，得到實(shí)施例1ES-MSM+H＝459CtRet＝3.26min。
中間體1.1
向中間體1.4(27mg，0.150mmol)和中間體1.9(50mg，0.125mmol)在CH2Cl2中的溶液加入BopCl(47mg，0.188)和Et3N(19mg，0.188mmol)。于室溫?cái)嚢?6小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用H2O(10mL)稀釋，用EtOAc(50mL)萃取。有機(jī)相連續(xù)用5％NaHCO3水溶液、H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體1.1，為白色無定形物；ES-MSM+H＝559HPLCctRet＝4.23min。
中間體1.2
于0℃向中間體1.3(450mg，1.09mmol)在THF/H2O(5/5mL)中的溶液加入LiOH.H2O(84mg，2mmol)。于相同溫度攪拌1小時(shí)后，將反應(yīng)用5％KHSO4水溶液(20mL)淬滅，用EtOAc(200mL)萃取。用H2O和鹽水洗滌有機(jī)相，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到中間體1.2，為白色無定形物；ES-MSM+H＝401ctRet＝3.30。
中間體1.3
類似于中間體1.1的制備，通過中間體1.7與(3S，5R)-原料-F的偶聯(lián)反應(yīng)，合成中間體1.3ES-MSM+H＝415ctRet＝3.69min。
中間體1.4
于0℃向中間體1.5(230mg，1.20mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液加入Et3SiH(728mg，6.26mmol)和TFA(1.48g，12.9mmol)，然后于室溫?cái)嚢杌旌衔?。攪?5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物在真空中濃縮。將殘?jiān)鼞矣?％NaHCO3水溶液，用CH2Cl2萃取。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空濃縮，將所得殘?jiān)?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體1.4，為白色無定形物；ES-MSM+H＝177HPLCctRet＝2.24min。
中間體1.5
于0℃向中間體1.6(300mg，1.45mmol)在THF(10mL)中的溶液加入MeLi(1M于Et2O中，7.25mmol)，然后于室溫?cái)嚢杌旌衔?。攪?小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用5％NaHCO3水溶液(50mL)淬滅。然后將反應(yīng)混合物用EtOAc(200mL)萃取。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體1.5，為白色無定形物；ES-MSM+H＝193HPLCctRet＝1.74min。
中間體1.6
于室溫向6-氯煙酸乙酯(1g，5.4mmol)在NMP(10mL)中的溶液加入環(huán)丙胺(4.12g，72.2mmol)和K2CO3(2.2g，16mmol)，然后在70℃攪拌混合物。攪拌12小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用H2O(100mL)淬滅。將反應(yīng)混合物用EtOAc(200mL)萃取。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，將其從n-己烷/Et2O中重結(jié)晶，得到中間體1.6，為白色無定形物；ES-MSM+H＝207HPLCctRet＝1.98min。
中間體1.7
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體1.8的脫保護(hù)合成中間體1.7ES-MSM+H＝146BtRet＝1.32min。
中間體1.8
向0℃、N2下的Boc-D-亮氨醇(277.9mg，1.278mmol)在DMF(5mL)中的溶液加入NaH(80.3mg于礦物油中60wt％，2.00mmol)。在相同溫度攪拌幾分鐘后，加入EtI(0.122mL，1.53mmol)。將所得溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。用H2O淬滅反應(yīng)，用EtOAc萃取混合物，經(jīng)Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體1.8ES-MSM+H-Boc＝146BtRet＝2.11min。
實(shí)施例2
在N2下，將中間體2.1(194.2mg，0.33mmol)在4N HCl的EtOAc溶液(3mL)中的溶液于RT攪拌35min。在減壓下濃縮，得到實(shí)施例2，為白色無定形物；ES-MSM+H＝485CtRet＝3.08min。
中間體2.1
向RT、N2下的中間體2.2(153.8mg，0.356mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液加入EDCI.HCl(95mg，0.42mmol)和HOAt(70mg，0.51mmol)。在相同溫度攪拌所得溶液15min。然后，于0℃緩慢加入中間體2.4(73mg，0.35mmol)和三乙胺(0.25mL，1.78mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液。將溶液在RT攪拌60min。在減壓下濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體2.1，為白色無定形物；ES-MSM＝585HPLCCtRet＝4.78min。
中間體2.2
于0℃向中間體2.3(160mg，0.359mmol)在THF/H2O(5/5mL)中的溶液加入LiOH.H2O(29mg，0.691mmol)。在相同溫度攪拌1小時(shí)后，用5％KHSO4水溶液(20mL)淬滅反應(yīng)，用CH2Cl2萃取(50mL)。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到中間體2.2，為白色無定形物；ES-MSM+H＝432HPLCctRet＝3.50min。
中間體2.3
于0℃向(3R，5S)-原料-F(293mg，1.02mmol)在THF(10mL)中的溶液加入Et3N(206mg，2.04mmol)和TcBocCl(488mg，2.04mmol)。在相同溫度攪拌1小時(shí)后，于0℃加入MgBr2.Et2O(527mg，2.04mmol)和中間體1.4(180mg，1.02mmol)，然后于室溫?cái)嚢杌旌衔?。攪?小時(shí)后，用5％KHSO4水溶液(50mL)淬滅反應(yīng)，用EtOAc(100mL)萃取。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空濃縮，將所得殘?jiān)?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體2.3，為白色無定形物；ES-MSM+H＝446HPLCctRet＝3.86min。
中間體2.4
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體2.5的脫保護(hù)合成中間體2.4。ES-MSM+H＝172BtRet＝1.55min。
中間體2.5
向RT、N2下的商業(yè)可得的N-Boc-L-環(huán)己基甘氨酸醇(glycinol)(499mg，2.05mmol)在DMF(8mL)中的溶液加入0℃的NaH(164mg，4.10mmol)和EtI(179μL，2.26mmol)。將反應(yīng)混合物于RT攪拌2小時(shí)。然后，將H2O加至所得溶液。用CH2Cl2萃取水相。合并的有機(jī)相通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，然后用硅膠柱色譜法純化，得到中間體2.5白色無定形物，ES-MSM+H＝272BtRet＝2.46min。
實(shí)施例3
于室溫?cái)嚢柚虚g體3.1(65mg，0.098mmol)和4M HCl的二噁烷溶液(2mL)的混合物。攪拌1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，得到實(shí)施例3ES-MSM+H＝563CtRet＝4.21min。
中間體3.1
