專利名稱：標記方法
標記方法本發(fā)明涉及rF]-氟化的方法和試劑，特別是生物載體如肽的氟化。得到的，-標
記的載體可作為放射性藥物使用，特別是用在正電子發(fā)射斷層攝影術(shù)(PET)中。 放射性標記生物載體在診斷成像的應(yīng)用在核醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中日益受到重視。能與特定
細胞類型選擇性相互作用的生物活性分子可用于向靶組織遞送放射性。例如，在診斷成像，
臨床研究，和放療方面，放射性標記的生物載體用于向腫瘤，梗死(infarct)，和感染組織遞
送放射性核素方面具有重要的潛在作用。半衰期為110分鐘的^F是在多種受體成像研究
中選用的正電子發(fā)射放射性核素。因此，由于其在PET中的應(yīng)用,F-標記生物載體在定量
檢測和表征多種疾病中具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。 某些"F-標記生物載體的一種困難是現(xiàn)有的"F-標記試劑的制備是很耗時的。例 如，用^F對肽和蛋白質(zhì)的有效標記主要是通過使用合適的輔基來完成。文獻中提供了多種 這樣的輔基，包括N-琥珀酰亞胺基-4-『F]氟苯甲酸酯，m-馬來酰亞胺-N-(p-『F]氟芐 基)-苯甲酰胺，N-(p-『F]氟苯基)馬來酰亞胺，和4-『F]氟苯甲酰甲基溴化物。許多使 用輔基的標記方法產(chǎn)生了多種放射標記產(chǎn)物。例如包括3個賴氨酸殘基的肽有3個氨基全 部與標記的輔基等同地反應(yīng)。這種方法，常被稱為"兩步"法也是很耗時的，因為不得不先 制備放射標記輔基然后在第二步與生物載體偶合。因此，仍然存在對能夠快速進行"F-標 記的方法的需求，所述方法高化學(xué)選擇性地將18F引入到生物載體中，特別是引入到肽和蛋 白質(zhì)中，以在溫和條件下以高放射化學(xué)產(chǎn)率和高純度產(chǎn)生"F-標記產(chǎn)品。另外，還有對這類 方法的需求，其能夠?qū)崿F(xiàn)在臨床條件下放射性藥物自動便捷的制備。
相應(yīng)地，本發(fā)明提供了一種放射性氟化方法，其包括式(II)化合物
載體連接體穴^1犬配體 或其鹽與[18F] _氟化物源反應(yīng)， 得到式(I)化合物
載體連接體穴狀配體 或其鹽，隨后是下列任選步驟
(i)式(I)化合物的純化和/或
(ii)式I化合物的配制。 本發(fā)明提供更加具有化學(xué)選擇性的放射性標記方法，其中，在式(II)前體的合成 過程中，預(yù)先選擇引入標記的精確位點。因此，該方法具有化學(xué)選擇性和其應(yīng)用對于寬范圍 的生物載體被認為是通用的。 本文所使用的術(shù)語"載體"意指適合放射標記以形成放射性藥物的生物分子，例如
肽，蛋白質(zhì)，激素，多糖，寡核苷酸，抗體片斷，細胞，細菌，病毒，或者類藥小分子。 在式(I)和式(II)和本發(fā)明的其他方面中，除非特別規(guī)定，否則特別合適的載體
選自肽，蛋白質(zhì)，和類藥小分子，在本發(fā)明的一個方面中是不需要通過穿越血腦屏障來發(fā)揮
5生物功能的載體。 本發(fā)明作為載體使用的合適的肽包括生長激素抑制素類似物，例如奧曲肽 (octreotide)，哇皮素(bombesin)，血管活性腸肽，趨化性肽類似物，a -促黑激素，神經(jīng) 緊張素(neurotensin), Arg-Gly-Asp肽，人胰島素原連接肽，胰島素，內(nèi)皮素，血管緊張 素，舒緩激肽(bradykinin)，內(nèi)皮抑素(endostatin)，安吉奧斯塔汀(angiostatin)，谷 胱甘肽，降鈣素，美甘寧(magainin)I和II，促黃體激素釋放激素，胃泌素，胰酶分泌素 (cholecystochinin) ， P物質(zhì)，血管加壓素(vasopressin)，甲酰-正亮氨酰_亮氨酰-苯 丙氨酰-正亮氨酰-絡(luò)氨酰-賴氨酸，膜聯(lián)蛋白V類似物，血管活性蛋白-1 (VAP-1)肽，和 半光天冬酶(caspase)肽物質(zhì)。本發(fā)明中優(yōu)選的作為載體的肽是Arg-Gly-Asp肽及其類似 物，例如在WO 01/77415和W003/006491中描述的優(yōu)選的肽包括以下片段