于室溫，向中間體3.2(60mg，0.112mmol)和中間體1.7(24mg，0.132mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液加入EDCl.HCl(32mg，0.168mmol)，HOAt(23mg，0.168mmol)和Et3N(17mg，0.168mmol)；然后于室溫?cái)嚢杌旌衔?。在相同溫度攪?6小時(shí)后，用H2O(10mL)稀釋反應(yīng)混合物，用EtOAc(50mL)萃取。有機(jī)相用5％NaHCO3水溶液、H2O和鹽水連續(xù)洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體3.1，為白色無定形物；ES-MSM+H＝663HPLCctRet＝4.83min。
中間體3.2
于0℃，向中間體3.3(85mg，0.155mmol)在THF/H2O(5/5mL)中的溶液加入LiOH.H2O(14mg，0.330mmol)。在相同溫度攪拌1小時(shí)后，反應(yīng)混合物用5％KHSO4水溶液(20mL)淬滅，用Et2O(100mL)萃取。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到中間體3.2，為白色無定形物；ES-MSM+H＝536HPLCctRet＝4.32min。
中間體3.3
于0℃，向(3R，5S)-原料-F(103mg，0.36mmol)在CH3CN(1mL)中的溶液加入Et3N(43mg，0.43mmol)、TcBocCl(86mg，0.36mmol)。在相同溫度攪拌1小時(shí)后，于0℃加入MgBr2.Et2O(112mg，0.43mmol)和中間體3.4(100mg，0.36mmol)，然后于室溫?cái)嚢杌旌衔?。攪?4小時(shí)后，反應(yīng)混合物用5％KHSO4水溶液淬滅，用EtOAc萃取。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體3.3，為白色無定形物；ES-MSM+H＝550HPLCctRet＝4.65min。
中間體3.4
于0℃，向中間體3.5(550mg，1.85mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液加入Et3SiH(2.3g，10.8mmol)和TFA(7.4g，64.5mmol)。于室溫?cái)嚢杷没旌衔铩嚢?5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物在真空中濃縮。將殘?jiān)鼞矣?％NaHCO3水溶液，用CH2Cl2萃取。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體3.4，為白色無定形物；ES-MSM+H＝281HPLCctRet＝3.61min。
中間體3.5
于0℃，向中間體3.6(574mg，1.7mmol)在THF(18mL)中的溶液加入MeMgBr(于乙醚中的0.96M溶液，8.83mL，8.48mmol)。將所得混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)。加水后，用EtOAc萃取混合物，用NaHCO3水溶液、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體3.5，為無色油；ES-MSM+H＝297HPLCctRet＝3.50min。
中間體3.6
向中間體3.7(737mg，2.44mmol)在NMP(17mL)中的溶液加入K2CO3(1.69g，12.2mmol)和異丁胺(535mg，7.32mmol)，將所得混合物在120℃攪拌過夜。加水后，用EtOAc萃取混合物，用水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)浣?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體3.6，為無色晶體；ES-MSM+H＝339HPLCctRet＝3.94min。
中間體3.7
向中間體3.8(1g，4.07mmol)在DMF(15mL)中的溶液加入K2CO3(1.69g，12.2mmol)和異丁基碘(1.5g，8.14mmol)，將所得混合物于60℃攪拌2小時(shí)。然后用EtOAc稀釋混合物，用水、KHSO4飽和水溶液、NaHCO3飽和水溶液、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體3.7，為無色晶體；ES-MSM+H＝302HPLCctRet＝4.49min。
中間體3.8
于0℃向3-甲氧基丙-1-醇(1.4g)在THF(30mL)中的溶液加入NaH(625mg，15.6mmol)，將混合物在室溫?cái)嚢?0min。然后，于0℃向混合物加入4，6-二氯煙酸(1.2g，6.25mmol，美國(guó)專利2005049419)在THF(10mL)中的溶液，將其于室溫再攪拌3小時(shí)。加水后，用乙醚洗滌混合物。用KHSO4酸化水相，然后用乙醚萃取。有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)浣?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體3.7，為無色晶體；ES-MSM+H＝246，HPLCctRet＝3.34min。
實(shí)施例4
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體4.1(18mg，0.03mmol)的脫保護(hù)合成實(shí)施例4。實(shí)施例4ES-MSM+H＝489CtRet＝2.84min。
中間體4.1
將中間體4.2(468mg，2.27mmol)、中間體1.2(1g，2.5mmol)、BopCl(1.73g，6.81mmol)和三乙胺(688mg，6.81mmol)的溶液于室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入KHSO4飽和水溶液后，用EtOAc萃取混合物。有機(jī)層用水、NaHCO3飽和水溶液、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。硅膠柱色譜法得到中間體4.1無色油，ES-MSM+H＝589BtRet＝1.92min。
中間體4.2
將中間體4.3(2g，9mmol)溶于CH2Cl2(14mL)中。于室溫向該溶液加入三乙基硅烷(14mL)和TFA(14mL)，將混合物于50℃攪拌3小時(shí)。在真空下除去溶劑，用AcOEt稀釋殘?jiān)?。所得混合物用NaHCO3飽和水溶液、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。硅膠柱色譜法得到中間體4.2無色晶體，ES-MSM+H＝207BtRet＝1.51min。
中間體4.3
向中間體4.4(2.5g，2.63mmol)在NMP(20mL)中的溶液加入K2CO3(9.2g，66.6mmol)和異丁基碘(2.3mL，20mmol)。將所得混合物在80℃攪拌40min。然后加入環(huán)丙胺(4.6mL，66.6mmol)，將反應(yīng)混合物于110℃攪拌過夜。加水后，用AcOEt萃取混合物。用水、鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥。從EtOAc-正己烷中重結(jié)晶，得到中間體4.3無色晶體，ES-MSM+H＝265BtRet＝1.54min。
中間體4.4
于0℃向NaH(5.2g，130mmol)在THF(100mL)中的懸浮液加入MeOH(4.2g，130mmol)。于室溫?cái)嚢?0min后，于0℃逐滴加入4，6-二氯煙酸(10g，52.9mmol，美國(guó)專利2005049419)在THF(100mL)中的溶液。于室溫將所得混合物攪拌過夜。加水后，用乙醚洗滌混合物。水相用KHSO4酸化，然后用乙醚萃取。用鹽水洗滌有機(jī)相，經(jīng)MgSO4干燥。在減壓下濃縮，得到中間體4.4無色晶體，ES-MSM+H＝188CtRet＝1.80min。
實(shí)施例5
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體5.1的脫保護(hù)合成實(shí)施例5。實(shí)施例5ES-MSM+H＝515ctRet＝3.92min。
中間體5.1
類似于中間體1.1的制備，通過中間體5.2與中間體2.4的偶聯(lián)反應(yīng)，合成中間體5.1。ES-MSM+H＝615ctRet＝4.45min。
中間體5.2
類似于中間體1.2的制備，通過中間體5.3(1g，2.1mmol)的皂化，合成中間體5.2。中間體5.2無色油，ES-MSM＝462HPLCCtRet＝2.85min。
中間體5.3
類似于中間體1.3的制備，通過中間體4.2(800mg，3.88mmol)和(3R，5S)-原料-F(1230mg，4.27mmol)的縮合，合成中間體5.3。中間體5.3無色油，ES-MSM＝476HPLCCtRet＝1.78min。
實(shí)施例6
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體6.1的脫保護(hù)，合成實(shí)施例6。實(shí)施例6ES-MSM+H＝505ctRet＝3.29min。
中間體6.1
類似于中間體1.1的制備，通過中間體6.2與中間體1.7的偶聯(lián)反應(yīng)，合成中間體6.1。中間體6.1ES-MSM+H＝605ctRet＝4.11min。
中間體6.2
類似于中間體1.2的制備，通過中間體6.3的皂化，合成中間體6.2。中間體6.2ES-MSM+H＝478ctRet＝3.41min。
中間體6.3
類似于中間體1.3的制備，通過中間體6.4與(3R，5S)-原料-F的偶聯(lián)反應(yīng)，合成中間體6.3。中間體6.3S-MSM+H＝492ctRet＝3.81min。
中間體6.4
類似于中間體1.4的制備，通過中間體6.5的脫羥基，合成中間體6.4。中間體6.4ES-MSM+H＝223ctRet＝2.78min。
中間體6.5
類似于中間體1.5的制備，通過中間體6.6的烷基化，合成中間體6.5。中間體6.5ES-MSM+H＝239ctRet＝1.95min。
中間體6.6
類似于中間體4.5的制備，由中間體4.6(用異丁胺代替環(huán)丙胺)合成中間體6.6。中間體6.6ES-MSM+H＝281ctRet＝2.54min。
實(shí)施例7
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體7.1的脫保護(hù)，合成實(shí)施例7。中間體7.1ES-MSM+H＝445ctRet＝3.44min。
中間體7.1
類似于中間體1.1的制備，通過中間體2.2與中間體7.2的偶聯(lián)反應(yīng)，合成中間體7.1。中間體7.1ES-MSM+H＝545ctRet＝4.30min。
中間體7.2
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體7.3的脫保護(hù)，合成中間體7.2。中間體7.2ES-MSM+H＝132BtRet＝1.17min。
中間體7.3
類似于實(shí)施例1.8的制備，通過Boc-D-纈氨醇[Journal of OrganicChemistry，2000，65(16)，5037-5042]的烷基化，合成中間體7.3。中間體7.3ES-MSM+H-Boc＝132BtRet＝2.03min。
實(shí)施例8
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體8.1的脫保護(hù)，合成實(shí)施例8。實(shí)施例8ES-MSM+H＝589ctRet＝3.50min。
中間體8.1
向中間體8.2(49mg，0.239mmol)和中間體1.2(80mg，0.20mmol)在CH2Cl2中的溶液加入BopCl(153mg，0.60mmol)和Et3N(61mg，0.60mmol)。于室溫?cái)嚢?5小時(shí)后，反應(yīng)混合物用H2O(10mL)稀釋，用EtOAc(50mL)萃取。有機(jī)相連續(xù)用5％NaHCO3水溶液、H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體8.1，為白色無定形物；ES-MSM+H＝589HPLCctRet＝3.50min。
中間體8.2
類似于中間體1.4的制備，通過中間體8.3的還原，合成中間體8.2。中間體8.2ES-MSM+H＝207ctRet＝3.71min。
中間體8.3
于室溫向中間體8.4(500mg，2.5mmol)在DMSO(10mL)中的溶液加入環(huán)丙胺(1.65g，28.9mmol)和K2CO3(415mg，7.5mmol)。然后于80℃攪拌所得混合物。攪拌5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用H2O(50mL)淬滅。所得混合物用EtOAc(100mL)萃取。有機(jī)相用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體8.3，為黃色無定形物；ES-MSM+H＝221HPLCctRet＝2.34min。
中間體8.4
于0℃，向中間體8.5(1.85g，7.56mmol)在THF(40mL)中的溶液加入MeLi(1M于Et2O中，9.07mmol)，然后于室溫?cái)嚢杌旌衔铩Ｓ谑覝財(cái)嚢?小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用5％KHSO4水溶液(100mL)淬滅。然后反應(yīng)混合物用CH2Cl2(100mL)萃取。有機(jī)相用5％NaHCO3水溶液、H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到中間體8.4，為黃色無定形物；ES-MSM+H＝200HPLCctRet＝2.82min。
中間體8.5
于室溫向中間體8.6(2g，10mmol)在ClCH2CH2Cl中的溶液加入SOCl2(2mL)和DMF(0.1mL)，然后于60℃攪拌混合物。于60℃攪拌3小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，得到黏性物質(zhì)，其不需進(jìn)一步純化而用于下一步反應(yīng)。
于0℃，向該粗品在CH2Cl2中的溶液加入N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.46g，15mmol)和Et3N(1.52g，15mmol)，然后于室溫?cái)嚢杌旌衔?。于室溫?cái)嚢?9小時(shí)后，反應(yīng)混合物用H2O(100mL)淬滅，用CH2Cl2(100mL)萃取。有機(jī)相連續(xù)用5％NaHCO3水溶液、H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體8.5，為棕色油；ES-MSM+H＝245HPLCctRet＝2.27min。
中間體8.6
類似于中間體4.6的制備，通過2，4-二氯煙酸(美國(guó)專利2005049419)與乙醇鈉的反應(yīng)合成中間體8.6。中間體8.6ES-MSM+H＝202ctRet＝2.12min。
實(shí)施例9
將N2下中間體9.1(13mg，0.02mmol)在4N HCl-二噁烷(4mL)中的溶液于0℃攪拌15min。然后，將溶液升至室溫，于RT攪拌1小時(shí)。在減壓下濃縮混合物，得到實(shí)施例9，為白色無定形物。ES-MSM+H＝563AtRet＝2.48min。
中間體9.1
向0℃、N2下的中間體9.2(20mg，0.037mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液加入EDCI.HCl(11.6mg，0.075mmol)和HOAt(10.1mg，0.075mmol)。在相同溫度攪拌5min后，將中間體1.7(13.6mg，0.075mmol)和Et3N(0.04mL，0.22mmol)加至反應(yīng)混合物。將所得溶液升至RT，于室溫?cái)嚢柽^夜。反應(yīng)用H2O淬滅，用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)萃取液用H2O和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。將殘?jiān)?jīng)硅膠快速色譜法純化，得到期望的偶聯(lián)產(chǎn)物-中間體9.1，為白色無定形物。ES-MSM+H＝663HPLCctRet＝3.71min。
中間體9.2
于0℃，向中間體9.3(20mg，0.04mmol)在干燥THF(1mL)中的溶液加入0.22M LiOH溶液(0.5mL，0.11mmol)。將所得溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)用KHSO4飽和溶液(1mL)淬滅，用EtOAc萃取。用Na2SO4干燥后，在減壓下濃縮，得到中間體9.2，為固體。此物質(zhì)不需進(jìn)一步純化而用于下一步驟。ES-MSM+H＝536ctRet＝2.93min。
中間體9.3