<formula>formula see original document page 6</formula> 其中^是_朋2或者
<formula>formula see original document page 6</formula>
其中a是1到10的整數(shù)，優(yōu)選a是1。 在式(II)和式(I)及本發(fā)明的其他方面中，連接體是任選包括l-10個雜原子例 如氧或氮的C卜5。烴基基團，以及可以是被選擇為在體內(nèi)提供良好的藥代動力學(xué)特性，例如 有利的排泄特性。術(shù)語"烴基基團"意指由碳和氫組成的有機取代基，這類基團可以包括飽 和的，不飽和的，或芳基部分。合適的連接體基團包括烷基，烯基，炔基鏈，芳基，稠芳基，或 者雜芳基環(huán)(例如，三唑)，和聚合物包括乙二醇，氨基酸，或者碳水化合物亞基，所有都可被例如1個或多個醚基，硫醚基，磺酰胺基，或者酰胺基官能團取代。 本文所使用的術(shù)語"穴狀配體"意指用于氟化物陰離子的雙-或多-環(huán)多齒配 體(multidentate ligand)。用于結(jié)合陰離子例如氟化物陰離子的合適的穴狀配體已經(jīng) 記載在J. W. Steed， J丄Atwood in Supramolecular Chemistry (Wiley， New York, 2000)， ppl98-249 ;Supramolecular Chemistry of Anions, Eds. A Bianchi， K Bowmann—James， E. Garcia_Espana(Wiley_VCH，New York, 1997)，禾口 P. D. Beer，P. A. Gale，Angew. Chem. 2001， 113,502 ;Angew. Chem. Int. Ed. 2001,40,486。
本文所使用的合適的穴狀配體包括式(C)的那些
<formula>formula see original document page 7</formula> 其中 Rl和R2獨立地選自<formula>formula see original document page 7</formula>
和R3，R4和R5獨立地選自
<formula>formula see original document page 7</formula>
本發(fā)明中可使用的優(yōu)選的穴狀配體可選自
或可選擇為具有理想特性例如較其他陰離子相比與氟化物具有高結(jié)合能力，高氟 化物結(jié)合復(fù)合物的穩(wěn)定性以及高氟化物選擇性。在本發(fā)明的一個方面中，穴狀配體具有正 電荷。在式(I)和式(II)化合物中，穴狀配體與連接體基團連接。連接位點可以是穴狀配 體的氮或碳原子。因此，連接連接體"L"的位點可以是在R1或R2基團中
或在R3， R4或R5中
根據(jù)本發(fā)明的合適的鹽包括(i)生理上可接受的的酸加成鹽例如它們衍生于無 機酸，例如鹽酸，氫溴酸，磷酸，偏磷酸，硝酸和硫酸，和衍生于有機酸，例如酒石酸，三氟乙 酸，檸檬酸，馬來酸，乳酸，富馬酸，苯甲酸，羥基乙酸，葡糖酸，琥珀酸，甲基磺酸和對甲基苯 磺酸；和(ii)生理上可接受的的堿性鹽例如銨鹽，堿金屬鹽(例如鈉和鉀的鹽)，堿土金屬 鹽(例如鈣和鎂的鹽)，與有機堿形成的鹽例如和三乙醇胺，N-甲基-D-葡糖胺，哌啶，吡 啶，哌嗪，和嗎啉形成的鹽，和與氨基酸如精氨酸和賴氨酸形成的鹽。 本文所用的術(shù)語"[18F]_氟化物源"意指能夠以反應(yīng)活性形式將[18F]_氟化物遞 送到反應(yīng)混合物中的試劑。