向N2下(3R，4S，5S)-原料-G(100mg，0.33mmol)在干燥THF(5mL)中的溶液加入(1-氯-2-甲基-丙烯基)-二甲基-胺(0.066mL，0.69mmol)，同時(shí)在冰浴中冷卻。在相同溫度攪拌5min后，將反應(yīng)升至RT，再攪拌20min。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物，得到(3R，4R，5S)-5-氯羰基-4-羥基-哌啶-1，3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯。此物質(zhì)不需進(jìn)一步純化而用于下一步驟。于0℃向中間體9.4(87mg，0.33mmol)和Et3N(0.13mL，0.99mmol)在干燥THF(2mL)中的溶液逐滴加入該酰氯在THF(2mL)中的溶液，將所得混合物于RT攪拌2小時(shí)?；旌衔镉肗aHCO3飽和水溶液淬滅，用水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，在減壓下濃縮。將殘?jiān)?jīng)反相色譜法純化，得到中間體9.3，為油。ES-MSM+H＝550ctRet＝3.74min。
中間體9.4
將中間體9.5(4.3g，15.3mmol)溶于CH2Cl2(51mL)中。于室溫向該溶液加入三乙基硅烷(24.4mL，153mmol)和TFA(22.7mL，306mmol)。將混合物于35℃攪拌10小時(shí)。在真空下除去溶劑，用AcOEt稀釋殘?jiān)?。有機(jī)相用NaHCO3飽和水溶液、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。硅膠柱色譜法得到中間體9.4無色晶體，ES-MSM+H＝265CtRet＝2.53min。
中間體9.5
將中間體9.6(5.3g，16.4mmol)溶于THF(84mL)中。于0℃向該溶液加入0.97M MeMgBr的THF溶液(85mL，82.2mmol)，將混合物在相同溫度攪拌1小時(shí)。加水后，用AcOEt萃取混合物。用鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥。硅膠柱色譜法得到中間體9.5無色晶體，ES-MSM+H＝281CtRet＝1.75min。
中間體9.6
將中間體9.7(22.1g，90.2mmol)溶于NMP(250mL)中。向該溶液加入K2CO3(37.2g，270.6mmol)和異丁基碘(15.5mL，135.3mmol)，將混合物于80℃攪拌1小時(shí)，然后加入環(huán)丙胺(33.9mL，451.0mmol)，將混合物于110℃攪拌過夜。加水后，用AcOEt萃取混合物。有機(jī)層用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。硅膠柱色譜法得到中間體9.6無色晶體，ES-MSM+H＝323CtRet＝2.61min。
中間體9.7
將4，6-二氯煙酸(20g，104.7mmol，美國(guó)專利2005049419)溶于THF(120mL)。于0℃將該溶液加至NaH(11.4，262mmol)和3-甲氧基-丙-1-醇(23.6g，262mmol)在THF(120mL)中的溶液，將所得混合物于RT攪拌2小時(shí)。加水后，用乙醚洗滌混合物。水層用1N HCl水溶液酸化，用EtOAc萃取。有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，得到中間體9.7無色晶體，ES-MSM+H＝246CtRet＝2.14min。
實(shí)施例10
將N2下中間體10.1(262mg，0.46mmol)在4N HCl二噁烷溶液(3mL)中的溶液于RT攪拌40min。在減壓下濃縮，得到HCl鹽。然后，加入NaHCO3水溶液。用EtOAc萃取水層。合并的有機(jī)萃取液通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)硅膠色譜法、然后經(jīng)制備型反相HPLC純化，得到期望的胺(170.2mg，0.358mmol)。向此胺在甲苯(3mL)中的溶液加入4N HCl-二噁烷(3mL)。在減壓下濃縮，得到期望的實(shí)施例10(HCl鹽)，為白色物質(zhì)；ES-MSM+H＝475CtRet＝2.87min。
中間體10.1
于RT、N2下向中間體10.2(174.5mg，0.39mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液，加入EDCI.HCl(130mg，0.57mmol)和HOAt(100mg，0.73mmol)。將反應(yīng)混合物在相同溫度攪拌數(shù)分鐘。然后，于0℃加入中間體1.7(117mg，0.64mmol)和三乙胺(0.19mL，1.36mmol)。將所得溶液于RT攪拌過夜，然后將H2O加至反應(yīng)混合物。用CH2Cl2萃取水相。合并的有機(jī)相通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到粗殘?jiān)浣?jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體10.1，為白色無定形物；ES-MSM＝575HPLCCtRet＝3.90min。
中間體10.2
向0℃的中間體10.3(180mg，0.39mmol)在THF(7mL)中的溶液緩慢加入LiOH水溶液(40.7mg，0.97mm ol于H2O(7mL)中)。在相同溫度攪拌所得溶液25min。反應(yīng)混合物用H2O稀釋，然后用Et2O洗滌。用KHSO4飽和水溶液酸化水相，然后用Et2O萃取。合并的有機(jī)萃取液通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到中間體10.2，為白色無定形物；ES-MSM＝448HPLCCtRet＝3.00min。
中間體10.3
于0℃、N2下向(3R，4S，5S)-原料-G(200mg，0.65mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液加入1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺(0.1mL，0.76mmol)。將溶液在相同溫度攪拌60min。然后，于0℃加入中間體1.4(229mg，1.3mmol)。將所得溶液加熱至RT，攪拌20min，然后加入H2O，用CH2Cl2萃取混合物。合并的有機(jī)萃取液通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體10.3。ES-MSM＝462HPLCCtRet＝3.66min。
實(shí)施例11
類似于實(shí)施例1的制備，通過中間體11.1的脫保護(hù)合成實(shí)施例11。實(shí)施例11ES-MSM+H＝461ctRet＝3.80min。
中間體11.1
類似于中間體1.1的制備，通過中間體10.2與中間體7.2的偶聯(lián)反應(yīng)，合成中間體11.1。中間體11.1ES-MSM+H＝561ctRet＝4.14min。
實(shí)施例12
于0℃，將N2下中間體12.1(9.3mg，0.015mmol)在4N HCl-二噁烷(1mL)中的溶液攪拌15min。然后，將該溶液升溫至RT，于室溫?cái)嚢?0min。在減壓下濃縮混合物，得到實(shí)施例12，為白色無定形物.ES-MSM+H＝505ctRet＝2.94min。
中間體12.1
于0℃、N2下向中間體12.2(63mg，0.13mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液加入EDCI.HCl(33.0mg，0.21mmol)和HOAt(29.0mg，0.21mmol)。在相同溫度攪拌5min后，將中間體1.7(38.0mg，0.21mmol)和Et3N(0.06mL，0.42mmol)加至反應(yīng)混合物。將所得溶液升溫至RT，于RT攪拌過夜。反應(yīng)用H2O淬滅，用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)萃取液用H2O和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。將殘?jiān)?jīng)硅膠快速色譜法純化，得到中間體12.1，為白色無定形物。ES-MSM+H＝605HPLCctRet＝3.93min。
中間體12.2
于0℃，向中間體12.3(68mg，0.14mmol)在干燥THF(1mL)中的溶液加入0.4M LiOH溶液(1.0mL，0.41mmol)。將所得溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)用KHSO4飽和水溶液(1mL)淬滅，用EtOAc萃取。通過Na2SO4干燥后，在減壓下濃縮，得到中間體12.2，為固體。此物質(zhì)不需進(jìn)一步純化而用于下一步驟。ES-MSM+H＝478AtRet＝2.77min。
中間體12.3
在N2下，向(3R，4S，5S)-原料-G(132mg，0.44mmol)在干燥CH2Cl2(2mL)中的溶液加入(1-氯-2-甲基-丙烯基)-二甲基-胺(0.06mL，0.66mmol)，同時(shí)在冰浴中冷卻。在相同溫度攪拌5min后，將反應(yīng)升溫至RT，再攪拌20min。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物，得到(3R，4R，5S)-5-氯羰基-4-羥基-哌啶-1，3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯。此物質(zhì)不需進(jìn)一步純化而用于下一步驟。于0℃向中間體12.4(90mg，0.44mmol)和Et3N(0.18mL，1.32mmol)在干燥CH2Cl2(2mL)中的溶液逐滴加入該酰氯在CH2Cl2(2mL)中的溶液。將所得混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)?；旌衔镉肗aHCO3飽和水溶液(3mL)淬滅，用水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，在減壓下濃縮。將殘?jiān)?jīng)硅膠快速色譜法純化，得到中間體12.3，為油。ES-MSM+H＝492；AtRet＝3.10min。
中間體12.4
在5mL玻璃微波管中放入中間體1.5(100mg，0.52mmol)和CAN(123.4mg，0.21mmol)和干燥MeOH(2mL)。使用Biotage Initiator 60EXP于100℃、微波輻射下加熱反應(yīng)達(dá)15min。除去溶劑，用NaHCO3飽和水溶液、水洗滌殘?jiān)?jīng)Na2SO4干燥，在減壓下濃縮。將殘?jiān)?jīng)硅膠快速色譜法純化，得到中間體12.4，為白色固體物質(zhì)。ES-MSM+H＝207；ctRet＝3.02min。
實(shí)施例13
將N2下中間體13.1(107mg，0.177mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(3mL)中的溶液于RT攪拌40min。在減壓下濃縮得到粗HCl鹽。該粗品經(jīng)制備型反相HPLC純化，得到實(shí)施例13，為白色物質(zhì)；ES-MSM+H＝505；CtRet＝2.63min。
中間體13.1
向RT、N2下中間體13.2(122.7mg，0.257mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液加入EDCI.HCl(83mg，0.363mmol)和HOAt(60.9mg，0.447mmol)。將反應(yīng)混合物在相同溫度攪拌數(shù)分鐘。然后，于RT加入中間體1.7(69mg，0.38mmol)和三乙胺(0.11mL，0.82mmol)。將所得溶液在相同溫度攪拌過夜。在減壓下濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體13.1，為白色無定形物；ES-MSM＝605；HPLCCtRet＝3.39min。
中間體13.2
向0℃的中間體13.3(168mg，0.34mmol)在THF(10mL)中的溶液緩慢加入LiOH水溶液(27.65mg，0.659mmol于H2O(10mL)中)。在相同溫度攪拌所得溶液40min。反應(yīng)混合物用H2O稀釋，用Et2O洗滌。水相用KHSO4飽和水溶液酸化，用Et2O萃取。合并的有機(jī)萃取液通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到中間體13.2，為白色無定形物；ES-MSM＝478HPLCBtRet＝1.61min。
中間體13.3
向0℃、N2下(3R，4S，5S)-原料-G(499.7mg，1.647mmol)在CH2Cl2(33mL)中的溶液加入1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺(0.22mL，1.65mmol)。將溶液在相同溫度攪拌60min。然后，于0℃加入中間體4.4(683.3mg，3.3mmol)。將所得溶液升溫至RT，攪拌60min。然后，將混合物用H2O稀釋，用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)萃取液通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到粗殘?jiān)浣?jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體13.3。ES-MSM＝492；HPLCCtRet＝2.96min。
實(shí)施例14
將N2下中間體14.1(65mg，0.107mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(2mL)中的溶液于RT攪拌40min。在減壓下濃縮，得到粗HCl鹽。該粗品經(jīng)制備型反相HPLC純化，得到實(shí)施例14，為白色物質(zhì)；ES-MSM+H＝505；CtRet＝2.79min。
中間體14.1
向RT、N2下中間體14.2(150mg，0.314mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液加入EDCI.HCl(90mg，0.471mmol)和HOAt(64mg，0.471mmol)。將反應(yīng)混合物在相同溫度攪拌數(shù)分鐘。然后，于RT加入中間體1.7(69mg，0.38mmol)和三乙胺(0.066mL，0.471mmol)。將所得溶液在相同溫度攪拌過夜。在減壓下濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體14.1，為白色無定形物；ES-MSM＝605；HPLCCtRet＝3.56min。
中間體14.2
向0℃的中間體14.3(500mg，1.02mmol)在THF(10mL)中的溶液緩慢加入LiOH水溶液(84mg，2.10mmol于H2O(10mL)中)。在相同溫度攪拌所得溶液40min。反應(yīng)混合物用H2O稀釋，用Et2O洗滌。用KHSO4飽和水溶液酸化水相，用Et2O萃取。合并的有機(jī)萃取液通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到中間體14.2，為白色無定形物；ES-MSM＝478；HPLCCtRet＝2.79min。
中間體14.3
向0℃、N2下(3R，4S，5S)-原料-G(1g，3.3mmol)在CH2Cl2(33mL)中的溶液加入1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺(0.523mL，3.95mmol)。將溶液在相同溫度攪拌60min。然后，于0℃加入中間體8.2(817mg，3.95mmol)和Et3N(0.552mL，3.95mmol)。將所得溶液升溫至RT，攪拌60min。然后，混合物用H2O稀釋，用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)萃取液通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體14.3。ES-MSM＝492；HPLCCtRet＝3.01min。
實(shí)施例15
將N2下中間體15.1(15.1mg，0.023mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(3mL)中的溶液于RT攪拌30min。在減壓下濃縮，得到實(shí)施例15，為白色物質(zhì)；ES-MSM+H＝565；CtRet＝4.30min。
中間體15.1
于RT，將H2氣體通入中間體15.2(22mg，0.029mmol)和10％Pd-C(1mg)在MeOH(2mL)中的黑色懸浮液。于RT攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物濾過硅藻土。在減壓下濃縮濾液，用硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc)純化，得到中間體15.1(15.1mg，0.023mmol，78％)；ESI-MS(M+H)665，HPLCCtRet＝4.57min。
中間體15.2
于室溫向中間體15.3(34.9mg)和中間體1.7(12.1mg，0.067mmol)在CH2Cl2(2mL)中的溶液加入EDCl·HCl(16mg，0.083mmol)、HOAt(11.3mg，0.083mmol)和Et3N(9.3μL，0.067mmol)，然后將混合物于RT攪拌過夜。加水后，用CH2Cl2萃取混合物。干燥有機(jī)層，在減壓下濃縮，用硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc)純化，得到中間體15.2(22mg，0.029mmol)；ES-MSM+＝755；BtRet＝2.54min。
中間體15.3