[18F]氟化物通常在回旋加速器(cyclotron)中通過(p，n)-核 反應(yīng)由富180的水制備，(Guilla聽et al， Appl. Radiat. Isot. 42 (1991) 749-762)。例如， [18F]氟化物源可能是來自回旋加速器的目標水中的「F]-氟化物，或從目標水中制備的 [，]-氟化物鹽例如[，]-氟化鈉，[18F]氟化鉀，「F]-氟化銫，「F]-四烷基銨鹽氟化 物，[18F]_四烷基磷氟化物在合適的溶劑例如乙腈，二甲基甲酰胺，二甲亞砜，四氫呋喃，二 噁烷，1，2-二甲氧基乙烷，環(huán)丁砜，1-甲基吡咯烷酮中的或其任何含水混合物。
8
式(II)化合物與rF]-氟化物源的反應(yīng)可以在非極端溫度條件下進行，例如l(TC 到5(TC，最優(yōu)選在室溫下和如上所述的合適溶劑作為"[18F]_氟化物源"的溶劑中或作為
如下所述進行固載反應(yīng)。在室溫下將rF]-氟化物摻入生物載體的能力是本發(fā)明特別的
優(yōu)點，因為許多生物載體在高溫下不穩(wěn)定。如果式(II)化合物的穴狀配體不具有固定正電 荷，則與『F]-氟化物源的反應(yīng)適當(dāng)?shù)卦趐H5以下進行，通過添加酸例如鹽酸或硫酸實現(xiàn)。
在制備式(I)化合物之后，可以需要純化步驟(i)，該步驟可以包括，例如除去多 余的『F]-氟化物，除去溶劑，和/或分離未反應(yīng)的式(II)化合物。多余的[18F]氟化物可 以通過常規(guī)方法例如離子交換層析(例如使用BIO-RAD AG l-X8或Waters QMA)或固相萃 取(例如，使用氧化鋁)從式(I)化合物的溶液中除去。多余的溶劑可以通過常規(guī)方法除 去，例如高溫真空蒸發(fā)或在溶液上方通過惰性氣體流(例如，氮氣或氬氣)?；蛘?，式(I)化 合物可能被截留在固相上，例如反向吸收柱例如C5—18衍生硅，同時不需要的多余的試劑和 副產(chǎn)品被洗脫，然后式(I)的化合物可以以純凈的形態(tài)從固相中洗脫。通過常規(guī)方法從未 反應(yīng)的式(II)化合物中分離式(I)化合物，例如利用固相萃取法在陰離子固相上(例如， 大孔磺化聚苯乙烯樹脂)除去還原的電荷，由此通過[^F]-氟化物與式(II)化合物的結(jié)合 導(dǎo)致親合力的變化。 在一個實施方案中，式(II)化合物可以通過共價鍵經(jīng)由載體與固體載體結(jié)合，例 如高分子珠子或涂層，例如三苯甲基或氯三苯甲基樹脂。在這個方面，放射性氟化反應(yīng)的 多余試劑和副產(chǎn)品可以通過洗滌從與聚合物結(jié)合的產(chǎn)品中分離。可以通過固相化學(xué)的常 規(guī)方法從固體載體中切割式(II)化合物，例如FlorencioZaragoza Dorwald〃 Organic Synthesis on Solid Phase ;S聊orts， Linker, Reactions" ， Wiley-VCH(2000)中所述。 該方法特別適合式(I)化合物的自動化生產(chǎn)，其中載體是肽或者蛋白質(zhì)。
在制備式(I)化合物及其鹽之后，可以將其適當(dāng)?shù)嘏渲瞥煞派湫运幤?，備用為?象給藥。該制劑步驟(ii)可以包含式(I)化合物或其鹽的水溶液的制備，通過溶解在無菌 的等滲鹽水中，其中可以包含高達10%的合適的有機溶劑例如乙醇，或合適的緩沖溶液例 如磷酸鹽緩沖液。其它的添加劑例如穩(wěn)定劑，例如抗壞血酸可以被加到該制劑中。
式(II)化合物可以通過反應(yīng)式(III):
<formula>formula see original document page 9</formula>
與式(IV)化合物反應(yīng)而制備
<formula>formula see original document page 9</formula>(IV) 其中，載體和穴狀配體如前面限定連接體'是如前面定義的連接體的一部分，Rm