于0℃，向中間體15.4(36.6mg)在THF/H2O(3/3mL)中的溶液加入LiOH·H2O(6.8mg，0.29mmol)。于RT攪拌30min后，用5％KHSO4水溶液淬滅反應(yīng)，用Et2O萃取混合物。有機(jī)層通過Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，得到中間體15.3(34.9mg)；ESI-MS(M+H)628，HPLCCtRet＝4.66min。
中間體15.4
向RT、N2下(3R，4S，5S)-原料-G(100mg，0.33mmol)在CH2Cl2(2mL)中的溶液加入1-氯-N，N-2-三甲基-1-丙烯基胺(55.7μL，0.42mmol)。將溶液于RT攪拌30min。然后于0℃加入含中間體15.5(100mg，0.28mmol)和三甲胺(62.6μL，0.45mmol)的CH2Cl2(2mL)。將所得溶液升溫至RT，于RT攪拌1小時(shí)。加入水和1N HCl。用EtOAc萃取水層。用鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥。在減壓下濃縮，用制備型TLC(己烷/EtOAc)純化，得到中間體15.4(36.6mg)；ESI-MS(M+H)642，HPLCBtRet＝2.39min。
中間體15.5
于0℃，向中間體15.6(801.1mg，2.15mmol)在CH2Cl2(3.5mL)中的溶液加入三乙基硅烷(3.4mL，21.1mmol)和TFA(3.3mL，43.0mmol)，然后將混合物于40℃攪拌3小時(shí)。在真空中濃縮大多數(shù)溶劑，用EtOAc稀釋殘?jiān)?，?N NaOH水溶液中和，并用EtOAc萃取混合物。有機(jī)層通過Na2SO4干燥，在真空中濃縮。該殘?jiān)?jīng)硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc)純化，得到中間體15.5(651mg，1.83mmol，85％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.76(s，1H)，7.35-7.27(m，5H)，5.81(s，1H)，4.53(s，2H)，4.41(brs，1H)，4.08(dd，J＝6.6，6.0Hz，2H)，3.67(dd，J＝6.1，6.0Hz，2H)，3.04(dd，J＝6.6，6.0Hz，2H)，3.02-2.97(m，1H)，2.11(五重峰，J＝6.0Hz，2H)，1.87(五重峰，J＝6.6Hz，1H)，1.18(s，3H)，1.16(s，3H)，0.99(s，3H)，0.97(s，3H)；ESI-MS(M+H)357，HPLCCtRet＝3.60min。
中間體15.6
于0℃，向中間體15.7(1.28g，3.1mmol)在THF(16mL)中的溶液加入1M MeMgBr的THF溶液(15.9mL，15.4mmol)。在相同溫度攪拌1小時(shí)后，將混合物升溫至RT，在RT攪拌過夜。加入水和NaHCO3飽和水溶液后，用EtOAc萃取混合物。用鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc)純化，得到中間體15.6(1.06g，2.8mmol，92％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.91(s，1H)，7.35-7.27(m，5H)，5.86(s，1H)，4.53(s，3H)，4.18(dd，J＝6.1，6Hz，2H)，3.72(brs，1H)，3.66(dd，J＝6.1，6Hz，2H)，3.05(dd，J＝6.5，6Hz，2H)，2.14(五重峰，J＝6.0Hz，2H)，1.87(五重峰，J＝6.5Hz，1H)，1.56(s，6H)，0.99(s，3H)，0.97(s，3H)；ESI-MS(M+)372，HPLCCtRet＝3.12min。
中間體15.7
向中間體15.8(1.56g，4.1mmol)在NMP(42mL)中的RT溶液加入K2CO3(856mg，6.2mmol)和異丁胺(604μL，6.2mmol)，將混合物于110℃攪拌過夜。加水后，用EtOAc萃取混合物。用鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc)純化，得到中間體15.7(1.3g，3.1mmol，75％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，7.38-7.22(m，5H)，5.77(s，1H)，4.95-4.86(m，1H)，4.52(s，2H)，4.15(dd，J＝6.1，6.0Hz，2H)，4.00(d，J＝6.6Hz，2H)，3.71(dd，J＝6.1，5.5Hz，2H)，3.09(dd，J＝6.6，6.0Hz，2H)，2.19-2.10(m，2H)，2.06-1.95(m，1H)，1.94-1.83(m，1H)，1.00(s，3H)，0.99(s，3H)，0.98(s，3H)，0.97(s，3H)；ESI-MS(M+)414，HPLCCtRet＝3.59min。
中間體15.8
將上述粗中間體15.9(10.4mmol)溶于NMP(52mL)中。向該溶液加入K2CO3(4.32g，31.2mmol)和異丁基碘(1.8mL，15.6mmol)，將混合物于80℃攪拌1小時(shí)。加水后，用EtOAc萃取混合物。用鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc)純化，得到中間體15.8(3.1g，8.2mmol，79％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.71(S，1H)，7.36-7.23(m，5H)，6.91(s，1H)，4.51(s，2H)，4.21(t，J＝6.0Hz，2H)，4.06(d，J＝7.0Hz，2H)，3.68(t，J＝6.0Hz，2H)，2.20-2.10(m，2H)，2.08-1.97(m，1H)，1.00(s，3H)，0.98(s，3H)；ESI-MS(M+)377，HPLCBtRet＝2.31min。
中間體15.9
將4，6-二氯煙酸(2g，10.4mmol)溶于THF(20mL)中。于0℃將該溶液加至NaH(1.04g，26.0mmol)和3-芐氧基-1-丙醇(4.1mL，26.0mmol)在THF(80mL)中的溶液，將所得混合物于RT攪拌3小時(shí)。加水后，用1N HCl酸化混合物，然后用EtOAc萃取。有機(jī)萃取液通過Na2SO4干燥，在真空中濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc)純化，得到中間體15.9，為3-芐氧基-1-丙醇混合物。ESI-MS(M+)321，HPLCBtRet＝1.82min。
實(shí)施例16
將N2下中間體16.1(65mg，0.116mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(2mL)中的溶液于RT攪拌2小時(shí)。在減壓下濃縮，得到實(shí)施例16，為白色物質(zhì)；ES-MSM+H＝461；CtRet＝3.80min。
中間體16.1
于室溫，向中間體10.2(80mg，0.179mmol)和中間體7.2(36mg，0.215mmol)在CH2Cl2(2mL)中的溶液加入EDCI·HCl(54mg，0.281mmol)、HOAt(38mg，0.281mmol)和Et3N(28mg，0.281mmol)，然后將混合物在相同溫度攪拌2小時(shí)。反應(yīng)用H2O(10mL)淬滅，用EtOAc(50mL)萃取。有機(jī)萃取液用5％NaHCO3水溶液、H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。在真空中濃縮有機(jī)相，得到粗殘?jiān)浣?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到Boc中間體(65mg，0.116mmol，65％)，為無色無定形物；ES-MSM+H＝561，HPLCctRet＝4.64min。
實(shí)施例17
于RT、N2下將中間體17.1(66mg，0.109mmol)溶于4N HCl-二噁烷(0.5mL)中。攪拌15min后，在減壓下濃縮，得到粗鹽。然后，加入NaHCO3飽和水溶液。有機(jī)相用CH2Cl2萃取，經(jīng)Na2SO4干燥。過濾，在減壓下濃縮，得到粗品。此粗品經(jīng)硅膠色譜法純化，得到實(shí)施例17(游離堿)(23.45mg，0.0466mmol)，收率43％。ES-MSM+H＝503，Atret＝2.10min。
中間體17.1