和RIV是能夠相互共價結(jié)合以完整形成連接體的具有反應(yīng)活性的基團。合適地，R111和RIV之 一是胺，另一個是羧酸或者活性羧酸酯，異氰酸酯，異硫氰酸酯，從而式(in)和式(IV)可 以通過簡單的胺反應(yīng)連接起來。合適的活性羧酸酯包括N-羥基琥珀亞胺基和N-羥基磺基
琥珀亞胺基酯
或者，Rm和R"之一可以是硫醇，另一個是可以與硫醇反應(yīng)的基團，例如馬來酰亞胺或者a-鹵代羰基。 正如本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠清楚的，對于式(III)化合物中的穴狀配體，還期望在任何暴露的官能基團上具有保護基團，例如氨基以防止或降低在轉(zhuǎn)化為式(II)化合物的過程中的副反應(yīng)。在這些情況下，可以從常規(guī)用于所考慮官能基團的保護基團中選取保護基團，例如叔丁基氨基甲酸酯作為胺保護基。其他合適的保護基團可以從John Wiley&SonsInc出片反，Theodora W.Greene禾卩Peter G. M. Wuts的Protecting Groups in OrganicSynthesis中選取，其中還進一步描述了引入和去除所述保護基團的方法。
式(II)的某些化合物可以通過式(III)化合物(其中Rm是氨基或者羧酸基)與式(IV)化合物反應(yīng)制備，其中R"分別為羧酸基或者氨基。在這些情況下，式(II)化合物可以與式(IV)化合物通過任選使用原位反應(yīng)試劑如2-(lH-苯并三唑-l-基)-l，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)或者N-[(二甲基氨)-lH-l，2，3-三唑[4，5_b]妣啶+基亞甲基]-N-甲基甲銨六氟磷酸酯N-氧化物(HATU)結(jié)合。使用標準的條件例如二甲基甲酰胺(DMF)溶液和堿例如三乙胺或者二異丙基乙胺?；蛘?，如果式(IV)中的R"是硫醇基團，其可以與式(III)化合物反應(yīng)，其中Rm是可以與硫醇反應(yīng)的基團，例如馬來酰亞胺或者a-鹵代羰基。該反應(yīng)可以在PH緩沖溶液或有機溶劑中進行。具有式(II)結(jié)構(gòu)的化合物可以通過制備型的高效液相色譜純化。 載體是肽或蛋白質(zhì)的式(II)化合物，可以通過標準的肽合成方法制備，例如，固相月太合成，例如，在Atherton， E. and Sh印pard， Rc. ; 〃 Solid PhaseSynthesis 〃 ；IRLPress :0xford， 1989中所描述?？梢酝ㄟ^肽的N或者C端的反應(yīng)或利用其他一些包括在肽序列的功能性基團的反應(yīng)達到式(II)化合物中引入連接體和穴狀配體，其修飾不影響載體的結(jié)合性質(zhì)。優(yōu)選通過肽的氨基基團(R")與式(III)化合物反應(yīng)形成穩(wěn)定的酰胺鍵的方式來引入上述定義的式(III)化合物(其中Rm是活性酸)，或者可選通過式(III)化合物與肽酸基團的反應(yīng)引入上述定義的式(III)化合物(其中Rm是胺)，和在任一種情況下式(III)化合物可以在肽的合成期間或之后被引入，例如，固相肽合成。當(dāng)Rm或者R"是酸，式(III)和式(IV)化合物的反應(yīng)可以使用原位活性試劑如2-(lH-苯并三唑-l-基)-l，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)或者N-[(二甲基氨)-lH-l，2，3-三唑[4，5_b]吡啶-l-基亞甲基]-N-甲基銨六氟磷酸酯N-氧化物(HATU)而進行。本發(fā)明的特別方面的
實施方案如方案l所示。
<formula>formula see original document page 11</formula>
C)=固體載體
TFA=三氟乙酸 方案1 穴狀配體可以根據(jù)在US20040267009 Al， BernardDietrich， Jean-Marie Lehn，Jean Guilhem 禾卩Claudine Pascard， Tetrehedron Letters,1989， Vol. 30， No.31，pp4125-4128，Paul H.Smith et al， J. Org. Chem. ， 1993， 58， 7939—7941， Jonathan W. Steedet al，2004，Journal of the American Chemical Society,126，12395-12402，Bing-gimngZhang et al， Chem. Comm. ， 2004， 2206-2207中所描述的進行合成。 式(III)化合物的合成可以如上述文獻中關(guān)于非衍生的穴狀配體通過起始原料的修飾或者通過后續(xù)化學(xué)得到，例如通過如下實施例中的穴狀配體的仲胺的烷基化。式(III)化合物也可以如方案2-5所示制備，其中L和R"，如上對式(III)化合物所定義的。
方案2
<formula>formula see original document page 11</formula><formula>formula see original document page 12</formula>選用于體內(nèi)成像的方法，合適地為PET，所述的方法包括為人或者動物體給藥所述的化合物，并產(chǎn)生機體至少一部分的圖像。 從更進一步方面看，本發(fā)明提供了人或動物機體成像的方法，其包括為所述機體給藥放射性藥物，例如進入血液系統(tǒng)使用PET產(chǎn)生所述放射性藥物已經(jīng)擴散至的所述機體的至少一部分的圖像，其中所述的放射性藥物包括如上所定義的式(I)化合物或其鹽。進一步地，提供了體內(nèi)成像的方法，適當(dāng)?shù)氖菣C體優(yōu)選人體的PET成像，該機體已經(jīng)被預(yù)先給藥包括如上所述的式(I)化合物或者其鹽的放射性藥物，其中該方法包括通過體內(nèi)成像技術(shù)，合適的是PET，檢測所述放射性藥物的吸收。 進一步，本發(fā)明提供了如上所定義的式(II)化合物或其鹽作為放射性標記前體的應(yīng)用。 另一方面，本發(fā)明提供了新型的式(III)化合物的合成中間體，用于放射性氟化
的功能性載體，例如通過如上所述的方法。相應(yīng)的，提供式(III)化合物
<formula>formula see original document page 13</formula> 其中Rm如上所述，優(yōu)選自胺，羧酸，活性羧酸酯，異氰酸酯，異硫氰酸酯，硫醇，馬來酰亞胺或a -鹵代羰基，以及如上所述的連接體'和穴狀載體。
更優(yōu)選的式(III)化合物包括
<formula>formula see original document page 13</formula> 其中L是如上所述的連接體'，Rm是如上所述的有反應(yīng)活性的基團且優(yōu)選自胺，羧酸，活性羧酸酯，異氰酸酯，異硫氰酸酯，硫醇，馬來酰亞胺或a -鹵代羰基。
更優(yōu)選的式(III)化合物包括
<formula>formula see original document page 14</formula> 其中L是如上所述的連接體'，Rm是如上所述的有反應(yīng)活性的基團且優(yōu)選自胺，羧 酸，活性羧酸酯，異氰酸酯，異硫氰酸酯，硫醇，馬來酰亞胺或a_鹵代羰基。
本發(fā)明的進一步方面中，提供了式(V)的化合物
穴4犬配體
18r
(V)
或其鹽，其中穴狀載體如上所述，用作醫(yī)藥，例如灌注