于RT，向N2下中間體13.2(91.6mg，0.192mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液加入EDCI·HCl(60mg，0.26mmol)和HOAt(49mg，0.36mmol)。在此溫度攪拌數(shù)分鐘后，加入溶于CH2Cl2(3mL)中的中間體17.2(34.3mg，0.19mmol)和Et3N(0.133mL，0.96mmol)。將所得溶液在此溫度攪拌1小時(shí)。在減壓下濃縮，得到粗品。經(jīng)硅膠色譜法純化，得到中間體17.1(66.0mg，0.109mmol)，收率為57％。ES-MSM+H＝603，ctret＝3.21min。
中間體17.2
在N2下，將中間體17.3(46.8mg，0.192mmol)溶于4HCl-二噁烷(1mL)中。于RT攪拌30min后，在減壓下濃縮，得到中間體17.2(34.3mg，0.19mmol)，收率為99％。ES-MSM+H＝144，ctret＝1.21min。1H NMR(400MHz，CDCl3)8.27(br，2H)，7.90-7.55(br，1H)，3.31(s，3H)，3.18(brd，J＝6.04Hz，2H)，3.13-3.00(br，1H)，2.40-2.00(br，3H)，1.88(brd，J＝13.12Hz，2H)，1.70-1，40(br，2H)，1.18-0.99(br，2H)。
中間體17.3
于0℃，向N2下中間體17.4(112.1mg，0.488mmol)在THF(3mL)中的溶液加入氫化鈉(19.5mg于60wt％礦物油中，0.488mmol)和甲基碘(30.3μL，0.488mmol)。將溶液升溫至RT。在此溫度攪拌過夜后，加入H2O和KHSO4飽和水溶液。有機(jī)相用乙酸乙酯萃取，經(jīng)Na2SO4干燥。過濾，在減壓下濃縮，得到粗品。經(jīng)硅膠色譜法純化，得到期望的中間體17.3(46.8mg，0.19mmol)，收率為39％。ES-MSM+H＝244，ctret＝1.92min。1H NMR(400MHz，CDCl

4.40-4.30(m，1H)，3.37(br，1H)，3.32(s，3H)，3.17(d，J＝6.56Hz，2H)，2.02(d，J＝9.56Hz，2H)，1.81(d，J＝11.6Hz，2H)，1.49(m，1H)，1.44(s，9H)，1.13-0.98(m，4H)。
中間體17.4
于0℃，向N2下商業(yè)可得的順-4-叔丁氧基羰基氨基-環(huán)己烷甲酸(200mg，0.82mmol)在THF(3mL)中的溶液加入Et3N(0.17mL，1.23mmol)和氯甲酸異丁酯(0.106mL，0.82mmol)。在此溫度攪拌30min后，過濾，在減壓下濃縮，得到酐。
于0℃，向N2下該粗品在MeOH(5mL)中的溶液加入NaBH4(170mg，4.49mmol)。在此溫度攪拌40min后，將KHSO4飽和水溶液加至溶液中。有機(jī)相用CH2Cl2萃取，經(jīng)Na2SO4干燥。過濾，在減壓下濃縮，得到粗品。經(jīng)硅膠色譜法純化，提供中間體17.4(185.3mg，0.808mmol)，收率為99％。ES-MSM+H＝230，ctret＝1.62min。1H NMR(400MHz，CDCl3)

4.38(br，1H)，3.45(br，2H)，3.38(br，1H)，2.04(d，J＝9.12Hz，2H)，1.83(d，J＝10.8Hz，2H)，1.47(s，9H)，1.26(dd，J＝7.32，7.08Hz，1H)，1.15-0.99(m，4H)。
實(shí)施例18
將中間體18.1(180mg，0.305mmol)和HCl/二噁烷(4M溶液，2mL)的混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮，得到實(shí)施例18(170mg)，為無色無定形物；ES-MSM+H＝491，HPLCctRet＝2.46min。
中間體18.1
于室溫向中間體14.2(200mg，0.419mmol)和中間體7.2(105mg，0.628mmol)在CH2Cl2(2mL)中的溶液加入EDCI·HCl(120mg，0.628mmol)、HOAt(85mg，0.628mmol)和Et3N(64mg，0.628mmol)，然后將混合物在相同溫度攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)用H2O(50mL)淬滅，用EtOAc(100mL)萃取。有機(jī)萃取液用5％NaHCO3水溶液、H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。將有機(jī)相在真空中濃縮，得到粗殘?jiān)?，其?jīng)SiO2柱色譜法純化，得到中間體18.1(180mg，0.305mmol，73％)，為無色無定形物；ES-MSM+H＝591，HPLCctRet＝3.37min。
生物試驗(yàn) 根據(jù)以上第2)項(xiàng)所述的方法，體外評(píng)價(jià)腎素抑制活性。
代表性式I化合物的結(jié)果


等價(jià)物 本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識(shí)到或者能夠采用只是常規(guī)實(shí)驗(yàn)確定在本文所述的特定過程的多種等價(jià)物。這樣的等價(jià)物被認(rèn)為處于本發(fā)明的范圍內(nèi)并且由以下權(quán)利要求涵蓋。這些專利、申請(qǐng)和其他文件的合適的組分、過程和方法可被選擇用于本發(fā)明及其實(shí)施方案。
權(quán)利要求
1.式I化合物或其鹽
其中
R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代；
R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基或C1-C7-烷氧基-C1-C7-烷氧基；
R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基；
R4為氫或羥基；且
R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基；
條件是其中R1為甲基或異丙基，R2為3-甲氧基丙氧基，R3為環(huán)丙基，R4為氫且R5為2-甲基丙基的式I化合物除外。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其具有根據(jù)式II的結(jié)構(gòu)
其中
R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代；
R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基或C1-C7-烷氧基-C1-C7-烷氧基；
R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基；
R4為氫或羥基；且
R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其具有根據(jù)式III的結(jié)構(gòu)
R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代；
R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基或C1-C7-烷氧基-C1-C7-烷氧基；
R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基；
R4為氫或羥基；且
R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3的化合物或其鹽，其具有根據(jù)式III’的結(jié)構(gòu)
R1為C1-7烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自羥基、鹵素和C1-C7-烷氧基的取代基取代；
R2為氫、C1-7烷基、C1-C7-烷氧基、鹵素-C1-C7-烷基、鹵素-C1-C7-烷氧基或C1-C7-烷氧基-C1-C7-烷氧基；
R3為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基；
R4為氫或羥基；且
R5為C1-7烷基或C3-8環(huán)烷基。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為任選被C1-C7-烷氧基取代的C1-7烷基。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的化合物，其中R2為氫或C1-C7-烷氧基。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的化合物，其中R3為支鏈C4-6-烷基或環(huán)丙基。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的化合物，其中R5為C1-4-烷基或環(huán)己基。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求1或2或5至8中任一項(xiàng)的化合物，其分別選自如下表所示的下式化合物或其鹽(優(yōu)選可藥用鹽)