成像劑。 為了本目的優(yōu)選的式(V)化合物包括如上所述優(yōu)選的穴狀配體。為該用途，式(V) 化合物或其鹽被適當(dāng)?shù)嘏渲瞥扇缟鲜?I)化合物描述的放射性藥物。 另外，本發(fā)明提供了成像的方法，該方法包括對患者給藥可檢測劑量的如上定義 的式(V)化合物或其鹽，利用PET為對象成像。SWAIGER，J.Nucl.Med. (1994)693-8及其他 相關(guān)文獻已經(jīng)描述了用PET檢測成像的技術(shù)。 在一些環(huán)境下，可以期望制備用于載體的放射性氟化的輔基基團。因此，根據(jù)本發(fā)
明的進一步提供式(VI)化合物<formula>formula see original document page 15</formula> 其中連接體'和穴狀配體和Rm如上述式(III)化合物的定義。 根據(jù)本發(fā)明的進一步方面，提供了試劑盒，用于制備放射性氟化合物，其包括式
(III)化合物的合成中間體，和任選如上所述定義的式(IV)化合物。 在試劑盒的使用中，式(III)化合物應(yīng)該與式(IV)化合物反應(yīng)，使用如上所述的
方法以形成相應(yīng)的式(II)化合物然后與『F]-氟化物源反應(yīng)以形成式(I)的放射性氟載
體。任選的，式(I)化合物可以如上所示進行純化和/或配制。 本發(fā)明通過如下實施例進行描述，其中使用下述縮寫 Pri()H :異丙醇 Et3N:三乙胺 R. T.:室溫 MeOH:甲醇 (t)B0C:(叔)丁氧羰基 L :升 Ml :毫升 hr(S):小時 THF:四氫呋喃 HPLC:高效液相色譜 DCM:二氯甲烷 LCMS:液相色譜質(zhì)譜 NMR:核磁共振 TFA:三氟乙酸
實施例
實施例1 :化合物4的合成<formula>formula see original document page 16</formula>
17當(dāng)量(BOC)20 DMF, Py, 70 。C
實施例1 (i)化合物1的合成 裝有機械攪拌器的1L的3頸圓底燒瓶供給16. 7mL 98%的三丙胺和0. 33L99%的 i-PrOH，在干冰-異丙醇浴中冷卻到_78°C 。向該混合物中加入15. 0g40%的乙二醛水溶液 (0. 103摩爾)，再用異丙醇烯釋到83mL，和加入10. 0g (0. 0. 683摩爾)的96%的三(2-氨 基乙基)胺(三氨基乙基胺)，稀釋到83ml，其同時經(jīng)過劇烈攪拌2小時以上加入。(乙二 醛的起始濃度=1. 24M ;三氨乙基胺的起始濃度=0. 82M)。然后反應(yīng)混合物加熱過夜和稍 微加熱到6(TC，以保證化合物2的形成完全。隨著將氮氣吹過混合物表面將其冷卻至室溫。 真空除去溶劑并加入氯仿(250mL)。所得到的漿狀物過濾通過沙子和真空濃縮，得到橙色固 體(5. 2g，43% )。 實施例化合物2的合成 化合物1 (4g， 11. 2mmo1)溶解在甲醇(150mL)中，在冰/水浴中冷卻。硼氫化鈉 (8g，208mmo1)經(jīng)過30分鐘時間按份加入?；旌衔锓胖蒙潦覝亟?jīng)過16小時進行硬化。將 溶液真空濃縮干燥，得到灰白色的固體。固體溶解到水中(100mL)，然后在半小時內(nèi)加熱到 6(TC，期間混合物中形成油性物質(zhì)。加入THF(100mL)，分離有機層。含水層再用THF(100mL) 萃取。合并的萃取液用相分離器過濾后真空干燥濃縮。油性固體再次溶解在THF(20mL) 中，再加入水(15mL)。溶液慢慢濃縮直到形成白色固態(tài)晶體，過濾收集，冰水洗滌，真空干燥 (1. 6g，38% )。 實施例1 化合物3的合成化合物2(0. lg，0.270mmo1)溶解在干燥的DMF(5mL)中，加入碳酸鉀(1. 1當(dāng)量 0. 297mmo1 ，0.041 g)。溴代烷(1.1當(dāng)量0. 297mmo1， 81. 7mg)按份加入，反應(yīng)后從反應(yīng)中取 大約O. lmL體積進行HPLC-質(zhì)譜分析，用1 : 10. 1%甲酸的水乙腈(10ml)稀釋。在室溫 下攪拌反應(yīng)16小時。進一步加入0. 25當(dāng)量的溴代烷，然后反應(yīng)繼續(xù)攪拌16小時。將反應(yīng) 混合物真空濃縮至干燥。將此混合物不經(jīng)提純直接用于下一步。
實施例1 (iv)化合物4的合成
化合物3的粗品溶解在干燥的DMF (20mL)中和加入吡啶(2mL)，隨后加入二叔丁基 羧酸酯(lg，4. 58mmol， 17當(dāng)量)?；旌衔镌?(TC下氮氣加熱16小時。粗品用薄層色譜(硅 膠板用10%甲醇/DCM洗脫)和LCMS分析。薄層色譜顯示兩個Rf值為0. 2和0. 5的主要 的點和一些小斑點。混合物的純化是通過硅膠凝膠以100%汽油40-60到100%乙酸乙酯 洗滌進行快速柱色譜。經(jīng)過NMR和LCMS分析顯示第二主峰是期望的五-BOC產(chǎn)品(50mg)。
實施例2 實施例2(i)化合物5的合成 化合物2 (0. lg， 0. 270mmo1)溶解在干燥的DMF (2mL)中，溴代烷(1. 1當(dāng)量 0. 297mmol，81.07mg)于干燥的DMF(lmL)中的溶液經(jīng)過5分鐘加入。溶液在室溫下攪拌16 小時。減壓除去DMF，白色固體溶解在少量的水/甲醇(1 : 1)中。制備HPLC(Phenomenex luna C18(2) 150X21. 2，乙月青/水5%到70%經(jīng)過10分鐘)得到具有8-8. 5分鐘tr的主 尖峰，凍干得到白色固體(15mg)。 NMR和LCMS證實了其結(jié)構(gòu)。
棚列2(ii) 「，，-氟扁隨齢石蹄化合物5 (lmg)在水(0. lml)中用IN HC1酸化到pHl，室溫下加入氟化鉀 水溶液(0. 1-1當(dāng)量)。溶液通過反相HPLC(l % TFA/水，1 % TFA MeCN梯度在Luna C5150X 4. 6150X4. 6mm，在254nm檢測)分析。
實施例2(iii)化合物5與PFytt化物的放射件tt標記 1M HC1(4. 5ii L，4. 5iimo1)加入到溶解在50 : 50甲醇/水(0. 2毫升)中的化 合物5中(0. lmg， 180nmo1)。酸化的溶液直接加入到包含[18F]氟化物(98MBq)的玻璃小 瓶的目標水中(0. 05mL)，室溫下放置20分鐘。反應(yīng)通過反向HPLC分析(溶劑A = 0. 1 % TFA在水中;溶液B = 0. 1% TFA在MeCN， Luna C5150X4. 6mm，在254nm檢測；梯度:0到3 分鐘(2% B) ， 3-10分鐘(2到70% B) ， 10到13分鐘(70% B) ;13到16分鐘(70到2% B)， 16到21分鐘(2% B);流速lmL/分鐘。[18F]_5具有10. 1分鐘的保留時間。[18F]_5用同 樣的HPLC方法純化，衰減校正分離產(chǎn)率是64%。
1權(quán)利要求
放射性氟化方法，其包括式(II)化合物或其鹽與[18F]-氟化物源反應(yīng)，得到式(I)化合物或其鹽，隨后是下列任選步驟(i)式(I)化合物的純化；和/或(ii)式(I)化合物的配制。F2008800206952C00011.tif,F2008800206952C00012.tif
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述載體是肽，蛋白質(zhì)，激素，多糖，寡核苷酸，抗體片 斷，細胞，細菌，病毒，或者類藥小分子。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述載體是Arg-Gly-Asp肽或其類似物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中所述載體包括片段<formula>formula see original document page 2</formula>