10.根據(jù)前述權(quán)利要求1或4至8中任一項(xiàng)的化合物，其分別選自如下表所示的下式化合物或其鹽(優(yōu)選可藥用鹽)
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽，其用于診斷或治療性治療溫血?jiǎng)游铩?br> 12.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽，其用于治療依賴于腎素活性的疾病、尤其是高血壓。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽在制備用于治療依賴于腎素活性的疾病、尤其是高血壓的藥物組合物中的用途。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽在治療依賴于腎素活性的疾病、尤其是高血壓中的用途。
15.藥物制劑，其包含如權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用鹽和至少一種可藥用載體材料。
16.治療依賴于腎素活性的疾病的方法，其包括對(duì)需要這種治療的溫血?jiǎng)游?、尤其是人施用藥學(xué)有效量的如權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用鹽。
17.用于制備如權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的化合物的方法，所述方法包括
使式IV化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物
其中PG為保護(hù)基團(tuán)且R4和R5如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義，
與式V化合物反應(yīng)，
其中R1、R2和R3如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義；或
使式VI化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物，
其中PG為保護(hù)基團(tuán)且R1、R2、R3和R4如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義，
與式VII化合物反應(yīng)，
其中R5如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義；
并且如有需要，在上述任何一個(gè)或多個(gè)方法完成后，將可得的式I化合物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為不同的式I化合物，將可得的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物或不同的鹽，將可得的游離式I化合物轉(zhuǎn)化為其鹽，和/或?qū)⒖傻玫氖絀化合物的異構(gòu)體混合物分離成單個(gè)異構(gòu)體；
其中在任何原料中，除所述特定保護(hù)基團(tuán)之外，可存在更多的保護(hù)基團(tuán)，并且在適當(dāng)?shù)碾A段去除任何保護(hù)基團(tuán)或所結(jié)合的樹脂以便獲得相應(yīng)的式I化合物或其鹽。
18.用于制備如權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的化合物的方法，所述方法包括
使式VIII化合物
其中PG為保護(hù)基團(tuán)，
與醇R6OH在手性胺催化劑的存在下反應(yīng)，其中R6為未取代或取代的烷基或鏈烯基，優(yōu)選為C1-C4烷基。
19.用于制備如權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的化合物的方法，所述方法包括
使式(IXa)化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物，
其中PG為保護(hù)基團(tuán)，R4如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義，且R6為未取代或取代的烷基或鏈烯基，優(yōu)選為C1-C4烷基，
與式V化合物反應(yīng)，
其中R1、R2和R3如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義，以獲得式Xa的酰胺；
將其酯部分水解以獲得式XIa化合物，
所述式XIa化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物又可與式VII化合物反應(yīng)，
其中R5如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義，
以獲得式XII化合物，
并且如有需要，在上述任何一個(gè)或多個(gè)方法完成后，將可得的式I化合物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為不同的式I化合物，將可得的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物或不同的鹽，將可得的游離式I化合物轉(zhuǎn)化為其鹽，和/或?qū)⒖傻玫氖絀化合物的異構(gòu)體混合物分離成單個(gè)異構(gòu)體；
其中在任何原料中，除所述特定保護(hù)基團(tuán)之外，可存在更多的保護(hù)基團(tuán)，并且在適當(dāng)?shù)碾A段去除任何保護(hù)基團(tuán)或所結(jié)合的樹脂以便獲得相應(yīng)的式I化合物或其鹽。
20.用于制備如權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的化合物的方法，所述方法包括
使式(IXb)化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物，
其中PG為保護(hù)基團(tuán)，R4如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義，且R6為未取代或取代的烷基或鏈烯基，優(yōu)選為C1-C4烷基，
與式VII化合物反應(yīng)，
其中R5如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義，
以獲得式Xb的酰胺，
將其酯部分水解以獲得式XIb化合物，
所述式XIb化合物或其(優(yōu)選)活化衍生物又可與式V化合物反應(yīng)，
其中R1、R2和R3如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)定義，
以獲得式XII化合物，
并且如有需要，在上述任何一個(gè)或多個(gè)方法完成后，將可得的式I化合物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為不同的式I化合物，將可得的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物或不同的鹽，將可得的游離式I化合物轉(zhuǎn)化為其鹽，和/或?qū)⒖傻玫氖絀化合物的異構(gòu)體混合物分離成單個(gè)異構(gòu)體；
其中在任何原料中，除所述特定保護(hù)基團(tuán)之外，可存在更多的保護(hù)基團(tuán)，并且在適當(dāng)?shù)碾A段去除任何保護(hù)基團(tuán)或所結(jié)合的樹脂以便獲得相應(yīng)的式I化合物或其鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I化合物，其中R1、R2、R3、R4和R5如說明書中所定義；此類化合物用于診斷和治療溫血?jiǎng)游?、尤其用于依賴于腎素活性的疾病(＝病癥)的治療；此類化合物在制備用于治療依賴于腎素活性的疾病的藥物制劑中的用途；此類化合物在治療依賴于腎素活性的疾病中的用途；含有此類化合物的藥物組合物；包括施用此類化合物的治療方法以及其制備方法。
文檔編號(hào)C07D401/12GK101687847SQ200880021897
公開日2010年3月31日 申請(qǐng)日期2008年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月25日
發(fā)明者橫川文昭, 江原建, 川上新平, 入江統(tǒng), 鈴木雅貴, 比留佑幸, 鳥谷尾淳 申請(qǐng)人:諾瓦提斯公司