5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中所述載體是由式(A)表示的 -S<formula>formula see original document page 2</formula>其中X7是-M^或<formula>formula see original document page 2</formula>其中a是1到10的整數(shù)，優(yōu)選a是1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1到5任一項所述的方法，其中所述穴狀配體是由式(C)(c)<formula>formula see original document page 3</formula>Rl和R2獨立地選自R3，R4和R5獨立地選自<formula>formula see original document page 3</formula>
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中所述穴狀配體選自<formula>formula see original document page 3</formula>
8. 權(quán)利要求1到7任一項中所限定的式(I)或式(II)化合物或其鹽。
9. 放射性藥物制劑，其包括權(quán)利要求1到7任一項中所限定的式(I)化合物或其鹽和 生理上可接受的載體或賦形劑。
10. 權(quán)利要求1到7任一項中所限定的式(I)化合物或其鹽在醫(yī)藥，更特別地在體內(nèi)成 像的方法，合適地為PET中的用途。
11. 產(chǎn)生人或動物機體圖像的方法，其包括為所述機體給藥權(quán)利要求9所限定的放射 性藥物，以及使用PET產(chǎn)生已經(jīng)分布所述放射性藥物的所述機體至少一部分的圖像。
12.式(III)化合物<formula>formula see original document page 4</formula>連接體'穴;)犬配體其中RIII是活性基團，合適地選自胺，羧酸，活性羧酸酯，異氰酸酯，異硫氰酸酯，硫 醇，馬來酰亞胺和a -鹵代羰基；以及連接體'是權(quán)利要求1到7任一項中所限定的連接體 的一部分，穴狀配體是權(quán)利要求1到7任一項中所限定的。
13.式(V)化合物穴狀配體<formula>formula see original document page 4</formula>或其鹽，其中穴狀配體是權(quán)利要求1到7任一項中所限定的，其用于醫(yī)藥，例如作為灌 注成像劑。
14. 成像的方法，其包括為對象給藥可檢測量的權(quán)利要求13所限定的式(V)化合物或 其鹽，以及使用PET對所述對象進行成像。
15. 式(VI)化合物:<formula>formula see original document page 4</formula><image>image see original document page 4</image>其中RIII是活性基團，合適地選自胺，羧酸，活性羧酸酯，異氰酸酯，異硫氰酸酯，硫 醇，馬來酰亞胺和a -鹵代羰基；以及連接體'是權(quán)利要求1到7任一項中所限定的連接體 的一部分，穴狀配體是權(quán)利要求1到7任一項中所限定的。
全文摘要
本發(fā)明提供一種生物載體例如肽的放射性氟標記方法，包括式(II)化合物或其鹽與[18F]-氟化物源反應(yīng)，得到式(I)化合物或其鹽。該方法在溫和反應(yīng)環(huán)境下即可進行，并且為放射性氟標記方法的應(yīng)用提供了更具有化學(xué)選擇性的標記手段的新型試劑，并且也提供了合成的18F-標記的載體的應(yīng)用。
文檔編號C07B59/00GK101720328SQ200880020695
公開日2010年6月2日 申請日期2008年6月18日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月20日
發(fā)明者A·杰克遜, R·巴拉 申請人:通用電氣健康護理有限公司